专利名称：一种用于治疗跌打损伤药物组合物的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物的质量控制方法，特别涉及一种用于治疗跌打损伤的中药组合物的质量控制方法。
背景技术：
目前中药的质量标准很不规范和完善，质量分析和评价的手段还很落后，无法准确的反映现有中药的质量状况，成为中药走出国门，走向世界的障碍。
卫生部部颁中药成方制剂十八册中标准号为WS3-B-3465-98药物组合物制剂具有舒筋活络，接骨止痛的作用；用于跌打损伤，消肿散瘀，扭腰岔气等症。其在国内的应用十分广泛，为广大人民的健康作出了重要的贡献。但是原有的质量控制方法由于过于简单而不能保障其有效性和安全性，达不到控制其质量的目的。为了进一步加强中药制剂的质量管理，本发明提供了一种针对该中成药的质量控制方法，从而能够更全面、有效地控制其制剂质量。
发明内容
本发明目的在于公开一种药物组合物的质量控制方法，特别是一种用于治疗跌打损伤中药组合物的质量控制方法。
卫生部部颁中药成方制剂十八册中标准号为WS3-B-3465-98的药物组合物(骨折挫伤胶囊)公开了如下的技术内容猪骨(制)250重量份、黄瓜子(炒)200重量份、土鳖虫3重量份、自然铜(煅)25重量份、乳香(制)10重量份没药(制)10重量份、血竭10重量份、红花25重量份、大黄15重量份、当归15重量份，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒，即得。
本发明组合物制剂的质量控制方法含有如下含量测定和/或鉴别方法中的一种或几种，本发明质量控制方法中的含量测定及鉴别方法为含量测定方法为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40-60∶40-60比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取或热回流提取2-4小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素(C17H14O3)计，不得少于0.1mg。
鉴别方法为a、取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处理5-20分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以3-5∶4-6∶0.7-0.9∶0.1-0.3比例的石油醚(60-90℃)—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸10-30分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以6-8∶0.3-0.5∶1-3∶2-4比例的醋酸乙酯—甲醇—甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1g，加水50ml，置水浴上加热20-40分钟，滤过，滤液加盐酸2滴，用乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚层，水层加盐酸5ml，置水浴上加热20-40分钟，冷却后，再用乙醚20ml提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠溶液10ml，振摇，水层显橙红色；d、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物，置显微镜下观察花粉粒呈圆球形或椭圆形，外壁有齿状突起，有的可见三个萌发孔；不规则块片血红色，周围液体显姜黄色，渐变红色；不规则碎块淡黄色，半透明，渗出油滴，加热油滴溶化，可见草酸钙方晶；草酸钙簇晶棱角多短钝，直径60-140μm；体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8-24μm，有的具长短不一的刚毛。
本发明质量控制方法新增加血竭含量测定方法，其阴性试验基本无干扰且结果稳定；新增加当归和红花的薄层鉴别，分离效果好，阴性试验未见干扰。
下述实验例用于进一步说明但不限于本发明实验例1含量测定选择实验血竭为方中的主要药味，又为贵重药材，血竭素是血竭中的主要有效成分，且含量较高，用高效液相色谱法测定血竭素的含量，操作简单，易于重复。
1、供试液处理方法的考察a、分别取供试品(批号010318)500mg，分别置50ml容量瓶中，加3％的磷酸甲醇溶液40ml①超声3分钟。②超声5分钟中。③超声10分钟。补加甲醇至刻度。结果如下表表1
结果表明超声10分钟血竭素未提取完全。
b、分别取供试品(批号010318)500mg，分别置50ml、100ml容量瓶中，①加3％的磷酸甲醇溶液40ml，超声10分钟，补加甲醇至50ml的量瓶中。②加3％的磷酸甲醇溶液80ml，超声10分钟，回收甲醇至近50ml，补加甲醇至刻度。结果如下表表2
结果表明溶媒的量对提取效果无影响。
c、分别取供试品(批号010318)500mg，①加3％的磷酸甲醇溶液40ml，热回流2小时，滤过，滤液置50ml容量瓶中，补加甲醇至刻度。②加3％的磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时，提取液置50ml容量瓶中，补加甲醇至刻度。结果如下表表3
结果表明索氏提取与热回流提取2小时，血竭素含量较高，且两者无差异。
d、分别取供试品(批号010318)500mg，分别置50ml容量瓶中，加3％的磷酸甲醇溶液40ml①超声1小时。②超声2小时。③超声3小时。补加甲醇至刻度。结果如下表表4
最后确定供试液的制备取供试品500mg，加3％的磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时，提取液置50ml容量瓶中，补加甲醇至刻度。
2、标准曲线的制备精密称取血竭素高氯酸盐对照品(购于中国药品生物制品鉴定所纯度为99.37％)9.55mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密吸取0.5ml、0.75ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。照高效液相色谱法(中国药典2000版一部附录VID)试验，分别吸取上述稀释液20u1，注入液相色谱仪，记录相应的峰面积值。结果表5
A＝21740.37×C-20140.15 r＝0.9998
结果表明，在浓度2.744ug/ml-13.870ug/ml范围内，线性关系良好。见附图13、方法学考察(1)阴性空白试验取缺血竭的处方药，按制备方法制备阴性样品，按样品的含量测定方法测定，结果在血竭素保留时间处无峰出现，表明阴性无干扰。见附图2(2)稳定性试验取样品(批号010318)500mg，加40ml 3％的磷酸甲醇溶液索氏提取2小时，置50ml量瓶中，补加甲醇至刻度，于0hr、1.0hr、2.0hr、2.5hr、3.0hr测定峰面积值。结果表6
提取后2.5小时内测定是稳定的。
(3)精密度试验取样品(批号010318)500mg，加40m13％的磷酸甲醇溶液索氏提取2小时，置50ml量瓶中，补加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜过滤，续滤液作为供试溶液，连续进针5次。结果表7
说明血竭素含量测定在本色谱条件下的精密度良好。
(4)重现性试验取样品(批号010318)500mg，加40ml 3％的磷酸甲醇溶液索氏提取2小时，置50ml量瓶中，补加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜过滤，续滤液作为供试溶液，连续称样5次。结果表8
说明血竭素含量测定在本色谱条件下的重现性良好。
(5)回收率试验取样品(批号010318)250mg，加浓度是102.54ug/m1的对照品溶液2ml，加40m13％的磷酸甲醇溶液索氏提取2小时，置50ml量瓶中，补加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜过滤，续滤液作为供试溶液，测定血竭素的含量，计算回收率。结果如下表9
X＝98.98％ RSD＝1.75％表明此法回收率良好，符合定量分析的要求。
实验例2样品含量测定(1)对照品溶液的制备精密称取血竭素高氯酸盐对照品9.55mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取1.5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
(2)供试品溶液的制备取骨折挫伤胶囊适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml索氏提取2小时(至提取液无色)，将提取液置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
(3)仪器及色谱条件仪器岛津SPD-10A高效液相色谱仪Anastar色谱工作站柱；Irregular C18柱(4.6×250mm 10u)柱温35℃流动相甲醇-0.05mol/L磷酸(50∶50)
流速1ml/min进样各20ul结果如下表表10
根据药典规定血竭素的含量不得少于1％，本品血竭以生药入药，每粒胶囊含血竭0.01g，故规定本品每粒含血竭按血竭素〔C17H14O3〕计不得少于0.1m。
实验例3鉴别方法选择实验修订标准新增加当归和红花的薄层鉴别。
骨折挫伤胶囊药味比较多，进行筛选薄层鉴别成分时，干扰比较大，按处方中药味的君臣佐使顺序，逐一进行了鉴别条件筛选。
1、当归为方中主药之一，其作用与本品的功能主治有关。
(1)样品制备供试品溶液取本品1.5g，加水30ml，超声10分钟，滤过，滤液用30ml乙醚萃取，分取水层，再用30ml乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液。
阳性对照药材溶液另取当归对照药材1g(购于中国药品生物制品检定所)，同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液取缺当归的处方药；照制备工艺制备，按供试液方法处理。
(2)薄层色谱吸附剂高效硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂分厂)展开剂石油醚(60～90℃)—甲苯—乙酸乙酯—甲酸(4∶5∶0.8∶0.2)点样量各5ul展开方式上行展距6cm显色方法置紫外灯下(365nm)检视结果供试品色谱中，在与阳性对照药材色谱相应的位置上(Rf＝0.64)显相同蓝色的荧光斑点，阴性对照液无此斑点。见附图32、红花具有活血消肿，祛瘀止痛的作用，与本品的功能主治有关，可采用薄层色谱方法鉴别之。
(1)样品制备供试品溶液取本品2.0g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸15分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液。
对照药材溶液取红花对照药材1g(购于中国药品生物制品检定所)，同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液取缺红花的处方药，照制备工艺制备，按供试液方法处理。
(2)薄层色谱吸附剂羧甲基纤维素钠为粘合剂硅胶H薄层板上(自制)展开剂乙酸乙酯—甲醇—甲酸—水(7∶0.4∶2∶3).
点样量各5ul展开方式上行展距7cm显色方法置目光下检视。
结果供试品色谱中，在与阳性对照药材色谱相应的位置上(Rf＝0.42)显相同的红色斑点。阴性对照液无此斑点。见附图
图1血竭素标准曲线图
图2血竭素阴性高效液相色谱3当归薄层色谱图1、阴性对照 2、当归对照药材3、样品批号010320 4、样品批号010322图4红花薄层色谱图1、阴性对照 2、红花对照药材3、样品批号0103204、样品批号010322实施例1质量控制方法中的含量测定方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，50∶50比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素(C17H14O3)计，不得少于0.1mg。
实施例2质量控制方法中的鉴别方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
鉴别取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处10分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以4∶5∶0.8∶0.2比例的石油醚(60-90℃)—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
实施例3质量控制方法中的鉴别方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
鉴别取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸20分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以7∶0.4∶2∶3比例的醋酸乙酯—甲醇-甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例4质量控制方法中的鉴别方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
鉴别取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1g，加水50ml，置水浴上加热30分钟，滤过，滤液加盐酸2滴，用乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚层，水层加盐酸5ml，置水浴上加热30分钟，冷却后，再用乙醚20ml提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠溶液10ml，振摇，水层显橙红色。
实施例5质量控制方法中的鉴别方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
鉴别取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物，置显微镜下观察花粉粒呈圆球形或椭圆形，外壁有齿状突起，有的可见三个萌发孔；不规则块片血红色，周围液体显姜黄色，渐变红色；不规则碎块淡黄色，半透明，渗出油滴，加热油滴溶化，可见草酸钙方晶；草酸钙簇晶棱角多短钝，直径60-140μm；体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8-24μm，有的具长短不一的刚毛。
实施例6质量控制方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，50∶50比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素(C17H14O3)计，不得少于0.1mg；鉴别a、取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处理10分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以4∶5∶0.8∶0.2比例的石油醚(60-90℃)—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸20分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以7∶0.4∶2∶3比例的醋酸乙酯—甲醇—甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例7质量控制方法猪骨(制)250g、黄瓜子(炒)200g、土鳖虫3g、自然铜(煅)25g、乳香(制)10g、没药(制)10g、血竭10g、红花25g、大黄15g、当归15g，以上十味，猪骨去脂制胶；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与其余九味混合，粉碎成细粉，混匀，过筛，制成1000粒。
含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，50∶50比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素(C17H14O3)计，不得少于0.1mg；鉴别a、取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处理10分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以4∶5∶0.8∶0.2比例的石油醚(60-90℃)—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸20分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以7∶0.4∶2∶3比例的醋酸乙酯—甲醇—甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1g，加水50ml，置水浴上加热30分钟，滤过，滤液加盐酸2滴，用乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚层，水层加盐酸5ml，置水浴上加热30分钟，冷却后，再用乙醚20ml提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠溶液10ml，振摇，水层显橙红色；d、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物，置显微镜下观察花粉粒呈圆球形或椭圆形，外壁有齿状突起，有的可见三个萌发孔；不规则块片血红色，周围液体显姜黄色，渐变红色；不规则碎块淡黄色，半透明，渗出油滴，加热油滴溶化，可见草酸钙方晶；草酸钙簇晶棱角多短钝，直径60-140μm；体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8-24μm，有的具长短不一的刚毛。
权利要求
1.一种用于治疗跌打损伤的药物组合物的质量控制方法，该药物组合物以猪骨250重量份、黄瓜子200重量份、土鳖虫3重量份、自然铜25重量份、乳香10重量份、没药10重量份、血竭10重量份、红花25重量份、大黄15重量份、当归15重量份为原料药，其特征在于该方法中含量测定方法为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40-60∶40-60比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取或热回流提取2-4小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素计，不得少于0.1mg。
2.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于该方法中含量测定方法为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，50∶50比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素计，不得少于0.1mg。
3.如权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于该方法中包括如下鉴别方法中的一种或几种a、取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处理5-20分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以3-5∶4-6∶0.7-0.9∶0.1-0.3比例的石油醚—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸10-30分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以6-8∶0.3-0.5∶1-3∶2-4比例的醋酸乙酯—甲醇—甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1g，加水50ml，置水浴上加热20-40分钟，滤过，滤液加盐酸2滴，用乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚层，水层加盐酸5ml，置水浴上加热20-40分钟，冷却后，再用乙醚20ml提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠溶液10ml，振摇，水层显橙红色；d、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物，置显微镜下观察花粉粒呈圆球形或椭圆形，外壁有齿状突起，有的可见三个萌发孔；不规则块片血红色，周围液体显姜黄色，渐变红色；不规则碎块淡黄色，半透明，渗出油滴，加热油滴溶化，可见草酸钙方晶；草酸钙簇晶棱角多短钝，直径60-140μm；体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8-24μm，有的具长短不一的刚毛。
4.如权利要求3所述的质量控制方法，其特征在于该方法中包括如下鉴别方法中的一种或几种a、取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处理10分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以4∶5∶0.8∶0.2比例的石油醚—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸20分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以7∶0.4∶2∶3比例的醋酸乙酯—甲醇—甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；c、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1g，加水50ml，置水浴上加热30分钟，滤过，滤液加盐酸2滴，用乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚层，水层加盐酸5ml，置水浴上加热30分钟，冷却后，再用乙醚20ml提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠溶液10ml，振摇，水层显橙红色；d、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物，置显微镜下观察花粉粒呈圆球形或椭圆形，外壁有齿状突起，有的可见三个萌发孔；不规则块片血红色，周围液体显姜黄色，渐变红色；不规则碎块淡黄色，半透明，渗出油滴，加热油滴溶化，可见草酸钙方晶；草酸钙簇晶棱角多短钝，直径60-140μm；体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8-24μm，有的具长短不一的刚毛。
5.如权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于该方法为含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，50∶50比例的乙腈—0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，检测波长为440nm，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；精密称取血竭素高氯酸盐9mg，置50ml量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液；取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物适量，精密称取500mg，加3％磷酸甲醇溶液40ml，索氏提取2小时至提取液无色，将提取液置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含血竭以血竭素计，不得少于0.1mg；鉴别a、取上述本药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物1.5g，加水30ml，超声处理10分钟，滤过，滤液用30ml乙醚提取，分取水层，再用醋酸乙酯30ml提取，分取醋酸乙酯层，回收醋酸乙酯至约0.5ml，作为供试品溶液另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以4∶5∶0.8∶0.2比例的石油醚—甲苯—醋酸乙酯—甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b、取上述药物组合物所制药剂装量差异项下的内容物2g，加80％丙酮水溶液5ml，冷浸20分钟，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红花对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以7∶0.4∶2∶3比例的醋酸乙酯—甲醇—甲酸—水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
全文摘要
本发明公开一种中药组合物的质量控制方法。卫生部部颁中药成方制剂十八册中标准号为WS
文档编号A61P29/00GK1733187SQ200510098729
公开日2006年2月15日 申请日期2005年9月7日 优先权日2005年9月7日
发明者关家华, 路波, 董长萍, 刘传贵, 张广民 申请人:吉林华康药业股份有限公司