专利名称：：作为抗癌药的在c12-c13位被修饰的埃博霉素类似物的制作方法作为抗癌药的在C12-C13位被修饰的埃博霉素类似物本发明涉及埃博霉素A的类似物。更确切地讲，本发明涉及其中在埃博霉素的C13/C14位的环氧环被2-取代-2，5-二氢-喵唑或2-取代的噻唑烷之一代替的类似物。埃博霉素是可用于制药领域的大环内酯化合物。例如，具有以下结构的埃博霉素A和B具有稳定微管的效果，因此对快速增殖的细胞诸如肿瘤细胞或其它过度增殖性细胞疾病具有细胞毒活性。埃博霉素ARa=H埃博霉素BRa=Me发明详述本发明的一个方面涉及下式之一表示的化合物:
背景技术：
：0OH0(J)OOH0其中Q是选自O或S的基团；并且R'可选自氢、卤素、羟基、烃基、三氟曱基、氰基、硝基、脒基、-B(OH)2、=NR2、-OR2、-SR2、-C(O)R2、-C(O)OR2、-OC(O)R2、-N(R2)R3、-C(0)KN(R2)R3、(CR5r6)广S(0)'R2、-C(R2)>R4;R2和R3彼此独立地是氢或选自d-6烷基、-(015议6)广碳环基和-(0^116)广杂环基，其中任何一个均任选地被l、2、3、4或5个独立地选自下列的取代基所取代卤素、羟基、CM烷基、三氟曱基、氰基、硝基、氨基和脒基；各RJ和X可相同或不同并且均独立地选自Q-6烷基、Qj-6链烯基、C2-6炔基、d—6烷氧基、-(^15116)]-碳环基和-(0^1^-杂环基、芳基、杂芳基、氨基，其中任何一个均任选地被l、2、3、4或5个独立地选自下列的取代基所取代卤素、羟基、C"烷基和C"烷氧基；各R5和I^可相同或不同并且均独立地选自键、氢、卤素、羟基和氨基；j是0、1、2、3、4、5、6或7;k是0或11是0、l或2;或其可药用盐、酯、溶剂化物、N-氧化物或前药。定义烃基本文所用的术语"烃基，，包括仅由氢和碳原子組成的基团；所述的基团可包括脂肪族和/或芳族基团。该基团可包含l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳原子。烃基的实例包括d-6烷基(例如d、C2、C3或C4烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基)；Q^链烯基；C^炔基；Cw烷氧基；它们均可被芳基所取代(例如千基)或被环烷基取代(例如环丙基曱基)；环烷基(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)；芳基(例如苯基、萘基或药基)等。烷基本文所用的术语"烷基"和"C,-6烷基"包括具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烷基部分。该术语包括基团诸如甲基、乙基、丙基(正丙基或异丙基)、丁基(正丁基、仲丁基或叔丁基)、戊基、己基等。尤其是烷基可具有l、2、3或4个碳原子。链烯基本文所用的术语"链烯基"和"C2-6链烯基"包括具有2、3、4、5或6个碳原子并且除此之外在适用的情况下还具有至少一个E或Z立体化学的双键的直链或支链烷基部分。该术语包括基团诸如乙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、l-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、l-己烯基、2-己烯基和3-己烯基等。炔基本文所用的术语"炔基"和"<:2.6炔基"包括具有2、3、4、5或6个碳原子并且除此之外还具有至少一个三键的直链或支链烷基部分。该术语包括基团诸如乙炔基、l-丙炔基、2-丙炔基、l-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、l-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、l-己炔基、2-己炔基和3-己炔基等。烷氧基本文所用的术语"烷氧基"和"Cw烷氧基"包括-O-烷基，其中烷基是直链或支链的并且含有l、2、3、4、5或6个碳原子。在一类实施方案中，7垸氧基具有l、2、3或4个碳原子。该术语包括基团诸如曱氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。芳基本文所用的术语"芳基"包括具有6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个环碳原子的芳族环系。芳基通常是苯基，但也可以是具有两个或多个环的多环环系，其中至少一个环是芳族的。该术语包括基团诸如苯基、萘基、芴基、寞基、茚基、蒽基等。碳环基本文所用的术语"碳环基"包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个碳环原子的饱和(例如环烷基)或不饱和(例如芳基)的环基团。碳环基尤其包括3-至10-元非芳族环或环系，尤其是5-或6-元非芳族环，它们可以是完全或部分饱和的。碳环基团选自例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基、二环[2.2.2]辛基、苯基、萘基、芴基、奠基、茚基、蒽基等。环烷基本文所用的术语"环烷基"包括具有3、4、5、6、7或8个碳原子的脂环族基团。该基团可以是桥接的或多环环系。环烷基更通常是单环的。该术语包括基团诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基、二环2.2.2I辛基等。杂环基本文所用的术语"杂环基"包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个环原子的饱和(例如杂环烷基)或不饱和的(例如杂芳基)的杂环基团，所述环原子中的至少一个选自氮、氧、磷、硅和硫。杂环基尤其包括3-至10-元非芳族环或环系，更尤其是5-或6-元环，它们是完全或部分饱和的。杂环基团选自例如环氧乙烷基、氮杂环丙烯基、1，2-氧硫杂环戊基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、四氢呋喃基、吡喃基、噻喃基、噻蒽基、异苯并呋喃基、苯并吹喃基、色烯基、2H-吡咯基、吡咯基、p比咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、苯并咪喳基、吡唑基、吡漆基、吡峻烷基、漆唑基、异噻哇基、二噻唑基、"恶唑基、异嚅唑基、吡梵基、吡,基、嘧梵基、哌咬基、哌噪基、歧溱基、吗啉基、疏代吗啉基，尤其是硫代吗啉-4-基、吲溱基、异吲咮基、3H-吲咮基、吲咪基、苯并咪唑基、cumaryl、吲唑基、三唑基、四唑基、噤呤基、4H-壹唤基、异壹啉基、#基、四氩壹啉基、四氢异奮啉基、十氢会啉基、八氢异全啉基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并噻吩基、二苯并噻吩基、2，3-二氮杂萘基、萘免基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶咬基、咔唑基、P-咔啉基、菲咬基、丫咬基、萘嵌二氮苯基、菲咯啉基、呋咱基、吩嗓基、吩漆嗪基、吩嚅嗪基、色烯基、异色满基、色满基等。杂环烷基本文所用的术语"杂环烷基"包括具有3、4、5、6或7个环碳原子和1、2、3、4或5个选自氮、氧、磷和硫的环杂原子的饱和杂环基团。该基团可以是多环环系，但通常是单环的。该术语包括基团诸如氮杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌咬基、环氧乙烷基、吡唑烷基、咪唑基、吲哚里西梵基、哌溱基、噻唑烷基、吗啉基、硫代吗啉基、壹诺里西咬基等。杂芳基本文所用的术语"杂芳基"包括具有5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16个环原子的芳族环系，所述环原子中的至少一个选自氮、氧和石克。该基团可以是具有两个或多个环的多环环系，所述环中的至少一个是芳环，但通常是单环的。该术语包括基团诸如嘧咬基、呋喃基、苯并bl噻吩基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、P比咯烷基、吡啶基、苯并[b咬喃基、吡嗪基、嘌呤基、吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、汾虔嗪基、三嗪基、2，3-二氮杂萘基、2H-色烯基、嚅唑基、异喁唑基、噻唑基、异P引咪基、吲唑基、嘌呤基、异喹啉基、喹峻啉基、蝶咬基等。卤素本文所用的术语"面素"包括F、Cl、Br或I。在一类特定的实施方案中，卤素是F或C1，其中F是更常用的。本文所用的术语"氨基"包括通式结构-N(R勺RJ的基团，尤其包括-NH2和-NHR2,其中112和113如上文所定义。脒基本文所用的术语"脒基"包括通式结构-C(NH)NH2的基团及其衍生物，尤其是其中的氬被烷基(例如甲基或乙基)或羟基取代的基团。卣素本文所用的术语卣素包括氟、氯、溴和碘。尤其可提到氟。取代的本文中针对基团所用的术语"取代的"是指所述基团中的一个或多个、特别是最多5个、更优选1、2或3个氬原子彼此独立地被相应数目的所述取代基所取代。当然，应该理解，取代基应该仅在化学上可能的位置上，本领域的技术人员能够确定(从实验上或理论上)特定的取代是否是可能的而无需过多的尝试。例如，如果连接到带有不饱和(例如烯属)键的碳原子上的话，含有游离氢的氨基或羟基可能是不稳定的。另外，当然还应该理解，本文所述的取代基本身可被任何取代基所取代，受到上述限制以进行适当的取代，如本领域技术人员所认识到的那样。当空间因素决定基团上的取代基的排列次序时，具有最低构象能量的异构体是优选的。独立地当两个或多个基团被描述为"彼此独立地"选自一系列原子或基团时，这意味着这些基团可以相同或不同。因此每个基团的特性独立于一个或多个其它基团的特性。可药用的本文所用的术语"可药用的"包括在合理医学判断范围内适宜用于与人或动物的組织相接触而没有过多的毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症、具有合理的受益/风险比的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。该术语包括对于人和兽医目的的可接受性。保护的程度包括含有或声称含有本发明化合物的伪造或假冒的产品，不论其是否真的含有所述化合物以及所述化合物的含量是否是治疗有效量。包括在保护范围内的是包装的产品，其包含表明在该包装的产品中包含本发明的物质或药物制剂的描述或说明书以及是或含有或声称是或含有所述制剂或物质的产品。所述包装的产品可以但不一定是伪造或假冒的产-口o在该说明书的整个说明书和权利要求范围内，单数包括复数形式，除非上下文另有要求。尤其是在使用不定冠词的情况下，说明书应该理解成包括复数以及单数形式，除非上下文另有要求。结合本发明的特定方面、实施方案或实施例进行描述的特征、整数、特性、化合物、化学部分或基团都应该理解成适用于本文所述的任何其它方面、实施方案或实施例，除非与其矛盾。所迷的盐尤其是式(I)(或其示例性的式子)化合物的可药用盐，尤其是如果它们形成成盐基团的话。成盐基团是具有碱性或酸性特性的基团。具有至少一种碱性基团例如氨基、未形成肽键的仲氣基或吡梵基的化合物可形成酸加成盐、例如与无机酸、诸如盐酸、硫酸或磷酸或与适当的有机羧酸或磺酸、例如脂肪族单-或二-羧酸、诸如三氟乙酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、羟基马来酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸或草酸或氨基酸诸如精氨酸或赖氨酸、芳香族羧酸诸如苯甲酸、2-苯氧基-苯甲酸、2-乙酰氧基-苯曱酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、芳香族-脂肪族羧酸诸如苦杏仁酸或肉桂酸、杂芳族羧酸诸如烟酸或异烟酸、脂肪族磺酸、诸如甲-、乙-或2-羟基乙磺酸或芳族磺酸、例如苯-、对-曱苯-或萘-2-磺酸。当存在数个碱性基团时，可形成单-或多-^口成盐。具有酸性基团、羧基或酚羟基的化合物可形成金属或铵盐、诸如碱金属或碱土金属盐、例如钠、钾、镁或钙盐，或与氨或适当的有机胺、诸如叔单胺、例如三乙胺或三-(2-羟基乙基)-胺或杂环碱、例如N-乙基-哌啶或N，N'-二甲基哌唤形成铵盐。也可形成盐的混合物。同时具有酸性和碱性基团的化合物可形成内盐。为了分离或纯化的目的，以及在可进一步用作中间体的化合物的情况下，还可以使用不可药用的盐，例如苦味酸盐。然而，仅有可药用的无毒的盐可用于治疗的目的，因此这些盐是优选的。在存在负电荷基团诸如羧基或磺基的情况下，还可与碱形成盐，例如金属或铵盐、诸如碱金属或碱土金属盐、例如钠、钾、镁或钙盐，或与氨或适当的有机胺、诸如叔单胺、例如三乙胺或三(2-羟基乙基)胺或杂环碱、例如N-乙基-哌啶或N，N'-二甲基艰,形成铵盐。为了分离或纯化的目的，还可以使用不可药用的盐，例如苦味酸盐或高氯酸盐。对于治疗应用，仅使用可药用盐或游离化合物(以药物制剂的形式使用)，因此这些是优选的。12鉴于游离形式的新化合物与其盐形式的化合物、包括例如在该新化合物的纯化或鉴别过程中可用作中间体的那些盐之间的密切关系，在适当和方便的情况下，上下文中所提到的游离化合物都应理解为也指相应的盐。在本发明的优选实施方案中，W具有下式其中各RS和I^可以相同或不同并且均独立地选自氢、卣素、羟基；j是0、1、2、3、4、5、6或7;并且Ar是芳族基团，其可任选地被独立地选自下列的取代基所取代囟素、羟基、C,-6烷基、C卜6链烯基、C卜6炔基、C卜6烷氧基、三氟甲基、氰基、硝基、氨基和脒基。基团CR5^可以是饱和的或不饱和的。在该基团是不饱和的情况下，基团R5或R6之一是键。在一类化合物中，Ar是任选取代的芳族或杂芳族的5-或6-元环。Ar可以是例如苯基、吡咬基和噻汾基。在另一类化合物中，W具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>其中R5、R6、j和I^如上文所迷；并且W是N或C;并且m是0、1、2、3或4。在式IV化合物的优选种类中，取代M此处于对位，如下式所示—(CR5R6)i~\//~(R，其中RS、R6、j和R"如上文所迷；并且W是N或C;并且m是0、1、2、3或4。在另一类化合物中，W具有下式(CR5R6)i(R)n(VI)其中n是O、1、2或3且T是NH、O或S。在一个特定类型的化合物中，R5和I^都是氢。在另一类化合物中，j优选是0、l或2。在另一亚类化合物中，j是0。W优选选自卣素和Cw烷基，其中尤其可以提到的是甲基、乙基、异丙基和叔丁基。本发明化合物在C12/C13位优选具有反式构型并且具有下列结构式之OOHO其中R1和Q如上文所述。在一种类型的化合物中，Q是O，提供了下式的化合物OOHO(X)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中R'如上文所述。在本发明的一个方面，该化合物在代谢上比埃博霉素A更稳定。在另一方面，本发明化合物表现出与它的天然同类物质相当的抗增殖活性。由于在C12/C13位的环氧化物功能团，埃博霉素在酸性条件下发生重排反应，生成无生物学活性的化合物。因此，可以认为环氧化物基团代表了可在体内水解以产生无生物学活性的二醇的代谢薄弱点。因此，本发明尝试通过用5-元"恶唑环代替环氧化物功能团以克服该问题。由于不再具有环氧化物功能团，本发明的化合物提供了在代谢上更稳定的埃博霉素衍生物。因此，本发明化合物更适用于开发口服有效的抗癌药。本发明化合物优选具有与埃博霉素A相当的生物学活性。在一种优选类型的化合物中，埃博霉素A中的环氧化物部分被2-取代的2，5-二氢,恶唑环所代替，例如如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>该类化合物的一个具体例子是其中的2，5-二氩-嚅唑环在C2上净皮5或6元芳族或杂芳族基团取代的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中R5、R6、j、R4、T和n如上文所述。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>本发明的这些化合物不仅在酸性条件下比它们的天然同族物质更稳定;而且，通过改变在2，5-二氢-哺唑环的C2上的取代基，例如可以调节这些化合物类型的物理化学和药理学性能。本文所述化合物的羟基可被用于羟基的保护基所保护。本文所用的术语"用于羟基的保护基"是指用于羟基的酸不稳定的保护基，该保护基是本领域已知的。保护基的特征在于它们能够很容易地被除去，即，不会发生不需要的副反应，通常通过溶剂分解、还原、光分解或还可通过酶活性、例如在与生理条件相类似的条件下除去，并且还在于它们不存在于终产物中。专家们知道或可以很容易地确定何种保护基适于上下文提到的反应。通过保护基对幾基进行保护、保护基本身及其分解反应记载于例如标准参考书诸如J,F.W.McOmie，"ProtectiveGroupsinOrganicChemistry",PlenumPress,London和NewYork1973、T.W.Greene,"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis",Wiley,NewYork1981、"ThePeptides";笫3巻(编者E.Gross和J.Meienhofer),AcademicPress,London和NewYork1981、"MethodenderorganischenChemie"(有机化学方法)，HoubenWeyl,第4版，笫15/1巻，GeorgThiemeVerlag，Stuttgart1974，H.-D.Jakubke和H.Jescheit，"Aminosauren，Peptide,Proteine"(氛基酸、肽、蛋白质)，VerlagChemie，Wdnheim,DeerileldBeach和Basel1982和JochenLehmann，"ChemiederKohlenhydrate:MonosaccharideundDerivate"(碳水化物化学单糖和衍生物)，GeorgThiemeVerlag，Stuttgart1974。优选的保护基是酸不稳定的甲硅烷基醚如叔丁基-二甲基-甲硅烷基(TBS)醚、三乙基甲硅烷基(TES)醚、三异丙基甲硅烷基(TIPS)醚、二乙基异丙基甲硅烷基(DEIPS)醚、异丙基二曱基甲硅烷基(IPDMS)醚或叔己基二曱基甲硅烷基(TDS)醚。本发明的另一个方面涉及包含溶于或悬浮在适于给药于患者的生理性溶剂中的上迷化合物中的任何一种的抗癌剂。该化合物在生理性溶剂中的浓度在足以对癌细胞呈细胞毒性的范围内。本发明的另一个方面涉及杀死癌细胞的方法，该方法包括将癌细胞与含有上述任何化合物的细胞毒性浓度的溶液相接触的步骤。17此外，本发明还涉及本发明化合物或该化合物的可药用盐或溶剂化物或7JC合物在用于治疗人或动物体的方法中的应用。此外，本发明还涉及本发明化合物或该化合物的可药用盐或溶剂化物或水合物在制备用于治疗瘤性疾病的药用产品中的应用。术语"瘤性疾病"尤其涉及液态肿瘤疾病如白血病和实体胂瘤疾病。术语"实体肿瘤疾病"特别是指乳腺癌、卵巢癌、结肠癌和包括胃癌在内的胃肠道癌症、宫颈癌、肺癌，例如小细胞肺癌和非小细胞肺癌、胰腺癌、肾癌、神经胶质瘤、黑瘤、头和颈癌症、膀胱癌、曱状腺癌、肝细胞癌、前列腺癌和卡波西肉瘤。此外，本发明还提供了用于治疗瘤性疾病的方法，该方法包括将本发明化合物或该化合物的可药用盐或溶剂化物或水合物以对所述疾病有效的量施用给需要所迷治疗的温血动物。此外，本发明还涉及包含本发明化合物或该化合物的可药用盐或溶剂化物或水合物和至少一种适于局部、肠内例如口服或直肠给药或肠胃外给药并且是无机或有机的、固体或液体的可药用栽体的药物制剂。特别是用于口服给药的包含活性成分和稀释剂例如乳糖、葡萄糖、甘露醇和/或甘油和/或润滑剂和/或聚乙二醇的片剂或明皿嚢。片剂还可包含粘合剂例如硅酸镁铝、淀粉诸如玉米、小麦或7jC稻淀粉、明胶、甲基纤维素、羧曱基纤维素钠和/或聚乙烯基吡咯烷酮和，如果需要的话，崩解剂例如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐诸如海藻酸钠、和/或泡腾剂混合物或吸附剂、染料、矫味剂和甜味剂。还可以以肠胃外给药组合物的形式或以输液的形式使用本发明的药理学活性化合物。该药物组合物可以是无菌的和/或可包含赋形剂例如防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、用于调节渗透压的盐和/或緩沖剂。如果需要的话，本发明的药物组合物可包含其它药理学活性物质，并且该药物组合物通过本领域已知的方式制得，例如通过常规混合、造粒、调制、溶解或冷冻干燥过程制得，并且包含约1%至95%、特别是约1%至约20%的活性成分。18活性成分的剂量取决于各种因素，包括患者的类型、种类、年龄、体重、性别和医疗条件；待治疗的状态的严重程度；给药途径；患者的肾脏和肝脏功能和所用的特定化合物。普通的主治医师、临床医师或兽医能够很容易地确定和处方用于预防、对抗或阻止状态的发展所需的药物有效量。在可产生效果而没有毒性的范围内达到药物浓度的最佳处方需要基于药物到达耙位的动力学的给药方案。这需要考虑药物的分布、平衡和排除。本发明化合物优选是微管稳定剂。它们因此可用于治疗各种癌症，包括(但不限于)下列癌症，包括膀胱、乳腺、结肠、肾、肝、肺、卵巢、胰腺、胃、宫颈、甲状腺和皮肤的癌症；包括扁平细胞癌；淋巴细胞的造血肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、B-细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非-霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和Burketts淋巴瘤；骨髓细胞的造血肿瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病以及早幼粒细胞白血病；间叶来源的肺瘤，包括纤维肉瘤和横紋肌肉瘤；其它肿瘤，包括黑瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、成神经细胞瘤和神经胶质瘤；中枢和外周神经系统的肺瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；间叶来源的胂瘤，包括纤维肉瘤、横紋肌肉瘤和骨肉瘤；和其它肿瘤，包括黑瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、精原细胞瘤、甲状腺滤泡癌和畸胎癌。本发明化合物还可抑制肿瘤的血管生成，由此影响肿瘤的生长。该抗血管生成的性能还可用于治疗涉及视网膜血管形成的失明、关节炎、特别是炎性关节炎、多发性硬化、再狭窄和牛皮癣的某些形式。本发明化合物可诱导或抑制细胞凋亡，一种对于正常的发育和体内平衡起着关键作用的生理性细胞死亡过程.细胞凋亡途径的改变与各种人类疾病的发病机理有关。本发明化合物作为细胞凋亡的调节剂可用于治疗各种涉及细胞凋亡异常的人类疾病，包括癌症(尤其是、但不限于滤泡淋巴瘤、具有p53突变的癌、激素依赖性的乳腺、前列腺和印巢肿瘤，和癌症前期的损害诸如家族性的腺瘤性息肉)、病毒感染(包括但不限于疱疹病毒、痘病毒、EB病毒、辛德毕斯病毒和腺病毒)、自体免疫疾病(包括但不限于全身性红斑狼疮、免疫介导的肾小球性肾炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、炎性肠疾病和自身免疫性糖尿病)、神经变性疾病(包括但不限于阿尔茨海默氏病、AIDS-有关的痴呆、帕金森氏病、肌萎缩性侧索硬化、视网膜色素变性、脊髓性肌萎缩和小脑变性)、AIDS、骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、与局部缺血性损伤有关的心肌梗塞、中风和再灌注损伤、心律失常、动脉粥样硬化、毒素诱导或酒精诱导的肝病、血液系统疾病(包括但不限于慢性贫血和再生障碍性贫血)、肌与骨骼系统的变性疾病(包括但不限于骨质疏松和关节炎)、阿司匹林敏感性鼻窦炎、嚢性纤维化、多发性硬化、肾病和癌症疼痛。本发明化合物还可用于与已知的抗癌剂和细胞毒性剂和疗法包括放射疗法相组合。本发明化合物可单独给药或与一种或多种其它治疗剂相组合，可能的联合治疗是固定組合的形式，或将本发明化合物和一种或多种其它治疗剂交错给药或彼此独立地给药，或将固定组合和一种或多种其它治疗剂联合给药。尤其是本发明化合物例如在肿瘤治疗的情况下可与化学疗法、放射治疗、免疫疗法、外科手术干预疗法或这些疗法的组合一起联合给药。长期的治疗也可在如上所述的其它治疗策略中作为辅助治疗。其它可能的治疗是在肿瘤消退后维持患者的状态的治疗，或甚至是化学预防性治疗，例如处于危险状态中的患者的治疗。用于可能的组合的治疗剂尤其是一种或多种抗增殖的、抑制细胞或细胞毒性化合物，例如化学治疗剂或选自下列的多种活性剂，包括但不限于多胺生物合成的抑制剂、蛋白激酶的抑制剂、尤其是丝氨^/苏氨酸蛋白激酶、诸如蛋白激酶C或酪氨酸蛋白激酶、诸如EGF受体酪氨酸激酶的抑制剂(例如PKI166)、VEGF受体受体酪氨酸激酶的抑制剂(例如PTK787)或PDGF受体酪氨酸激酶的抑制剂(例如STI571)、细胞因子、负生长调节剂诸如TGF-或IFN-B、芳香酶抑制剂例如来曲唑或阿那曲唑、SH2结构域与磷酸化的蛋白相互作用的抑制剂、抗雌激素、拓朴异构酶I抑制剂、诸如依立替康、拓朴异构酶II抑制剂、微管活化剂例如紫杉醇、海绵内酯20(discodermolide)或埃博霉素、烷基化剂、抗瘤的抗代谢物诸如吉西他滨或卡培他滨、铂化合物诸如卡铂或顺铂、抗血管生成的化合物、戈那瑞林激动剂、抗-雄激素、二膦酸类例如AREDIA或ZOMETA和曲妥单抗。通过编码、通用名或商品名标识的活性剂的结构可取自正版的标准概述"TheMerckIndex"或取自数据库例如PatentsInternational(例如IMSWorldPublications)。因此将其相应的内容引入作为参考。本发明化合物还可具有前药形式。可在体内转化以提供生物学活性剂的任何化合物均是在本发明的范围和精神实质内的前药。例如本发明化合物可形成羧酸酯基团。该羧酸酯通过酯化所公开的环结构上存在的羧酸官能团中的任何一个来方^f更地形成。前药的各种形式是本领域已知的。对于所述前药衍生物的例子可参见a)H.Bundgaard编写的DesignofProdrugs(Elsevier,1985)和K.Widder等人编写的MethodsinEnzymology，Vol.42，p.309-396(AcamedicPress,1985);b)Krosgaard-Larsen和H.Bundgaard编写的TextbookofDrugDesignandDevelopment,第5章，，，前药的设计和应用"H.Bundgaard,p.113-191(1991);c)H.Bundgaard,AdvancedDrugDeliveryReviews,8，1-38(1992);d)H.Bundgaard等人，JournalofPharmaceuticalSciences,77，285(1988);和e)N.Kakeya等人，ChemPharBull,32,692(1984)。应进一步理解，本发明化合物的溶剂化物(例如水合物)也在本发明的范围内。溶剂化的方法在本领域通常是已知的。制备方法
技术领域：
：本发明的另一个方面是合成上述化合物中的任何一种或其中间体的方法，尤其是如说明书中所述。衍生自埃博霉素A的-恶唑啉4-6的合成在所有情况下均基于氩基醇3作为中心中间体。如流程1所示，3通过用叠氮化物阴离子将埃博霉素A(la)中的环氧部分进行亲核性开环(以生成2)、然后将叠氮基在Staudinger条件(Ph3P/H20)下还原来得到。流程1:a)LiN3、NH4C1、DMF、85。C、24h、38%;b)Ph3P、THF/H2015/1、RT、88h、50%;c)参见正文和流程2、3。作为埃博霉素A和LiN3在DMF中在NH4C1的存在下(在该反应中所用的条件)反应的主要产物，叠氮基醇2(具有12-叠氮基)的结构通过NMR光谱确定；对于该结构确认的其它证据来自随后的胺3(其乙酸盐的形式)的X-射线晶体结构，该证据表明氨基连接到C-12上(不在C-13上)。因此，环氧化物开环反应的区域性化学过程与关于12，13-二-表-埃博霉素A与NaN3在EtOH中的反应[1所报道的相同。我们最初的将氨基醇3转化成所需的嘈、峻啉的方法包括将该中间体与适当的原酸酯在回流的EtOH中反应。因此，将3与可购买到的乙酸、丙酸、戊酸、3-苯基磺酰基-丙酸和苯甲酸的三乙基原酸酯或与原碳酸四乙酯反应以分别生成类似物4a、4b、4c、4g、5a和4e，收率为21%-74%(结构参见表l)。一般地讲，将3以乙酸盐的形式用于这些反应(其直接在色谱纯化的过程中得到)，但4a的合成除外，其中该反应用游离胺在催化量TFA的存在下进行。除了预期的喝唑啉4e之外，3的乙酸盐与碳酸四乙酯的反应还提供了少量(8%)的嚅唑烷酮4h，4e的曱缩醛水解产物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>对于所研究的大多数目标结构来说，所需的原酸酯是无法购买到的，它们可从相应的腈通过HCl-催化的亚氨基酯形成和随后的乙醇分解来制得。在4f的合成中采用了该方法，其从3以55。/。的收率得到，尽管起始的原酸酯仅能以不纯的形式得到。随后的实验表明埃博霉素A-衍生的哺唑啉事实上还可通过3(以乙酸盐的形式)与粗亚氨基酯盐酸盐在回流的DCE中在催化量乙醇的存在下直接反应来得到(流程2;结构参见表)。流程24d,5b-j,6d,e流程2:a)DCE、EtOH(催化量)、卯。C、2國24h、16-68%。利用该方法，芳基-嚅唑啉5b-j以及叔丁基-取代的衍生物4d和吡1^类似物6d和6e以中等至可接受的收率(16。/。-68%)得到而不需要事先的原酸酯的制备。然而，由于未查明的原因，在含吡啶的哺唑啉6的制备中，该方法通常被证明是效果较差的。这些类似物大量地通过以下方法得到用Et3N的EtOH溶液在室温下处理适当的亚氨基酯，将二乙醚加入到该混合物中，然后将沉淀形式直接与3的乙酸盐在回流DCE中反应。将该方法总结在关于2,5-取代的吡咬衍生物6f-j的流程3中。化合物6a-c按照类似的方法得到。流程323流程1:a)HC1(气体)，EtOH，0。C—RT，16h;b)Et3N，EtOH，RT,30min-64h;c)DCE，90。C，1-24h，21-57%(基于3)。在6f的制备过程中在步骤a)中使用HBr气体。应该注意到，从M-吡啶用饱和HC1的EtOH溶液得到的亚氨基酯没有产生清晰的NMR光i普(这可能是由于存在不同质子化的物种)，并且没有对用三乙胺处理这些亚氨基酯形成的产物(其可能是游离的亚氨基酯和原酸酯的混合物)进行表征。尽管存在与这些前体的纯度和确切性质有关的不确定性，但所需的哺唑啉可以可接受的收率和高纯度来得到。由于6-乙基_和6-异-丙基-烟腈是无法购买到的，所以这些化合物从6-氯-3-j^-吡啶通过Fe(II)-催化的与相应Grignard试剂的偶联来得到[2]。6-叔丁基-3-氰基-吡哽从3-^&-吡啶和新戊酸按照[31得到。11A.Regueiro画Ren，R.M.Borzilkri，X.Zheng，S.一H.Kim，J,A.Johnson，C.R.Fairchild，F.Y.F.Lee,B.H.Long,G.D.Vite，le汰2001，3，2693-2696。+。在另一个实验中，将3通过制备型HPLC纯化而不进行事先的FC(H20/CH3CN，不含TFA)。通过该方法得到游离胺形式的化合物，该化合物可用于制备哺唑啉4a。4a:将氨基醇3(游离碱；10.2mg，0.02mmol)溶于9.7mg(0.06mmol)原乙酸三乙酯和1.37mg(0.012mmol)TFA的200pLDCE溶液(取自275nL原乙酸三乙酯和34.5jiLTFA的5mlDCM原溶液)中并将混合物在90。C下加热3小时。然后用1mlACN稀释并直接通过制备型HPLC纯化(5%—100%ACN，100分钟)得到6.1mg物质，将该物质通过FC在5%MeOH/DCM—10%MeOH/DCM中再次纯化。该方法得到2.45mg目标化合物4a(23%)+0.35mg(3。/。)水解的物质(N-乙酰基-3;553.3[胁Hj+)。^顺W，Af取Z)M50母S=7.36(s，1H，H-19),6.51(s,1H，H-17),5.30(d，1H，H-15),5.12(d，1H，3画OH)，4.28(m，2H，H-3+7画OH)，4.15(m，1H,H-13)，3.54(m，1H，H-12)，3.47(m，1H，H-7)，3.17(m，1H，H-6)，2.65(s，3H,H-21),2.41(dd，1H，H-2)，2.29(dd，1H，H-2)，2.09(s，3H，H-27)，2.08(m，1H)，1.90(m，2H)，1.85(s，3H，CH,恶唑啉)，1.65(m，1H)，1.55(m，1H)，1.35(m，2H)，1.23(s，3H),1.15(m,1H)，1.05(m，1H)，0.94(d，3H)，0.88(s，3H)，0.84(d，3H)。j^S7-My,535,Af+H+。4b:将氨基醇3(乙酸盐；51mg，0.1mmol)和40.2mg(0.3mmol)原丙酸三乙酯溶于600^L干燥DCE并将混合物在90。C下加热2小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC以得到33.6mg标题化合物(61%)。溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。W-7V織,Af取"MSO母5=7.36(s，1H，H-19),6.51(s，1H，H画17)，5.27(d，1H,H-15)，5.11(d,1H，3-OH)，4.29(m，2H，H-13+7-OH),4.17(m，1H，H-3)，3.54(m，1H，H-12),3.49(m，1H，H画7)，3.19(m，1H，H-6)，2.65(s，3H，H-21),2.42(dd，1H，H-2)，2.29(dd，1H，H-2)，2.18(m，2H,Et画梦恶唑啉)，2.08(s，3H，H-27)，1.88(d，1H，H-14)，1.83(d，1H，H-14),1.68(m，1H，H画ll)，1.55(m，1H)，1.35(m，2H，H画9)，1.23(s，3H，H22或H-23，+m，1H)，1.15(m，1H)，1.14(m，1H,H國ll)，1.05(t，3H，Et画喵峻啉，+m，1H)，0.94(d，3H，H-24),0.88(s，3H,H陽22或H-23),0.84(d,3H,H-25)。EW-MS:549[Af+H十；571.3f+Na+。〃iMS:m/z571.2814[AT+Na]十，IC29H44N206S+Na的计算值571.2818。4c:向氨基醇3(乙酸盐；51mg，0.1mmol)的600jiLDCE溶液中加入48.6mg(0.3mmol)原戊酸三甲酯并将混合物在90°C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3。/。MeOH/DCM中进行FC以得到36.3mg(63%)标题化合物。将该物质溶于ACN/7K2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。7//-層及,Af沃，Z)MSO画^:S=7.36(s，1H，H-19),6.50(s，1H，H-17),5.26(d，1H，H-15)，5.12(d，1H，3-OH)，4.29(m，2H,H-13+7-OH)，4.16(m，1H，H-3)，3.55(m，1H，H-12),3.48(m，1H，H-7)，3.19(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H-21)，2.43(dd，1H，H-2)，2.30(dd，1H，H-2)，2.17(t，2H，Bu画嗜唑啉)，2.08(s,3H,H-27),1.87(dd，1H，H-14)，1.81(dd，1H，H-14)，1.65(m，1H)，271.50(m，3H)，1.40一1.20(m，5H),1.23(s，3H，H22或H國23，+m,1H)，1.15(m，1H)，1.05(m，1H，)，1.05(m,1H)，0.93(d,3H，H画24)，0.88(s,3H，H画22或H画23)，0.86(t，3H，Bu-喷唑淋)，0.83(d，3H，H画25)。甜-緣577.4[胁H+;599.5[胁Na]+。m/z577.3311[MfH]+，+。4e和4h:向氨基醇3(乙酸盐；51mg,0.1mmol)的600pLDCE溶液中加入40.8mg(0.3mmol)原碳酸四甲酯并将混合物在卯。C下加热3小时。28冷却至室温后将反应混合物直接在40/。MeOH/DCM中进行FC以得到11.5mg4e(21%)和4.3mg(8%)4h。将这些物质溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬^^的白色粉末状产物。4e:'好-7VM/f5卯M^，DMSO^^,5=7.36(s，1H，H画19)，6.51(s，1H，H-17)，5.26(d，1H，H-15)，5.12(d，1H，3画OH)，4.50(t，1H，H曙13)，4.28(d，1H，7-OH)，4.13(m，1H，H-3)，3.47(m，1H，H-7)，3.41(m，1H，H-12)，3.16(m，1H，H-6)，2.65(s，3H，H-21)，2.44(dd，1H，H-2),2.30(dd，1H，H-2),2.10(s，3H，H-27)，1.97(dd，2H，H14),1.55(m，2H)，1.50(m，3H)，1.40(m，1H)，1.32(m，2H)，1.25(s，3H，H22或H-23,+m，1H)，1.15(m，1H),1.05(m，1H，)，0.95(d，3H，H-24)，0.88(s，3H，H-22或H-23)，0.85(d，3H，H-25)。551.3降H+;573.3[M+Na]+。/2MS:/n/z573.2610,Na]+，[C27HUoN207S+Na的计算值573.2613。4h:'好-7V雄,M^z，Z)MW母S=7.63(s，1H,NH)，7.37(s，1H，H画19)，6.51(s，1H，H-17)，5.29(dd，1H，H-15)，5.12(d，1H,3隱OH)，4.37(q，1H，H-13),4.31(d，1H，7-OH)，4.09(t(br)，1H,H-3)，3.75(s，3H，OCH3)，3.54(m，1H,H-13),3.49(m，1H,H-7)，3.16(m，1H,H画6)，2.65(s，3H，H-21)，2.42(dd，1H，H-2)，2.29(dd,1H，H誦2)，2.09(s，3H,H画27)，1.94(m，2H，H-14)，1,62(m，1H)，1.53(m，1H)，1.35(m，3H)，1.24(s，3H，H22或H-23,+m，1H)，1.15(m，1H)，1.05(m，1H，)，0.94(d，3H，H-24),0.88(s，3H，H-22或H-23),0.84(d，3H，H-25)。537.3,H+;559.3,Na+。i/组S:一559.2454[Af+Na]+，CrzH4。N207S+Nal的计算值559.2463。4f:A.原酸酯的制备:将23.4g千基氰(0.2摩尔)和10.1g干燥EtOH(0.22摩尔)的混合物用HC1气体在5。C下处理至饱和。然后将混合物在相同的温度下放置18小时并加入40mlDEE。将形成的沉淀物通过过滤收集，用DEE洗涤并干燥得到31.3g(79%)白色固体状的亚氨基酯盐酸盐。将该物质溶于50mlEtOH并将混合物在室温下》欠置2天。然后加入DEE(25ml)并通过过滤除去NH4C1。将滤液在室温下真空蒸发得到含有苯乙酰胺沉淀物的黄色油。通过过滤除去固体物质，将滤液进行Kugelrohr蒸馏以得到23.9g(64o/。)无色油状的原苯乙酸三乙西旨(进行3次，bp.卯。C/0.1毫巴)。根据NMR，该物质仍然是不纯的，但不经进一步纯化即可用于下一步骤。B.哺唑啉的形成向氨基醇3(乙酸盐；51mg，0.1mmol)的600nLDCE溶液中加入71.4mg(0.3mmol)上述粗原酸酯并将混合物在90°C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进行FC以得到48mg不纯的产物。将该物质在2%MeOH/DCM中再次进行色镨分离得到33.6mg(55%)标题化合物4f。将该物质溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。^Z-7V備，Af取"MW母5=7.34(s，1H，H曙19)，7.32-7.20(m，5H)，6.47(s，1H,H-17)，5.19(d，1H，H-15),5,12(d，1H,3画OH),4.34(t,1H，H-13),4.30(d，1H，7-OH)，4.15(m，1H，H-3)，3.59(ra，1H,H-12),3.56(d，2H,Bn-哺唑啉)，3.48(m，1H，H-7)，3.16(m，1H,H國6)，2.64(s,3H，H-21),2.41(dd，1H，H-2)，2.28(dd，1H，H-2)，2.03(s,3H，H-27),1.87(dd，1H，H-14),1.78(dd,1H，H-14)，1.68(m，1H)，1.50(m，1H)，1.33(m，2H)，1.23(s，3H，H22或H-23,+m，1H)，1.15(m，1H)，1.05(m，1H)，0.93(d，3H，H-24)，0.86(s，3H，H-22或H-23),0.83(d，3H，H-25)。，-雄.610.9.3[胁H]+。4g:向#^醇3(乙酸盐；51mg，0.1mmol)的600jliLDCE溶液中加入60mg(0.3mmol)三乙基-3-苯基磺酰基-原丙酸酯的600jiLDCE溶液并将混合物在80。C下加热1小时，然后在卯。C下加热3小时。将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC以得到34.5mg(50%)标题化合物4g。溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。f5卯M好z，"MSO-fl^:5=7"0(d，2H)，7.76(m，1H)，7.65(m，2H)，7.32(s，m，H-19),6.50(s，1H,H画17)，5.23(d，1H，H-15),5.10(d,1H，3-OH)4.27(d，1H,7-OH)，4.23(t，1H，H陽13)，4.14(m，1H，H-3)，3.57(t，2H，30-CH2SOr)，3.47(m，2H，H-12+H-7)，3.18(m,1H，H-6)，2.65(s,3H，H-21),2.41(dd,1H，H-2)，2.29(dd，1H，H画2)，2.07(s，3H，H-27),1.79(m，2H,H-14),1.60(m，1H，H-ll)，1.52(m，1H，H-8),1.36(m,2H，H-9)，1.23(s,3H，H22或H隱23，+m(1.20—1.00)，1H，H-ll)，0.92(d，3H，H國24)，0.87(s，3H，H-22或H-23),0.84(d，3H，H-25)。E57-M5V688.8[7/+H+。711.2750[7l/+Na+，C35H48N208S3+Naj的计算值711.2750。5a:将氨基醇3(乙酸盐；51mg，0.100mmol)溶于68pL(0.300mmol)原苯曱酸三乙酯的600pL干燥DCE溶液并将混合物在90。C下加热2小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进行FC以得到".0mg(74%)标题化合物5a。溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。'/Z-yVAf/「5^M/7z，DMSO-flU:S=7.85(d,2H)，7.54(m，1H),7.47(m，2H),7.36(s，1H，H画19)，6.56(s，1H，H画17)，5.43(dd，1H，H-15),5.17(d，1H，3隱OH)，4.57(t,1H,H-13)，4.33(d，1H，7画OH)，4.20(m，1H，H-3)，3.83(m，1H，H-12),3.52(m，1H,H-7)，3.21(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H陽21)，2.46(dd，1H,H-2)，2.33(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27),1.99(m，2H，H-14)，1.80(m，1H，H-ll)，1.53(m，1H，H-8)，1.38(m,3H)，1.25(s，3H，H22或H-23),1.22(m，1H)，0.95(d，3H，H-24),0.89(s，3H，H-22或H23),0.84(d,3H，H陽25)。￡^7-M9,597.3[MfH+。iWM5:/w/j;619.2812[Af+Na]+,[C33H44N206S+Nal的计算值619.2818。5b:A.亚氮基酯盐酸盐的制备将1.0g(7.5mmol)4-氟苄腈的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和，然后将溶液在室温下放置过夜。然后蒸发至干并将残余物真空干燥得到1.60g粗亚氮基酯盐酸盐。《//-7VM/f。^iV/^z，"MSO-rfA.5=11.90(s(br)，IH)，8.23(m，2H)7.50(t，2H)，4.60(q,2H)，1.48(t，3H))。B.嚅唑啉的形成将30.5mg(0.150mmol)上述亚氨基酯盐酸盐与20pLEtOH—起加入到^J^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300nLDCE溶液中并将混合物在卯。C下加热5小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC以得到19.1mg(62%)纯标题化合物5b。'iZ-TVAfW「5^Att/z，DMSO-^):S=7.91(m,2H)，7.36(s，1H，H-19),7.30(t，2H)，6.56(s，1H，H-17)，5.44(dd，1H,H-15),5，16(d，1H，3-OH)，4.58(m，1H，H画13)，4.29(d，1H，7-OH)，4.20(m，1H，H-3)，3.83(m，1H，H-12),3.51(m，1H，H-7)，3.21(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H-21),2.46(dd，1H，H-2)，2.33(dd，1H，H-2),2.11(s，3H，H陽27)，1.99(m，2H，H-14),1.68(m，1H)，1.52(m，1H)，1.38(m，3H)，1.25(s，3H，H画22或H-23+m，1H)，1.11(m，1H)，0.95(d,3H，H國24)，0.89(s，3H，H-22或H画23)，0.84(d，3H，H-25)。614.9,H+。好/2MS:m/z637.2724[Af+Na+，[C33H43FN206S+Na的计算值637.2728。5c:向氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300nLDCE溶液中加入33.0mg(0.150mmol)对-氯苯亚氨酸乙酯盐酸盐和20pLEtOH并将混合物在90。C下加热5小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC以得到10.6mg(34%)标题化合物5c。77/-7VMR(5WAf好z，Z>MS*0-￡^:5=7.85(d，2H)，7.55(d，2H)，7.36(s，1H，H-19),6.56(s，1H，H-17),5.43(t(br)，1H，H-15),5.16(d,1H，3國OH)，4.59(m，1H，H-13),4.31(d，1H，7画OH)，4.19(m，1H,H-3),3.85(m,1H，H-12),3.50(m，1H，H-7)，3.20(m，1H，H國6)，2.64(s，3H，H-21)，2.45(dd，1H，H-2)，2.33(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H画27)，1.99(m，2H，H-14)，1.80(m，1H)，1.54(m，1H)，1.40(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.13(m，1H)，0.95(d,3H，H-24),0.89(s，3H，H-22或H國23)，0.84(d，3H，H画25)。630.8，100%,632.8,45%[M+H]+。好lMy(单一同位素的)附々653.2424[AT+Na+，[C33EU3C1N206S+Nal的计算值637.2728。325d:A.亚氛基酯盐酸盐的制备将1.0g(5.5mmol)4-溴千腈在8mlEtOH和10mlDEE的混合物中的溶液用HC1气体在0°C下饱和。将混合物在室温下放置过夜，然后蒸发溶剂得到1.40g白色固体状的亚JUJ旨盐酸盐。(J^/-M5:228，100%,230，80%[Af+H]+。'好-7VM/C卯M好z，Z)MSO母5=8.05(d，2H),7.85(d,2H),4.60(q，2H),1.45(t，3H))。B.哺哇淋的形成向氨基醇3(乙酸盐；20.4mg，0.04mmol)的300jiLDCE的溶液中加入32.0mg(0.150mmol)KH-2495和20pLEtOH并将混合物在卯。C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进4亍FC以得到8.1mg稍孩史不纯的产物，将该产物通过制备型HPLC纯化(30%—100%ACN，100分钟)得到6.33mg(24%)标题化合物5d。,好-A^f/ff5^Af/^,Z)MSO-i/6):5=7.78(d，2H)，7.69(d，2H)，7.36(s，1H,H-19)，6.56(s，1H，H画17)，5.43(m，1H，H-15)，5.17(s(br)，1H，3-OH)，4.58(m，1H，H-13)，4.33(d，1H，7画OH)，4.19(d(br)，1H,H画3)，3.83(m，1H，H-12)，3.50(m,1H，H画7),3.20(m,1H，H-6)，2.64(s,3H，H-21),2.45(dd，1H,H-2)，2.32(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27),1.99(m，2H，H-14)，1.78(m，1H)，1.51(m，1H)，1.38(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.10(m，1H)，0.94(d，3H，H-24),0.89(s，3H，H22或H-23),0.84(d，3H，H-25)。￡^/-My:674.9，100%，676.9，95%A/+H+.A72MS(单一同位素的)m/z675.2104[Af+Na]+，[<:3311438圹]\2068+3]的计算值675.2104。5e:A.亚氨基酯盐酸盐的制备将5,0g(42.7mmol)对甲苯基氰的40mlEtOH/50mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和。然后将该溶液在室温下放置过夜，蒸除溶剂和将残余物真空干燥得到8.81g白色固体状的并且亚^JJ旨盐酸盐。《好-7VM/^卯M77z，ZMfSO-^):S=8.04(d，2H)，7.44(d,2H)，4.62(q，2H)，2.40(s，3H),1.47(t,3H》。B.喝峻啉的形成将30.0mg(0.150mmol)上述亚氨基酯盐酸盐与20pLEtOH—起加入到^J^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300pLDCE溶液中并将混合物在卯。C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在2%MeOH/DCM中进行FC以得到12.4mg(41%)标题化合物5e。将该物质溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。'/f-層及，MHz，S=7.74(d，2H),7.36(s，1H，H-19),7.28(d，2H)，6.56(s，1H，H-17)，5.41(dd(br)，1H，H画15)，5.16(d，1H,3-OH)，4.54(m，1H，H-13)，4.32(d，1H，7-OH)，4.21(m(br)，1H，H-3)，3.81(m，1H，H-12)，3.52(m，1H，H画7)，3.20(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H画21)，2.46(dd，1H，H國2)，2.32(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H誦27)，1.98(m，2H，H画14)，1.70(m,1H)，1.53(m，1H)，1.37(m，3H)，1.24(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.12(m，1H)，0.95(d，3H，H-24),0.89(s，3H,H-22或H-23),0.84(d，3H，H-25)。，-感.611.2，100%[Af+H+;633.2，23%[Af+Na]十。/HMS:m/z611.3155[MfH]+，[C34H46N206S+H的计算值611.3161。5f:A.亚氨基酯盐酸盐的制备将1.0g(5.85mmol)三氟-对曱苯基氰的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和。然后将该溶液在室温下放置过夜，蒸除溶剂并将残余物真空干燥得到1.44g亚M酯。('〃-iVAttW卯M^:,Z)MSO-rf^..S=8.29(d，2H)，8.04(d，2H)，4.65(q，2H)，1.48(t，3H))。B."恶唑啉的形成将38.0mg(0.15mmol)上迷亚氨基酯盐酸盐与20jiLEtOH—起加入到#^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300pLDCE溶液中并将混合物在90。C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进行FC以得到16.8mg不纯的物质。在3%MeOH/DCM中再次进行色谱分离得到5.6mg纯标题化合物。将不纯的级分合并(11.2mg)然后通过制备型HPLC纯化(30%—100%ACN,100分钟)得到另外8.55mg纯的冷冻干燥的5f。总收率14.15mg(43%)。(5卯M好z,"MSO-^),S=8.08(d，2H)，7.88(d，2H)，7.36(s，1H，H-19),6.59(s，1H，H-17),5.47(t(br)，1H，H-15)，5.17(d，1H，3-OH)，4.66(m，1H，H-13),4.31(d，1H，7-OH)，4.21(m，1H，H-3)，3.92(m，1H，H12),3.53(m，1H，H-7),3.21(m,1H,H-6),2.67(s,3H,H画21)，2.48(dd,1H，H-2)，2.36(dd，1H，H-2)，2.13(s，3H，H-27),2.04(m，2H，H-14),1.70(m，1H)，1.53(m，1H)，1.43(m，3H)，1.24(s，3H，H-22或H-23)，1.15(m，1H)，0.95(d，3H，H-24+m，1H)，0.92(s，3H，H-22或H-23),0,86(d，3H，H-25)。E57-MSV665.1[Af+H+。/f/MS:m/z687.269M+Na+，C34H43F3N:t06S+Na的计算值687.2689。5g:A.亚氨基酯盐酸盐的制备将1.0g(8.4mmol)4-羟基节腈在8mlEtOH和10mlDEE的混合物中的溶液用HC1气体在0°C下饱和。在室温下放置过夜后，加入50mlDEE并通过过滤分离出粗亚^JJ旨盐酸盐(1.72g;W-層/「M%，Z)MyO-脉5=8.05(d，2H)，7.00(d，2H)，4.56(q，2H)，1.45(t，3H))。B.^恶唑啉的形成向氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300^LDCE溶液中加入33.0mg(0.150mmol)上述亚氨基酯盐酸盐和20pLEtOH并将混合物在卯。C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在5%MeOH/DCM中进行FC以得到12.54mg(41%)标题化合物5g。'iZ-7VM/(5WMi/z，Z)M50-flTd).'5=10.08(s(br)，1H,Ar画OH);7.70(d，2H)，7.38(s，1H，H-19),6.83(d，2H)，6.57(s，1H，H-17)，5.43(d(br)，1H，H-15)，5.18(d，1H，3-OH),4.52(t(br)，1H,H-13)，4.33(d，1H，7-OH)，4.24(m，1H，H-3)，3.78(m，1H,H-12),3.54(m，1H，H誦7),3.23(m,1H，H-6)，2.67(s，3H，H画21)，2.50(dd，1H，H-2)，2.34(dd,1H,H-2),2.13(s，3H，H-27),1.99(m，2H，H-14),1.80(m，1H),1.56(m，1H)，1.39(m,3H),1.27(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.15(m，1H)，0.96(d，3H，H画24)，0.92(s，3H，H-22或H-23),0.87(d，3H，H國25)。￡^/-M5,613.2[MfH]+。iWMS:/n/z613.2947[M+H+,[C33H44N206S+H1的计算值613.2948。5h:A.亚M酯盐酸盐的制备将1.0g(7.5mmol)4-甲氧基千腈的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0。C下处理至饱和。然后将该溶液35在室温下放置过夜，蒸除溶剂并将残余物真空干燥得到1.65g粗亚氨基酯盐酸盐。(^y-A^f/Mi/z，DMSO-fl^..S=8.15(d，2H)，7.17(d，2H)，4.58(q，2H)，3.90(s，3H)，1.45(t，3H))。B.哺、唑啉的形成向氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300pLDCE溶液中加入32.0mg(0.150mmol)上述亚氨基酯盐酸盐和20pLEtOH并将混合物在90°C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在5%MeOH/DCM中进4亍FC以得到16.5mg稍樣吏不纯的物质，将其进一步通过制备型HPLC纯化(30%~>100%ACN，100分钟)得到11.85mg(38%)纯标题化合物5h。'W-7VM/「5WM好z，Z)M50-^g:S=7.78(d，2H)，7.36(s，1H，H-19)，7.01(d，2H)，6.56(s，1H，H-17)，5.43(d(br)，1H，H-15)，5.16(d，1H，3-OH)，4.52(t(br)，1H，H-13)，4.30(d，1H，7-OH)，4.21(m，1H，H-3)，3.80(s，3H)，3.78(m，1H,H-12),3.51(m,1H，H-7),3.21(m，1H，H-6)，2.67(s，3H,H-21),2.45(dd，1H，H-2)，2.33(dd，1H,H-2)，2.11(s,3H,H誦27)，1.97(m，2H，H-14),1.70(m，1H),1.55(m，1H),1.40(m,3H)，1.24(s,3H，H-22或H-23+m，1H)，1.15(m,1H)，0.95(d，3H，H-24)，0.89(s，3H，H-22或H画23)，0.84(d，3H,H曙25)。^S7画MS,627.3[M+HI+。仔/MS:/m/z627.3104[Af+Na广，[C34H46N207S+Na的计算值627.3102。5i:A.亚氨基西旨盐酸盐的帝备将5.0g(36.3mmo1)3-氯-千腈的40mlEtOH/50mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和。然后将该溶液在室温下放置过夜，蒸除溶剂并将残余物真空干燥得到7.70g粗亚氨基酯盐酸盐。(^/-TVM/fW卯A^，DMSO-rf":5=8.18(d，2H)，8.05(dd，IH)，7.86(t，IH)，4.60(q，2H),1.49(t，3H))。B.伊恶唑淋的形成向氨基醇3(乙酸盐；25.5mg,0,050mmol)的300fiLDCE溶液中加入33.0mg(0.150mmol)上述亚氨基酯盐酸盐和20jiLEtOH并将混合物在90。C下加热2小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进行FC以得到18.5mg(59%)标题化合物5i。将该物质溶于ACN/水2/1并冷冻干燥得到蓬松的白色粉末状产物。'/Z-7V臓，A/仏,"MSO母S=7.82(m，2H)，7.61(dd，1H)，7.51(t,1H)，7.36(s，1H，H-19)，6.57(s，1H，H-17),5.45(t，1H，H-15),5.15(d，1H，3-OH)，4.60(m，1H，H隱13)，4.28(d，1H，7-OH)，4.19(m，1H，H-3)，3.86(m，1H，H-12),3.51(m，1H，H-7)，3.20(m，1H，H-6)，2.65(s，3H，H陽21)，2.45(dd，1H，H國2)，2.34(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27)，2.00(m，2H，H-14),1.78(m，1H)，1.53(m，1H)，1.38(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H23+m，1H)，1.10(m，1H)，0.96(d，3H,H-24)，0.90(s，3H，H-22或H-23)，0.84(d，3H，H隱25)。E57-感'631.2，80%;633.2，30%[Af+H十;653.1，100%;655.1,42%[3/+Na+。好/MS(单一同位素的)653.2423[Af+Na广，[C33H43C1N206S+Na]的计算值653.2428。5j:A.亚氨基酯盐酸盐的制备将5g(42.7mmol)间甲苯基氰的40mlEtOH/50mlDEE溶液用HC1气体在0。C下处理至饱和。然后将该溶液在室温下放置过夜，蒸除溶剂并将残余物真空干燥得到8.60g粗亚^JJ旨盐酸盐。('〃-A^f/MHz,Z)MS0匿^六5=7.92(m，2H)，7.60(d，1H)，7.50(t,1H)，4.60(q，2H)，2.37(s，3H)，1.47(t，3H))。B.^恶唑啉的形成向氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300nLDCE溶液中加入30.0mg(0.15mmol)上述亚氨基酯盐酸盐和20nLEtOH并将混合物在卯。C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进行FC以得到23.2mg稍樣吏不纯的产物，将该产物通过FC在2%MeOH/DCM中重新纯化得到20.8mg(68%)标题化合物5j。'H-7VMif卩5卯M//z，"MSO-rf^:S=7.68(s，1H),7.66(t，1H),7,34(m，3H)，6.57(s,1H，H-17),5.43(dd，1H，H-15),5.16(d，1H，3國OH)，4.55(t(br),1H，H-13),4.31(d，1H,7-OH)，4.20(m，1H，H-3)，3.82(m，1H，H-12),3.51(m，1H，H-7),3.21(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H-21),2.45(dd，1H，H-2)，2.35(s，3H)，2.32(m，1H，H國2)，2.11(s，3H，H-27),1.99(m，2H，H-14)，1.70(m，1H)，371.55(m，1H)，1.40(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.15(m，1H)，0.95(d，3H，H曙24)，0.89(s，3H，H-22或H-23)，0.86(d，3H，H画25)。EW層MS:610.9Af+H+。好/JMS:/n/z633.2978[7W+Na+，[C34H46N206S+Na的计算值633.2974。5k:A.亚氨基酯盐酸盐的制备将1.0g(7.3mmol)2-氯节腈的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和。然后将该溶液在室温下放置过夜，蒸除溶剂并将残余物真空干燥得到0.089g不纯的亚JL^酯盐酸盐。未对该物质进行纯化，将其直接用于下一步骤。《好-iVM;W卯Af仔Z，"A/^O-fU:S=7.78(d，IH)，7.71(d，2H)，7.56(m，IH)，4.63(q，2H)，1.44(t，3H);在光语的芳族区域的其它峰)。B.哺峻淋的形成将33.0mg(0.15mmol)上述亚氛基酯盐酸盐与20jiLEtOH—起加入到#^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300jiLDCE溶液中并将混合物在90°C下加热21小时。冷却至室温后将反应混合物直接在2%MeOH/DCM中进行FC以得到20,97mg不纯的物质，将该物质进一步通过制备型HPLC纯化(30%—100%ACN，100分钟)得到6.08mg(19%)纯标题化合物5k。'H曙7VM/「50。Af/fz，PMSO-rf".'S=7.68(d,1H)，7.55(m，1H)，7.43(t,1H)，7.36(s，1H，H-19),6.53(s，1H，H-17),5.39(d，1H，H-15),5.17(d,1H，3-OH)4.62(t，1H，H画13)，4.32(d，1H，7-OH)，4.15(m，1H，H-3)，3.88(m，1H，H-12)3.52(m，1H，H-7)，3.21(m，1H，H-6)，2.65(s，3H，H-21),2.45(dd，1H,H-2)，2.34(dd，1H,H-2)，2.11(s，3H，H-27),2.01(m，2H，H-14)，1.72(t(br),1H),1.50(m,2H)，1.40(m，2H)，1.26(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.13(m，1H),0.96(d,3H，H-24),0.89(s，3H，H曙22或H曙23)，0.87(d，3H，H-25)。甜-皿.631，100%;633,50%[Af+H十；653，75%;655，33%,Na+。幵/MS(单一同位素的)wi/z653.2430[Af+Na+，[<:331143<:1]\2068+3的计算值653.2428。200780046275.7说明书第35/50页51:A.亚氩基酯盐酸盐的制备将1.2g(11.0mmol)塞汾-3-甲腈的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和。然后将该溶液在室温下放置过夜，蒸发至干并将残余物真空干燥得到2.01g粗亚J^酯盐酸盐。('iZ-A^//^卯M^z，Z)MyO-<^,.5=8.92(m，IH)，7.88(d，IH)，7.82(dd，IH)，4.57(q，2H)，1.46(t，3H))。B.5恶唑啉的形成将29.0mg(0.15mmol)上述亚氨基酯盐酸盐与20pLEtOH—起加入到^J^醇3(乙酸盐；25.5mg,0.05mmol)的300jiLDCE溶液中并将混合物在90°C下加热4小时冷却至室温后将反应混合物直接在2%MeOH/DCM中进行FC以得到17.7mg(59%)纯标题化合物51。'/f-7VAf/「5tf0M^/z，S=8.04(s，1H)，7.62(m，1H)，7.42(d，1H)，7.35(s，1H,H-19),6.55(s，1H，H-17),5.41(dd，1H，H-15)，5.15(d，1H，3-OH)，4.51(t，1H，H-13),4.30(d，1H，7國OH)，4.21(m，1H，H-3),3.78(m，1H，H-12)，3.51(m，1H，H-7)，3.21(m，1H，H-6)，2.65(s，3H，H-21),2.46(dd，1H，H-2)，2.32(dd，1H，H-2)，2.10(s，3H，H-27)，1.97(m，2H，H-14)，1.70(m，1H)，1.52(m，1H)，1.40(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H23+m，1H)，1.12(m，1H)，0.95(d，3H，H-24)，0.89(s，3H，H-22或H-23),0.85(d，3H，H-25)。J^S/-MS:602.8[M+H+。好i^MS:m/z625.2381[M+Na]+，[C33H42N206S2+Na的计算值625.2382。6a:将5g4-^J^-吡啶(48mmol)的40mlEtOH/50mlDEE溶液用HC1气体在0。C下饱和(形成悬浮液)。将混合物在室温下放置过夜后，通过过滤收集沉淀物(9.34g)。将2g该物质(10mmol，基于亚氨基酯单盐酸盐的分子量)重新i^于20mlEtOH并用Et3N(1ml)处理18小时。然后将混合物用DEE(60ml)稀释并通过过滤除去不溶物，然后用DEE洗涤。将合并的滤液蒸发至干得到1.4g固体，根据NMR，该固体含有约60%所需的原酸酯。该物质不经进一步纯化即可用于下一步骤。哺唑啉的形成向#^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300nLDCE溶液中加入28.0mg不纯的原酸酯(0.15mmol，基于原酸酯的分子量)和20pLEtOH并将混合物在90°C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC以得到10.5mg(35%)标题化合物6a。,i7-A7kttf5卵MWz，S=8.72(d，2H)，7.77(d,2H),7.36(s，1H，H國19)，6.57(s，1H,H-17)，5.54(m，1H，H-15),5.16(d，1H，3画OH)，4.64(m，1H，H画13)，4.29(d，1H，7-OH)，4.19(m，1H，H-3)，3.90(m，1H，H-12),3.52(m，1H，H画7)，3.20(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H-21),2.46(dd，1H，H-2)，2.34(dd，1H,H-2)，2.11(s，3H，H-27)，2.02(m，2H,H-14),1.81(m,1H)，1.53(m，1H)，1.40(m，3H)，1.26(s，3H,H-22或H-23+m，1H)，1.13(m，1H)，0.95(d，3H,H-24),0.90(s，3H，H-22或H國23)，0.84(d，3H，H國25)。甜-感.597.8[M+H+。7WMS:w/z620.2765降Na+,C34H46N206S+Na的计算值620.2770。6b:将5g3-氰基-吡咬(48mmol)的40mlEtOH/50mlDEE溶液用HC1气体在0。C下饱和(形成悬浮液)。将混合物在室温下放置过夜后，通过过滤收集沉淀物(10.37g)。将2g该物质(10mmol，基于亚氨基酯单盐酸盐的分子量)重新溶于20mlEtOH并用Et3N(0.7ml，5mmol)处理64小时。然后将混合物用DEE(60ml)稀释并通过过滤除去不溶物，用DEE洗涤。将合并的滤液蒸发至干得到1.18g固体，该固体不经进一步纯化即可用于下一步骤。嚅唑啉的形成向#^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300nLDCE溶液中加入以上反应步骤得到的45.0mg物质(0.150mmol，基于原酸酯的分子量)和20nLEtOH并将混合物在90。C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC以得到13.4mg不纯的物质，将该物质进一步通过制备型HPLC纯化(30%—100%ACN，100分钟)得到9.93mg(33%)纯标题化合物6b。「5卯Af好z，"MSO-W;5=9.01(d，1H)，8.71(d，1H)，8.19(dt，1H)，7.52(dd，1H)，736(s，1H，H-19)，6.57(s，1H，H-17)，5.44(t(br)，1H，H-15),5.15(d，1H，3-OH)，4.61(m,1H，H-13),4.29(d，1H，7-OH),4.20(m,1H，H-3)，3.87(m，1H，H曙12)，3.52(m，1H，H國7)，3.21(m，1H,H画6)，2.64(s，3H,H-21)，2.46(dd，1H，H-2)，2.33(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27)，2.01(m，2H，H14),1.82(m，1H)，1.55(m，1H)，1.42(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H画23+m，1H)，1.17(m，1H)，0.95(d，3H，H-24),0.89(s，3H，H-22或H誦23)，0.86(d，3H，H-25)。598.2[MfH广。/7iM5:/w/z620.2766[Af+Na]+，[C34H46N206S+Na的计算值620.2770。6c:将5.5g(53mmol)2-氰基吡啶和2.67g(58mmol)EtOH的混合物用HC1气体处理，导致反应混合物几乎立即固化。加入12mlEtOH后继续用HC1气体处理至饱和，然后将悬浮液在5。C下放置18小时。然后通过过滤分离出沉淀物；该物质被证实为多种化合物的混合物，其中所需的亚氨基酯仅仅是少量的成分(基于乙酯基团的信号)。将3g该混合物的10mlEtOH悬浮液用0.2mlEt3N在室温下处理18小时。然后将混合物过滤并将滤液蒸发至干。嗜唑啉的形成将33.8mg所得到的残余物与lOpLEtOH—起加入到4J^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300jiLDCE溶液中并将混合物在卯。C下加热3小时。此刻加入以上步骤得到的物质(50mg)和50nLEtOH并在卯。C下继续加热21小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM—5%MeOH/DCM中进行FC得到2.26mg约7/1的6c和相应的水解产物的混合物(分子质量+18)。将该物质通过制备型HPLC纯化(30%—100%ACN,100分钟)得到1.02mg标题化合物6c。￡^/-MS:598.M+H+。在分析HPLC(30。/。—100%ACN，100分钟；Rt=6.94分钟)上的单一峰。6d:A.亚M酯盐酸盐的制备将1.0g(11.0mmol)2-氯-4-^&吡啶的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0。C下处理至饱和并将形成的悬浮液在室温下搅拌过夜。然后将混合物蒸发至干并将残余物真空干燥得41到1.39g粗亚氨基酯盐酸盐，其不经进一步纯化即可用于随后的步骤。^//-iVA/W(￥卯MHz,5=8.69(d，1H)，8.13(s，1H)，7.97(d，1H)，4.55(q，2H)，1.45(t，3H)。B.嶠峻啉的形成将33.0mg(0.15mmol)上述亚氨基酯盐酸盐与20^LEtOH—^口入到^J^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300pLDCE溶液中并将混合物在卯。C下加热8小时。冷却至室温后将反应混合物直接在3%MeOH/DCM中进行FC以得到15.91mg(50%)标题化合物6d。^-廢i，Att/z，層SO母S=8.57(d，IH)，7.82(s(br)，1H)，7.81(s(br)，1H)，7.38(s,1H，H-19),6.60(s，1H，H-17),5.48(m，1H，H國15)，5.18(d(br)，1H，3-OH)，4.69(m，1H，H-13),4.31(d(br)，1H，7-OH)，4.19(m，1H，H-3),3.95(m，1H，H-12),3.52(m,1H，H-7)，3,22(m，1H，H-6)，2.67(s，3H，H-21)，2.47(dd，1H，H-2)，2.35(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H國27)，2.05(m，2H，H-14),1.71(m，1H)，1.57一1.10(m，6H)，1.28(s，3H，H-22或H-23)，0.98(d，3H，H-24),0.92(s,3H，H-22或H曙23)，0.86(d，3H，H-25)。￡^/-MS:631.8，100%[M+H]+;633.8，39%M+H]+。好7MS(单一同位素的):柳々654.2381[7V/+Nal+，[(:321142<:1>^068+~3的计算值654.2381。6e:将1.25g(9.03mmol)6-氯-3-^J^比吱的10mlEtOH/12mlDEE溶液用HCI气体在0。C下处理至饱和并将形成的悬浮液在室温下放置过夜。将沉淀物通过过滤分离并用10mlEtOH/30mlDEE混合物研制得到1.23g粗亚氩基酯盐酸盐，未对其进行进一步纯化。伊恶峻啉的形成将33.0mg该物质((0.15mmol，基于亚氛基酯单盐酸盐的分子量)与20nLEtOH—起加入到^J^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300^iLDCE溶液中并将混合物在90。C下加热8小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC得到14.27mg稍微不纯的产物，将其进一步通过制备型HPLC纯化(30。/。—100%ACN，100分钟)得到11.8mg(37%)标题化合物6e。'好-A^Of(5007V/H^，Z)MS0-fl^:5=8.83(d，1H)，8.25(dd，1H)，7.65(dd，1H)，7.35(s，1H，H-19),6.57(s，1H，H-17),5.44(t(br)，1H，H-15)，5.16(d(br)，1H，3誦OH)，4.64(m，1H,H國13)，4.30(d(br),1H,7-OH)，4,18(m，1H，H-3)，3.89(m，1H，H-12),3.50(m，1H，H-7)，3,20(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H-21)，2.45(dd，1H，H曙2)，2.32(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27)，2.02(m，2H，H-14)，1.80(m，1H)，1.55(m，1H)，1.43(m，3H)，1.25(s,3H，H-22或H-23+m，1H)，1.16(m，1H)，0.95(d，3H，H-24)，0.89(s，3H，H-22或H画23)，0.86(d，3H，H-25)。E57-MSV631.8，100%[M+H+;633.8，39%[M+H广好/2MS(单一同位素的):附々654.2380[M+Nal+,十。/WM5:w/z676.20541[M+H+，[C32H42BrN306S+H的计算值676.20561;698.18691[M+Na+，[C32H42BrN306S+Na]的计算值698.18755。6g:将1g6-甲基-3-^J^-吡啶的8mlEtOH/10mlDEE溶液用HC1气体在0°C下处理至饱和并将形成的悬浮液在室温下放置过夜。将混合物蒸发至干并简单干燥得到1.89g粗亚氨基酯盐酸盐。将1.86g该物质悬浮在20mlEtOH中，加入Et3N(2ml)并将混合物在室温下搅拌16小时(在加入Et;3N后IO分钟内形成澄清溶液)。然后加入DEE(30ml)并将形成的沉淀物通过过滤除去，用DEE洗涤。将合并的滤液蒸发至干得到1.52g物质，按照NMR，该物质含有亚氨基酯游离碱以及相应的原酸酯。嗜、唑啉的形成将30.0mg以上物质(0.15mmo1,基于亚^J^酯游离碱的分子量)加入到氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300pLDCE溶液中并将混合物在90°C下加热3小时。冷却至室温后将反应混合物直接在4%MeOH/DCM中进行FC得到22.3mg稍孩史不纯(>卯％纯度)的物质，将其进一步通过制备型HPLC纯化(5V。—100%ACN，100分钟)，冷冻干燥后得到16.2mg(53%)白色粉末状纯标题化合物6g。'/f-層/，M所，/)MW母S=8.87(s，1H)，8.06(dd，1H)，7.78(d，1H)，7.37(s，1H，H-19),6.57(s，1H,H-17)，5.43(m，1H,H-15)，5.17(d，1H，3-OH)，4.59(m，1H，H-13),4.33(d，1H，7-OH)，4.20(m，1H,H-3)，3.84(m,1H，H画12)，3.50(m，1H，H-7)，3.20(m，1H，H画6)，2.64(s，3H,H画21)，2.45(dd.m，H-2)，2.32(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27)，2.00(m，2H，H-14)，1.81(t(br)，m)，1.52(m，1H)，1.40(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.13(m,1H)，0.94(d，3H，H-24),0.89(s，3H，H-22或H画23)，0.84(d，3H，H-25)。￡^/-My:611.9[M+H]十。/WfMS:w/z612.3102[Af+H]十，[C33H45N306S+H]的计算值612.3107。6h:A.6-乙基-3-氰基-他咬的制备向6-氯-3-氰基-吡梵(277mg，2.0mmol)和35.3mgFe(acac)2(0.1mmol)在12mlTHF和1.13mlNMP中的溶液中加入0.8mlEtMgBr的DEE溶液(3M;2.4mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，此刻加入DEE(30ml)，然后加入水(IOml)。分离出有;f几层并将水溶液用DEE彻底地洗涤。将合并的有机萃取液用水洗涤(2x10ml),用MgS04干燥并蒸发溶剂。将残余物通过FC在己烷/AcOEt4/1中纯化得到142mg(54%)6-乙基-3-氰基-吡淀。(ES7-3/S:133[M+H+。7i/-iVM/^卯M//z，CDC7je):S=8.80(s，1H)，7.85(dd，1H)，7.29(d.1H)，2.90(q，2H)，1.25(t，3H))。B.将140mg6-乙基-3-^J^-吡啶(1.06mmol)的4mlEtOH/5mlDEE溶液用HC1气体处理至饱和(间歇地形成悬浮液，但饱和后形成澄清溶液)。将混合物在室温下放置过夜，蒸发溶剂并将残余物在真空下简单地干燥(228mg)。然后将该物质重新溶于5mlEtOH并加入Et3N(0，4mL)。30分钟后加入DEE(25ml)，将形成的沉淀物通过过滤除去并用DEE洗涤，将合并的滤液蒸发至干得到133mg粗产物，该粗产物不经进一步純化即可用于下一步骤。将26.7mg该物质(0.15mmol，基于亚氨基酯游离碱的分子量)与30nLEtOH—起加入到#^醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300^iLDCE溶液中并将混合物在90。C下加热6小时。6小时(15mg)和9小时(20mg)后继续加入亚氛基酯/原酸酯。在90。C下总共19小时后，将反应混合物直接在5%MeOH/DCM中进行FC得到6.6mg(21%)基本上纯净的产物。为了生物学研究，将该物质进一步通过制备型HPLC纯化(5%—100%ACN，100分钟)，冷冻干燥后得到2.8mg白色粉末状纯标题化合物6h。'好-A^/jRP卯MHz，DM50-^):S=8.88(d，1H)，8.06(dd，1H)，7.37(d，1H)，7.33(d，1H，H画19)，6.55(s，1H，H-17),5.42(m，1H，H-15)，5.15(d，1H，3-OH)，4.58(m，1H，H-13),4.29(d，1H，7-OH)，4.20(m,1H，H-3)，3.84(m，1H，H-12)，3.50(m，1H，H-7)，3.20(m，1H，H-6)，2.79(q，2H,Et-哺唑淋)，2.64(s，3H，H-21)，2.47(dd，1H，H-2)，2.32(dd,1H，H-2)，2.11(s，3H，H画27)，2.00(m，2H，H-14),1.70(t(br),1H)，1.53(m，1H),1.40(m，3H)，1.25(s，3H，H-22或H-23+m，1H)，1.23(t，3H，Et画嗜唑啉)，1.15(m，1H)，0.96(d，3H，H24),0.90(s，3H，H-22或H-23)，0.86(d，3H，H-25)。五57-M9:625.9[M+H+。好/MS:m/z626.3259[M+H]+，[C34H47N306S+H的计算值626.3264。6i:A.6-异-丙基-3-^J^-吡啶的制备向6-氯-3-氰基-吡梵(277mg，2.0mmol)和35.3mgFe(acac)2(0.1mmol)在12mlTHF和1.13mlNMP中的溶液中加入2.4ml/so-C3H7MgBr的DEE溶液(lM;2.4mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，此刻加入DEE(30ml)，然后加入水(IOml)。分离出有机层，将水溶液用DEE彻底地洗涤。将合并的有机萃取液用水洗涤(2x10ml),用MgS04干燥并蒸发溶剂。将残余物通过FC在己烷/AcOEt4/1中纯化得到224mg(76%)6-异-丙基-3-氰基-吡啶。(￡S/-MS:146.9[M+H]+。'/7-7V3/iM/Tz，CDOj六S=8.80(s，1H)，7.85(dd，1H)，7.29(d.1H)，3.13(quin，1H)，1.33(d，6H))。B.按照关于6h的描述将200mg(1.36mmol)6-异-丙基-3-^J^-吡啶转化成274mg相应的亚氨基酯游离碱和原酸酯的粗混合物。将30.0mg该物质(0.15mmol，基于亚#^酯游离碱的分子量)与30pLEtOH—起加入到氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.05mmol)的300nLDCE溶液中并将混合物在卯。C下加热19小时。冷却至室温后将反应混合物直接在5%MeOH/DCM中进行FC得到6.2mg(19%)基本上纯净的产物。为了生物学研究，将该物质进一步通过制备型HPLC纯化(5%—100%ACN，100分钟)，冷冻干燥后得到4.3mg白色粉末状纯标题化合物6i。7H-/VMi(5卯M好z，2>MSO^g:8=8.92(s,1H)，8.09(d，1H)，7.38(d，1H)，7.35(d，1H，H-19)，6.55(s，1H，H-17),5.42(m，1H，H-15)，5.17(d，1H，3-OH)，4.61(m,1H，H-13),4.34(d，1H,7-OH)，4.20(m,1H,H-3),3.83(m,461H，H-12),3.51(m，1H，H-7)，3.20(m，1H，H画6)，3.13(quin，1H，异丙基嗜唑啉)，2.66(s，3H，H-21)，2.48(dd，1H，H-2)，2.34(dd，1H，H-2)，2.10(s，3H，H-27),1.99(m，2H，H誦14)，1.79(m,1H),1.52(m，1H)，1.38(m，3H),1.25(s,H-22或H-23+2xd+m，IOH)，1.12(m，1H)，0.94(d，3H，H-24)，0.89(s，3H，H-22或H-23)，0.86(d,3H，H-25)。￡5/-MS:639.9[M+H]+。〃iMS:m/z640.3424H+，[C35H49N306S+H的计算值640.3420。6j:按照关于6h的描述将1.16g(7.25mmol)6-叔丁基-3-氰基-吡咬(从3-氰基-吡啶和新戊酸按照参考文献3制得)转化成1.26g亚氛基酯游离碱和相应的原酸酯的粗混合物。将30.0mg该物质(0.15mmol，基于亚氩基酯游离碱的分子量)加入到氨基醇3(乙酸盐；25.5mg，0.050mmol)的300nLDCE溶液中并将混合物在卯。C下加热1小时。冷却至室温后将反应混合物直接在5%MeOH/DCM中进行FC得到33.2mg不纯的物质，将其进一步通过制备型HPLC纯化(5%—100%ACN，IOO分钟)，冷冻干燥后得到18.5mg(57%)白色粉末状纯标题化合物6j。'H-7VMW「5卯MHz,Z>MSO-</6)..5=8.92(d，1H)，8.09(d，1H)，7.51(d，1H)，7.33(d，1H，H-19),6.55(s,1H,H-17),5.42(m，1H，H-15),5.14(d，1H，3-OH)，4.59(m，1H，H-13),4.30(d,1H，7-OH),4.20(m,1H，H-3)，3.85(m,1H，H画12)，3.51(m，1H，H-7)，3.21(m，1H，H-6)，2.64(s，3H，H-21),2.46(dd1H，H-2)，2.34(dd，1H，H-2)，2.11(s，3H，H-27)，1.99(m，2H，H-14),1.77(m,1H)，1.50(m，1H)，1.37(m，3H)，1.33(s，9H，叔丁基喝唑啉)，1.26(s，3H-22或H-23+m，1H)，1.11(m，1H)，0.96(d，3H，H-24)，0.90(s，3H，H-22或H-23),0.85(d，3H，H-25)。￡^/-MS,654.0[MfHj+。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>化学生物学所合成的埃博霉素类化合物的生物学活性通过微管蛋白聚合试验来评价。在一个试验中，确定与给定浓度的相应化合物相接触而聚合成微管的微管蛋白的分数。聚合的引发相对于2SnM埃博霉素B(其产生最大聚合反应(100%值))的效果，通过5nM(jiM)待测化合物引发纯的牛脑微管蛋白的聚合。微管蛋白聚合利用基于离心法的试验进行测定。结果<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>对人的表皮样癌细胞系KB-31的IC50值的测定分别测定对人的表皮样癌细胞系KB-31和KB-8511的生长抑制作用的ICso值。KB-8511是P-糖蛋白170(P-gpl70)过度表达的KB-31母细胞系的多重耐药的亚系。将细胞与化合物接触72小时。通过用亚甲基蓝染色法定量固定细胞的蛋白含量来估计细胞的数目。<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>权利要求1、选自式A、B、I或II的化合物其中Q是选自O或S的基团；并且R可选自氢、卤素、羟基、烃基、三氟甲基、氰基、硝基、氧代、脒基、-B(OH)2、＝NR2、-OR2、-SR2、-C(O)R2、-C(O)OR2、-OC(O)R2、-N(R2)R3、-C(O)KN(R2)R3、(CR5R6)j-S(O)lR2、-C(R2)3和R4；R2和R3彼此独立地是氢或选自C1-6烷基、-(CR5R6)j-碳环基和-(CR5R6)j-杂环基，其中任何一个均任选地被1、2、3、4或5个独立地选自下列的取代基所取代卤素、羟基、C1-6烷基、三氟甲基、氰基、硝基、氨基和脒基；R4和X彼此独立地选自C1-6烷基、C1-6链烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、-(CR5R6)j-碳环基和-(CR5R6)j-杂环基、芳基、杂芳基、氨基，其中任何一个均任选地被1、2、3、4或5个独立地选自下列的取代基所取代卤素、羟基、C1-6烷基和C1-6烷氧基；各R5和R6可相同或不同并且均独立地选自键、氢、卤素、羟基和氨基；j是0、1、2、3、4、5、6或7；K是0或1；l是0、1或2；或其可药用盐、酯、N-氧化物或前药。2、权利要求1的化合物，其中Q是O。3、权利要求1或2的化合物，其中R1具有下式—(CR5RV/=Y(R4)m其中R5、R6、j和R"如上文所述；W是N或C;并且m是0、1、2、3或4。4、权利要求l、2或3的化合物，其中R1具有下式:其中R5、R6、j和I^如上文所述；W是N或C;并且m是0、1、2、3或4。5、权利要求l、2或3的化合物，其中W具有下式:其中n是0、1、2或3且T是NH、O或S。6、权利要求5的化合物，其中n是l。7、权利要求1至4中的任何一项所述的化合物，其中m是1。8、任何前a利要求的化合物，其中RS和RS都是氢。9、任何前述权利要求的化合物，其中j是0。10、任何前述权利要求的化合物，其中R"选自鹵素和Cw烷基。11、权利要求l的化合物，其中W选自下列之一H、CH3、C2H5、"C4H9、叔丁基、OCH<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>12、包含任何前述权利要求的化合物和至少一种可药用载体的药物组合物。13、用作药物的权利要求1至12中的任何一项所述的化合物。14、权利要求1至12中的任何一项所述的化合物在生产用于治疗癌症的药物中的应用。15、治疗癌症的方法，该方法包括将权利要求1至12中的任何一项所述的化合物以有效治疗所述疾病的量施用给温血动物。16、杀死癌细胞的方法，该方法包括将包含权利要求1至12中的任何一项所述的化合物的细胞毒性溶液与癌细胞接触。17、制备权利要求1至12中的任何一项所述的化合物的方法，该方法包括将式3化合物用a)原酸酯或b)亚氛基酯处理。18、权利要求1的化合物，其中X是芳基或杂芳基。全文摘要本发明涉及式A、B、(I)和(II)的埃博霉素的类似物、其应用和制备方法。文档编号A61K31/424GK101558074SQ200780046275公开日2009年10月14日申请日期2007年12月12日优先权日2006年12月14日发明者K·阿尔特曼申请人:诺瓦提斯公司