专利名称：通过调节细胞应激反应治疗阿茨海默病和相关病症的新治疗手段的制作方法
通过调节细胞应激反应治疗阿茨海默病和相关病症的新治
疗手段本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病(AD)和相关病症的组合物和方法。AD是原型皮层性痴呆，其特征为可归因于与皮层相关区域有关的记忆损伤并伴有 言语困难(语言障碍，其中存在语言和语言理解受损)、运动障碍(在不存在运动或感觉缺 损的情况下不能协调和执行某些有意的运动和姿势)以及认识失能(不能识别物体、人、声 音、形状或气味)。也可能涉及特殊症状例如痉挛性截瘫(影响下肢的虚弱症)(1-4)。阿尔茨海默病的发病率随着年龄急剧增加。目前，AD是最常见的痴呆症病因。它 的临床特征是认知功能的整体下降，其缓慢发展，并最终使患者卧床不起、失禁并依赖于监 护护理。平均来说，死亡发生在诊断后9年(5)。阿尔茨海默病的发病率随着年龄急剧增加。联合国人口规划项目估计，到2050年 超过80岁的人口数量将达到3亿7千万。目前，据估计年龄超过85岁的人中有50%患有 AD。因此，在50年内，全世界将有超过1亿人患有痴呆症。需要经常性护理和其他服务的 人口的巨大数量，将严重影响医疗、财政和人力资源(6)。记忆损伤是疾病的早期特点，并涉及情景记忆(日常事件的记忆)。在疾病后期涉 及语义记忆(言语和视觉意义的记忆)。相比较而言，工作记忆(涉及用于暂时储存和操作 信息的结构和过程的短期记忆)和程序记忆(无意识记忆，是技术和过程的长期记忆)保 留到更晚。随着疾病发展，出现了语言受损、视觉和空间缺损、认识失能和运用失能等其他 特征。阿尔茨海默病的经典描述具有足够的特征性，允许鉴定约80%的病例(7)。然而， 确实存在着临床异质性，这不仅对于临床管理来说是重要的，而且为功能不同形式的特异 性药物治疗提供了进一步的暗示(8)。AD的病理标志物包括含有β -淀粉样蛋白(Αβ )的淀粉样蛋白斑块、含有Tau的 神经原纤维缠结(NFT)以及神经元和突触机能障碍和丧失(9-11)。最近十年，关于AD的 病因已经提出了两种主要假说“淀粉样蛋白级联假说”，其陈述神经变性过程是由淀粉样 蛋白前体蛋白(APP)的异常加工所触发的一系列事件(12)，以及“神经元细胞骨架退化假 说”(13)，其提出细胞骨架改变是触发事件。解释AD发展的最广泛接受的理论仍然是淀粉 样蛋白级联假说(14-16)，AD研究人员主要聚焦于确定成为与A β蛋白相关的毒性的基础 的机制。相比之下，由于基础和实践两方面的考虑，与淀粉样蛋白相比，Tau蛋白受到的制 药工业的关注要少得多。此外，突触密度改变与其他两者相比是与认知受损最相关的病理 损伤。研究显示，淀粉样蛋白病理学似乎以神经递质特异性的方式发展，其中胆碱能末梢表 现得最易受伤害，其次是谷氨酸能末梢，最后是GABA能末梢(11)。发明简述本发明的目的是提供用于治疗AD和相关病症的新的治疗手段。本发明人已经鉴定到参与AD发生的分子途径，并为开发改善AD和相关病症的新 疗法、特别是开发使用新的或以前在其他适应症中使用过的已有分子的组合疗法，提供了 新的靶。更具体来说，本发明人已经鉴定了几种药物，其单独或组合时能够有效影响这种途径，并代表了用于治疗AD和相关病症的新的和有效的疗法因此，本发明提供了用于治疗AD疾病和相关病症的新的组合物和方法。更具体来说，本发明涉及适合用于在需要的对象中治疗阿茨海默病或相关病症的 组合物，其中所述组合物包含抑制细胞应激反应的药物。本发明的另一个目的涉及适合用于在需要的对象中治疗阿茨海默病或相关病症 的组合物，其中所述组合物包含至少两种抑制细胞应激反应的药物的组合，用于组合、单独 或顺序给药。更具体来说，抑制细胞应激反应的一种或多种药物与由选自下列的基因编码的蛋 白结合或调节该蛋白的活性ACCN1、ADRA1A、ADRB2、AFADIN、AKT、ALDH2、ALOXl2, AMPK, APBA1、APBA2BP、APG1、APG12、AP0ER2、ATG5、ATG7、ATM、ATPIA1、ATP2A3、ATP2B1、ATP6V1C1、 ATR、BACEl、BAD、ΒΑΧ、BCARl、BCL2、BECLIN1、BK 通道(KCNMAU KCNMB1)、BRCAl、CACNA1C、 钙调磷酸酶、CD36、CD44、CDHl、CDH2、CDK5、CDKN1A、CHKl、CHRMl、CHRM2、CHRM3、CHRM4、 CHRM5、CKl、CTNNA2、CTNNBl、CULLIN1、CYCLINE、DCC, DGKB, DGKH、DNAJB9、D0CK3、DRD2、 EDNRA、ELAVL2、ERKl、ERK2、埃兹蛋白(EZRIN) ,FAS,FKBP12,FKBP12. 6、F0X03A、FZ2、GADD45、 GNPTAB、GPC5、GRK2、GRK5、GRP170、GRIN2B、GRIN3A、GSK3B、HAS1、HAS2、HAS3、HIPK2、HSPAS、 HSP90B1、HSPA5、HTR1A、IDE、IMPDHl、IMPDH2、INS、INSR、IRFl、ITBl、ITGAl、ITGBl、ITPRl、 JNK1、LAMA 1、MAD 1L1、MAO、MCC1、MDM1、MME、膜突蛋白(MOESIN)、MTOR、NADPH 氧化酶、NEDD9、 NETRIN1、NFKB1、NHERF、N0S1、N0S2A、N0S3、PAELR、PAK1、PARK2、PCAF、PDE11A、PDE3A、PDE4D、 PDE5、PDE6D、P13K、PIK3C3、PKCA、PLCB1、PLD2、PLN、PML、P0P2、PRDX5、PRDX6、PRKG1、PTPRG、 PTPRM、PVRL1、RAC1、RACK1、根蛋白(RADIXIN)、RH0A、R0R2、RTN1、RYR3、SAPK3、SCN1A、SCN1B、 SCNN1D、SCNN1G、SH3BP5、SIL1、SLC8A1、SLC8A2、SLC8A3、SLN、SNCA、SNCAIP、S0RBS2、S0RCS2、 SRC、SYNUTHBS2, TP53、TP63、TRPC3、TRPC4, TRPC5、UNC5C、VPS15、WNT1A、WNT5A、WWOX、黄 嘌呤氧化酶和YESl。这些药物的具体和优选实例包括但不限于选自阿坎酸、沙丁胺醇、阿仑膦酸盐、氨 氯地平、阿拉伯糖醇、西洛他唑、达沙替尼、磷苯妥英、来氟米特、甘露醇、间羟胺、甲巯咪唑、 米力农、硝普纳、奥美拉唑、苯乙双胍、苯丁酸钠、丙胺卡因、雷帕霉素、利福布汀、磺胺异噁 唑、他达拉非、特比萘芬、硫鸟嘌呤、海藻糖、阿糖腺苷和唑尼沙胺或其组合的化合物。在具体实施方案中，本发明的组合物进一步包含至少一种调节血管发生的药物， 用于组合、单独或顺序使用。可替选地或此外，本发明的组合物还可以包含至少一种调节突触功能的药物，用 于组合、单独或顺序使用。典型情况下，本发明的组合物进一步包含可药用的载体或赋形剂。本发明的另一个目的在于用于治疗阿茨海默病或相关病症的药物的生产方法，所 述方法包括测试候选药物对细胞应激反应的活性以及筛选抑制细胞应激反应的候选药物 的步骤。本发明还涉及用于治疗阿茨海默病或相关病症的组合物的生产方法，所述方法包 括制备抑制细胞应激反应的药物与调节血管发生或突触功能的药物的组合，以及配制所述 药物组合，用于将其同时、独立或顺序给药于需要的对象。本发明还涉及治疗阿茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向需要的对象同
6时、独立或顺序给药抑制细胞应激反应的一种或多种药物的组合。本发明还涉及治疗阿茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向需要的对象同 时、独立或顺序给药抑制细胞应激反应的药物和调节血管发生的药物和/或调节突触功能 的药物。本发明还涉及抑制细胞应激反应的药物用于制造治疗阿茨海默病或相关病症的 药物的用途。本发明还涉及至少两种抑制细胞应激反应的药物的组合用于制造治疗阿茨海默 病或相关病症的药物的用途，其中所述至少两种药物一起、独立或顺序给药。正如在本申请中讨论的，上述疗法以及组合疗法为在人类对象中治疗AD提供了 新的和有效的手段。
图1 所选药物对NGF-分化的PC12在β -淀粉样蛋白毒杀中毒后存活力的影响。
格丨:ρ < 0. 00001 与介质显著不同。** :ρ < 0. 01 ；*** φ < 0. 0001 与A β 2Μ5显著不同。 双侧Mudent' s t检验。A β 25_3510 μ M产生显著中毒，与介质处理的神经元相比高于25% (图I-A和B，红色)。这种中毒被有效地阻止。这种中毒被丙胺卡因(图1Α)或氨氯地平 (图1Β)显著阻止。图2 所选药物对淀粉样蛋白中毒的原代大鼠皮层神经元培养物中LDH释放 的影响。ΦΦΦΦΙ:Ρ < 0. 000001 与介质显著不同。* :ρ < 0. 05 ；** φ < 0. 01 ；*** :ρ < 0. 001 ；
:ρ < 0. 00001 与 Αβ25_Μ 显著不同。双侧 Mudent' s t 检验。A β 25_3520 μ M 产生显著 中毒，与介质处理的神经元相比高于25% (图2-Α和B，红色)。这种中毒被lOng/ml BDNF 有效地阻止，其被当作神经保护作用的阳性对照。这种中毒也被唑尼沙胺(图2A)或磺胺 异噁唑(图2B)或来氟米特(图2C)药物显著阻止。发明详述本发明提供了用于治疗AD或相关病症的新的治疗手段。本发明公开了药物或药 物组合物的新用途，它们允许有效校正所述疾病，并可以用于患者治疗。术语“AD相关病症”是指阿茨海默病(AD)、AD型老年痴呆(SDAT)、帕金森病、路易 体痴呆、血管性痴呆、轻度认知功能障碍(MCI)、年龄相关记忆缺损(AAMI)以及与衰老相关 的问题、脑炎后帕金森病候群、ALS和唐氏综合征。在本文中使用时，障碍的“治疗”包括由障碍引起的症状的治疗、阻止、预防、延迟 或减少。术语治疗具体来说包括疾病进展和相关症状的控制。术语“抑制”当指称细胞应激反应(“CSR”)时，包括与对象中现有的活性相比CSR 的任何降低。这样的降低可以包括足以改善患者状况的部分减小、例如5-20%，以及更显著 的减小例如20-50%或更完全的抑制例如超过50%。抑制可以使用已知的生物学测试来评 估或验证，正如在实验部分中描述的。此外，在本发明的文本中特定化合物的名称意味着不仅包括具体命名的分子，而 且包括其任何可药用的盐、水合物、酯、醚、异构体、外消旋物、缀合物或前体药物。术语“组合”是指其中至少两种或更多种药物被共同给药于对象以引起生物学效 应的疗法。在本发明的组合疗法中，至少两种药物可以一起或单独地、在同时或顺序给药。此外，至少两种药物可以通过不同的途径和方案给药。因此，组合的药物尽管可以配制在一 起，但它们也可以单独配制。正如上面所讨论的，本发明涉及使用抑制细胞应激反应的药物或药物组合，在需 要的对象中治疗阿茨海默病或相关病症的组合物和方法。通过全面整合覆盖了描述阿尔茨海默病的不同方面的细胞生物学研究、表达情况 实验和遗传关联性研究结果的实验数据，以及细胞信号传导和功能途径中存在的联系，本 发明人已经揭示，突触功能代表了在患有AD的对象中发生改变的重要机制。位于所述功能 网络中并与阿尔茨海默病有关的基因通过下述标准进行选择(1)-与作为原因造成了阿尔茨海默病的家族性病例的基因(APP、ApoE、早老素、 tau蛋白)直接相互作用，(2)_通过标准(1)选择的基因的功能性配偶体，(3)_通过标准(2)选择的基因的最接近的功能性配偶体。通过该过程，本发明人能够确定，负责突触功能的网络是在阿尔茨海默病中起作 用的主要功能网络。更具体来说，本发明人确定细胞应激反应是阿茨海默病的功能性相关的标志。正 如下面讨论的，本发明人已经在细胞应激反应网络中鉴定到三个蛋白家族，它们与阿茨海 默病的发生和控制功能性相关，并代表了用于(组合)疗法的有价值的靶。这些组蛋白更 具体来说是参与钙体内平衡、蛋白质折叠和凋亡执行的蛋白。在具体实施方案中，更具体来说，本发明涉及组合物和方法，其使用了调节参与钙 体内平衡的蛋白的活性的药物或药物组合。钙是最重要的细胞内信使之一，它在神经元和内皮细胞两者中介导多效的细胞过 程，包括突触可塑性、血管发生和凋亡。早老素、APP和tau蛋白的突变、异常折叠或过磷酸 化影响钙体内平衡。反过来，细胞内钙信号传导的破坏加剧了阿茨海默病的特征性病损，导 致β -淀粉样蛋白聚集体的加速积累和tau蛋白的过磷酸化，表明在钙体内平衡与AD特异 性细胞病理学之间存在调节性反馈。细胞内钙水平受到质膜和内质网中一系列可透过钙的通道、钙泵和钙交换器的协 同作用的精确调控。例如，钙在内质网(Ε 中大量储存，由于CZSERCA泵的活性，内质网 能够积累非常高的Ca2+水平，达到毫摩尔浓度(17)。Ca2+从内质网的释放受到两种类型的 Ca2+释放通道控制，即兰尼碱受体(RYR)和IP3受体(ITPR)。它们能够被多种信号传导信 使、包括Ca2+浓度或IP3的局部细胞质波动直接激活，并在功能上受到几种调控蛋白例如 PKA、PRKGU mTOR、钙调磷酸酶、FKBP、受磷蛋白等的调节(18)。SERCA泵受到ER内部Ca2+ 浓度的调控，当降低钙的ER含量时增加SERCA活性。在细胞质膜水平上，钙的体内平衡主 要受到负责Ca2+进入的钙池操纵和电压门控钙通道、钙驱出AIPase泵、Na+/Ca2+交换器和 电压门控Na+通道的调控。我们鉴定到了参与钙体内平衡途径的基因网络，其功能可能受到突变的早老素蛋 白或毒性β-淀粉样蛋白的修饰。其中，IP3R(IIPR1)和RYR3受体、在ER水平上调控钙体 内平衡的ATP2A3 (SERC A3 Ca2+ATPase)、从真核细胞逆浓度梯度排出钙离子的质膜AIPase ATP2B1、以及电压门控Na+通道表现得特别重要。已经显示，ΑΡΡ、Α β 42和突变的PSl能够调 节兰尼碱受体和SERCA泵的活性。A β 42和PSl的FAD变体增加RYR3表达和活性(19-21)，导致神经元对谷氨酸兴奋毒性攻击的易损性增强0幻。此外，抑制钙通过SERCA泵的重新 摄取与Αβ释放的减少相关，而促进SERCA活性增加了 Aβ生产0；3)。此外，在质膜的水平 上，早老素和BACE-I参与电压门控钠通道的β -亚基的加工，所述钠通道调节并能够在病 理条件下逆转Na7Ca2+交换器的活性，激起过量的细胞内钙积累04)。在另一个具体实施方案中，本发明更具体来说涉及组合物和方法，其使用了调节 参与蛋白折叠或聚集的蛋白的活性的药物或药物组合。蛋白聚集是AD中的中心细胞病理现象。阿茨海默病的两个主要细胞学标志表现 为神经原纤维缠结(NFT)的发生和淀粉样蛋白斑的沉积，其分别由聚集的过磷酸化tau蛋 白和APP蛋白的Αβ片段构成。另一种倾向于聚集的蛋白——α-synuclein，尽管被识别 为帕金森氏病的特定标志，但是可以在大多数阿茨海默病的偶发和家族性形式的病例中， 在淀粉样蛋白斑中检测到0546)。我们鉴定了参与调节阿茨海默病相关蛋白聚集的每种主要组分的折叠、翻译 后修饰和加工的几种基因的途径。该发现强调了错误折叠的tau、Αβ和synuclein蛋 白的组合病理效应对阿茨海默病发展的重要性。例如，我们鉴定了胰岛素降解酶IDE， 它也参与Αβ (27)和与APP相互作用并调节其稳定性和功能的APBAl和ΑΡΒΑ2ΒΡ蛋白 (28-29)的蛋白水解作用。此外，数据开采揭示了 α-SynucIein(SNCA)、其相互作用配偶体 Synphilin(SNCAIP)和PARK2，一种参与SNCA清除和保护神经元对抗α -synuclein毒性的 泛素-蛋白连接酶，作为阿茨海默病发生的风险因子(30)。调节tau蛋白的磷酸化水平的激酶例如GSK3 β、CDK5和MARK(31-32)以及磷酸 酶活性的不平衡，可能有助于并加强tau蛋白聚集。由于早老素在功能上也受GSK_3i3依 赖性磷酸化的调控，因此GSK-3 β激酶可能在阿茨海默病的病理发生中发挥特别重要的作 用。该结论得到了我们的发现的加强，即几个调节GSK-3 β激酶活性或其与tau蛋白的直 接相互作用的信号传导模块——WWOX (33)、透明质酸⑶44受体、Wnt受体i^2/R0R2和胰岛 素受体/PTPRG磷酸酶复合物(34)——可能与阿茨海默病的发生有关。在其他具体实施方案中，本发明涉及组合物和方法，其中使用了抑制凋亡的药物 或药物组合。凋亡被认为是阿茨海默病中造成细胞丧失的主要细胞机制，它能够由典型地与阿 茨海默病发生相伴的细胞伤害有效地触发，所述伤害包括由淀粉样肽(Αβ)的有毒聚 集物所刺激的钙体内平衡的破坏和反应性氧物质(R0Q的生产增加。正如通过我们的分析所鉴定到的，在阿茨海默病的情况下，凋亡最可能通过典型 的Ρ53依赖性途径执行。ρ53是一种DNA结合蛋白，其起到转录因子的作用，控制抑制肿瘤 细胞生长和侵入的靶基因的表达。因此，Ρ53被当作肿瘤抑制蛋白，并在细胞周期进展的调 节、特别是在从GO到Gl期的转变和G2/M DNA损伤校验点以及凋亡诱导中发挥至关重要的 作用。后者似乎是通过前凋亡蛋白例如Bax表达的刺激或通过抗凋亡蛋白例如Bcl-2表达 的阻遏来介导。p53蛋白可以通过翻译后修饰并通过与正和负调控因子的相互作用进行调控。我 们已经鉴定到几种这样的调控蛋白——WffOX, MDMU HIPK2和PML，证实了关于p53蛋白在 阿茨海默病中执行细胞死亡中的关键作用的提议。含有与P53相互作用的Wff结构域的氧 化还原酶(WOXW)是TNFa细胞毒性的重要介导物，并与p53协同介导凋亡(35)。与同源异型结构域相互作用的核丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(HIH(2)在义！· 46处磷酸化p53，并与 P53合作激活p53依赖性转录和凋亡途径(36)。最后，PML蛋白抵消了 MDM2蛋白促进p53 被蛋白酶体降解的效应，并通过将P53召集到被称为PML-核体的多蛋白复合物上来激活 p53(37)。在阿茨海默病的情况下，在可能直接并特异性参与凋亡的诱导的受体系统中，参 与轴突导向和血管发生的UNC5C(Unc-5同系物C)和DCC (在结肠直肠癌中缺失的)netrin 受体，表现得特别重要。这些受体被称为推测的条件式肿瘤抑制因子，因为它们的行为与在 不存在配体的情况下诱导凋亡的netrin依赖性受体相似(38)。netrin-Ι与这些受体的结 合抑制了肿瘤抑制因子P53依赖性的凋亡，并且p53直接参与及其受体的转录调控(39)。 此外，DCC受体被早老素加工，产生了具有转录活性的细胞内受体结构域00)。因此，我们 的数据开采表明，除了由钙体内平衡的破坏和过量ROS生产所刺激的相当非特异性的前凋 亡程序之外，由netrin受体介导的和p53依赖性的凋亡可能是参与阿茨海默病情况下病理 性细胞丧失的特异性前凋亡途径之一。在特定实施方案中，本发明更具体来说涉及组合物和方法，其中使用了抑制至少 两种参与钙体内平衡、蛋白折叠和凋亡执行的不同蛋白的活性的药物组合。在本发明中，本发明人提出了新的组合物，其可用于抑制在阿茨海默病和其他神 经变性疾病中诱导的细胞应激反应。在特定实施方案中，本发明的组合物和方法使用了药物，所述药物通过它们与如 上列出的一个基因或蛋白的相互作用或调节如上列出的一个基因或蛋白来抑制细胞应激 反应。更具体来说，本发明的组合物包含一种或多种药物，它们通过结合由选自下列 的基因编码的蛋白或调节这些蛋白的活性来抑制细胞应激反应ACCN1、ADRA1A、ADRB2、 AFADIN、AKT、ALDH2、AL0X12、AMPK、APBAl、APBA2BP、APGl、APG12、AP0ER2、ATG5、ATG7、ATM、 ATPlAl、ATP2A3、ATP2B1、ATP6V1C1、ATR、BACEl、BAD、ΒΑΧ、BCARl、BCL2、BECLIN1、BK 通道 (KCNMA1、KCNMB1)、BRCAl、CACNA1C、钙调磷酸酶、CD36、CD44、CDHl、CDH2、CDK5、CDKN1A、 CHKl、CHRMl、CHRM2、CHRM3、CHRM4、CHRM5、CKl、CTNNA2、CTNNBl、CULLIN1、CYCLINE、DCC, DGKB, DGKH、DNAJB9、D0CK3、DRD2、EDNRA, ELAVL2、ERKU ERK2、±矣兹蛋白、FAS、FKBP12、 FKBP12.6、F0X03A、FZ2、GADD45、GNPTAB、GPC5、GRK2、GRK5、GRP170、GRIN2B、GRIN3A、GSK3B、 HAS1、HAS2、HAS3、HIPK2、HSPAS, HSP90B1、HSPA5、HTR1A、IDE、IMPDHl、IMPDH2、INS、INSR、 IRFl、ITBl、ITGAl、ITGBl、ITPRl、JNKl、LAMAl、MADlLl、MAO、MCCl、MDMl、MME、膜突蛋白、 MTOR、NADPH 氧化酶、NEDD9、NETRIN1、NFKBl、NHERF、NOSl、N0S2A、N0S3、PAELR、PAKl、PARK2、 PCAF、PDE1IA、PDE3A、PDE4D、PDE5、PDE6D、P13K、PIK3C3、PKCA、PLCB1、PLD2、PLN、PML、P0P2、 PRDX5、PRDX6、PRKGU PTPRG, PTPRM、PVRLl、RACl、RACK1、根蛋白、RHOA、R0R2、RTNl、RYR3、 SAPK3、SCN1A、SCN1B、SCNNlD, SCNN1G、SH3BP5、SILl、SLC8A1、SLC8A2、SLC8A3、SLN、SNCA, SNCAIP、S0RBS2、S0RCS2、SRC、SYNl、THBS2、TP53、TP63、TRPC3、TRPC4、TRPC5、UNC5C、VPS15、 WNT1A、WNT5A、WffOX、黄嘌呤氧化酶和 YESl。所有上面列出的基因和蛋白的序列可以从基因文库获得，并可以通过本技术领域 已知的技术分离。此外，这些基因和蛋白的活性可以通过其本身在本技术领域中已知的技 术来评估，正如在实验部分中讨论的。
本发明还描述了可用于调节这些靶基因和蛋白的药物。本发明公开了单独但优选 组合地调节上述途径并可用于治疗所述疾病的特定药物的鉴定和活性。具体来说，我们鉴 定了在文献中已经存在但在人类对象中正用于治疗其他疾病的小分子。就此而言，在最优选实施方案中，本发明的组合物至少包含AMPK的调节剂(优选 选自苯乙双胍和阿糖腺苷)、ATP1A1的抑制剂(优选为奥美拉唑)、CACNA1C的抑制剂(优 选为氨氯地平)、EDNRA内皮素受体的拮抗剂(优选为磺胺异噁唑)、GABA能和谷氨酸能 GRIN2B和GRIN3A受体的调节剂(优选为阿坎酸)>GSK3B活性的抑制剂(优选选自沙丁胺 醇和间羟胺)、HAS1-3透明质酸合酶的调节剂(优选为来氟米特)、IMPDHl和IMPDH2的抑 制剂(优选为硫鸟嘌呤)、MTOR的抑制剂(优选为雷帕霉素)、PDEl 1A、PDE4A和PDE5A磷 酸二酯酶的抑制剂(优选为他达拉非)、PDE3A的抑制剂(优选为西洛他唑)、PDE4D的抑制 剂(优选为米力农)>PRDX5和PRD)(6的调节剂(优选为甲巯咪唑),PRKGl的活化剂(优选 选自硝普纳、他达拉非和西洛他唑)、RHOA的调节剂(优选选自阿仑膦酸盐和特比萘芬)、 RYR3的调节剂(优选为丙胺卡因)、SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙 胺)、SCN1A/B的抑制剂(优选选自唑尼沙胺和磷苯妥英)、YESl和SRC的抑制剂(优选为 达沙替尼)、自体吞噬的活化剂(优选为海藻糖)和/或化学伴侣(优选选自苯丁酸钠、利 福布汀、阿拉伯糖醇和甘露醇)。正如上面所讨论的，本发明具体提出了设计针对AD和相关病症的机制的组合疗 法。就此而言，最优选的靶和药物组合的实例在下文公开。更优选情况下，组合物包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给 药-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂 (优选为唑尼沙胺)，-GABA能和谷氨酸能受体的调节剂(优选为阿坎酸)和RHOA的调节剂(优选为特 比萘芬)，-钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和RYR3兰尼碱 受体的调节剂(优选为丙胺卡因)，-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和RYR3兰尼碱受体的调节剂(优选为丙胺卡 因)，-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和RHOA的调节剂(优选为特比萘芬)，-钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和RHOA的调节 剂(优选为特比萘芬)，-RYR3兰尼碱受体的调节剂(优选为丙胺卡因)和RHOA的调节剂(优选为特比萘 芬)，-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和化学伴侣(优选为利福布汀)，-钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和化学伴侣(优 选为利福布汀)，-RYR3兰尼碱受体的调节剂(优选为丙胺卡因)和化学伴侣(优选为利福布汀)，-RHOA的调节剂(优选为特比萘芬)和化学伴侣(优选为利福布汀)，或-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和PDEllA和PDE4A、PDE5A磷酸二酯酶的抑制剂(优选为他达拉非)。本发明的组合物的最优 选的实例包括选自阿坎酸、沙丁胺醇、阿仑膦酸盐、氨氯地 平、阿拉伯糖醇、西洛他唑、达沙替尼、磷苯妥英、来氟米特、甘露醇、间羟胺、甲巯咪唑、米力 农、硝普纳、奥美拉唑、苯乙双胍、苯丁酸钠、丙胺卡因、雷帕霉素、利福布汀、磺胺异噁唑、他 达拉非、特比萘芬、硫鸟嘌呤、海藻糖、阿糖腺苷和唑尼沙胺或其组合的化合物。在另一个优选实施方案中，本发明的组合物包含至少一种化合物，所述化合物选 自阿坎酸、西洛他唑、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、他达拉非、特比萘芬、唑尼沙胺和利福 布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、独立或顺序给药。在更优选实施方案中，本发明的组合物包含至少两种化合物的组合，所述化合物 选自阿坎酸、西洛他唑、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、他达拉非、特比萘芬、唑尼沙胺和利 福布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、独立或顺序给药。在另一个实施方案中，本发明的组合物包含至少两种化合物的组合，所述化合物 选自阿坎酸、西洛他唑、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、他达拉非、特比萘芬、唑尼沙胺和利 福布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，其中所述组合物抑制在神经变性疾 病中诱导的细胞应激反应，所述神经变性疾病选自阿茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、肌萎 缩性侧索硬化(ALQ和多发性硬化(MS)。在另一个优选实施方案中，本发明的组合物包含至少两种化合物的组合，所述化 合物选自阿坎酸、西洛他唑、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、他达拉非、特比萘芬、唑尼沙胺 和利福布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿茨海默病(AD)。优选情况下，用于在需要的对象中治疗阿茨海默病或相关病症的组合物，包含下 述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药-苯乙双胍和唑尼沙胺，-阿坎酸和特比萘芬，-唑尼沙胺和丙胺卡因，-苯乙双胍和丙胺卡因，-苯乙双胍和特比萘芬，-唑尼沙胺和特比萘芬，-丙胺卡因和特比萘芬，-苯乙双胍和利福布汀，-唑尼沙胺和利福布汀，-丙胺卡因和利福布汀，-特比萘芬和利福布汀，或-苯乙双胍和他达拉非。在最优选实施方案中，本发明的组合物至少包含氨氯地平和丙胺卡因，或其盐或 前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、独立或顺序给药。在另一个优选实施方案中，本发明的组合物至少包含氨氯地平和/或丙胺卡因， 或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿茨海默病或相关病症。在另一个具体实施方案中，本发明的组合物进一步包含至少一种抑制细胞应激反 应的药物，用于组合、单独或顺序使用。
12
优选情况下，附加的抑制细胞应激反应的药物选自AMPK的调节剂(优选为阿糖腺 苷),ATPlAl的抑制剂(优选为奥美拉唑)、GSK!3B活性的抑制剂(优选选自沙丁胺醇和间羟 胺)、IMPDHl和IMPDH2的抑制剂(优选为硫鸟嘌呤)、MT0R的抑制剂(优选为雷帕霉素)、 PDE4D的抑制剂(优选为米力农)、PRKG1的活化剂(优选为西洛他唑)、RH0A的调节剂(优 选为阿仑膦酸盐)、SCN1A/B的抑制剂(优选为磷苯妥英)、YESl和SRC的抑制剂(优选为 达沙替尼)、自体吞噬的活化剂(优选为海藻糖)和/或化学伴侣(优选选自苯丁酸钠、阿 拉伯糖醇和甘露醇)。在其他具体实施方案中，附加的抑制细胞应激反应的药物选自与由选自下列的基 因编码的蛋白结合或调节该蛋白的活性的一种或多种药物ACCN1、ADRA1A、ADRB2、AFADIN、 AKT、ALDH2、ALOX12、AMPK、APBA1、APBA2BP、APG1、APG12、AP0ER2、ATG5、ATG7、ATM、ATPIA1、 ATP2A3、ATP2B1、ATP6V1C1、ATR、BACEl、BAD、ΒΑΧ、BCARl、BCL2、BECLIN1、BK 通道(KCNMA1、 KCNMB1)、BRCAl、CACNA1C、钙调磷酸酶、CD36、CD44、CDHl、CDH2、CDK5、CDKN1A、CHKl、CHRMl、 CHRM2、CHRM3、CHRM4、CHRM5、CKl、CTNNA2、CTNNBl、CULLIN1、CYCLINE、DCC、DGKB, DGKH、 DNAJB9、D0CK3、DRD2、EDNRA、ELAVL2、ERK1、ERK2、埃兹蛋白、FAS、FKBP12、FKBP12. 6,F0X03A、 FZ2、GADD45、GNPTAB、GPC5、GRK2、GRK5、GRP170、GRIN2B、GRIN3A、GSK3B、HAS1、HAS2、HAS3、 HIPK2、HSPAS、HSP90B1、HSPA5、HTR1A、IDE、IMPDHl、IMPDH2、INS、INSR、IRFl、ITBl、ITGAl、 ITGBl、IIPR1、JNKl、LAMAl、MADlLl、MAO、MCCl、MDMl、MME、膜突蛋白、MTOR、NADPH 氧化酶、 NEDD9、NETRIN1、NFKB1、NHERF、N0S1、N0S2A、N0S3、PAELR、PAK1、PARK2、PCAF、PDE11A、PDE3A、 PDE4D、PDE5、PDE6D、P13K、PIK3C3、PKCA、PLCB1、PLD2、PLN、PML、P0P2、PRDX5、PRDX6、PRKG1、 PTPRG, PTPRM、PVRLl、RACl、RACK1、根蛋白、RHOA、R0R2、RTNl、RYR3、SAPK3、SCN1A、SCN1B、 SCNN1D、SCNN1G、SH3BP5、SIL1、SLC8A1、SLC8A2、SLC8A3、SLN、SNCA、SNCAIP、S0RBS2、S0RCS2、 SRC、SYNUTHBS2, TP53、TP63、TRPC3、TRPC4、TRPC5、UNC5C、VPS15、WNT1A、WNT5A、WWOX、黄 嘌呤氧化酶和YESl。本发明人已经确立，上述药物和药物组合提供了改进和协同的生物学效应，使得 引起AD和相关病症的功能性调节异常得到有效校正或正常化。上面提到的化合物名称与它们的CAS编号一起列于下面的表中。正如前面讨论过 的，应该理解，本发明涵盖了上述化合物及其任何可药用盐、水合物、酯、醚、异构体、外消旋 物、缀合物或前体药物的使用。可以制备前体药物(例如通过将药物与适合的载体偶联) 以提供对治疗的药物动力学参数的更好的控制。表权利要求
1.一种组合物，其包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自阿坎酸、氨氯地平、西 洛他唑、来氟米特、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、唑尼 沙胺和利福布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、独立或顺序给药。
2.一种组合物，其包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自阿坎酸、氨氯地平、 西洛他唑、来氟米特、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、唑 尼沙胺和利福布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，其中所述组合物抑制在 神经变性疾病中诱导的细胞应激反应，所述神经变性疾病选自阿茨海默病(AD)、帕金森病 (PD)、肌萎缩性侧索硬化(ALQ和多发性硬化(MS)。
3.权利要求1的组合物，其包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自阿坎酸、氨氯 地平、西洛他唑、来氟米特、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘 芬、唑尼沙胺和利福布汀，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿茨海默 病(AD)。
4.一种组合物，其包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药 -AMH(的调节剂(优选为苯乙双胍)和钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)，-GABA能和谷氨酸能受体的调节剂(优选为阿坎酸)和RHOA的调节剂(优选为特比萘芬)，-钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和RYR3兰尼碱受体 的调节剂(优选为丙胺卡因)，-AMH(的调节剂(优选为苯乙双胍)和RYR3兰尼碱受体的调节剂(优选为丙胺卡因)， -AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和RHOA的调节剂(优选为特比萘芬)， -钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和RHOA的调节剂(优 选为特比萘芬)，-RYR3兰尼碱受体的调节剂(优选为丙胺卡因)和RHOA的调节剂(优选为特比萘芬)， -AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和化学伴侣(优选为利福布汀)， -钠通道SCNlA的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和化学伴侣(优选为 利福布汀)，-RYR3兰尼碱受体的调节剂(优选为丙胺卡因)和化学伴侣(优选为利福布汀)， -RHOA的调节剂(优选为特比萘芬)和化学伴侣(优选为利福布汀)， -AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和PDEllA和PDE4A、PDE5A磷酸二酯酶的抑制剂 (优选为他达拉非)。
5.权利要求1的组合物，其用于在需要的对象中治疗阿茨海默病或相关病症，其中所 述组合物包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药-苯乙双胍和唑尼沙胺， -阿坎酸和特比萘芬， -唑尼沙胺和丙胺卡因， -苯乙双胍和丙胺卡因， -苯乙双胍和特比萘芬，-唑尼沙胺和特比萘芬， -丙胺卡因和特比萘芬， -苯乙双胍和利福布汀， -唑尼沙胺和利福布汀， -丙胺卡因和利福布汀， -特比萘芬和利福布汀， -苯乙双胍和他达拉非。
6.前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种抑制细胞应激 反应的药物，用于组合、单独或顺序使用。
7.权利要求6的组合物，其中所述至少一种抑制细胞应激反应的药物选自AMPK的调 节剂(优选为阿糖腺苷)、ATPlAl的抑制剂(优选为奥美拉唑)、GSK3B活性的抑制剂(优 选选自沙丁胺醇和间羟胺)、IMPDHl和IMPDH2的抑制剂(优选为硫鸟嘌呤)、MT0R的抑制 剂(优选为雷帕霉素)、PDE4D的抑制剂(优选为米力农)、PRKGl的活化剂(优选为西洛 他唑)、RH0A的调节剂(优选为阿仑膦酸盐)、SCN1A/B的抑制剂(优选为磷苯妥英)、YES1 和SRC的抑制剂(优选为达沙替尼)、自体吞噬的活化剂(优选为海藻糖)和/或化学伴侣 (优选选自苯丁酸钠、阿拉伯糖醇和甘露醇)。
8.权利要求6的组合物，其中所述至少一种抑制细胞应激反应的药物选自与由选自下 列的基因编码的蛋白结合或调节该蛋白的活性的一种或多种药物ACCN1、ADRA1A、ADRB2、 AFADIN、AKT、ALDH2、AL0X12、AMPK、APBAl、APBA2BP、APGl、APG12、AP0ER2、ATG5、ATG7、ATM、 ATPlAl、ATP2A3、ATP2B1、ATP6V1C1、ATR、BACEl、BAD、ΒΑΧ、BCARl、BCL2、BECLIN1、BK 通道 (KCNMA1、KCNMB1)、BRCAl、CACNA1C、钙调磷酸酶、CD36、CD44、CDHl、CDH2、CDK5、CDKN1A、 CHKl、CHRMl、CHRM2、CHRM3、CHRM4、CHRM5、CKl、CTNNA2、CTNNBl、CULLIN1、CYCLINE、DCC, DGKB, DGKH、DNAJB9、D0CK3、DRD2、EDNRA, ELAVL2、ERKU ERK2、±矣兹蛋白、FAS、FKBP12、 FKBP12.6、F0X03A、FZ2、GADD45、GNPTAB、GPC5、GRK2、GRK5、GRP170、GRIN2B、GRIN3A、GSK3B、 HAS1、HAS2、HAS3、HIPK2、HSPAS, HSP90B1、HSPA5、HTR1A、IDE、IMPDHl、IMPDH2、INS、INSR、 IRFl、ITBl、ITGAl、ITGBl、ITPRl、JNKl、LAMAl、MADlLl、MAO、MCCl、MDMl、MME、膜突蛋白、 MTOR、NADPH 氧化酶、NEDD9、NETRIN1、NFKBl、NHERF、NOSl、N0S2A、N0S3、PAELR、PAKl、PARK2、 PCAF, PDEl 1A、PDE3A、PDE4D、PDE5、PDE6D、PI3K、PIK3C3、PKCA, PLCB 1、PLD2、PLN、PML, P0P2、PRDX5、PRDX6、PRKGU PTPRG, PTPRM、PVRLl、RACl、RACK1、根蛋白、RHOA、R0R2、RTNl、 RYR3、SAPK3、SCN1A、SCN1B、SCNNlD, SCNN1G、SH3BP5、SILl、SLC8A1、SLC8A2、SLC8A3、SLN、 SNCA, SNCAIP, S0RBS2、S0RCS2、SRC、SYN1、THBS2、TP53、TP63、TRPC3、TRPC4、TRPC5、UNC5C、 VPS15、WNT1A、WNT5A、WffOX、黄嘌呤氧化酶和 YESl。
9.前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种调节突触功能 的药物，用于组合、单独或顺序使用。
10.权利要求9的组合物，其中所述至少一种调节突触功能的药物选自阿芬太尼、阿米 洛利、氨氯地平、氨曲南、巴氯芬、布克力嗪、布美他尼、丁丙诺啡、利多卡因、氯唑沙宗、西那 卡塞、二羟丙茶碱、依来曲普坦、麦角胺、氟硝西泮、伊马替尼、酮替芬、哌加他尼、喷他佐辛、 苯巴比妥、普瑞巴林、丙硫氧嘧啶、替马西泮、噻加宾、托吡酯、氨苯蝶啶和氨己烯酸。
11.前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种调节细胞血管发生的药物，用于组合、单独或顺序使用。
12.权利要求11的组合物，其中所述至少一种调节血管发生的药物选自安贝生坦、氨 基己酸、阿加曲班、巴柳氮、贝卡普勒明、卡麦角林、氯吡格雷、地西卢定、双氢麦角胺、依普 利酮、非诺多泮、氟氢可的松、吉非罗齐、橙皮素、来氟米特、L-组氨酸、碘赛罗宁、马立马司 他、美洛昔康、米帕林、醋甲唑胺、孟鲁司特、奈替米星、硝酸甘油、乙胺嘧啶、磺胺异噁唑、舒 尼替尼、硫乙拉嗪、替罗非班、拓扑替康和华法林。
13.前述权利要求任一项的组合物，其包含可药用的载体或赋形剂。
14.前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物重复地给药于对象。
15.一种生产用于治疗阿茨海默病或相关病症的药物的方法，所述方法包括测试候选 药物对细胞应激反应的活性以及选择抑制细胞应激反应的药物的步骤。
16.权利要求15的方法，其包括确定所述药物是否与权利要求8所述的蛋白或基因结 合或调节所述蛋白或基因的活性的步骤。
17.—种生产用于治疗阿茨海默病或相关病症的组合物的方法，所述方法包括制备调 节细胞应激反应的药物和调节突触功能或血管发生的药物的组合，以及配制所述组合，用 于向需要的对象同时、独立或顺序给药。
18.一种治疗阿茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向需要的对象同时、独立或 顺序给药调节细胞应激反应的药物和调节突触功能或血管发生的药物。
19.一种组合物，其至少包含氨氯地平和丙胺卡因或其盐或前体药物或衍生物或持续 释放制剂，用于同时、独立或顺序给药。
20.一种组合物，其至少包含氨氯地平和/或丙胺卡因或其盐或前体药物或衍生物或 持续释放制剂，用于治疗阿茨海默病或相关病症。
全文摘要
本发明涉及用于治疗阿茨海默病和相关病症的组合物和方法。更具体来说，本发明涉及调节细胞应激反应以治疗所述疾病的组合疗法。
文档编号A61P25/28GK102065897SQ200980122705
公开日2011年5月18日 申请日期2009年4月29日 优先权日2008年4月29日
发明者丹尼尔·科恩, 伊利亚·楚马科夫, 奥克萨纳·盖拉斯门科, 谢尔盖·纳比罗钦 申请人:法奈科斯公司