一种改进的仙蟾片药物处方及其制备方法

专利名称：一种改进的仙蟾片药物处方及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药领域，涉及一种中药为原料制备的中药制剂，特别是一种改进的仙蟾片药物处方及其制备方法。

背景技术：
“癌瘤”现代医学称之恶性肿瘤，是目前世界上威胁人类生命健康最残酷的一号杀手，一旦患染，幸免于死者寥寥无几。
中医认为癌瘤成因有以下数种情志抑郁，忧思郁怒，痰浊凝结，肝失调达，遂使肝旺气滞，痰浊内蕴，气郁痰浊随经络而行，由于情志内伤，肝脾气逆，痰浊内生，气郁痰浊结聚不散，气血为之壅滞，血随气滞而成瘀，积久瘀凝成毒，气滞痰浊瘀毒三者痼结而成本病；由于元气不足，肺气失于宣和，以致气滞痰凝，营卫不和，痰气凝聚肌表，发为气瘤；由于肝旺脾弱，失于健运，痰湿内生，积久成形，发生肉瘤；痰湿凝滞，血脉不畅，气血凝滞，三者皆能导致筋脉络道失于通畅，局部气血运行失常，瘀阻络道，以致筋脉盘曲，火旺逼血沸腾，血不循经，凝聚于经络之间，以致脉络交错，导致本病发生；肾主骨生髓，由于肾气不足，则骨无荣养，易为寒湿之邪侵袭，痰浊蕴阻骨骼，积聚日久，以致瘀血毒邪凝滞，络道阻塞，聚而成形，发为骨瘤；性情不畅，肝气郁结，气郁化火，肝肾不足，毒邪蕴结，气郁血逆，与痰火凝结于少阳、阳明之络而成；思则气结，忧愁则气闭而不行，气为血帅，气郁者必血逆，郁结胸中，久而化火，灼津为痰，或思虑过度，心火内灼，积热于脾经而成；过食煎炙，积热伤脾而肾水亏损，久则伤肝，气火内盛或肝旺脾失健运，无以化生水谷，反生湿浊，以致湿火蕴结下焦而成；冲任失调房劳过度，多产或流产，肝肾阴亏，无以调摄冲任，胞脉气血运行受阻，阴虚则生内热，热甚化火，火热之毒与气血凝滞，经络阻塞，或胎中积热瘀血、痰浊凝滞肌肤，郁结不散，日久聚而成瘤。
目前，治疗癌症的方法很多，主要包括手术治疗和非手术治疗。手术治疗因痛苦大，适用范围窄，术后可能遗留后遗症，手术费用高，而使多数人不愿接受。非手术治疗主要有化疗、放疗、口服药物、外用药物等。化疗和放疗对全身影响大，副作用显著；虽然目前市场有各种口服药，但都存在着药力不足、疗效差，适应症少等缺陷，很难从根本上解决问题。中医治疗癌瘤的药物虽然很多，仅在中国申请的治疗癌瘤的发明专利就达270余件(如申请号为94104938.8，名称为消癌灵；申请号为03126194.9，名称为双蛇灵芝草防癌治癌中药；申请号为200410018778.1，名称为一种克癌中药组合物及其制备方法)，但是没有令人信服的临床资料和典型病例，疗效令人置疑，或是缺乏药效学实验资料和安全性研究，毒副反应不得而知。
仙蟾片是申请人进行大量试验得出一种有关治疗癌瘤的药物，已于2005年获得中国发明专利，专利号ZL200510071081.5。该药物选择马钱子粉、蟾酥、补骨脂、半夏(制)、郁金、人参、黄芪、当归和仙鹤草等中草药，其处方为，马钱子粉4-6份、蟾酥0.5-1.5份、补骨脂10-20份、半夏(制)4-6份、郁金4-6份、人参2-4份、黄芪1-3份、当归1-3份、仙鹤草4-6份。
优选处方为马钱子粉5份、蟾酥1份、补骨脂16.5份、半夏(制)5份、郁金5份、人参3份、黄芪2份、当归2份、仙鹤草5份。该仙蟾片具有理气益肾，化痰软坚，祛痰化湿，通经去瘀，解毒去湿，散寒止痛，行瘀通络，补肾散坚，消浊益肾，攻毒抗癌，托疮生肌，扶正祛邪，清毒排毒，调补气血，和理脾胃的作用，经药效学、毒理学、临床试验证明，治疗癌瘤毒的效果较好，但在使用过程中发现，有些患者在服用后产生呕吐、血压升高、呼吸急促等一些副作用，因此对原药物的处方进行调整或改进是十分必要的。


发明内容
本发明的目的在于，提供一种改进的仙蟾片药物处方及其制备方法，以消除原配方的副作用。
为了实现上述任务，本发明给出的改进仙蟾片药物处方为 马钱子粉40-60份、蟾酥0.5-1.5份、补骨脂100-200份、半夏(制)40-60份、郁金40-60份、人参20-40份、黄芪10-30份、当归10-30份、仙鹤草40-60份。
优选为马钱子粉50份、蟾酥1份、补骨脂165份、半夏(制)50份、郁金50份、人参30份、黄芪20份、当归20份、仙鹤草50份。
即将原处方中“蟾酥”的用量减少为原处方的十分之一。
另外，原仙蟾片在生产过程中的煎煮时间太长，三次煎煮时间长达4.5小时，造成后续工艺衔接不紧凑，增加了产品成本。因此，有必要同时对原仙蟾片的制备方法进行改进。
上述改进的仙蟾片药物的制备方法，包括下列步骤 1)补骨脂量的五分之四和蟾酥、半夏(制)干燥后粉碎成细粉，过100目筛，调匀，备用； 2)将剩余的补骨脂粉碎成粗粉和马钱子粉混合，加入5-7倍量的质量分数为65％～75％的乙醇浸渍45小时～55小时，以每分钟3毫升的速度渗漉； 3)收集初漉液约225ml，继续渗漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和续漉液，滤过，滤液回收乙醇，得清膏，滤过，滤液回收乙醇得清膏，备用； 4)将郁金、人参、黄芪、当归、仙鹤草(后下)和醇提后的药渣混合，用高效提取浓缩机组，加水煎煮1小时，动态回流提取2小时，滤过，得到滤液； 5)滤液和清膏合并，混压，减压(-0.04MPA，68-72℃)浓缩至相对密度为1.10-1.25(60℃)的清膏， 6)在清膏中加入细粉与糊精18-22克，混匀，喷雾制粒，过14目筛整粒，加入0.2％硬脂酸镁和蔗糖适量，混匀，压制成片，包薄膜衣，消毒后包装即得。
本发明经改进的仙蟾片药物处方及其制备方法，经过3个批量的试制，并以此三批样品进行了“蟾酥”含量测定方法学研究及含量限度的确定，证明了改进是成功的，抗癌效果没有减弱。

具体实施例方式 以下结合发明人给出的具体实例对本发明作进一步的详细说明。
针对患者反映的原仙蟾片存在的副作用的问题，发明人对全方进行了深入研究和分析，原处方的产生副作用的原因主要在蟾酥的用量上，发明人本着降低不良反应，提高患者依从性，减少了蟾酥的用量，蟾酥用量由10g调整为1g，即每片含蟾酥为1mg，日服蟾酥量为0.012g。依照调整后的处方进行了3批样品(060801、060802、060803)的试制，并以此三批样品进行了“蟾酥”含量测定及含量限度的确定。其制备方法也作了适当改进，并增加了蔗糖作为辅料，以调节药片的硬度。
本发明也可以制成丸剂、粉剂、冲剂、膏剂、口服液。
本发明的改进的仙蟾片药物，各组分用量在下述重量份范围都具有较好疗效。
马钱子粉40-60份、蟾酥0.5-1.5份、补骨脂100-200份、半夏(制)40-60份、郁金40-60份、人参20-40份、黄芪10-30份、当归10-30份、仙鹤草40-60份。
优选为马钱子粉50份、蟾酥1份、补骨脂165份、半夏(制)50份、郁金50份、人参30份、黄芪20份、当归20份、仙鹤草50份。
处方中的马钱子、人参为君药，余为臣药。
马钱子，活络散结，消肿定痛，以其本身毒性逐风散寒窜于经络肌骨之间致邪外出； 人参，性平，味甘，微苦，具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能； 蟾酥，为蟾蜍科动物中华大蟾蜍(BufobufogargarizansCantor)或黑眶蟾蜍(Bufomelanost-ictusSchneider)的耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液，经加工干燥而成。辛，温。有毒，归心经。有开窍醒神解毒、攻毒抗癌、消肿止痛作用； 补骨脂，主入血分，为血中气药，有活血散瘀、行气止痛和镇静、缓解经筋痛、松弛肌筋之效能； 半夏(制)，为天南星科半夏的干燥块茎，辛、温、有毒，归脾、肺、胃经。具有燥湿化痰，降逆止呕、消痞散结作用。对动物实验性肿瘤和Hela细胞都具有明显的抑制作用。从水溶部分得白葫芦巴碱，对小鼠肝癌亦有明显抑制作用，其所含b-谷甾醇及其似物也有抑瘤作用；郁金性凉，味辛、苦。有行气解郁，凉血破瘀作用； 黄芪，味甘，微温，具有补气固表、托疮生肌、利水的功效； 当归，味甘、辛、性温。归肝、心、脾经。既能补血活血，又能调经止痛、甘温质润、消肿生肌，用于血虚，血滞而兼有寒凝，以及风湿痹阻； 仙鹤草，性平，味苦、涩，有收敛止血、截疟、止痢、解毒作用。
诸药合用具有疏肝开郁，解郁消肿，理气益肾，软坚散结，祛痰化湿，和营活血，健脾益气，祛瘀化痰，通经去瘀，清热凉血，解毒去湿，散寒止痛，行瘀通络，补肾散坚，消浊益肾，攻毒祛邪，托疮生肌，扶正抗癌，清毒排毒，清泄心火，调补气血，和理脾胃的作用。
以下是发明人给出的实施例，本发明不限于这些实施例。
实施例1 按照下述重量份称取各原料 马钱子粉40份、蟾酥0.5份、补骨脂100份、半夏(制)40份、郁金40份、人参20份、黄芪10份、当归10份、仙鹤草40份。
制备方法 取马钱子粉、人参、蟾酥、半夏(制)、郁金、黄芪、当归、仙鹤草分别拣选，洗净，炮制后，补骨脂80份、蟾酥0.5份、半夏(制)40份干燥后粉碎成细粉，过100目筛，调匀，备用。
将剩余的20份补骨脂粉碎成粗粉和马钱子粉混合，加入6倍量70％乙醇浸渍48小时，以每分钟3毫升的速度渗熝，收集初漉液，继续渗漉至有效成分完全漉出，合并初漉液和续漉液，滤过，滤液回收乙醇，得清膏，滤过，滤液回收乙醇得清膏，备用。
将郁金、人参、黄芪、当归、仙鹤草和醇提后的药渣混合，加水煎煮1小时(其中仙鹤草后下)，动态回流提取2小时，滤过，滤液和上述清膏合并，混压，减压(-0.04MPA，70℃)浓缩至相对密度为1.15(60℃)的清膏，加入上述细粉与糊精200克，混匀，喷雾制粒，过14目筛整粒，加入0.2％硬脂酸镁，混匀，压制成片，包薄膜衣，消毒后包装即得。
用法和用量每日3次，每次4片，每片0.25克，1个月为一疗程，3个月为一大疗程。
上述高效提取浓缩机组是瑞安凯迪药化机械有限公司生产的TQZW系列高效节能提取浓缩机组。
实施例2 按照下述重量份称取各组分原料马钱子粉60份、蟾酥1.5份、补骨脂200份、半夏(制)60份、郁金60份、人参40份、黄芪30份、当归30份、仙鹤草60份。
制备方法马钱子粉、人参、蟾酥、半夏(制)、郁金、黄芪、当归、仙鹤草分别拣选，洗净，炮制后，补骨脂160份和蟾酥1.5份、半夏(制)60份干燥后粉碎成细粉，过100目筛，调匀，备用。用高效提取浓缩机组将剩余的40份补骨脂粉碎成粗粉和马钱子粉混合，加入5倍量65％乙醇浸渍45小时，以每分钟3毫升的速度渗漉，收集初漉液，滤过，滤液回收乙醇得清膏，备用。将郁金、人参、黄芪、当归、仙鹤草(后下)和醇提后的药渣混合，加水煎煮1小时，动态回流提取2小时，滤过，滤液和上述清膏合并，混压，减压(-0.04MPA，68℃)浓缩至相对密度为1.10(60℃)的清膏，加入上述细粉与糊精180克，混匀，喷雾制粒，过14目筛整粒，加入0.2％硬脂酸镁，混匀，压制成片，包薄膜衣，消毒后包装即得。
用法和用量每日3次，每次4片，每片0.25克，1个月为一疗程，3个月为一大疗程。
实施例3 按照下述重量份称取各组分原料马钱子粉50份、蟾酥1份、补骨脂165份、半夏(制)50份、郁金50份、人参30份、黄芪20份、当归20份、仙鹤草50份。
制备方法马钱子粉、人参、蟾酥、半夏(制)、郁金、黄芪、当归、仙鹤草分别拣选，洗净，炮制后，补骨脂130份和蟾酥、半夏(制)干燥后粉碎成细粉，过100目筛，调匀，备用。将剩余的35份补骨脂粉碎成粗粉和马钱子粉混合，加入7倍量75％乙醇浸渍55小时，以每分钟3毫升的速度渗熝，收集初熝液，滤过，滤液回收乙醇得清膏，备用。用高效提取浓缩机组将郁金、人参、黄芪、当归、仙鹤草(后下)和醇提后的药渣混合，加水煎煮1小时，动态回流提取2小时，滤过，滤液和上述清膏合并，混压，减压(-0.04MPA，72℃)浓缩至相对密度为1.25(60℃)的清膏，加入上述细粉与糊精220克，混匀，喷雾制粒，过14目筛整粒，加入0.2％硬脂酸镁，混匀，压制成片，包薄膜衣，消毒后包装即得。
用法和用量每日3次，每次4片，每片0.25克，1个月为一疗程，3个月为一大疗程。
由于原药物的处方均按照药监局的要求，在西安中医肿瘤医院、西安交通大学第一医院、陕西省中医药研究院附属医院，进行了临床疗效观察，并在西安交通大学医学院临床药理研究所进行了药效学研究和安全性研究包括急性毒性试验及长期毒性实验，由于本申请仅仅将蟾酥用量作了大幅度缩减，以降低不良反应，按照药理学的观点，可以预见改进的药物是安全的，按照药监局的要求，本申请仅进行了“蟾酥”含量测定及含量限度的确定，并对改进的仙蟾片的功能主治进行了有关的主要药效学试验研究(参见附件1、2)。
仙蟾片治疗癌瘤425例临床疗效观察总结 西安中医肿瘤医院、西安交通大学第一医院 陕西省中医药研究院附属医院 仙蟾片系多年治疗肿瘤的经验方，我们三家医院用该药治疗各种癌瘤425例，取得了较好的疗效，现将425例仙蟾片治疗组和132例化疗对照组临床观察结果总结如下。
临床资料 425例癌痛患者按全国肿瘤专业会议的诊断标准，明确诊断，凡服用仙蟾片一个月以上的作为观察对象。425例治疗组中，男257例，女168例，年龄最小6岁。最大81岁。其中肺癌135例，男71例，女64例食道癌96例，男43例，女53例胃癌72例，男53例，女19例肝癌62例，男53例，女9例肠癌23例，男16例，女7例；脑瘤20例，男10例，女10例；膀胱癌17例，男11例，女6例。132例化疗对照组中，男72例，女60例，年龄最小25岁，最大76岁。其中肺癌29例，男13例，女16例食道癌25例，男16例，女9例胃癌25例，男13例，女12例肝癌16例，男9例，女7例肠癌14例，男7例，女7例；脑瘤12例，男7例，女5例；膀胱癌11例，男7例，女4例。
中医证型 气血两亏、气滞血瘀型主症精神萎靡，形体消瘦，气短乏力，月经不调，症块疼痛，恶心呕吐，脉沉细无力，舌淡质紫暗。治疗组辩证为本型的126例，对照组为56例。
脾肾阳虚，痰湿内结型主症头晕耳鸣，腰背疼痛，遗精阳萎，咳嗽痰涎，月经不调，症块疼痛，恶心呕吐，脉沉迟舌淡紫。治疗组辩证为本型的299例，对照组为76例。
疗效标准 完全缓解可见肿瘤完全消失。
部分缓解病灶最大直径及其最大垂直直径的乘积缩小50％以上，其他病灶无增大。
稳定病灶两径乘积缩小不足50％，增大不超过25％。
无效(恶化)病灶两径乘积增大超过25％以上。
治疗方法 治疗组服用仙蟾片，每片0.25克，每次4片，每日3次，一月为一疗程，三个月为一大疗程。一般服用三个月。对照组按不同癌瘤，常规化疗方案为3个疗程，两组均配以支持治疗。
治疗结果 (一)治疗组425例与对照组132例疗效观察。(见表1) 表1 治疗组与对照组疗效比较 注(1)代表治疗组 (2)代表对照组 表1说明，仙蟾片治疗组对肺癌和消化道等部位的癌瘤均有一定的疗效，总有效率为77.4％，化疗组总有效率为57.6％.(P<0.05) (二)治疗组与对照组辩证分型与疗效的观察，见表2 表2 两组辨证分型与疗效比较
注(1)代表治疗组 (2)代表对照组 表2说明，仙蟾片对气血两虚，气滞血瘀型的治疗有效率为78.6％，化疗组为53.6％，两组差异有显著性意义(P<0.05)；仙蟾片对脾肾阳虚，痰湿内结型的有效率为70.2％，化疗组为61.8％，两组比较差异无显著性意义(P>0.05)。
(三)治疗组和对照组对癌症病人临床症状改善的观察，见表3。
表3 治疗组与对照组对癌症病人临床症状改善的观察表 注(1)代表治疗组 (2)代表对照组 结果表明，仙蟾片改善癌症病人的临床症状有很好的疗效，总有效率为40.5％，化疗组改善临床症状极差，总有效率8.0％，两组比较差异有显著性意义(P<0.05)； (四)治疗组和对照组对癌症患者免疫指标的影响，见表4。
表4 治疗组与对照组免疫指标观察表

注(1)代表治疗组成 (2)代表对照组 表4说明，仙蟾片对癌症患者的免疫球蛋白均有提高，化疗组无明显提高。治疗前，两组免疫球蛋白测定值比较差异无显著性意义(P>0.05)，治疗后，两组免疫球蛋白测值比较差异有显著性意义(P<0.05)。
结论 一、仙蟾片按中医理论及组方原则，具有软坚散结，祛瘀化痰，扶正抗癌等作用。应用本药治疗肺癌及消化道癌瘤共425例，总有效率77.4％，化疗组132例，总有效率为57.6％。说明仙蟾片的抗癌作用可与化疗药物媲美。
二、仙蟾片在改善癌症患者症状方面优于化疗组，仙蟾片组为40.5％，化疗组为8.0％，差异有显著性意义，说明仙蟾片抗癌而不伤正气，有扶正祛邪的作用，癌症患者容易接受。
三、仙蟾片对中医辨证属于气血两亏，气滞血瘀型和脾肾阳虚，痰湿内结型的患者均有疗效。与化疗组相比，对于改善脾肾阳虚无明显差异 四、仙蟾片在抗癌的过程中，同时可增强人体免疫球蛋白，而化疗组抗癌同时，损伤了人体的免疫系统。
五、仙蟾片在抗癌毒副作用小，个别病员初服有轻度恶心，但坚持服用一周后，大多自行消失，且食欲加大，体重增多，精神转佳。
总之，仙蟾片具有抗癌扶正，增强免疫，缩小瘤体，提高生存质量，延长生存期的作用，值得推广应用，特别适应不愿接受化疗的患者。
仙蟾片与功能主治有关的主要药效学试验研究 西安交通大学临床药理研究所 受试物仙蟾片(原处方)，每克药片相当于原生药1.86克；仙蟾片(新处方)，每克药片相当于原生药1.82克，将仙蟾片(新处方)与仙蟾片(原处方)进行对比。
样品提供单位杨凌东科麦迪森制药有限公司 试验动物由西安交通大学医学院试验动物中心提供 实验材料 瘤株S180肉瘤实体型，H22肝癌腹水瘤和荷艾氏腹水癌均由四川省抗菌素工业研究所药理室提供。
动物NIH小鼠有四川省抗菌素工业研究所动物实验中心提供。
ICR小鼠由西安交通大学医学院实验动物中心提供。
试验方法和结果 一、仙蟾片对试验性动物肿瘤的影响 1.仙蟾片对小鼠H22肝癌细胞，离心弃去上清液，用生理盐水洗涤二次，再用RPMI1640培养液将其制备成1×107/mL的细胞悬液。设对照组和给药组，用PH6.8含10％小牛血清的RPMI1640培养液将药物稀释成所需的5个浓度，每个浓度设三个平行管，每管加入0.5ml细胞悬液，给药组分别加入0.5ml不同浓度的仙蟾片(原处方)溶液、仙蟾片溶液和阳性对照组阿霉素溶液，对照管加入等体积培养液，混均后置37℃水浴孵育4小时后，置水浴中终止反应。计数活肿瘤细胞数，计算抑制率，结果表明仙蟾片对H22肝癌细胞有明显的抑制作用，虽着药物浓度增加，抑制作用亦增强，结果见表1。
表1 仙蟾片对小鼠H22肝癌细胞体外生长的影响X±SD
*P<0.05 **P<0.05 2.仙蟾片对小数肉瘤S180体内生长的影响 取健康NIH小鼠80只，体重20±2克，动物分三批试验，每批每鼠右腋皮下接种肉瘤S180细胞，5×106个/0.2mL，第二天随机分为五组，生理盐水组(0.2mL/10g)，环磷酰胺组(30mg/kg)，仙蟾片(原处方)小剂量组(125mg/kg)，中剂量组(250mg/kg)，大剂量组(500mg/kg)，仙蟾片小剂量组(125mg/kg)，中剂量组(250mg/kg)，大剂量组(500mg/kg)，灌胃给药等容量0.2mL/10g，每日一次，共10日，于接种后第11天处死动物，解剖取肿瘤称重，重复三批试验，每批单性别。结果均显示仙蟾片有显著的抑制肿瘤生长的作用，三批试验有较好的重复性，同生理盐水组比较，各剂量组均有非常显著意义(P<0.01)，且均达到口服给药的有效抑瘤率，结果见表2，表3，表4。
表2 仙蟾片对小鼠肉瘤S180体内生长的影响 第一批试验(雄性)X±SD
与对照组比 t检验 **P<0.01 表3 仙蟾片对小鼠肉瘤S180体内生长的影响 第二批试验(雌性)X±SD
与对照组比 t检验 **P<0.01 表4 仙蟾片对小鼠肉瘤S180体内生长的影响 第三批试验(雌性)X±SD
与对照组比 t检验 **P<0.01 3.仙蟾片对小鼠荷艾氏腹水癌(EAC)小鼠生存期的影响 取健康NIH小鼠180只，体重20±2克，动物分三批进行试验，每批每鼠腹腔无菌接种荷艾氏腹水癌细胞，5×106个/0.2mL，接种24小时后称体重分组。每批随机分五组，生理盐水对照组；仙蟾片(原处方)小剂量组(125mg/kg)；中剂量组(250mg/kg)；大剂量组(500mg/kg)仙蟾片小剂量组(125mg/kg)；中剂量组(250mg/kg)大剂量组(500mg/kg)；环磷酰胺阳性对照组30mg/kg。各组均灌胃给药，等容量20mL/kg，每日一次，共9日。疗程结束后逐日称体重，观察记录小鼠存活的天数，于第45天计算各组小鼠的平均存活天数，并按下式计算生命延长率
试验重复三批，结果均显示仙蟾片有显著的延长荷艾氏腹水癌小鼠生存期的作用，生命延长率与对照组比较差异均有非常显著意义(P<0.01)，且高剂量组延长率达到50％以上，三批试验有较好的重复性。结果见表5、表6、表7。
表5 仙蟾片对荷艾氏腹水癌小鼠存活天数影响 第一批试验(雄性)X±SD
与对照组比 t检验 **P<0.01 表6 仙蟾片对荷艾氏腹水癌小鼠存活影响 第二批试验(雌性)X±SD
与对照组比 t检验 **P<0.01 表7 仙蟾片对荷艾氏腹水癌小鼠存活天数影响 第三批试验(雄性)X±SD
与对照组比 t检验 **P<0.01 4.仙蟾片对环磷酰胺益瘤抑瘤和降低白细胞作用的影响 取健康ICR小鼠75只，雌雄均有，体重20±2克，每鼠右腋皮下接种肉瘤S180细胞，5×106个/0.2mL，第二天随机分为4组生理盐水对照组(0.2ml/10g)；单纯环磷酰胺组(30mg/kg)；环磷酰胺+仙蟾片(原处方)小剂量组(30mg/kg+250mg/kg)；环磷酰胺+仙蟾片(原处方)大剂量组(30mg/kg+500mg/kg)，环磷酰胺按0.2ml/10g灌胃给药；仙蟾片(新处方)按0.2ml/10g灌胃给药，每日上午9时给环磷酰胺，下午2时给仙蟾片(新处方)，共给药十日。于接种后第11天眼眶取血，进行白细胞计数，并处死取瘤块称湿重。结果显示仙蟾片(新处方)与环磷酰胺联合使用，仙蟾片(新处方)能够对抗环磷酰胺降低白细胞的作用，与环磷酰胺组比较，白细胞数升高，大剂量组差异有非常显著意义(P<0.01)，小剂量组差异无统计学意义(P>0.05)。此外仙蟾片(新处方)大、小剂量对环磷酰胺的抑瘤作用均有非常明显增强作用(P<0.01)，结果见表8。
表8 仙蟾片对环磷酰胺抑瘤率及降低白细白作用影响(X±SD)

同环磷酰胺组比较 t检验 **P<0.01 二、仙蟾片对小鼠免疫功能的影响 1.仙蟾片对小鼠抗羊红细胞凝集素试验的影响 取健康ICR小鼠50只，雌雄各半，体重23±2克，随机分为四组生理盐水组(0.2ml/10g)，左旋咪组(2.4mg/kg)，仙蟾片(原处方)小剂量组(250mg/kg)，大剂量组(500mg/kg)，仙蟾片(新处方)小剂量组(250mg/kg)，大剂量组(500mg/kg)，按0.2ml/10g灌胃给药，每日一次，共给药10日。于11日处死小鼠，取血进行血清凝集素测定，试验结果仙蟾片组的的血清凝集效价明显升高，与生理盐水组比较大、小剂量组差异均有显著意义(P<0.01)，结果见表9。
表9仙蟾片对环磷酰胺抑瘤率及降低白细白作用影响(X±SD)
同对照组比较 t检验 **P<0.01 2、仙蟾片对小鼠脾溶血空斑形成细胞(PFC)的影响 分组及给药方法同上，取受检小鼠脾细胞制备成2×107/mL的细胞悬液，以1mL细胞悬液加1mL2％SRBC，再加14的稀释补体1mL，混均后置37℃水浴1小时，取上清液用721型分光光度计540nm处测OD值。结果显示仙蟾片组的PFC升高，与生理盐水组比较，大剂量组PFC非常明显升高(P<0.01)，小剂量组差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表10。
表10仙蟾片对小鼠脾溶血空斑形成细胞(PFC)的影响(X±SD) 3.仙蟾片对小鼠脾细胞E-玫瑰花结形成的影响 分组及给药方法同上，取小鼠脾细胞，按照张金钟法进行测定。实验结果仙蟾片组E-玫瑰花结形成明显增多，与生理盐水组比较，大剂量组差异有非常显著意义(p<0.01)，小剂量组无统计学意义(P>0.05)，结果见表11。
表11 仙蟾片对小鼠脾细胞E-玫瑰花结形成的影响(X±SD)
同对照组比较 t检验 **P<0.01 4.仙蟾片对外周血酸性α-醋酸萘脂酶(ANAE)的影响 分组及给药方法同上，取小鼠外周血进行测定，试验结果仙蟾片组的ANAE明显升高，与生理盐水组比较，大、小剂量组差异均有非常显著意义(均P<0.01)，结果见表12。
以上1、2、3、4试验结果表明，仙蟾片大剂量对小鼠细胞免疫均有明显增强作用，但小剂量有部分增强作用。
表12 仙蟾片对小鼠外周血酸性α-醋酸萘脂酶(ANAE)的影响(X±SD)

同对照组比较 t检验 **P<0.01 小结 1.仙蟾片(新处方)对H22肝癌细胞体外生长有明显抑制作用，而且随着药物浓度的增高，作用亦增强。
2.仙蟾片(新处方)对小鼠肉瘤S180的体外生长有明显抑制作用，各剂量组与对照组比较差异显著，口服给药均达到有效抑瘤率(30％以上)。对荷艾氏腹水癌小鼠有延长生命率作用，口服给药高剂量组达到延长生命率50％以上。
3.仙蟾片(新处方)有对抗环磷酰胺降低白细胞作用及协同抑瘤作用。
4.仙蟾片(新处方)对小鼠细胞免疫及体液免疫均有明显增强作用。
5.仙蟾片(新处方)与仙蟾片(原处方)呈现同等药效。
权利要求
1、一种改进的仙蟾片药物，其特征在于，制得的该药物的活性成分的原料药的重量份是马钱子粉40-60份，蟾酥0.5-1.5份，补骨脂100-200份，半夏40-60份，郁金40-60份，人参20-40份，黄芪10-30份，当归10-30份，仙鹤草40-60份。
2、如权利要求1所述的改进的仙蟾片药物，其特征在于，所述的原料药的重量份为马钱子粉50份，蟾酥1份，补骨脂165份，半夏50份，郁金50份，人参30份，黄芪20份，当归20份，仙鹤草50份。
3、如权利要求1所述的改进的仙蟾片药物，其特征在于，所述的药物制成丸剂、粉剂、冲剂、膏剂或口服液。
4、权利要求1所述的改进的仙蟾片药物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤
1)补骨脂量的五分之四和蟾酥、半夏干燥后粉碎成细粉，过100目筛，调匀，备用；
2)将剩余的补骨脂粉碎成粗粉和马钱子粉混合，加入5-7倍量的质量分数为65％～75％的乙醇浸渍45小时～55小时，以每分钟3毫升的速度渗
；
3)收集初
液，滤过，滤液回收乙醇制得清膏，备用；
4)将郁金、人参、黄芪、当归、仙鹤草和醇提后的药渣混合，用高效提取浓缩机组，加水煎煮1小时，动态回流提取2小时，滤过，得到滤液；
5)滤液和清膏合并，混压，减压浓缩至相对密度为1.10-1.25的清膏；
6)在清膏中加入细粉与糊精，混匀，加入0.2％硬脂酸镁和蔗糖适量，混匀，压制成片，包薄膜衣，消毒后包装即得。
5、如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的药物制成丸剂、粉剂、冲剂、膏剂或口服液。
6、如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的减压时的温度为68℃～72℃，压力为-0.04MPA。
全文摘要
本发明公开了一种改进的仙蟾片药物，制得的该药物的活性成分的原料药的重量份是马钱子粉40-60份，蟾酥0.5-1.5份，补骨脂100-200份，半夏40-60份，郁金40-60份，人参20-40份，黄芪10-30份，当归10-30份，仙鹤草40-60份。同时还改进了原仙蟾片的制备工艺，同原仙蟾片相比，减少了蟾酥的用量，经过3个批量的，试制，并以此三批样品进行了“蟾酥”含量测定方法学研究及含量限度的确定，证明了改进是成功的，抗癌效果没有减弱。
文档编号A61K36/9066GK101474388SQ20081023655
公开日2009年7月8日 申请日期2008年12月31日 优先权日2008年12月31日
发明者赵东科 申请人:赵东科