专利名称：：一种超声强化提取吴茱萸生物碱的制备方法
技术领域：
：本发明涉及以吴茱萸为原料，超声提取的方法。具体地涉及到超声技术提取吴茱萸生物碱的方法。
背景技术：
：吴茱萸为2005年版药典一部收载，是一种在临床上应用已有数百年历史的传统中药材。吴茱萸含有多种化学成分，其中吴茱萸生物碱为其主要药效成分，吴茱萸生物碱中，又以吴茱萸碱和次碱为主要生物碱。吴茱萸生物碱的药用价值已有很多文献报道，如《中国中医药信息杂志》2005年第12巻第6期的论文"吴茱萸碱药理作用研究进展"阐述吴茱萸药材中的吴茱萸碱具有抗肿瘤、抗伤害感受、减肥、强心、降血压、对支气管平滑肌等的作用。《中国药理学通报》2003年第19巻第10期的论文"吴茱萸碱和吴茱萸次碱的药理学研究进展"中阐明了吴茱萸次碱有降血压'和松弛血管的作用，可引起血管平滑肌细胞中一些非电压依赖性的钙通道开放血管内皮细胞中L-型电压依赖性钙通道的开启，此外，吴茱萸次碱还有抗血小板、抗血栓、松弛兔和人肛门内括约肌、减轻体重等作用。从吴茱萸药材提取吴茱萸生物碱的方法有水提法和醇提法。《中成药》2005年第27巻第11期的论文"均匀设计优选吴茱萸提取工艺的研究"用70%乙醇或者90%乙醇作为提取溶剂，优化的工艺条件是20倍量70。X乙醇回流提取3次，每次1.2小时，采用分光光度法测得吴茱萸总生物碱提取收率为1.6369%(总生物碱提取收率=总生物碱重量/吴茱萸重量)。该方法溶剂耗用量达60倍，生产成本高。《中国医院药学杂志》2003年第23巻第8期"超临界流体萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱"公开了一种采用95%乙醇作夹带剂进行超临界C02提取的方法制备吴茱萸生物碱，用超临界C02提取存在设备一次性投资大、维护费用高的缺陷。《中国药学杂志》2005年第40巻第2期的论文"吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取条件研究"，公开了一种超声提取吴茱萸生物碱的方法，是用45倍乙酸乙酯于3(TC超声提取40min。但是该工艺仅仅是一种分析方法的提取工艺，考察的也只是不同溶剂的冷浸效果，仅公开了用没乙酸乙酯作溶剂的超声工艺，它采用高达45倍的醋酸乙酯进行提取，溶剂耗用量大，操作烦琐。为了提高吴茱萸总生物碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率，有必要改进吴茱萸生物碱的制备方法。
发明内容本发明的目的是提供一种从吴茱萸药材超声提取制备吴茱萸生物碱的方法，使能达到高效快速提取，提取效率高，能耗低，工艺过程简便适合工业化生产。本发明所釆用的技术方案是将吴茱萸药材粉碎成粗粉，置于超声提取器中，用乙醇溶液作溶剂，吴茱萸药材与溶剂的重量体积比为1:101:30，浸泡时间30min60min后在超声频率2070kHz、温度207CTC下，提取30min120min后出料、滤过、取滤液经减压过滤或离心，清液浓縮回收溶剂得稠膏再干燥即得吴茱萸总生物碱。在提取过程中，实施超声波强化提取，利用超声波的空化效应、机械效应及热效应等增强溶剂对药材的穿透力，有助于药材中有效成分的溶出，提高有效成分的提取率，相应縮短提取时间，降低提取温度，降低能耗，提高生产率。在超声场中，因为提取过程短，且提取温度低，所以有必要对药材进行粉碎，增加药材受超声作用的表面积。药材要有一定的粒度，但也不能过细。药材的粒度细，虽然提取速度快，有效成分得率高，但杂质多，抽滤或离心工艺麻烦，且提取后的成分进行繁琐的除杂过程。本专利药材粒度选择经1060目筛。从吴茱萸中提取生物碱属于固液提取过程，因此，只有固相与液相充分接触，使溶剂充分渗入植物细胞内，才有利于传质过程的进行。为了保证溶剂充分渗入细胞内，有必要在提取前对药材进行浸泡处理。提取溶剂的乙醇溶液浓度优选为70%-95%。吴茱萸生物碱的制备方法，其最佳的工艺条件为用95%乙醇溶液作溶剂，吴茱萸药材与溶剂的重量体积比为1:15浸泡30min后在超声频率20kHz、温度60'C下，提取40min后出料。本发明的有益效果1.本发明的制备工艺提取时间短、生产周期短，生产效率高；提取温度低，有效成分不易被破坏，提高了吴茱萸总生物碱的收率和吴茱萸碱及吴茱萸次碱的提取率；2.溶剂用量少，既节约溶剂又节约能源和生产成本；3.本发明所提供的超声制备吴茱萸生物碱的方法和工艺条件适合工业化批量生产吴茱萸总生物碱中的质量指标以吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量为基准。所采用的的测定方法是2005版的《中国药典》一部119页HPLC法。本发明所说的吴茱萸总生物碱收率=(总生物碱质量/投入的药材质量)X100%。吴茱萸碱的提取率=(吴茱萸提取物中吴茱萸碱的含量x总碱质量/投入药材中吴茱萸碱含量x药材质量)X100%。吴茱萸次碱的提取率z(吴茱萸提取物中吴茱萸次碱的含量X总碱质量/投入药材中吴茱萸次碱含量x药材质量)X100%。下面通过具体实施例进一步阐述本发明的技术方案具体实施方式以下实施例所用的吴茱萸药材中吴茱萸碱含量为0.231%，吴茱萸次碱含量为0.207%实施例1提取工艺条件的选择(l)提取溶剂对吴茱萸总生物碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取率的影响实验方法取700克粉碎过10目筛的吴茱萸粉，置于超声提取器中，分别加入不同的提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1:15，浸泡30min,超声频率26kHz，提取温度60'C，提取时间40min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓縮得稠膏，稠膏减压干燥即得吴茱萸总生物碱。分别计算吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率。各溶剂均进行了IO批试验，各取10批的平均值，结果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>实验结果显示采用95%的乙醇提取时，吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率都比其他溶剂提取要高；控制提取溶剂的pH值在酸性或碱性时提取效果反而不好，95%的乙醇对吴茱萸碱和次碱提取效果与甲醇没有太明显的差别，但是甲醇提取的提取物比较多，提取物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量反而不高.，与乙酸乙酯作溶剂进行比较，95%乙醇提取的吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取率明显比乙酸乙酯提取的分别提高了3.2%和7.8%，同时乙酸乙酯比较容易挥发，回收时对设备要求高，不适合工业化生产。因此选择95%的乙醇为提取溶剂效果最佳。(2)提取温度对吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取率的影响实验方法取700克粉碎过10目筛的吴茱萸粉，置于超声提取器中，加入95%乙醇为提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1:15，浸泡30min，超声频率26kHz，选择不同的提取温度，提取时间40min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓縮得稠膏，稠膏减压干燥即得吴茱萸总生物碱。分别计算吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率。结果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>实验结果显示随着温度的升高，吴茱萸总生物碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率都升高，但到6(TC时提取率不再升，甚至有点下降的趋势，因此，我们将提取温度选择在6(TC为最佳。(3)提取时间对吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取率的影响实验方法取700克粉碎过10目筛的吴茱萸粉，置于超声提取器中，加入95%乙醇为提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1:15，浸泡30min，超声频率26kHz，提取温度6(TC，选择不同的提取时间，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓縮得稠膏，稠膏减压干燥即得吴茱萸提取物。分别计算吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率。结果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实验结果显示提取时间对吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取也有较大的影响，提取时间太短，吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取率较低，当提取时间为40min时，吴茱萸碱和次碱的提取率随提取时间的延长变化不大，综合考虑生产成本，选定提取时间为40min为最佳。(4)超声频率对吴茱萸碱和吴茱萸次碱提取率的影响实验方法取700克粉碎过10目筛的吴茱萸粉，置于超声提取器中，加入95%乙醇为提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1:15，浸泡30min，分别设定不同的超声频率进行提取，提取温度为6(TC，提取时间40min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩得稠膏，稠膏减压干燥即得吴茱萸总生物碱。分别计算吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率。结果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实验结果显示超声频率不同，对吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取率的影响不大，综合考虑，我们选择超声频率为26kHz。结论本发明超声提取过程中最佳工艺为将吴茱萸粉碎成粗粉，提取溶剂为乙醇溶液，置于超声提取器中，药材与溶剂的重量体积比为1:51:25,浸泡时间30min60min，超声频率2070kHz，提取温度2070°C，提取时间30min120min，超声提取后的提取液抽滤或离心，清液减压浓缩回收溶剂得稠膏，减压干燥即得吴茱萸总生物碱。实施例2取700克粉碎过10目筛的吴茱萸粉，置于超声提取器中，乙醇浓度为95%,药材与溶剂的重量体积比为1:15，浸泡30min，超声频率26kHz，提取温度60°C，提取时间40min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩得稠膏，稠膏减压干燥即得吴茱萸总生物碱为138.6g,收率为19.8%;吴茱萸碱的含量为0.88%,提取率是78.9%;吴茱萸次碱的含量为0.84%，提取率是79.9%。实施例3同实施例2所示，所不同的是实施例2中药材粒度为10目，而实施例3中药材粒度为30目，此时，吴茱萸总生物碱为162.4g，得率是23.2%;吴茱萸碱的含量为0.80%,提取率是80.1%;吴茱萸次碱的含量为0.73%，提取率是81.3%。实施例4同实施例2所示，所不同的是实施例2中药材粒度为10目，而实施例4中药材粒度为60目，此时，吴茱萸总生物碱为158.2g，得率是22.6%，吴茱萸碱的含量为0.83%，提取率是81.5%，吴茱萸次碱的含量为0.74%，提取率是80.4%。实施例5同实施例2所示，所不同的是:实施例2中药材与溶剂的重量体积比是1:15，而实施例6中药材与溶剂的重量体积比是l:5，此时，吴茱萸总生物碱为105.7g，得率是15.1%，吴茱萸碱的含量为1.13%,提取率是74.1%，吴茱萸次碱的含量为0.99%，提取率是72.3%。实施例6同实施例2所示，所不同的是:实施例2中药材与溶剂的重量体积比是1:15，实施例7中吴茱萸粉与溶剂的比例为1:25，此时，吴茱萸总生物碱为171.5g，得率是24.5%，吴茱萸碱的含量为0.75%，提取率是79.4%，吴茱萸次碱的含量为O.71%，提取率是84.0%。实施例7同实施例2所示，所不同的是实施例2中药材浸泡30min，而实施例7中药材浸泡30min，此时，吴茱萸总生物碱为149.8g，得率是21.4%，吴茱萸碱的含量为0.84%，提取率是78.1%，吴茱萸次碱的含量为0.77%，提取率是79.2%。实施例8同实施例2所示，所不同的是实施例2中药材浸泡30min，而实施例8中药材浸泡60min，此时，吴茱萸总生物碱为149.8g，得率是21.4%，吴茱萸碱的含量为0.85%,提取率是79.0%，吴茱萸次碱的含量为0.79%,提取率是81.2%。实施例9同实施例2所示，所不同的是实施例2中采用超声提取，而实施例9中不采用超声提取，而直接采取回流提取120min，此时，吴茱萸总生物碱为197.4g,得率是28.2%，吴茱萸碱的含量为0.61%，提取率是74.6%，吴茱萸次碱的含量为0.61%，提取率是83.7%。由以上实施例可知，超声提取吴茱萸生物碱时，其较优的提取条件为孔径过10目筛的吴茱萸药材粗粉，置于超声提取器中，乙醇浓度为70%，药材与溶剂的重量体积比为1:15，浸泡时间30min，超声频率26kHz，提取温度6(TC，提取时间40min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓縮得稠膏，稠膏减压干燥即得吴茱萸干粉。常规回流提取是在回流的高温及120min的长时间进行提取。所以说，超声提取具有降低提取温度，缩短提取时间，快速高效地提取吴茱萸生物碱等优点。权利要求1.一种吴茱萸生物碱的制备方法，其特征在于将吴茱萸药材粉碎成粗粉，置于超声提取器中，用乙醇溶液作溶剂，吴茱萸药材与溶剂的重量体积比为1∶10～1∶30，浸泡时间30min～60min后在超声频率20～70kHz、温度20～70℃下，提取30min～120min后出料、滤过、取滤液经减压过滤或离心，清液浓缩回收溶剂得稠膏再干燥即得吴茱萸生物碱。2、根据权利要求1所述的吴茱萸生物碱的制备方法，其特征在于所用的乙醇溶液浓度为70%-95%。3、根据权利要求1所述的吴茱萸生物碱的制备方法，其特征在于所用的粗粉粒度经过1060目筛。4、根据权利要求1所述的吴茱萸生物碱的制备方法，其特征在于用95%乙醇溶液作溶剂，吴茱萸药材与溶剂的重量体积比为l:15浸泡30min后在超声频率20kHz、温度60。C下，提取40min后出料。全文摘要一种超声强化提取吴茱萸生物碱的制备方法，涉及以吴茱萸为原料，超声提取的方法。它是将吴茱萸药材粉碎成粗粉，置于超声提取器中，用乙醇溶液作溶剂，吴茱萸药材与溶剂的重量体积比为1∶10～1∶30，浸泡时间30min～60min后在超声频率20～70kHz、温度20～70℃下，提取30min～120min后出料、滤过、取滤液经减压过滤或离心，清液浓缩回收溶剂得稠膏再干燥即得吴茱萸生物碱。本发明的制备方法具有提取时间短、生产周期短，生产效率高；提取温度低，吴茱萸总生物碱的收率和吴茱萸碱及吴茱萸次碱的提取率高；适合工业化批量生产等优越性。文档编号A61K36/754GK101224250SQ20071002634公开日2008年7月23日申请日期2007年1月17日优先权日2007年1月17日发明者周锦柯,曾荣华,李金华,葛发欢,邹小燕,裕黄申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司