胰腺癌的免疫疗法药物以及免疫疗法的制作方法

专利名称：胰腺癌的免疫疗法药物以及免疫疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于胰腺癌患者的、使用了免疫疗法药物的免疫疗法药物以及免疫疗 法。该免疫疗法药物以源自患者自身的外周血淋巴细胞所培养的活化淋巴细胞为主成分， 在活化淋巴细胞中包含高比率的⑶3TD56+NK细胞。
背景技术：
各种针对癌症的免疫疗法是公知方法。尤其是，过继免疫疗法，通过用抗体刺激患 者自身的外周血淋巴细胞，对其进行培养使其增殖，由此活化淋巴细胞。然后，活化淋巴细 胞作为所谓的免疫疗法药物对该患者进行给药。活化淋巴细胞具有免疫应答功能。活化淋 巴细胞中包含对肿瘤细胞具有细胞杀伤活性的T细胞和NKfcatural killer 自然杀伤细 胞)细胞。NK细胞是人的外周血淋巴细胞中含有10 20%的大颗粒淋巴细胞。活化的NK 细胞对肿瘤细胞和病毒感染细胞等具有非特异性的细胞杀伤活性或抗体依赖性细胞杀伤 活性(ADCC)。非特异性的NK细胞不需要像T细胞和B细胞那样通过抗原来致敏。因而， NK细胞一被癌组织诱导就直接分子特异性地攻击肿瘤细胞。活化的NK细胞的表面表达出 能以肿瘤细胞为靶的 NKG2D、TRAIL(TNF Related Apoptosis Inducing Ligand 肿瘤坏死 因子相关凋亡诱导配体)等表面受体。专利文献1 4公开了选择性地使外周血淋巴细胞中含有的各种细胞增殖的培养 方法。专利文献1 3涉及以比较高的比例使NK细胞增殖的方法。专利文献4涉及NK细 胞的比例极少或几乎不含有NK细胞的方法。专利文献1 日本特许第3056230号公报专利文献2 日本特开2002-45174号公报专利文献3 日本特开2006-340698号公报专利文献4 日本特许第3951350号公报非专利文献1 =Heinemann V, et al. BMC Cancer (BMC 癌症)2008,8 :82非专利文献2 Tanaka T，et al Jpn J Clin Oncol (临床肿瘤学杂志)2008，38 755非专利文献 3 =Okusaka T, et al. Cancer Chemother Pharmacol 2008,61 :615# 专禾I」JC ^ 4 Strumberg D, et al. 2009 Gastrointestinal Cancers Symposium, Abstract#195非专利文献 5 =Nakamura K, et al. Br J Cancer 2006,94 :1575非专利文献6 =Ueno H, et al. 2007ASC0, Abstract#4550非专利文献7 :Lee G, et al. 2008ASC0, Abstract#15577非专利文献8 :Kim MY, et al. Jpn J Clin Oncol 2009,39 :49

发明内容
发明要解决的问题专利文献1中记载了 3例使用培养的活化淋巴细胞的免疫疗法。其对象是恶性黑 色素瘤或肝癌。专利文献2中，使用培养时采用的增殖刺激用抗体，测定对肿瘤细胞的细胞 杀伤活性。但是，并未记载对患者使用的实际的应用例。另外，各种对癌症的免疫疗法中， 除了使用以NK细胞为主体的淋巴细胞的方法以外，也有使用以T细胞等为主体的淋巴细胞 的方法(专利文献4)等。但是，对胰腺癌有效的免疫疗法还未有人提出。胰腺癌是起因于胰腺的结构，脏器 的上皮细胞中产生的癌容易浸润至脏器外部，并且，容易转移至全身的癌症。因此，在诊断 为胰腺癌的时候经常已发展成晚期癌症。结果，与胃癌和大肠癌等相比，能够切除的病例要 少两成左右，手术后的生存率也低。顺便说一下，非专利文献1 8报告了对胰腺癌患者仅 用抗癌药进行治疗时的诊断后1年中的生存率。这些生存率除了非专利文献5中达到
以外，几乎都在15 33%的范围内。胰腺癌是预后极差的代表性癌症。这样，由于胰腺癌发展极快，因此，即使是对胰脏以外的脏器的癌症有效的免疫疗 法，也不能说对胰腺癌是有效的。本发明的目的是提供一种对胰腺癌有效的免疫疗法药物 以及免疫疗法。解决问题的手段本发明的胰腺癌的免疫疗法中使用的免疫疗法药物具有以下构成。本发明的免疫疗法药物是通过利用抗CD3抗体和抗CD52抗体对胰腺癌患者的自 身外周血淋巴细胞进行刺激来培养得到的免疫疗法药物。本发明的胰腺癌的免疫疗法具有通过利用抗CD3抗体和抗CD52抗体对胰腺癌患 者的自身外周血淋巴细胞进行刺激来培养得到免疫疗法药物的步骤；将得到的免疫疗法药 物对胰腺癌患者至少给药4次的步骤。免疫疗法每一次的给药量包含至少15 X IO9个活化 淋巴细胞。这些活化淋巴细胞中⑶3TD56+NK细胞的比率至少是30%。此外，对处于以下 的(a) (d)所构成的免疫低下状态的组中的至少一个状态的患者开始进行免疫疗法药物 的给药。(a)外周血中的淋巴细胞的数量小于1000/μ 1。(b)外周血中的淋巴细胞中⑶3TD56+NK细胞的数量小于200/μ 1。(c)外周血中的⑶3XD56+NK细胞的活性小于30%。(d)外周血中的NKG2D+淋巴细胞的数量小于400/μ 1。此外，对外周血中的⑶4+淋巴细胞与⑶8+淋巴细胞之比超过3的胰腺癌患者开始 给药上述免疫疗法药物是合适的。另外，给药的活化淋巴细胞的其余部分为⑶4+Τ细胞及⑶8+Τ细胞之中的任一种或 这两种，这是合适的。另外，将免疫疗法药物与抗癌药并用是合适的。发明效果发明人在专利文献3中公开了由30ml左右的外周血来大量增殖⑶16+NK细胞的 培养技术。CD16+NK细胞与CD3—CD56+NK细胞等同。本发明的免疫疗法中使用的免疫疗法药 物以通过基于该培养技术的大量培养方法所得到的活化淋巴细胞为主成分。该活化淋巴细胞与通常的外周血淋巴细胞相比，包含高比率的活化NK细胞，即⑶3XD56+NK细胞。无论有无手术，多数胰腺癌患者被施以利用抗癌药的治疗。仅使用抗癌药的治疗 的开始后ι年间的生存率(以下称作“1年生存率”)，基本在15 33%的范围内(非专利 文献1 8)。与此相对，实施了本发明的免疫疗法的27个病例所构成的实施例中，得到了 63%这样的高的1年生存率。这对发展快速的胰腺癌来说是突破性的结果。这些实施例 中，从免疫疗法开始后的生存期间来看，并用抗癌药的病例与仅使用免疫疗法的情况相比， 得到了更好的结果。本发明的免疫疗法，通过将含有高比率的活化NK细胞的免疫疗法药物，应用于特 定的给药量和特定的对象患者(处于特定的免疫低下状态的胰腺癌患者)，实现了使其生 存率大幅度提高的效果。实现的生存率的高比率显著超过胰腺癌以往预测的范围。这里，对患者自身外周血进行培养所得到的活化淋巴细胞数量及其中所含的NK 细胞的比率，存在个人差异非常大的问题。另外，即使活化淋巴细胞的数量以及NK细胞的 比率相同，也存在其效果的个体差异大的问题。因而，难以表示出对每个人都能确实得到效 果的给药条件的明确边界值。发明人发现，设定以下的免疫疗法的给药条件和患者条件是有效的，S卩，不以个人 为单位而是在患者集体中以统计上的高概率得到良好结果的免疫疗法的给药条件和患者 条件。作为本发明免疫疗法特征的给药条件和患者条件，具有作为能以统计上的高概率大 幅延长胰腺癌诊断后的总生存期的指标的意义。在本发明中，基于包含27个病例的实施例的中位数，特别指定给药条件和患者的 免疫状态条件。上述的1年生存率为63%，这是由全部实施例得到的效果。因而，如果以 全部实施例的中位数以上的条件进行免疫疗法药物的给药的话，则能够预期统计上得到更 高的1年生存率。另外，在全部实施例中，也包含不并用抗癌药而仅应用本发明的免疫疗法 药物的病例。因而，如果一定并用抗癌药的话，则可预期能够在统计上得到更高的1年生存 率。可以说确保实现了 1年生存率至少是63%。在该意思中，本说明书中记载的本发明的“实施例”的概念与通常的实施例的概念 略微不同。通常，所说的实施例是符合专利权利要求保护范围的必要条件的例子。但是，在 本发明中，基于“实施例”的中位数，将其中位数以上的条件设定为专利权利要求保护范围 的必要条件。结果，本发明的“实施例”中，也包含未必符合专利权利要求保护范围的必要 条件的例子(相当于小于中位数的条件)。这些病例也许可说成是参考例，但也是为了确定 中位数而必要的病例。因此，在本说明书中，将为设定专利权利要求保护范围的必要条件而 实施的全部病例称作“实施例”。对于发展快的胰腺癌的癌组织或者对于免疫机能低下的生物体，需要给予很大的 免疫影响。发明人发现有效的做法是，在免疫疗法中一次性地给药尽量大量的活化淋巴细 胞，给药的活化淋巴细胞至少含有30%的⑶3TD56+NK细胞，并且至少给药4次。免疫疗法 药物的每一次的给药量所含有的有效果的活化细胞数量至少是15X109个。这对于以往的 免疫疗法而言，相当于通常给药的活化淋巴细胞数量的3倍以上。在被给药的胰腺癌患者处于免疫状态低于健康人的情况下，可看出免疫状态的大 幅改善。所说的低的免疫状态是指符合以下状态中的至少一种状态的情况(a)外周血中 的淋巴细胞的数量小于1000/μ 1的状态；(b)外周血中的淋巴细胞之中⑶3—CD56+NK细胞数量小于200/μ 1的状态；(c)外周血中的CD3TD56+NK细胞的活性小于30%的状态；(d)外 周血中的NKG2D+淋巴细胞的数量小于400/μ 1的状态。通过对患者的外周血采血并测定它 们的免疫状态，能够判定本发明的免疫疗法的开始时期，即免疫疗法药物的给药开始时期。尤其是在患者的免疫状态低下，且达到上述(a) (d)中任一个范围的边界值的 时刻，开始治疗是最理想的。在患者的免疫状态被维持在与健康人相同程度的情况下，认为 由给药免疫疗法药物所引起的免疫影响少(其中，由于原本良好地维持免疫状态，因此在 结果上，生存期间成为长期的比例多)。另一方面认为，伴随着患者全身状态的恶化而免疫 状态较之边界值大幅降低的情况下，开始免疫疗法往往已经过迟了。另外，外周血中的⑶4+淋巴细胞和⑶8+淋巴细胞之比超过3也是免疫低下状态的 判断指标之一。此外，给药的淋巴细胞的其余部分是⑶4+T细胞和⑶8+T细胞中的任一种或这两 者，由此，可获得与CD3—CD56+NK细胞协同的改善效果。这是因为，具有细胞杀伤活性的 NKG2D+淋巴细胞中，除了 NK细胞以外，也包含一部分⑶8+T细胞。


图1是表示免疫疗法中使用的本发明的免疫疗法药物即活化淋巴细胞的流式细 胞仪的测定结果的图。图2是就实施例和适合例分别对表7的给药淋巴细胞数量绘图而制得的图。图3是就实施例和适合例分别对表7的NK细胞比率绘图而制得的图；图4是对表6的比较例(健康人)的外周血淋巴细胞数量、表8的实施例(胰腺癌 患者总体)以及适合例(长期生存者)的外周血淋巴细胞数量分别进行绘图而制得的图；图5是对表6的比较例(健康人)的NK细胞数量、表8的实施例(胰腺癌患者总 体)以及适合例(长期生存者)的NK细胞数量分别进行绘图而制得的图；图6是对表6的比较例(健康人)的NK活性、表8的实施例(胰腺癌患者总体) 以及适合例(长期生存者)的NK活性分别进行绘图而制得的图；图7是对表6的比较例(健康人)的NKG2D+细胞数量、表9的实施例(胰腺癌患 者总体)以及适合例(长期生存者)的NKG2D+细胞数量分别进行绘图而制得的图；图8是对表6的比较例(健康人)的⑶4/⑶8比、表9的实施例(胰腺癌患者总 体)以及适合例(长期生存者)的⑶4/⑶8比分别进行绘图而制得的图。
具体实施例方式本发明的免疫疗法药物含有的主成分是对胰腺癌患者自身的外周血淋巴细胞进 行培养增殖而得到的活化淋巴细胞。使用该免疫疗法药物进行免疫治疗。活化淋巴细胞之 中含有活化NK细胞。这些活化NK细胞通过⑶3_和⑶56+的表面标记被识别。对外周血淋 巴细胞应用专利文献3中记载的培养增殖方法，由此，能够以高比率获得⑶3XD56+NK细胞。图1表示一个实施例中使用的免疫疗法药物的流式细胞仪的测定结果。横轴 FLl-H表示表面标记⑶3的荧光强度，纵轴FL2-H表示表面标记⑶56的荧光强度。用圆 围住的部分表示CD3TD56+NK细胞的存在。该测定结果中，活化淋巴细胞包含约45 %的 ⑶3XD56+NK细胞。外周血淋巴细胞培养后的活化淋巴细胞所含有的⑶3XD56+NK细胞比率中，存在较大的个体差异。在后述的实施例中，⑶3TD56+NK细胞比率分散于10 70%的范 围内。对各患者来看，培养后的⑶3XD56+NK细胞比率比该患者的培养前的NK细胞比率有 所增高。图1的流式细胞仪中的中央下侧的另一点群表示活化T细胞。活化T细胞主要由 ⑶4+T细胞和⑶8+T细胞构成。本发明的免疫疗法药物也可以在胰腺癌诊断之后单独应用。但是，已经明确的是， 通过并用本发明的免疫疗法药物和抗癌药，能得到更大的效果。每一次的给药量所含有的活化淋巴细胞的数量优选至少为15X IO9个。这相当于 在通常的免疫疗法中给予的细胞数量的3倍以上。后述的实施例中的最高值约为18X109 个。给药的活化淋巴细胞中，优选至少含有30%的⑶3TD56+NK细胞。给药次数至少为4次 才是有效的。此外，本发明的免疫疗法药物，对处于由以下的(a) (d)构成的免疫低下状态的 组中至少一种状态的胰腺癌患者进行给药，是合适的。(a)外周血中的淋巴细胞的数量小于1000/μ 1 ；(b)外周血中的淋巴细胞之中⑶3TD56+NK细胞数量小于200/μ 1 ；(c)外周血中的⑶3XD56+NK细胞的活性小于30% ；(d)外周血中的NKG2D+淋巴细胞的数量小于400/μ 1。在后述的实施例中确认为，上述(a) (d)的免疫低下状态可以说是免疫机能比 健康人显著低的状态。对处于免疫低下状态的患者，一次给药大量的CD3—CD56+NK细胞，由 此，能够对低下的免疫机能给予大的影响。包括后述的27个病例的实施例中，1年生存率为63%。该1年生存率63%较之以 往的胰腺癌的1年生存率是非常良好的效果。在本发明的免疫疗法中，基于全部实施例的 中位数，分别设定每一次给药量所含的活化淋巴细胞数量和CD3TD56+NK细胞比率。S卩，分 别设定中位数以上的范围。因而，如果以这些中位数作为最低值来应用本发明的免疫疗法 的话，则可以预期得到比全部实施例得到的63%更高的1年生存率。这里，中位数原本是 测定值，因此，应该严密地考虑有效数字。但是，在本发明中，作为用于得到更高的生存率的 “指标”而采用了中位数，因此，与有效数字无关而采用概算的数值。此外，对外周血中的⑶4+T细胞和⑶8+T细胞之比超过3的患者给药是合适的。 CDS+T细胞的减少也是免疫低下状态的指标之一。因而，在胰腺癌患者中，具有CD4+T细胞 和⑶8+T细胞之比的数值比健康人大的倾向。在长期生存者(免疫疗法开始后生存10个月以上)中，可以看出在给药前后，外 周血中的NKG2D+淋巴细胞的数量显著增加。此外，也可以看出外周血中的淋巴细胞数量的 增加、NK细胞数量的增加、NK活性的增大以及CD4/CD8比的降低。在短期生存者(免疫疗 法开始后5个月内死亡)中，在给药前后这些参数没有显著性差异。从这些事实推测出，通 过免疫疗法药物的给药使得患者从免疫低下状态快速地增强免疫机能，这与生存期间的延 长相关。除了末期状态的患者，由免疫疗法所带来的免疫机能的快速增强的程度，存在较 大的个体差异。因而，难以示出每个人确实得到效果的给药条件和患者的免疫状态条件的 明确的边界值。但是，如果按照上述给药条件和患者免疫状态条件来给药免疫疗法药物的话，在统计上以概率来计，可预期得到比63%高的1年生存率。这是因为，就上述给药条件 和患者免疫状态条件而言，是将表示1年生存率63%的实施例的集体中的中位数设定成了 最低值。实施例(1)淋巴细胞的培养增殖方法通过以下工序，进行胰腺癌患者的自身外周血淋巴细胞的培养增殖。工序1:使抗 CD3 抗体(0. 1 μ 1/ml, Orthoclone 0KT3,可从 JANSSENPHARMACEUTICAL K. K.购得)和抗 CD52 抗体 QO 40 μ 1/ml，MABCAMPATH，可从拜 耳公司购得)溶解于磷酸缓冲液(PBS) 20ml中。工序2 将工序1的溶液装入225cm2的烧瓶中，在4°C静置一夜。工序3 对固相化的抗⑶3抗体和抗⑶52抗体用PBS洗涤2次。工序4:从胰腺癌患者身上采取加肝素的外周血30ml，通过采用安玛西亚 (Ficoll-Paque Plus)(可从安发玛西亚生物技术公司(Amersham PharmaciaBiotech)有限 公司购得)作为介质的密度梯度离心法，分离外周血单个核细胞(PBMC)。工序5 使工序4中分离的PBMC以0. 5 1 X 106/ml的浓度悬浮于含有IL-2 (500 单位/ml，可从Chiron公司购得)的细胞培养用培养基KBM-NKCGM-1 (可从K0HJINBI0公司 购得)，进一步加入患者血浆2 10%，制成培养液。在该阶段，培养液为60 120ml。将 该培养液添加于对工序3中得到的处理过固相化抗体的培养烧瓶。然后，在5% CO2培养器 内，37°C的环境下进行培养。这里，患者血浆也可以用由健康人获得的血清来代替。工序6 从培养开始后的第3 5天，确认出生成多个集落，母细胞化(blast化)， 进一步追加20 100%的培养液，添加500单位/ml的IL-2。通常，这个时期是培养开始 后的第3天。工序7 在工序6中追加培养液后进入对数增殖期的第1 3天(多数是第1天)， 向KBM-NKCGM-1B ( 一升装的包)中注入包含活化淋巴细胞的培养液。通常，将其分注于2 3包。分注后间隔3 4天，在每包中添加100 300ml的KBM-NKCGM-1以及10 20万单 位的IL-2。工序8 在培养开始第14 21天(由于22天以上时往往活性降低)，将培养液从 包中移至离心管，在600G下将其离心10分钟。从离心管中抽吸上清液，残留颗粒。然后， 对颗粒加入PBS进行洗涤，再次进行离心操作。该操作重复2 3次，充分洗涤培养的淋巴 细胞。最后，收集颗粒，使其悬浮于生理盐水IOOml中，在其中添加2 4%的人血清白蛋 白。最后，确认无菌检测和内毒素检测为阴性。(这里，得到的淋巴细胞悬浮液，在制备后4小时以内，用30 60分钟从患者的外 周静脉给药。)工序9 (成分解析)对于悬浮于生理盐水的淋巴细胞，将规定数量的细胞取入到 Eppendorf管(微量离心管)中，在其中加入规定的标记抗体，用常规方法对细胞染色。染 色后的细胞直接用流式细胞仪解析，求出CD3—CD56+NK细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的比率 (参照图1)。(2)培养增殖后的活化淋巴细胞的特征培养增殖后的活化淋巴细胞通过流式细胞仪，得到如下结果。
活化淋巴细胞所含有的NK细胞以及T细胞的细胞表面上，发现了 CXCR3趋化因子 受体、NKG2D、TRAIL的高表达。NK细胞中，发现了特异性的活化受体NKp30、NKp44、NKp46 的表达。另外，发现了在癌症患者中低下或阴性化的信号转导分子⑶3 ζ链、DAP12、Fc ε Rl 的再表达。另外，NK细胞中IFNy持续产生，至少3周的培养期内，可维持较高的细胞杀伤 活性(通过以Κ562为靶的常用方法)。具体而言，从第21天的培养淋巴细胞中纯化NK细 胞，测定该细胞杀伤活性时，50% lysis的E/T比为1. 07，为高活性(越是低的值，表示越是 高活性)。顺便提一下，用CD3抗体培养的活化T淋巴细胞，是71. 45。(3)对胰腺癌患者的给药方法上述淋巴细胞的培养增殖方法的工序8之后，在4个小时以内，将悬浮于生理盐水 的淋巴细胞，用30 60分钟从患者的外周静脉给药。(4)通过免疫疗法治疗胰腺癌患者的治疗效果(4-1)总生存期和治疗后生存期的结果表1的上栏表示应用本发明的免疫疗法的胰腺癌患者(实施例)的总生存期和1 年生存率的结果。以从胰腺癌的最初诊断后至2009年4月时的全部病例的诊疗记录为基 础。所有病例都进行4次以上的免疫疗法药物的给药。就给药3次以下的其他病例而言， ECOG PS (Eastern Cooperative Oncology Groupperformance status (美国东部月中瘤协作 组体力状态)，以下简记为“PS”)为3 4，全身状态差，是末期状态，因此在开始免疫疗法 2个月之内死亡，所以，这样的病例不包含于实施例中。实施例的27个病例中，有21个病例 并用了抗癌药。6个病例没有用抗癌药，而仅用本发明的免疫疗法进行治疗。表1的下栏的8个比较例，表示仅用抗癌药治疗的胰腺癌患者的总生存期和1年 生存率的结果(分别记载于非专利文献1 8)。在比较例中使用的抗癌药是盐酸吉西他滨 (GEM)或S-I，或者两者并用。如表1所示，实施例(27病例)的总生存期的中位数是14.0个月，1年生存率是 63%。与此相对，在比较例中，多数的1年生存率是在15 33%的范围内，最高值为 的仅有1例。在实施例27个病例中，对“有抗癌药并用”、“无胰腺切除”、“无胰腺切除且PS 为0 1，，、“PS为2 3”以及“有转移(stageIVb)，，的各亚组，分别算出总生存期和1年 生存率后，都得到比比较例良好的结果。由该结果证实了，通过本发明的免疫疗法，以及适 当地并用免疫疗法和抗癌药，使得与单独给药抗癌药相比，可延长总生存期，提高1年生存 率。
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权利要求
1.一种胰腺癌的免疫疗法药物，通过对胰腺癌患者的自身外周血淋巴细胞利用抗CD3 抗体和抗CD52抗体进行刺激来培养得到，其特征在于，对所述胰腺癌患者至少给药4次，每一次的给药量中所含的活化淋巴细胞的数量至少 是15 X IO9个，所述活化淋巴细胞中⑶3XD56+NK细胞的比率至少是30 %，并且，对处于以下 的(a) (d)所构成的免疫低下状态的组中的至少一个状态的所述胰腺癌患者开始给药，(a)外周血中的淋巴细胞的数量小于1000/μ1，(b)外周血中的淋巴细胞中CD3—CD56+NK细胞的数量小于200/μ1，(c)外周血中的⑶3TD56+NK细胞的活性小于30%，(d)外周血中的NKG2D+淋巴细胞的数量小于400/μ1。
2.根据权利要求1所述的胰腺癌的免疫疗法药物，其特征在于，对外周血中的CD4+淋 巴细胞和⑶8+淋巴细胞之比超过3的患者给药。
3.根据权利要求1所述的胰腺癌的免疫疗法药物，其特征在于，给药的所述淋巴细胞 的其余部分是⑶4+Τ细胞和⑶8+Τ细胞中的任一种或这两者。
4.根据权利要求1所述的胰腺癌的免疫疗法药物，其特征在于，与抗癌药并用。
5.一种胰腺癌的免疫疗法，其特征在于，具有通过利用抗CD3抗体和抗CD52抗体对胰 腺癌患者的自身外周血淋巴细胞进行刺激来培养得到免疫疗法药物的步骤，以及将所述免 疫疗法药物对所述胰腺癌患者至少给药4次的步骤，所述免疫疗法药物的每一次的给药量中，含有至少15 X IO9个活化淋巴细胞，该活化淋 巴细胞中⑶3XD56+NK细胞的比率至少是30%，并且，对处于以下的(a) (d)所构成的免 疫低下状态的组中的至少一个状态的所述胰腺癌患者开始该免疫疗法药物的给药，(a)外周血中的淋巴细胞的数量小于1000/μ1，(b)外周血中的淋巴细胞中CD3—CD56+NK细胞的数量小于200/μ1，(c)外周血中的⑶3TD56+NK细胞的活性小于30%，(d)外周血中的NKG2D+淋巴细胞的数量小于400/μ1。
6.根据权利要求5所述的胰腺癌的免疫疗法，其特征在于，对外周血中的CD4+淋巴细 胞和⑶8+淋巴细胞之比超过3的患者给药。
7.根据权利要求5所述的胰腺癌的免疫疗法，其特征在于，给药的所述淋巴细胞的其 余部分是⑶4+Τ细胞和⑶8+Τ细胞中的任一种或这两者。
8.根据权利要求5所述的胰腺癌的免疫疗法，其特征在于，与抗癌药并用。
全文摘要
本发明提供一种延长胰腺癌患者的生存期的免疫疗法药物以及免疫疗法。本发明的特征在于，具有通过利用抗CD3抗体和抗CD52抗体对胰腺癌患者的自身外周血淋巴细胞进行刺激来培养得到免疫疗法药物的步骤，以及将得到的免疫疗法药物对胰腺癌患者至少给药4次的步骤，每一次的给药量中，含有至少15×109个活化淋巴细胞，活化淋巴细胞中CD3-CD56+NK细胞的比率至少是30％，并且，对处于特定的多个免疫低下状态中的至少一个状态的胰腺癌患者开始给药。
文档编号A61K35/14GK102083448SQ200980000388
公开日2011年6月1日 申请日期2009年10月6日 优先权日2009年6月19日
发明者益山纯一 申请人:株式会社赛力克斯, 益山纯一