专利名称：：自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法
技术领域：
：本发明涉及医药
技术领域：
，具体涉及一种自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法。技术背景自微乳释药系统(self-microemulsifyingdrugdeliverysystem,SMEDDS;self-nanoemulsifyingdrugdeliverysystem,SNEDDS)是山汕相、表面活性剂和助表面活性剂和药物组成的均一、澄清的液体，一般最后制成软胶囊应用。SMEDDS在胃肠道内或37'C环境中，通过胃肠道蠕动或温和搅拌即可自发形成O/W乳剂或粒径小于lOOnm的纳米乳剂，特别是纳米乳剂极大的增加了药物表面积，有利于增加难溶性药物溶出度，提高生物利用度。山于其稳定性好，服用方便，加上环孢素微乳浓縮液软胶囊新山地明(SandimmunNeoml)等产品的面世，近年来国内外药学领域这方面的研究逐渐增多。但这些研究主要是针对单一药物，筛选适合该药物的SMEDDS，并对其体外溶出、体内生物利用度等进行考察；而且目前缺乏一种科学、全面的SMEDDS评价方法。为了弥补现有技术只针对单一药物筛选适合该药物的SMEDDS,本中请人做了大量实验研究，旨在建立一种适合多种药物的SMEDDS公共处方体系，探索SMEDDS中药物性质与处方体系选择的规律性并进行科学评价，建立一种筛选药物的SMEDDS通用模式。
发明内容本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法。本发明的另一个目的是提供了所述建立方法的应用，应用本发明方法建立的三种药物自微乳化给药系统公共处方体系。本发明的目的通过以下技术方案实现一种自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法，其特征在于包括以下步骤(1)选择模型药物和油相、乳化剂及助乳化剂，进行正交设计；(2)确定评价指标，筛选出最佳处方；(3)药物的SMEDDS制备；(4)药物的SMEDDS自徼乳化；(5)根据正交设计的结果进行处方优化，SMEDDS总重量保持不变，按临床剂量加入药物，并根据加入药物剂量调整油、乳化剂、和助乳化剂的比例，筛选最佳处方；(6)采用溶出度评价SMEDDS自微乳给药系统对药物溶出的促进作用。步骤(1)所述模型药物为葛根素、吲哚美辛或莪术油的任意一种。葛根素(PUE)、喷哚美辛(IDM)、莪术油(ZTO)为模型药物，PUE、IDM均为油水难溶性药物，在水中的溶解度分别为4.58g/L、0.004g/L;pH7.4时油水分配系数分别为0.1782、1.49。莪术油为油溶性药物，在水中几乎不溶其主要成分莪术醇在水中溶解度仅为0.3%。步骤(2)所述评价指标包括药物与油、乳化剂、助乳化剂的互溶解状态；乳化速度或透光率；乳化程度；乳化结束后是否液面出现漂浮油层或溶液出现药物沉淀；静置超过15h后稳定情况。本发明同时提供了应用本发明所述建立和评价方法建立的自微乳化给药系统公共处方体系，组成为葛根素、油酸乙酯、吐温80和PEG400，其中油酸乙酯吐温80:PEG400=13:58:13;或者组成为吲哚美辛、油酸乙酯、吐温80和PEG400，其中油酸乙酯吐温80:PEG400-13:58:13;或者组成为莪术油、油酸乙酯、吐温80和PEG400，其中油酸乙酯吐温80:PEG4001-13:58:13。本发明的有益效果是(1)本发明探索了药物性质与自微乳化处方组成的规律性，自微乳化给药系统适合溶解度及分配系数不同的水难溶性药物，为难溶性药物自微乳给药系统的设计提供了科学依据。(2)通过对葛根素、吲哚美辛、莪术油模型药物的系统研究，本发明建立的SMEDDS给药系统，适合具有不同溶解度及油水分配系数的难溶性药物，在处方组成一致及处方总量不变的情况下，根据药物的浓度不同，适当调整组成比例均能得到满意效果。本发明采用多指标综合评价的方式进行SMEDDS处方设计，评价指标更为全面、细化和量化，对于科学、客观及全面评价SMEDDS的质量具有一定的示范作用。图l自微乳粒径分布2紫外一可见光扫描图谱图3人工胃液(肠液)累计溶出百分率具体实施方式下面结合附图和具体实施例来进一步说明本发明。实施例l1仪器ZetasizenNanoZS90纳米粒度及Zeta电位分析仪(英国马尔文)，气浴恒温振荡器(江苏省金坛宏华仪器厂制造)；TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析仪器有限责任公司)；85-2恒温磁力搅拌器(金坛师富华仪器有限公司)；721-100可见分光光度计；数显恒温水浴锅(金坛市富华仪器有限公司)，AY120电子天平(日本导津)，2RS-8G智能溶出试验仪(天大天发科技有限公司)。2试药消炎痛(柳州弘宏德医药有限公司，批号060402);葛根素(惠州市东方植物保健科技有限公司，批号060619);莪术油(河南广晔天然色素有限公司，批号20061116);油酸乙酯(中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号F20060930);CrodamolGTCC(辛酸/葵酸三甘油酯，江门市蓬江区科美达有限公司，批号1(B89);橄榄油(食用)；CremophorEL(聚氧乙烯蓖麻油，德国BASF);其余均为药用辅料。吐温80、吐温85、PEG400(进口分装)；其余试剂均为分析纯。3.方法与结果(1)选择模型药物和油相、乳化剂坎助乳化剂，进行正交设计-,在查阅文献及预试验的基础上，选择PUE、IDM、ZTO为模型药物，按表1所示选择不同的油相(A)、乳化剂(B)、及潜溶剂(C)，按表2所示正交试验表L9(34)进行试验，试验设计及观察指标见附图14。(2)确定评价指标，筛选出最佳处方；观察指标的选择中，药物及其油、乳化剂、助乳化剂在体系中的互溶状况不仅关系到制剂的质量及稳定性，同时关系到药物在制剂的溶解度及在胃中形成乳剂后的分散程度、体外溶出度、体内生物利用度及乳化程度，因此作为重要的评价指标之一。乳化速度、乳化程度(透光率)、乳化后液面是否有漂浮油层、静置超过15h后是否有药物析出及程度能更全面地衡量自微乳化的效果，而成为另外四个评价指标。当微乳形成时溶液外观澄清透明，透光率很高，当透光率不再变化，表示乳化达到平衡。微乳化程度越高，浊度越低，透光率越高，形成的微乳稳定性越好，质量越高。把5个指标进行综合评分，分数越高越好，满分为IOO分。药物与油、乳化剂、助乳化剂的互瘤解状态占25分完全溶解不分层25分，溶解分层15分，部分溶解但不分层15分，部分溶解而且分层10分；透光率占30分透光率10097%，30分，9780%，25分，8050%，20分，其他依此类推，进行打分；乳化速度占15分透光率达平衡的时间《min，15分，12min，12分，23min，8分，其余5分；乳化结束后液面出现漂浮油层和溶液出现药物沉淀占15分没有油层和药物沉淀15分，有油层或药物沉淀10分，既有油又有药物沉淀5分；静置超过15h后稳定情况没有油水分层和药物沉淀15分，有分层或药物沉淀10分，既有分层又有沉淀5分。表2说明，三种因素中，乳化剂的影响最小，而油与助乳化剂的影响均较大，PUE、IDM、ZTO三种模型药物SMEDDS的组成中油相均为油酸乙酯，助乳化剂均为PEG400，而乳化剂却有两种选择吐温80与Cremophoi:EL。验证结果说明乳化剂为吐温80时总分较高，效果更好。表l.因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表2SMEDDS止:交表U(3"试验设计及试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>(3)药物的SMEDDS制备；以药(PUE、IDM、ZTO):油相乳化剂助乳化剂=6.25:30:45:18.75进行试验。称量适量的油、乳化剂、助乳化剂，搅拌混合均匀后，加入处方量的药物，6(TC水浴加热溶解，得均匀透明粘稠状液体，静置24h，观察溶解及分层情况，备用。(4)药物的SMEDDS自微乳化；将步骤(3)制备的PUE、IDM、及ZTO的SMEDDS取0.5ml滴入37t:的100ml蒸馏水中，并采用慢速磁力搅拌，120转/min，分别于0.5、1、1.5、2...min取样，700nm处药物及辅料自身均无吸收，选择在700nm处测定透光率T，当T值不再变化，即乳化完全，即可停止搅拌，观察液面是否有油层及溶液是否澄清，有无药物结晶析出，放置15h观察油水分层及药物沉淀。(5)根据正交设计的结果进行处方优化，SMEDDS总重量保持不变，按临床剂量加入药物，并根据加入药物剂量调整油、乳化剂、和助乳化剂的比例，筛选最佳处方；根据正交设计的结果进行处方优化，SMEDDS总重量保持不变，按临床剂量加入PUE70mg/g、IDM50img/g或ZTO200mg/g，并根据药物剂量调整油、乳化剂、助乳化剂的比例筛选最佳处方。选择药物、乳化剂、助乳化剂互溶(没有分层)，在自微乳区域内选择乳化速度快(2min以内)，乳化效果好(乳化后澄清透明，透光率>98%，静置15h后没有药物析出)，乳化剂用鹭较低的为最佳处方。从表2中可以筛选得到PUE、IDM、ZTO选择的处方组合均为药物、油酸乙酯、吐温80、PEG400。PUE、IDM、ZT03个药物SMEDDS的总重量均为0.5g，SMEDDS总重量保持不变，根据正交设计的结果，按临床剂量加入PUE70mg/g、IDM50mg/g或ZTO200mg/g，并根据药物剂量调整油、乳化剂、助乳化剂的比例筛选最佳处方，经过大量的对比实验，获得除药物外，油、乳化剂、助乳化剂的最佳比例分别为PUE(13:58:13);IDM(13:58:13);ZTO(13:58:13)。分别将三个最佳处方按步骤(4)操作，乳化完全后采用激光粒度仪测定粒度，其粒径分布见附图1。附图1中A为PUE-SMEDDS、B为IDM-SMEDDS、C为ZTO-SMEDDS，横坐标表示粒径大小(size)。PUE、IDM、ZTO自微乳的平均粒径分别为14.2、18.0、66.4nm，多分散系数分别为0.040、0.132、0.156。可见，PUE、IDM、ZTO自微乳液的粒度均小于70nm，粒度分布范围窄，粒径均匀。(6)采用溶出度评价SMEDDS自微乳给药系统对药物溶出的促进作用。体外溶出度评价采用步骤(5)确定的最佳处方进行。1、药物及空白自微乳给药系统紫外扫描称取PUE、IDM、ZTO标准品及空白SMEDDS适量，分别用无水乙醇溶解，人工胃液(肠液)适当稀释，在200400或600nm扫描，发现在200300nm，辅料有较大的紫外吸收，而在300400nm或600nm，几乎没有吸收，见附图2，其中a为葛根素；b为吲哚美辛(人工肠液)；c为吲哚美辛(人工胃液)；d为莪术油。2、绘制标准曲线精确称取PUE标准品10.0mg，无水乙醇溶解并定容至100mL，精确吸取2.51111，人工胃液稀释至10ml，在200400nm间扫描，发现在305nm处有最大吸收峰，见附图2a。精密吸取1、1.5、2、2.5、3mL该标准液，用人工胃液稀释至10mL，于305nm测定吸收值A，计算回归方程，得A-0.0261C+0.0212，R=0.9997。精确称取IDM标准品10.0mg，无水乙醇溶解并定容至100mL，精确吸取2.5ml,人工肠液(胃液)稀释至10ml，在200400nm间扫描，发现在320nm处有最大吸收峰，见附图2b和附图2c。精密吸取l、1.5、2、2.5、3、3.5、4mL该标准液，用人工肠液(胃液)稀释至10mL，于320nm测定吸收值A，计算回归方程，得A-0.0181A+0.0174，R=0.9995。精确称取ZTO标准品60,Omg，无水乙醇溶解并定容至lOOml作为标准液，取该标准液3.51111，加1.5ml乙醇和3ml人工胃液，香草醛硫酸溶液定容至25ml，放置lh后在200600nm扫描，发现在507nm有一吸收峰，辅料在该波长处没有吸收，可以作为测定波长，见附图2d。精确移取标准液1、1.5、2、2.5、3、3.5、4ml，分别加乙醇至5ml，按上法配制并在507腿处测定吸收值A，计算回归方程，得A二0.0078C—0.0063，R=0.9995。3、含量测定PUE-SMEDDS含量测定精确称取PUE-SMEDDS约50mg，无水乙醇溶解并定容至25mL，精密移取1.5mL，人工胃液定容至10mL，同法配制空白溶液。305nm测定吸收度值。得PUE-SMEDDS的百分含量为(7.86±0.15)%(n=3)。IDM-SMEDDS含量测定精确称取IDM-SMEDDS约100mg，无水乙醇溶解并定容至25mL，精密移取2mL，人工肠液定容至10mL，同法配制空白溶液。320nm测定吸收度值。得IDM-SMEDDS的百分含量为(5.12±0.04)%(n=3)。ZTO-SMEDDS含量测定精确称取ZTO-SMEDDS约125mg，无水乙醇溶解并定容至25mL。取2mL，加3.5ml乙醇和3ml人工胃液，香草醛硫酸溶液定容至25ml，放置lh后，同法配制空白溶液，507nm测定吸收值。得ZTO-SMEDDS的百分含量为(18.15±0.22)%(n=3)。4、溶出度测定取PUE-SMEDDS、IDM-SMEDDS、ZTO-SMEDDS，装入胶囊，0.5g/粒，和它们的对照品愈风宁心片、吲哚美辛肠溶衣片、莪术油油溶液，自制，装入胶囊，按《中国药典》2005版方法，以人工胃液及人工肠液为溶出介质，为了减少胃剌激，市售吲哚美辛口服制剂均为肠溶型，所以考察IDM-SMEDDS在人工肠液中的溶出情况，分别于5、8、11、14、17、20、28、36、45min取5mL(0.45"m微孔滤膜过滤)，立即补充人工胃液5mL，PUE、IDM滤液取适量用人工胃液(肠液)稀释，ZTO取3ml滤液，加入5ml乙醇，香草醛硫酸溶液定容至25mL，对应波长处测定吸光值A，并通过标准曲线转换为累积溶出百分率，结果见附图3，附图3中各曲线标记如下^~PUE—SMEDDS+Yu￡engnii^xinTabletIIM-S遞DIK(Artificialintestirialjuice)IIMEntericTaMet~*~IM~SMEDOS(ArtificialGastricJuice)~~ZTO"SMEDDS~s~ZTOOilSolution可见，PUE-SMEDDS、IDM-SMEDDS、ZTO-SMEDDS均在20min内溶出度超过95%，远高于对照片或对照胶囊。实验结论通过对葛根素、吲哚美辛、莪术油模型药物的系统研究，本发明建立的SMEDDS给药系统，适合具有不同溶解度及油水分配系数的难溶性药物，在处方组成一致及处方总量不变的情况下，根据药物的浓度不同，适当调整组成比例均能得到满意效果。本发明采用多指标综合评价的方式进行SMEDDS处方设计，评价指标更为全面、细化和量化，对于科学、客观及全面评价SMEDDS的质量具有一定的示范作用。本发明选择的三个乳化剂吐温80、CremophorEL、吐温85的HLB值分别为15、13.5、10，从三个模型药物的正交实验结果来看，HLB值高自乳化效果更好，自乳化区域更大。吐温85对三个药物乳化情况均不理想。SMEDDS—般是均匀透明的溶液，这不仅关系到制剂的质量及稳定性，同时关系到药物在制剂中的溶解度及在胃中形成乳剂后的分散程度、体外溶出度、体内生物利用度，药物、油相、乳化剂、助乳化剂的恰当比例，这是SMEDDS处方设计的关键之一，本发明选择合适的乳化剂及助乳化剂增加药物在油相的溶解度及各相的相容性，对于形成良好SMEDDS有极大帮助。随着助乳化剂用量的增加，乳化时间加快，但微乳的稳定性逐渐降低，超过某一比例后未乳化前就会出现分层。随着处方中乳化剂的比例的增加，粘稠度增加，乳化时间加长，但微乳的稳定性增强，长时间(>17h)室温放置不容易析出药物。不同性质的药物对SMEDDS影响不伺，油水分配系数大的脂溶性药物易溶于油相，可以增大载药量。溶解度小，油水分配系数也较小的药物载药量较小，而且自乳化后长时间放置会出现混浊。可能与自乳化后乳化剂和助乳化剂浓度的降低，对药物的增溶作用降低，而药物在油相的溶解度相对较小而从乳滴内核中泄漏出来有关。本发明考虑药物的有效剂量问题，剂量高而油水分配系数小的难溶性药物不适合制成SMEDDS。从三个模型药物的粒度分布图附图1可以看出，随着药物在处方中所占比例的增加，其自乳化后的乳滴粒径逐步增加，相应的粒度分布也随之增加。当处方总量不变时，药物量增加，必然要减少其他成分的量包括乳化剂、助乳化剂及油相的量，使整个体系的乳化能力下降。三个模型药物SMEDDS的溶出度均显著超过对照产品，SMEDDS生产工艺简单，可成为提高难溶性药物生物利用度及临床疗效的有效途径。权利要求1、一种自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法，其特征在于包括以下步骤(1)选择模型药物和油相、乳化剂及助乳化剂，进行正交设计；(2)确定评价指标，筛选出最佳处方；(3)药物的SMEDDS制备；(4)药物的SMEDDS自微乳化；(5)根据正交设计的结果进行处方优化，SMEDDS总重量保持不变，按临床剂量加入药物，并根据加入药物剂量调整油、乳化剂、和助乳化剂的比例，筛选最佳处方；(6)采用溶出度评价SMEDDS自微乳给药系统对药物溶出的促进作用。2、根据权利要求1所述建立和评价方法，其特征在于步骤(1)所述模型药物为葛根素、吲哚美辛或莪术油的任意一种。3、根据权利要求1所述建立和评价方法，其特征在于步骤(2)所述评价指标包括药物与油、乳化剂、助乳化剂的互溶解状态；乳化速度或透光率；乳化程度；乳化结束后是否液面出现漂浮油层或溶液出现药物沉淀；静置超过15h后稳定情况。4、一种权利要求1所述建立和评价方法建立的自微乳化给药系统公共处方体系，其特征在于组成为葛根素、油酸乙酯、吐温80和PEG400，其1'油酸乙酯吐温80:PEG400-13:58:13。5、一种权利要求1所述建立和评价方法建立的自微乳化给药系统公共处方体系，其特征在于组成为吲哚美辛、油酸乙酯、吐温80和PEG400，其屮油酸乙酯吐温80:PEG400-13:58:13。6、,巾权利要求1所述建立和评价方法建立的自微乳化给药系统公共处方体系，其特征在于组成为莪术油、油酸乙酯、吐温80和PEG400，其屮油酸乙酯吐温80:PEG4001-13:58:13。全文摘要本发明公开了一种自微乳化给药系统公共处方体系的建立及评价方法，适合多种药物，选择葛根素、吲哚美辛、莪术油为模型药物，采取正交设计，以溶解状况、乳化速度、乳化程度、液面浮油层、分层沉淀等多指标综合体系，对自微乳化系统中的油相、乳化剂及助乳化剂的组成、用量进行研究，筛选最佳处方组成和组成比例。本发明采用多指标综合评价的方式进行SMEDDS处方设计，评价指标更为全面、细化和量化，对于科学、客观及全面评价SMEDDS的质量具有一定的示范作用。文档编号A61K31/7042GK101239039SQ20081002561公开日2008年8月13日申请日期2008年1月2日优先权日2008年1月2日发明者丁沐淦,林丹荣,龙晓英申请人:广东药学院