一种dnj提取纯化的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种天然生物碱纯化方法，尤其是涉及一种DNJ提取纯化的方法，属于天然产物纯化技术领域。
【背景技术】
[0002]桑叶中富含营养成分，含有人体所需的氨基酸、维生素、无机盐、黄酮类、生物碱类等多种功能性成分。特别是桑叶的一种生物碱一1-脱氧野尻霉素(DNJ)，具有特殊的功能，药理研宄证实，桑叶DNJ对二糖类分解酶活性具有抑制作用，从而抑制小肠对双糖的吸收，降低食后血糖的高峰值达到降血糖的效果[食品科技，2010，35(12):209-211 ;食品科技，2009，34(7):168-171] ο
[0003]我国对DNJ提取进行了大量的研宄，但目前DNJ的分离提纯尚待进一步研宄。通过简单廉价的分离提纯方法得到高含量的DNJ产品，将对开发治疗糖尿病等的药品和保健品的发展具有积极推动作用。
[0004]中国专利CN 104402801 A公布了一种分离DNJ和制备DNJ纳米混悬剂的方法，分离DNJ的方法以桑树为原料，经过粉碎提取，微波焦化，加水溶解后得到分离物I，该分离物依次通过细沙-活性炭和硅胶两次色谱分离形成分离物11，所述分离物11经离子交换与乙醇沉淀得到分离物III，该分离物III经氧化铝色谱柱分离得到分离物IV，将分离物IV结晶与重结晶后得到目标产物。制备DNJ纳米混悬剂的方法首先对DNJ组分进行酯化修饰，增强其脂溶性，然后通过表面活性剂结合和高压均质处理将DNJ分散成高度分散粒子群。该专利的分离方法包括粉碎提取、微波焦化、色谱分离、离子交换、色谱分离等步骤，程序较为复杂，产率较低。
【发明内容】
[0005]本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种工艺合理、操作简单，环保节能、成本较低的DNJ提取纯化的方法。
[0006]本发明的目的可以通过以下技术方案来实现:
[0007]一种DNJ提取纯化的方法，包括以下步骤:
[0008](I)制备DNJ提取液，并预处理，得到DNJ澄清液；
[0009](2)将DNJ澄清液通过阳离子交换树脂柱进行吸附；
[0010](3)用清水通过吸附DNJ的阳离子交换树脂柱，进行洗涤，除去未吸附的杂质；
[0011](4)对吸附有DNJ的阳离子交换树脂进行洗脱，收集洗脱液；
[0012](5)将洗脱液浓缩、真空干燥即得DNJ产品。
[0013]步骤(I)制备DNJ提取液的方法为:将干燥的桑叶，加入去离子水中，在60?95°C下提取I?2h，过滤，回收滤渣，将滤渣加入去离子水再提取I次，合并所有滤液，即得DNJ提取液。
[0014]干燥的桑叶或滤渣与去离子水的重量比为1:5?1:20。
[0015]步骤(I)所述的预处理方法为:在搅拌下将ZTC澄清剂溶液加至DNJ提取液中，静置0.2-2h，过滤，所得滤液即为DNJ澄清液，ZTC澄清剂溶液与DNJ提取液体积之比为1:5-1:20。所述的ZTC澄清剂溶液的浓度为Iwt %。
[0016]步骤(2)中吸附的条件为:DNJ澄清液的上柱流速为I?5倍树脂体积/小时。
[0017]步骤(2)中所述的阳离子交换树脂为市售型号为PK216的阳离子交换树脂。
[0018]步骤(3)中洗涤的条件为:清水通过树脂柱流速为I?5倍树脂体积/小时。
[0019]步骤⑷中洗脱的条件为:洗脱剂为氨水，氨水的浓度为0.4mol/L?3mol/L ;洗脱剂的体积为2?10倍树脂体积；洗脱流速为I?4倍树脂体积/小时。
[0020]步骤(5)所述的干燥为30°C?50°C的真空干燥。
[0021 ] 步骤(5)所得DNJ产品中DNJ含量大于15wt %。
[0022]与现有技术相比，本发明工艺简单易行，PK216阳离子交换树脂可以多次使用，环保节能，原料易得且价廉，本发明能够得到较高纯度的DNJ产品。
【具体实施方式】
[0023]下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
[0024]实施例1
[0025](I)DNJ提取液的制备:取10g干燥的桑叶，加入1500mL的去离子水，在80°C下提取1.5h，过滤，回收滤渣。滤渣采用以上方法再提取I次，合并以上滤液，即DNJ提取液。
[0026](2)PK216阳离子交换树脂采用用饱和NaCl盐水浸泡浸泡24h，然后用去离子水洗涤，取50mL填柱。再用2倍树脂体积的浓度为5被％氢氧化钠水通过树脂柱；然后用10倍树脂体积的去离子通过树脂柱进行洗涤；再用2倍树脂体积的浓度为lwt%盐酸溶液通过树脂柱；然后用10倍树脂体积的去离子通过树脂柱进行洗涤，处理好的树脂柱待后续步骤用。
[0027](3)在搅拌下将10mL浓度为I % wt的ZTC澄清剂溶液加至以上制备的100mL的DNJ提取液中，静置0.2-2h，过滤，所得滤液即为DNJ澄清液。
[0028](4)取2倍树脂体积的经过预处理的DNJ澄清液，以3倍树脂体积/h通过树脂柱。
[0029](5)PK216阳离子交换树脂吸附DNJ后，用2倍树脂体积的去离子水水以流速为4倍树脂体积/h通过树脂柱洗涤，然后用3倍树脂体积的0.5mol/L的氨水溶液以2倍树脂体积/h通过树脂柱进行洗脱，收集洗脱液。
[0030](6)以上洗脱液在50°C下浓缩至干，45°C真空干燥得DNJ产品，DNJ产品中DNJ的含量为16.2%。
[0031]实施例2
[0032]一种DNJ提取纯化的方法，包括以下步骤:
[0033](I)将干燥的桑叶，加入去离子水中，干燥的桑叶与去离子水的重量比为1:5，在60°C下提取2h，过滤，回收滤渣，将滤渣加入去离子水，滤渣与去离子水的重量比为1:5，再提取I次，合并所有滤液，即得DNJ提取液；
[0034](2)在搅拌下将浓度为Iwt %的ZTC澄清剂溶液加至DNJ提取液中，ZTC澄清剂溶液与DNJ提取液体积之比为1: 5，静置0.2h，过滤，所得滤液即为DNJ澄清液；
[0035](3)将DNJ澄清液通过PK216阳离子交换树脂柱进行吸附，DNJ澄清液的上柱流速为I倍树脂体积/小时；
[0036](4)用清水通过吸附DNJ的阳离子交换树脂柱，进行洗涤，清水通过树脂柱流速为I倍树脂体积/小时，除去未吸附的杂质；
[0037](5)对吸附有DNJ的阳离子交