专利名称：：7-氯-4-[4’-(7”-氯喹-4”-基)哌嗪-1’-基]喹啉及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及有机化学领域，具体涉及一种含喹啉环的新的化合物。
背景技术：
：喹啉(quinoline)是一种吡啶与苯并联的化合物，分子式为C9H7N，主要用于制备染料或作为医药中间体，其衍生物种类繁多，其中哌喹(Piperaquine)及其磷酸盐、氯喹(chlorquine)、奎宁(quinine)、甲氟喹(mefloquine)和伯氨喹(primaquine)是抗疙疾的常用药。哌喹及其磷酸盐是目前较好的一种抗疟疾的药物，对于抗氯喹性恶性疟疾有根治作用，iK乍用缓'漫。《Piperaquinebioanalysis，drugmetabolismandpharmacokinetics》一文X寸BjS喹在人体的药效动力学和药物代谢作了较深入的研究，发现哌喹在被人体吸收利用后有5种主要的代谢产物，其中两种代谢产物的分子结构中也含有喹啉环，如式1和式2所示，另外3种代谢产物的结构尚未明确，该文没有对这些化合物的化学性质、生物活性和用途作进一步的研究。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(1)
发明内容本发明的目的在于提供一种新的化合物。本发明所提供的化合物是7-氯-4-[4，-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-r-基]喹啉，分子式为C22H18N4C12，分子量为408.0894，黄色粉末，能溶于氯仿、二氯甲垸、DMS0等，不溶于甲醇、水，分子结构如式I所示。ClClI本发明所述的化合物是磷酸哌喹在人体内的代谢产物之一，是从服用过磷酸哌喹的健康人的尿液中分离出来的，具体步骤如下(i)收集服用过磷酸哌喹的健康人的尿液，浓縮，然后用3倍体积的体积比为15:io:l的二氯甲垸、乙醚和异丙醇混合溶剂萃取，取有机层；(2)将有机层浓缩，过0DS柱层析，先用水洗脱，然后用5%50%甲醇梯度洗脱，收集、合并3050%甲醇的洗脱液；(3)将步骤(2)所得甲醇洗脱液浓縮，过S印hadexLH-20，然后用30%甲醇洗脱，收集收集第50-150mL的洗脱液；(4)将步骤(3)所得洗脱液浓縮，过C18液相色谱柱，然后用含有0.1%甲酸的50%甲醇洗脱，收集洗脱液；(5)将步骤(4)所得洗脱液减压干燥，结晶，得本发明化合物。本发明所述的化合物能抑制疟原虫生长及其裂殖体发育，具有较好的抗疟疾活性，可用于制备抗疟疾的药物。所述的药物可以是口服剂，其中7-氯-4-[4'-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l'-基]喹啉的重量百分比含量为20%40%。本发明所述的药物，抗疟疾的有效剂量按服用者的体重计算，口服给药时，7-氯-4-[4'-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l'-基]喹啉的每天用量为16.5mg/kg~33mg/kg。下面将通过体外实验和药效学试验来证明本发明化合物的技术效果。一、体外实验1、实验材料症原虫FCC-1/HN株，引自广东省寄生虫病防治研究所。磷酸哌喹购自上海中西药业有限公司提供，含量为99.4%。磷酸氯喹购自上海中西药业有限公司提供，含量为99.4%。本发明化合物按实施例l方法制备。2、实验方法和分组(1)磷酸哌喹处理组(PQP组)磷酸哌喹用二甲基亚砜配置成以下浓度的溶液5000,VL、腦0,1/L、100^mol/L、50拜]/L、10nmo]/L、5(jmol/L、1,1/L、0.5,1/L、0.1,1/L、0.05Mmol/L，分别用以上浓度的磷酸哌喹溶液20ML处理疟原虫。(2)磷酸氯喹处理组(CQP组)磷酸氯喹用二甲基亚砜配置成以下浓度的溶液5000,1/L、1000pmo]/L、100pmoVL、50Mmol/L、10nmol/L、5(jmol/L、lnmol/L、0.5nmol/L、0.1timol/L、0.05Mmo/L,分别用以上浓度的磷酸氯喹溶液20PL处理疟原虫。(3)本发明化合物处理组(Ml组)用二甲基亚砜配置成以下浓度的溶液5000,1/L、1000^xmDI/L、100^unol/L、5。nmo]/L、10Mmol/L、5|jmol/L、lMmol/L、0.5Mmol/L、0.lMmo!/L、0.05nmol/L'分别用以上浓度的本发明化合物溶液20PL处理疟原虫。(4)空白对照组(fU)组)用与上面药物等量的水处理疟原虫。(5)溶剂对照组(ly。DMS0组)用与上面药物等量的1。/。DMSO处理疟原虫。3、实验结果,结果如表l所示，本发明化合物对疟原虫的裂殖体的发育具有明显的抑制作用，其效果与磷酸哌喹相当。表1本发明化合物对疟原虫裂殖体发育的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注"-"代表是片中疟原虫的裂殖体的发育受到抑制；"+"代表是片中存在疟原虫的裂殖体或裂殖体发育分裂。二、药效学实验1、材料和方法(1)药物7-氯-4-[4，-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l'-基喹啉按实施例l的方法制备，用水配成所需不同浓度的悬液，药物剂量按7-氯-4-[4'-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l'-基]喹啉计算。(2)恶性疟原虫抑制试验实验动物为昆明系小鼠，体重(20±2)g。将小鼠随机分为4组(10只/组)本发明化合物低剂量组(M1低剂量组，75mg/kg)，本发明化合物中剂量组(M1中剂量组，150mg/kg)，本发明化合物高剂量组(Ml高剂量组，300mg/kg)和阳性药对照组(PQP组'160mg/kg)。每鼠分别腹腔注射(ip)FCC-1/HN(恶性疟原虫，引自广东省寄生虫病防治研究所)的含虫血(红细胞5xl()S个)，感染次日后按组别灌胃(ig)给药。给药时间分别为Oh(首次给药时间记为Oh)，6h，24h，32h。末次给药的次日从小鼠尾部取血，制片染色镜检并计数，得出平均抑制率。2、结果表2本发明化合物口服给药对恶性疟原虫的抑制率<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>结果如表2所示，本发明化合物M1中剂量口服给药的恶性疟原虫抑制率为94.2%,接近阳性对照药PQP的抑制率(94.0%);高剂量口服给药的恶性疟原虫抑制率为97.0%，比阳性对照药PQP的抑制率高，显示本发明化合物口服用药对恶性疟原虫具有显著的抑制作用。图1是本发明化合物的UV谱图。图2是本发明化合物的MS谱图。图3是本发明化合物的'H-NMR谱图。图4是本发明化合物的^-NMR谱图的局部放大图。图5是本发明化合物的"C-NMR谱图。图6是本发明化合物的13C-NMR谱图的局部放大图。图7是本发明化合物的I3C-NMRDEPT135°禾QDEPT卯。局部图。具体实施例方式例l本发明化合物的制备1、实验前一周内未服用任何药物的45名健康受试者，年龄20-30岁，体重45-75kg，按0，6，24和32h连续四次服Artekin药片，每次两片，收集药后5天的尿液，共收尿液集尿液约155L，供分离分析使用。2.人体尿液样品中代谢产物M1的分离纯化(1)将所收集的尿液浓缩至4L，然后用3倍体积的体积比为15:10:1的二氯甲烷、乙醚和异丙醇混合溶剂萃取，取有机层；(2)将有机层浓縮至250mL,过ODS柱层析，先用水洗脱，然后用5%50%甲醇梯度洗脱，收集、合并3050%甲醇的洗脱液；(3)将步骤(2)所得甲醇洗脱液浓縮10ml，过S印hadexLH-20，然后用30%甲醇洗脱，收集洗脱液(4)将步骤(3)所得洗脱液浓縮至10ml，过C18液相色谱柱，然后用含有O.1%甲酸的50%甲醇洗脱，收集洗脱液；(5)将步骤(4)所得洗脱液减压干燥，结晶，得本发明化合物4.5mg。本发明化合物的鉴定1、UV谱分析本发明化合物用甲醇-水溶解，然后用PDA-100二极管阵列检测器(DAD)扫描。结果如图l所示，该化合物在225.0nm和358.5mn处有紫外吸收，说明化合物有喹啉结构，UV图谱上三线归一，表示样品纯度在98%以上。2、MS谱分析用美国Thermo质谱仪(型号MAT95XP，分辨率>2000)采用电离方法分析EI源；孔口温度250°C;进样温度350°C;气体氮气；电子攻击源70eV;扫描范围m/z50-600。所述的化合物的MS谱图如图2所示，通过Thermo质谱仪自带的分析软件分析确定该化合物的分子量为408.0894，分子式为C22H18N4C12，如表1和表2所示。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>3、磁核共振分析美国Bruker500MHz核磁共振仪，型号AV500;探头5mmBBOBB-m;脉冲Zg30(氢谱)；Zgdc30(碳谱)；溶剂DMSO;采样次数8;采样数据点32K;谱宽10000Hz。经核磁共振iH-NMR(DMSO-d6,500MHz)分析，如图34所示，分析结果为S8.67(2H,d,风7Hz,H-2,2"),7.10(2H,d，《/=6.7Hz,H-3,3"),8.30(2H,d,^9.0Hz,H-5,5"),7.10(2H,dd，J-9.0Hz，J二2.0Hz,H-6，6"),8.05(2H，d,/=2.0Hz,H隱8，8")，4.13(8H,d，H-2，，3，，5,，6，)。经核磁共振13C-NMR(MeOD,500MHz)分析，如图57所示，分析结果为S105.2(C-3，3"),143.9(C-4,4"),128.7(C-5,5"),126.2(C-6,6")，137.3(C-7，7"),126.2(C-8，8"),158.6(C-10，10"),49.9(C-2，，3'，5，，6')。4、红外吸收光谱分析本发明化合物31062982cm—'显示存在Ar-H,16241501cm—'显示存在芳环，11601016cm—'显示存在芳基-卤素，824555crrf'显示存在C-Cl。例2处方例1所得化合物60g甘露醇48g微晶纤维素32g低取代羟丙基纤维素(L-HPC)8g微粉硅胶lg硬脂酸镁lg制法取微晶纤维素于80'C干燥4h,依次与L-HPC、甘露醇、例l所得化合物混合均匀后加入硬脂酸镁、微粉硅胶混合，以适当压力直接压片，共制200片，每片0.75g，含7-氯-4-[4'-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-r-基]喹啉300mg。例3处方例l所得化合物30g淀粉56g微晶纤维素54g交联羧甲基纤维素钠(CCNa)4.5g微粉硅胶4.5g十二垸基硫酸钠0.8g制法按处方称取药粉和各种辅料，以5XPVP-60W乙醇溶液为黏合剂，用流化床制粒，压片即得。共制400片，每片0.375克，含7-氯-4-[4，-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l'-基]喹啉75mg。例4处方例1所得化合物40g淀粉30g微晶纤维素54g交联羧甲基纤维素钠(CCNa)4.5g,微粉硅胶4.5g十二垸基硫酸钠0.8g制法按处方称取药粉和各种辅料，以5XPVP-60X乙醇溶液为黏合剂，用流化床制粒，压片即得，共制400片，每片0.335克，含7-氯-4-[4'-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l，-基]喹啉100mg。权利要求1、7-氯-4-[4’-(7”-氯喹-4”-基)哌嗪-1’-基]喹啉，其分子结构如式I所示。2、7-氯-4-[4'-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-r-基]喹啉在制备抗疟疾药物中的应用。3、一种抗疟疾药物，该药物由7-氯-4-[4，-(7"-氯喹-4"-基)哌嗪-l，-基]喹啉和药学上可接受的辅料组成。4、如权利要求3所述的药物，其特征在于该药物是胶囊或片剂。全文摘要本发明提供了一种新的化合物，该化合物是磷酸哌喹在人体内的代谢产物之一，其名称为7-氯-4-[4’-(7”-氯喹-4”-基)哌嗪-1’-基]喹啉，分子结构如式I所示。本发明化合物具有抑制疟原虫裂殖体发育和恶性疟原虫生长的作用，可用于制备抗疟疾的药物。文档编号A61K31/496GK101293871SQ200810028868公开日2008年10月29日申请日期2008年6月17日优先权日2008年6月17日发明者刘昌辉,宓穗卿,王宁生,陈沛泉,黄小桃申请人:广州中医药大学