抗-igf-1r抗体和其它化合物的治疗联合的制作方法

专利名称：抗-igf-1r抗体和其它化合物的治疗联合的制作方法
抗-1GF-1R抗体和其它化合物的治疗联合
背景技术：
联合治疗化合物(诸如，例如生物和小分子)在癌症治疗中已日益成为人们关注 的方案。参见例如Bianco，R.，et al.，” Combination of biological therapies in non-small cell lung cancer, “ Ann Oncol. ，17， Suppl 2 :ii52-54(2006)；Rodriguez,J. , et al. ,“ Combining chemotherapy and targeted therapies in metastatic colorectal cancer，” World J Gastroenterol. ,13(44) :5867-76 (2007)；Gligorov, J.，et al.， “ Novel therapeutic strategies combining
antihormonal and biological targeted on clinical trials and perspectives, 115-28(2007)；
therapies in breast cancer :focus “Crit Rev Oncol Hematol. ,64(2)Bracci， L ， et al. ， ” IFN-alpha and novel strategies of combination therapy for cancer, “ Ann NY Acad Sci. ，1112 :256-268(2007)；Ho，C.，et al.， “ Dual inhibition :combining epidermal growth factor-targeted therapies in non-small-cell lung cancer, “ Clin Lung Cancer, 8(7) :420-4(2007)；Leonetti, C. ， et al. ， ' Targeting different signaling pathways with antisense oligonucleotides combination for cancer therapy, “ Curr Pharm Des.， 13(5) :463-70(2007)；和Cascone，Τ·，et al. , “ Combined targeted therapies in non-small cell lung cancer :a winner strategy ？ ， 〃 Curr Opin Oncol. ,19 (2)(2007)。本发明涉及在过度增殖病症(例如癌症)的治疗中、特别是在靶向由胰岛素样生 长因子-1受体(IGF-IR)介导的信号转导途径以及另外的细胞生长、细胞增殖和细胞存活 信号转导途径中的联合治疗方案。一系列流行病学研究显示高于正常循环水平的IGF-I与多种常见癌症风险 的增加有关，所述癌症包括乳腺癌(Hankinson et al, Lancet 1998. 351 :1393-6), 前列腺癌(Chan et al, Science. 1998. 279 :563-6)、月市癌(Yu et al, J. Natl. Cancer Inst. 1999. 91 :151-6)和结肠直肠癌(Ma et al, J. Natl. Cancer Inst. 1999. 91 :620-5)。 IGF-2循环水平的上升同样显示与子宫内膜癌的风险上升有关(Jonathan et al, Cancer Biomarker & Prevention. 2004. 13 :748-52)。与此相反，据观察 IGF 结合蛋白、IGF-BP3 之一和癌症风险的水平上升呈负相关。另外，还在癌症患者中发现了 IGF的水平上升 (Peyrat et al Eur.J.Cancer. 1993. 3511393-6 ；Jonathan et al, Cancer Biomarker & Prevention. 2004. 13 :748-52)。IGF系统在调节细胞增殖、分化、凋亡和转化中扮演了重要的角色(Jones et al, Endocrinology Rev. 1995. 16 :3-34)。IGF系统包含了两种不相关的受体_胰岛素样生长 因子受体KIGF-IR ;CD221)和胰岛素样生长因子受体2 (IGF-2R ；⑶222)；两种配体-胰岛素样生长因子KIGF-I和IGF-2)；多种IGF结合蛋白(IGFBP-1至IGFBP-6)。此外，多 种IGFBP蛋白酶(例如，胱天蛋白酶、金属蛋白酶、前列腺-特异性抗原)水解IGF结合的 IGFBP以释放游离IGF，后者随后与IGF-IR和IGF-2R相互作用。IGF系统还可紧密结合胰岛 素和胰岛素受体(InsR) (Moschos et al. Oncology 2002. 63 :317-32 ；Baserga et al. ,Int J. Cancer. 2003. 107 :873-77 ；Pollak et al. ,Nature Reviews Cancer. 2004. 4 :505-516)。在癌症细胞中，受体酪氨酸激酶(TK)在胞外肿瘤微环境和控制多种细胞功能(例 如，细胞分裂周期、存活、凋亡、基因表达、细胞骨架结构、细胞附着以及细胞迁移)的胞内 信号转导途径的联系中扮演重要的角色。由于控制细胞信号转导的机制已经得到了较好地 理解，因而可通过靶向信号转导事件中的配体结合、受体表达/循环、受体激活和所涉及蛋 白的水平来开发破毁一种或多种该类细胞功能的治疗策略(Hanahan and Weinberg, Cell 2000. 100 :57-70)。I型胰岛素样生长因子受体(IGF-1R，⑶221)属于受体酪氨酸激酶(RTK)家族 (Ullrich et al.，Cell. 1990. ,61 :203-12)。IGF-1R 被广泛表达，其配体 IGF-I 和 IGF-2 在出生前和出生后发育、生长激素响应、细胞转化、存活中具有重要作用，并与扩散和转移 肿瘤表型的获得具有关联(Baserga, Cell. 1994. 79 :927-30 ；Baserga et al.，Exp. Cell Res. 1999. 253 :1-6, Baserga et al.，Int J. Cancer. 2003. 107 :873-77).。免疫组化研究 显示一系列人肿瘤表达更高水平的IGF-1R。IGF-IR的分子构造包含两个胞外α亚基(130_135kD)和两个包含胞浆催化激 酶区的跨膜β亚基(95kD)。与胰岛素受体(InsR)相同，IGF-IR由于具有共价二聚体 (α 2 β 2)结构而区别于其它RTK家族成员。IGF-IR在结构上与^isR过度相关(Pierre De Meyts and Whittaker, Nature Reviews Drug Discovery. 2002,1 :769_83) 。
酶区与hsR具有84%的序列一致性，而在近膜区和N-末端区分别占有61 %和44%的序列 一致性(Ulrich et al.，EMBO J.，1986,5 :2503-12 ；Blakesley et al.，Cytokine Growth Factor Rev.，1996. 7 :153-56)。IGF-I和IGF-2是IGF-1R的两个激活配体。IGF-1和IGF-2与α链的结合诱发 构型变化，从而导致在特定酪氨酸残基的各β -链发生自身磷酸化，将受体由未磷酸化状 态转化为激活状态。激酶区活化环中三个酪氨酸残基(在1131、1135和1136的Tyr残基) 的活化导致增强催化活性，该活性引发如IRS-I和She衔接蛋白等底物的对接和磷酸化。 这些底物的活化导致了存活(PI3K、AKT、TOR、S6)和/或增殖(丝裂原活化的蛋白激酶， p42/p44)的信号转导级联中涉及的另外蛋白的磷酸化(Pollak et al. , Nature Reviews Cancer. 2004. 4 :505-516 ；Baserga et al.，Biochem Biophys Act. 1997. 1332 :F105_F126 ； Baserga et al, Int.J. Cancer. 2003. 107 :873-77)。尽管在IGF-IR和hsR之间具有过度的同源性，但是有证据显示这两种受体具有 截然不同的生物作用JnsR是葡萄糖运输和糖原和脂肪生物合成等生理功能的关键调节 剂，而IGF-IR是细胞生长和分化的有效调节剂。与hsR不同，IGF-IR在组织中普遍表达并 对组织生长产生作用，它受到调节IGF-I的生长激素(GH)的控制。尽管据显示IGF-IR活 化促进正常细胞生长，但是实验证据提示IGF-IR并非绝对必需(Baserga et al,Exp Cell Res. 1999. 253 :1_6 ；Baserga et al,Int.J.Cancer. 2003. 107 :873-77)。IGF在调节细胞增殖、分化和凋亡中具有至关重要的作用。据显示对IGF-IR介导
7的信号转导的抑制降低肿瘤生长率，增加凋亡，提高化疗和其它分子靶向治疗对肿瘤的杀 伤(综述参见 Pollak et al. , Nature Reviews Cancer. 2004. 4 :505-516 ；Zhang et al., Breast Cancer Res. 2000. 2 :170-75 ；Chakravarti et al,Cancer Res. 2002. 62 :200-07)。抑制肿瘤中IGF-IR功能的实验方案取得了鼓舞人心但也颇为有限的成就，且它 们在治疗癌症中的作用尚待临床检验。这些实验方案包括针对IGF-IR的抗体(Kull et al.，J.Biol. Chem. 1983，258 :6561-66 ；Kalebic et al.，Cancer Res. 1994. 54 :5531-4)， 针对 IGF-I 或 IGF-2 的中和抗体(Fang et al, Mol. Cancer Therapy. 2006. 5 :114-20 ； Miyamoto et al, Clin. Cancer Res. 2005，11 :3494-502)，小分子酪氨酸激酶抑制剂 (Garcia-Escheverria et al, Cancer Cell. 2004. 5 :231-9 ；Scotlandi et al, Cancer Res. 2005. 65 :3868-76)，反义寡聚核苷酸(Shapiro et al, J. Clin. Invest. 1994. 94 1235-42 ；Wraight et al. Nature Biotech. 2000. 18 :521-26 ；Scotlandi et al, Cancer Gene Therapy. 2002. 9 :296-07)，IGF-IR 的显性-阴性突变体(Prager et al,Proc. Natl. Acad. Sci. 1994,91:2181-85 ；Kalebic et al.，Int. J. Cancer 1998. 76:223-7 ；Scotlandi et al. Jnt. J. Cancer. 2002 :101 :11-6)，IGF配体类似物(Pietrzkowski et al,Mol. Cell. Biol. 1992. 12 :3883-89),重组 IGF 结合蛋白(Yee et al. Cell growth Differ. 1994. 5 73-77 ；Van Den Berg et al, Eur. J. Cancer. 1997,33 :1108-1113 Jerome et al AACR 2004,Abstract # 5334)，GH释放激素拮抗剂GHRH(&ereday et al,Cancer Res. 2003. 63 7913-19 ；Letsh et al,Proc Natl. Acad. Sci. USA. 2003. 100:1250-55)以及 GII (Kopchick et al，2002. Endocr. Rev. 23，623-46)。抗体抑制IGF-IR功能的能力首先通过靶向IGF-IR的α亚基中未知表位的小鼠 单克隆抗体(a IR3)得到证实(Kull et al.，J. Biol. Chem. 1983,258 :6561-6)。后续开 发的针对IGF-IR的α亚基的其它抗体在不同的实验癌症模型中显示了对IGF-IR功能不 同程度的抑制(Maloney et al. Cancer Res. 2003. 63 :5073-83 ；Burtrum et al, Cancer Res. 2003. 63 :8912-21 ；Sachdev D et al, Cancer Res. 2003. 63,627-35 ；Cohen et al, Clin.Cancer Res. 2005. 11 :3065-74 ；Goetsch et al, Intl. J. Cancer. 2005. 113 :316-28. Lu et al, J. Biol. Chem. 2004. 280 :19665-72)。在癌症细胞中，除了促生存和增殖信号转导，IGF-IR的活化还显示参与运动和 侵入(Ress et al.，Oncogene 2001. 20 :490-00, Nolan et al, Int. J. Cancer. 1997. 72 828-34，Stracke et al, J. Biol.Chem. 1989. 264 :21544-49 Jackson et al, Oncogene, 2001. 20 :7318-25)。据显示肿瘤细胞生产IGF系统的一种或多种成分(IGF-1、IGF-2、IGF-1R、IGF-2R 和IGF-BP)。尽管体外研究表明肿瘤可以生产IGF-I或IGF-2，但是翻译研究表明IGF-2在 肿瘤中为更加相关的更普遍表达的IGF。这是由于肿瘤中沉默IGF-2等位基因因为表遗传 变异而印迹丢失((LOI)时导致了 IGF-2基因的双等位基因表达(Fienberg et al.，Nat. Rev.Cancer 2004. 4 :143-53 ；Giovannucci et al, Horm. Metab. Res. 2003. 35:694-04 ；De Souza et al, FASEB J. et al，1997. 11 :60-7)。这反过来向癌症细胞和支持肿瘤生长的微 环境提供了更多的IGF-2。IGF-IR敏感肿瘤接受来自循环的IGF-1 (肝生成)和来自肿瘤的IGF-2的受体活 化信号，因此目标为同时破坏IGF-I和IGF-2介导的生物活性的方法应提供更好的抗肿瘤应答。因此，同时有效阻断IGF-I和IGF-2介导的生物功能的抗-IGF-IR抗体方法可相对 其它未能有效阻断肿瘤微环境中IGF-I和IGF-2介导的IGF-IR信号转导的生物功能的方 法提供更好的疗效。对于安全性，IGF-IR有着普遍表达，因此靶向IGF-1R的抗体对于避免由普通组织 中ADCC和CDC活性产生的毒性应具有极小的或不具有效应功能。开发该类抗体的一种可 能是包含不介导ADCC或⑶C功能的人gamma 4Fc区的非糖基化形式。另外，下列特性也值得注意=IGF-IR与致癌基因介导的细胞转化有关。IGF/ IGF-IR活化介导癌症细胞中的促分裂和促生存信号转导。IGF-IR活化还促进细胞运动和 转移。IGF-IR在多种癌症中过量表达。具有高于正常循环IGF水平的个体患上癌症的风险 增加。在许多癌症患者中发现了增加的IGFl和2的血浆水平。人肿瘤产生的IGF-2作为 自分泌生长因子。以单一制剂和联合化疗和生物制剂均证实了肿瘤生长的抑制。在本领域仍存在对用于治疗各种肿瘤性疾病(包括癌症及其转移瘤)的具有不同 或改善的结合、功效和安全特征的IGF-IR抗体的需求。

发明内容
本发明涉及联合治疗，并且特别是涉及通过联合使用两种或多种治疗剂来治疗增 殖病症(例如癌症)。特别地，本发明涉及联合抗-IGF-IR抗体和其它抗癌治疗剂以减轻 或消除细胞生长和增殖、致癌作用、肿瘤发生和/或转移性病灶。当和使用单一制剂治疗的 效果比较时，本发明的联合治疗可在治疗癌症和减轻细胞过度增殖、致癌作用、肿瘤发生和 /或转移性病灶中具有协同效果。本发明部分基于IGF系统在调节细胞增殖、分化、凋亡和转化中的重要作用。特别 地，I型胰岛素样生长因子受体((IGF-IR)及其配体(IGF-1和IGF-2)在出生前和出生后 发育、生长激素响应、细胞转化、存活中具有重要作用，并与扩散和转移肿瘤表型的获得具 有关联。本发明一般涉及IGF-IR抗体、其抗原结合片段或衍生物。某些特定的IGF-IR抗 体和抗原结合片段抑制IGF-IR功能或阻断IGF-I和IGF-2介导的IGF-IR信号转导的生物 功能。此外，本发明一般涉及各种肿瘤性疾病(包括癌症和转移瘤)、以及各种与IGF-IR信 号转导相关的过度增殖疾病、病症或损伤的治疗方法。在一些实施方案中，本发明涵盖与选自由M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、 M12-E01和M12-G04构成的组的参考单克隆Fab抗体片段或是与选自由P2A7. 3E11、 20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组的杂交瘤生产的参考 单克隆抗体特异性结合相同IGF-IR表位的分离的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-1RIGF-1R的分离的抗体或其 抗原结合片段，其中该抗体或其片段竞争性地抑制选自由M13-C06、M14-G11、M14-C03、 Μ14-Β01、Μ12-Ε01和M12-G04构成的组的参考单克隆Fab抗体片段或是选自由Ρ2Α7. 3Ε11、 20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组的杂交瘤生产的参考 单克隆抗体结合IGF-1R。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其抗原结合 片段，其中该抗体或其片段包含与选自由M13-C06、M14-G11、M14-C03、Μ14-Β01、Μ12-Ε01 和M12-G04构成的组的单克隆Fab抗体片段或是选自由Ρ2Α7. 3E1U20C8. 3Β8、Ρ1Α2. 2Β11、
920D8. 24B1U P1E2. 3B12和P1G10. 2B8构成的组的杂交瘤生产的单克隆抗体相同的抗原结合域。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的重链可变区(VH)包含与选自由SEQ ID NO :4、SEQ ID NO :9、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO :20、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :48,SEQ ID NO :53,SEQ ID NO :58和SEQ ID NO :63构成的组的参考氨基酸序列至少具
有90% —致性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的轻链可变区(VL)包含与选自由SEQ ID NO :68、SEQ ID NO :73、SEQ ID NO 78, SEQ ID N0:83、SEQ ID NO 88, SEQ ID N0:93、SEQ ID NO 98, SEQ ID N0:103、SEQ ID NO :108, SEQ ID NO :113和SEQ ID NO :118构成的组的参考氨基酸序列至少具有90%
一致性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH包含除了 20个或更少保守氨基酸替换外与选自由SEQ ID NO :4、SEQ ID NO :9,SEQ ID NO 14、SEQ ID NO 20、SEQ ID NO 26、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 38、SEQ ID NO 43,SEQ ID NO 48、SEQ ID NO 53、SEQ ID N0:58 禾口 SEQ ID NO :63 构成的组的参考
氨基酸序列一致的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VL包含除了 20个或更少保守氨基酸替换外与选自由SEQ ID NO 68、SEQ ID NO :73、SEQ ID NO :78、SEQ ID NO :83、SEQ ID NO :88、SEQ ID NO :93、SEQ ID NO :98、 SEQ ID NO :103, SEQ ID NO :108、SEQ ID NO :113 和 SEQ ID NO :118 构成的组的参考氨基
酸序列一致的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的 VH 包含选自由 SEQ ID N0:4、SEQ ID NO :9、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO: 20、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :48、SEQ ID NO :53, SEQ ID NO :58和SEQ ID NO :63构成的组的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的 VL 包含选自由 SEQ ID NO :68、SEQ ID NO :73、SEQ ID NO :78、SEQ ID NO 83,SEQ ID NO 88、SEQ ID NO 93、SEQ ID NO 98、SEQ ID NO 103,SEQ ID NO 108,SEQ ID NO :113和SEQ ID NO :118构成的组的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH和VL分别包含与选自由SEQ ID NO :4和SEQ ID NO 68 ；SEQ ID N0: 8 和 SEQ ID NO 73 ；SEQ ID NO 14 和 SEQ ID NO 78 ；SEQ ID NO 20 和 SEQ ID NO 83 ；SEQ ID NO :26 和 SEQ ID NO 88 ；SEQ ID NO :32 和 SEQ ID NO 93 ；SEQ ID NO :38 和 SEQ ID NO 98 ；SEQ ID NO 43 和 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID NO 48 和 SEQ ID NO :108 ；SEQ ID NO 53 和 SEQ ID NO 103 ；SEQ ID NO 58 和 SEQ ID NO :113 ；禾口 SEQ ID NO 63 禾口 118 构成的组的参 考氨基酸序列至少具有90% —致性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH和VL分别包含除了各有20个或更少保守氨基酸替换外与选自由SEQID NO 4 和 SEQ ID NO 68 ；SEQ ID NO 8 和 SEQ ID NO 73 ；SEQ ID NO 14 和 SEQ ID NO 78 ；SEQ ID NO :20和 SEQ ID NO 83 ；SEQ ID NO :26和 SEQ ID NO 88 ；SEQ ID NO :32和 SEQ ID NO 93 ；SEQ ID NO :38 禾和 SEQ ID NO 98 ；SEQ ID NO :43 和 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID NO 48 和 SEQ ID NO 108 ；SEQ ID N0:53 禾和 SEQ ID NO 103 ；SEQ ID N0:58 禾和 SEQ ID NO :113 ； 和SEQ ID NO 63和118构成的组的参考氨基酸序列一致的氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH和VL分别包含选自由SEQ ID NO 4和SEQ ID NO 68 ；SEQ ID NO 8 和 SEQ ID NO 73 ；SEQ ID NO 14 和 SEQ ID NO 78 ；SEQ ID NO 20 和 SEQ ID NO 83 ；SEQ ID NO :26 和 SEQ ID NO 88 ；SEQ ID NO :32 和 SEQ ID NO 93 ；SEQ ID NO :38 和 SEQ ID NO 98 ；SEQ ID NO 43 和 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID NO 48 和 SEQ ID NO :108 ；SEQ ID NO 53 和 SEQ ID NO 103 ；SEQ ID NO 58 和 SEQ ID NO :113 ；和 SEQ ID NO 63 和 118 构成的组的氨 基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH包含除了两个或更少氨基酸替换外与选自由SEQ ID N0:5、SEQ ID NO :10, SEQ ID N0:15、SEQ ID N0:21、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :44,SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :54、SEQ ID NO :59 和 SEQ ID NO :64 构成的组的参考 VH-⑶Rl氨基酸序列一致的Kabat重链决定簇互补区_1 (VH-⑶Rl)氨基酸序列。在另外的 实施方案中，VH-CDRl 氨基酸序列选自由 SEQ ID N0:5、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :49、 SEQ ID NO :54, SEQ ID NO :59 和 SEQ ID NO :64 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH包含除了四个或更少氨基酸替换外与选自由SEQ ID N0:6、SEQ ID NO 11、SEQ ID NO :16、SEQ ID NO :22、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :34、SEQ ID NO :40、SEQ ID NO 45,SEQ ID NO 50、SEQ ID NO 55、SEQ ID N0:60 和 SEQ ID NO :65 构成的组的参考 VH-⑶R2氨基酸序列一致的Kabat重链决定簇互补区-2 (VH-OTM)氨基酸序列。在另外的 实施方案中，VH-CDR2 氨基酸序列选自由 SEQ ID N0:6、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO :22, SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :34、SEQ ID NO :40、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :50、 SEQ ID NO :55, SEQ ID NO :60 和 SEQ ID NO :65 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH包含除了四个或更少氨基酸替换外与选自由SEQ ID N0:7、SEQ ID NO :12,SEQ ID NO 17、SEQ ID NO 23、SEQ ID NO 29、SEQ ID NO 35、SEQ ID N0:41、SEQ ID NO :46,SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :56、SEQ ID NO :61 和 SEQ ID NO :66 构成的组的参考 VH-⑶R3氨基酸序列一致的Kabat重链决定簇互补区-3 (VH-⑶旧)氨基酸序列。在另外的 实施方案中，VH-CDR3 氨基酸序列选自由 SEQ ID N0:7、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO :23, SEQ ID NO :29、SEQ ID NO :35、SEQ ID NO :41、SEQ ID NO :46、SEQ ID NO :51、 SEQ ID NO :56, SEQ ID NO :61 和 SEQ ID NO :66 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VL包含除了四个或更少氨基酸替换外与选自由SEQ ID NO 69, SEQ ID NO :74、SEQ ID NO :79、SEQ ID NO :84、SEQ ID NO :89、SEQ ID NO :94、SEQ ID NO :99、SEQID NO :104, SEQ ID N0:109、SEQ ID NO :114 禾口 SEQ ID NO :119 构成的组的参考 VL-CDR1 氨基酸序列一致的Kabat轻链决定簇互补区-I(VL-CDRl)氨基酸序列。在另外的实施方案 中，VL-CDRl 氨基酸序列选自由 SEQ ID NO 69, SEQ ID NO 74, SEQ ID NO 79, SEQ ID NO: 84,SEQ ID NO 89,SEQ ID NO 94、SEQ ID NO 99、SEQ ID NO 104,SEQ ID NO 109,SEQ ID NO :114 禾Π SEQ ID NO :119 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VL包含除了两个或更少氨基酸替换外与选自由SEQ ID NO 70, SEQ ID NO 75,SEQ ID NO 80,SEQ ID NO 85,SEQ ID NO 90,SEQ ID NO 95,SEQ ID NO: 100、SEQ ID NO :105, SEQ ID N0:110、SEQ ID NO :115 禾口 SEQ ID NO : 120 构成的组的参考 VL-CDR2 氨基酸序列一致的Kabat轻链决定簇互补区-2 (VL-CDM)氨基酸序列。在另外的实施方案 中，VL-CDR2 氨基酸序列选自由 SEQ ID NO 70, SEQ ID NO 75, SEQ ID NO 80, SEQ ID NO:
85、SEQID NO :90、SEQ ID NO :95、SEQ ID NO :100、SEQ ID NO :105、SEQ ID NO :110、SEQ ID NO 115 和 SEQ ID NO :120 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VL包含除了四个或更少氨基酸替换外与选自由SEQ ID NO 71, SEQ ID NO 76, SEQ ID N0:81、SEQ ID NO 86, SEQ ID N0:91、SEQ ID NO 96, SEQ ID N0:101、SEQ ID NO :106, SEQ ID N0:111、SEQ ID NO :116 禾口 SEQ ID NO : 121 构成的组的参考 VL-CDR3 氨基酸序列一致的Kabat轻链决定簇互补区-3(VL-CDR;3)氨基酸序列。在另外的实施方案 中，VL-CDR3 氨基酸序列选自由 SEQ ID N0:71、SEQ ID NO 76, SEQ ID N0:81、SEQ ID NO:
86、SEQID NO :91、SEQ ID NO :96、SEQ ID NO :101, SEQ ID NO :106, SEQ ID NO : 111、SEQ ID NO 116 和 SEQ ID NO :121 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH包含除了在至少一个所述VH-CDR中一个、两个、三个或四个氨基酸 替换外选自由 SEQ ID NO :5、6 禾口 7 ;SEQ ID NO :10、11 和 12 ;SEQ ID NO: 15、16 和 17 ；SEQ ID NO :21、22和23 ;SEQ ID NO :27、28和 29 ;SEQ ID NO :33、34和 35 ;SEQ ID N0:39、40和 41;· SEQ ID NO :44、45 和 46 ;SEQ ID NO :49、50 和 51 ;SEQ ID NO :54、55 和 56 ;SEQ ID NO: 59,60 和 61 ；以及 SEQ ID NO :64、65 和 66 构成的组的 VH-CDRl、VH-CDR2 和 VH-CDR3 氨基 酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VH包含选自由SEQ ID N0:5、6和7;SEQ ID NO :10、11和12 ;SEQ ID NO: 15、16 和 17;SEQ ID NO :21、22 和 23 ;SEQ ID NO :27、28 禾口 29 ;SEQ ID NO :33、34 和 35 ;SEQ ID NO :39,40 和 41 ；· SEQ ID NO :44、45和 46；SEQ ID NO :49、50 和 51 ；SEQ ID NO :54、55 ^P 56 ；SEQ ID NO :59、60 和 61 ；以及 SEQ ID NO :64、65 和 66 构成的组的 VH-CDR1、VH_CDR2 和VH-⑶R3氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VL包含除了在至少一个所述VL-CDR中一个、两个、三个或四个氨基酸替 换外选自由 SEQ ID NO 69,70 和 71 ；SEQ ID NO :74、75 和 76 ；SEQ ID NO :79、80 和 81 ；SEQ ID NO :84、85和86 ;SEQ ID NO :89、90和91 ;SEQID NO :94、95和96 ;SEQ ID N0:99、100和 101 ；SEQ ID NO :104,105 和 106 ；SEQ ID NO :109,110 和 111 ；SEQ ID NO :114,115 和 116 ；以及SEQ ID NO 119、120和121构成的组的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3氨基酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖特异性结合IGF-IR的分离的抗体或其片段，其中 该抗体或其片段的VL包含选自由SEQ ID NO :69、70和71 ;SEQ ID NO :74、75和76 ;SEQ ID NO :79、80 和 81 ;SEQ ID NO :84、85 和 86 ;SEQ ID NO :89、90 和 91 ;SEQ ID N0:94、95 禾口 96 ；SEQ ID NO :99、100和 101 ;SEQ ID NO 104、105和 106 ;SEQ ID NO :109、110和 111 ;SEQ ID NO :114、115 和 116 ；以及 SEQ ID NO :119、120 和 121 构成的组的 VL-CDR1、VL-CDR2 禾口 VL-⑶R3氨基酸序列。在上述抗体或其片段的多种实施方案中，VH框架区和/或VL框架区除了五个或 更少的氨基酸替换外为人源。在一些实施方案中，上述抗体或其片段结合线性表位或非线性构型表位。在一些实施方案中，上述抗体或其片段为多价体，并包含至少两条重链和至少两 条轻链。在一些实施方案中，上述抗体或其片段是多特异性的。在另外的实施方案中，上述 抗体或其片段是双特异性的。在上述抗体或其片段的多种实施方案中，重链和轻链可变域为完全人源。在另 外的实施方案中，重链和轻链可变域来自选自由M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、 M12-E01和M12-G04构成的组的单克隆Fab抗体片段。在上述抗体或其片段的多种实施方案中，重链和轻链可变域是鼠源。在另外的实 施方案中，重链和轻链可变域来自由选自由P2A7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B11、 P1E2. 3B12和P1G10. 2B8构成的组的杂交瘤生产的单克隆抗体。在多种实施方案中，上述抗体或其片段是人源化、嵌合、灵长源化、或完全人源的。 在某些实施方案中，上述抗体或其片段是Fab片段、Fab'片段、F (ab) 2片段或Fv片段。在 某些实施方案中，上述抗体是单链抗体。在某些实施方案中，上述抗体或其片段包含选自由人kappa恒定区和人lambda恒 定区构成的组的轻链恒定区。在某些实施方案中，上述抗体或其片段包含重链恒定区或其片段。在另外的实施 方案中，重链恒定区或其片段是人IgG4。在某些其它实施方案中，该IgG4被突变以去除糖 基化位点。在另外的实施方案中，该IgG4突变包含Kabat编号系统的SMlP和T318A。在一些实施方案中，上述抗体或其片段通过以解离常数(Kd)低于对所述参考单克 隆抗体的Kd表征的亲和力特异性结合IGF-IR多肽或其片段或IGF-Rl变体多肽。在另外的 实施方案中，该解离常数(Kd)不大于 ^d(T2M、10-2M、5xl(^M、10-3M、5xl0-4M、10-4M、5xl0-5M、
1(Γ"Μ、5χ10 Μ、1(Γ12Μ、5Χ10 Μ、1(Γ"Μ、5Χ1(ΓμΜ、1(ΓμΜ、5Χ1(Γ15Μ、或 IO-15M0在一些实施方案中，上述抗体或其片段相对于鼠IGF-IR多肽或其片段或者非人 灵长动物IGF-IR多肽或其片段优先结合人IGF-IR多肽或其片段。在某些其它实施方案中，上述抗体或其片段结合人IGF-IR多肽或其片段，并且还 结合非-人灵长动物IGF-IR多肽或其片段。在一些实施方案中，上述抗体或其片段结合在细胞表面上表达的IGF-1R。在另外 的实施方案中，细胞是恶性肿瘤细胞、肿瘤性细胞、肿瘤细胞或转移细胞。
在一些实施方案中，上述抗体或其片段阻断胰岛素生长因子与IGF-IR的结合。 在另外的实施方案中，胰岛素生长因子是胰岛素生长因子-I(IGF-I)或胰岛素生长因 子-2(IGF-2)。在某些实施方案中，上述抗体或其片段同时阻断IGF-I和IGF-2与IGF-IR 的结合。在一些实施方案中，上述抗体或其片段抑制IGF-IR-介导的细胞增殖、IGF-I或 IGF-2-介导的IGF-IR磷酸化、肿瘤细胞生长或IGF-IR内在化。在另外的实施方案中，上述抗体或其片段还包含与其融合的外源多肽。在一些实施方案中，上述抗体或其片段结合至选自由细胞毒素剂、治疗剂、细胞抑 制剂、生物毒素、前药、肽、蛋白、酶、病毒、脂质、生物应答调节剂、药剂、淋巴因子、外源抗体 或其片段、可检测的标记、聚乙二醇(PEG)构成的组的制剂、以及两种或多种任意所述制剂 的组合，或联合使用。在另外的实施方案中，该细胞毒素剂(和IGF-IR抗体结合或联合使 用)选自由放射性核、生物毒素、酶活毒素、细胞抑制或细胞毒性治疗剂、前药、免疫活性配 体、生物应答调节剂构成的组、或是两种或多种任意所述细胞毒素剂的组合。在另外的实施 方案中，该可检测的标记选自由酶、荧光标记、化学发光标记、生物发光标记、放射活性标记 构成的组、或是两种或多种任意所述可检测的标记的组合。在另外的实施方案中，本发明涵盖包含上述抗体或其片段和载体的组合物。本发明的某些实施方案涵盖包含编码抗体VH多肽的核酸的分离的多聚核苷酸， 其中VH多肽的氨基酸序列与选自由SEQ ID NO :4、SEQ ID NO :9、SEQ ID NO :14、SEQ ID NO 20, SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :48、SEQ ID NO 53,SEQ ID NO 58和SEQ ID NO :63构成的组的参考氨基酸序列至少具有90%—致 性；并且包含该VH多肽的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。在另外的实施方案 中，VH 多肽的氨基酸序列选自由 SEQ ID NO :4、SEQ ID NO :9、SEQ ID NO :14、SEQ ID NO 20、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :48、SEQ ID NO :53、SEQ ID NO 58 和 SEQ ID NO 63 构成的组。在某些实施方案中，编码该VH多肽的核苷酸序列在不改变该VH多肽的氨基酸序 列的情况下进行优化以提高表达。在另外的实施方案中，该优化包括鉴别并去除剪接供体 和剪接受体位点和/或用于表达该多聚核苷酸的细胞的密码子的优化。在另外的实施方案 中，该核酸包含选自由 SEQ ID NO 3, SEQ ID N0:8、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 18、SEQ ID NO :19, SEQ ID NO :24、SEQ ID NO :25、SEQ ID NO :30、SEQ ID NO :31、SEQ ID NO :36、SEQ ID NO :37, SEQ ID NO :42, SEQ ID NO :47, SEQ ID NO :52, SEQ ID NO :57 禾口 SEQ ID NO :62 构成的组的核苷酸序列。在一些实施方案中，本发明涵盖包含编码抗体VL多肽的核酸的分离的多聚核苷 酸，其中该VL多肽的氨基酸序列与选自由SEQ ID NO :68、SEQ ID NO :73、SEQ ID NO :78、 SEQ ID NO 83,SEQ ID NO 88,SEQ ID NO 93,SEQ ID NO 98,SEQ ID NO 103,SEQ ID N0: 108,SEQ ID NO :113和SEQ ID NO :118构成的组的参考氨基酸序列至少具有90% —致性； 并且其中包含该VL多肽的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。在另外的实施方案 中，该 VL 多肽的氨基酸序列选自由 SEQ ID NO 68, SEQ ID NO 73、SEQ ID NO 78、SEQ ID NO 83,SEQ ID NO 88、SEQ ID NO 93、SEQ ID NO 98、SEQ ID NO :103、SEQ ID NO :108、SEQ ID NO 113 和 SEQ ID NO :118 构成的组。
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在某些实施方案中，编码该VL多肽的核苷酸序列在不改变所述VL多肽的氨基酸 序列的情况下进行优化以提高表达。在另外的实施方案中，该优化包括鉴别并去除剪接供 体和剪接受体位点和/或用于表达该多聚核苷酸的细胞的密码子的优化。在另外的实施方 案中，该核酸包含选自由 SEQ ID NO 67,SEQ ID NO 72、SEQ ID NO 77、SEQ ID NO :82、SEQ ID NO :87,SEQ ID NO :92、SEQ ID NO :97、SEQ ID NO 102,SEQ ID NO :107、SEQ ID NO :112 和SEQ ID NO :117构成的组的核苷酸序列。在某些其它实施方案中，本发明涵盖包含编码抗体VH多肽的核酸的分离的多聚 核苷酸，其中该VH多肽的氨基酸序列除了 20个或更少的保守氨基酸替换之外与选自由SEQ ID NO 4, SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO 20, SEQ ID NO :26, SEQ ID NO :32, SEQ ID NO :38, SEQ ID NO :43, SEQ ID NO :48, SEQ ID NO :53, SEQ ID NO :58 禾口 SEQ ID NO :63 构成的组的参考氨基酸序列一致；并且其中包含所述VH多肽的抗体或其抗原结合片段特 异性结合IGF-1R。在一些实施方案中，本发明涵盖包含编码抗体VL多肽的核酸的分离的多聚核苷 酸，其中该VL多肽的氨基酸序列除了 20个或更少的保守氨基酸替换之外与选自由SEQ ID NO :68、SEQ ID NO :73、SEQ ID NO :78、SEQ ID NO :83、SEQ ID NO :88、SEQ ID NO :93、SEQ ID NO :98、SEQ ID NO :103、SEQ ID NO :108、SEQ ID NO :113 和 SEQ ID NO :118 构成的组 的参考氨基酸序列一致；并且其中包含所述VL多肽的抗体或其抗原结合片段特异性结合 IGF-IR0在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含除了两个或更少的氨 基酸替换之外与选自由 SEQ ID NO 5,SEQ ID NO 10、SEQ ID NO :15、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :27, SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :54、SEQ ID NO 59和SEQ ID NO :64构成的组的参考VH-⑶Rl氨基酸序列一致的VH-⑶Rl氨基酸序 列的编码核酸；并且其中包含所述VH-CDRl的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。 在另外的实施方案中，VH-CDIU氨基酸序列选自由SEQ ID NO :5、SEQ ID NO 10,SEQ ID N0:
15、SEQID NO :21、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :54、SEQ ID NO 59 和 SEQ ID NO 64 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含除了四个或更少的氨 基酸替换之外与选自由 SEQ ID NO 6,SEQ ID NO =IUSEQ ID NO 16、SEQ ID NO 22、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :34、SEQ ID NO :40、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :50、SEQ ID NO :55、SEQ ID NO 60和SEQ ID NO 65构成的组的参考VH-⑶R2氨基酸序列一致的VH-⑶R2氨基酸序 列的编码核酸；并且其中包含所述VH-CDR2的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。 在另外的实施方案中，VH-CDR2氨基酸序列选自由SEQ ID NO :6、SEQ ID NO =IUSEQ ID NO:
16、SEQID NO :22、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :34、SEQ ID NO :40、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :50, SEQ ID NO :55、SEQ ID NO :60 和 SEQ ID NO :65 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含除了四个或更少的氨 基酸替换之外与选自由 SEQ ID NO 7,SEQ ID NO 12、SEQ ID NO :17、SEQ ID NO :23、SEQ ID NO :29、SEQ ID NO :35、SEQ ID NO :41、SEQ ID NO :46、SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :56、SEQ ID NO 61和SEQ ID NO 66构成的组的参考VH-⑶R3氨基酸序列一致的VH-⑶R3氨基酸序 列的编码核酸；并且其中包含所述VH-CDR3的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。在另外的实施方案中，VH-CDR3氨基酸序列选自由SEQ ID NO :7、SEQ ID NO 12, SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO :23、SEQ ID NO :29、SEQ ID NO :35、SEQ ID NO :41、SEQ ID NO :46、SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :56、SEQ ID NO 61 和 SEQ ID NO 66 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含除了四个或更少的氨 基酸替换之外与选自由 SEQ ID NO 69, SEQ ID NO 74, SEQ ID NO 79、SEQ ID NO 84、SEQ ID NO 89,SEQ ID NO 94、SEQ ID NO 99、SEQ ID NO 104,SEQ ID NO 109,SEQ ID NO :114 和SEQ ID NO 119构成的组的参考VL-⑶Rl氨基酸序列一致的VL-⑶Rl氨基酸序列的编 码核酸；并且其中包含所述VL-CDRl的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。在另外 的实施方案中，VL-CDRl氨基酸序列选自由SEQ ID NO 69、SEQ ID NO 74, SEQ ID NO :79、 SEQ ID NO 84,SEQ ID NO 89、SEQ ID NO 94、SEQ ID NO 99、SEQ ID NO 104,SEQ ID NO: 109、SEQ ID NO :114 禾口 SEQ ID NO :119 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含除了两个或更少的氨 基酸替换之外与选自由 SEQ ID NO 70, SEQ ID NO 75, SEQ ID NO 80、SEQ ID NO 85, SEQ ID NO :90、SEQ ID NO :95、SEQ ID NO :100、SEQ ID NO :105、SEQ ID NO :110、SEQ ID NO 115和SEQ ID NO :120构成的组的参考VL-⑶R2氨基酸序列一致的VL-⑶R2氨基酸序列的 编码核酸；并且其中包含所述VL-CDR2的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。在另 外的实施方案中，VL-CDR2氨基酸序列选自由SEQ ID NO :70、SEQ ID NO :75、SEQ ID NO 80,SEQ ID NO 85,SEQ ID NO 90,SEQ ID NO 95,SEQ ID NO 100,SEQ ID NO 105,SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO :115 和 SEQ ID NO :120 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含除了四个或更少的氨 基酸替换之外与选自由 SEQ ID NO 71, SEQ ID NO 76, SEQ ID N0:81、SEQ ID NO 86, SEQ ID NO :91、SEQ ID NO :96、SEQ ID NO :101、SEQ ID NO :106、SEQ ID NO 111、SEQ ID NO 116和SEQ ID NO :121构成的组的参考VL-⑶R3氨基酸序列一致的VL-⑶R3氨基酸序列的 编码核酸；并且其中包含所述VL-CDR3的抗体或其抗原结合片段特异性结合IGF-1R。在另 外的实施方案中，VL-CDR3氨基酸序列选自由SEQ ID NO :71、SEQ ID NO :76、SEQ ID NO 81,SEQ ID NO 86,SEQ ID NO :9USEQ ID NO 96,SEQ ID NO =IOUSEQ ID NO 106,SEQ ID NO: 111、SEQ ID NO :116 和 SEQ ID NO :121 构成的组。在一些实施方案中，本发明涵盖分离的多聚核苷酸，其包含编码抗体VH多肽的核 酸，其中所述VH多肽包含选自由SEQ ID N0:5、6和7;SEQ ID NO :10、11和12 ;SEQ ID NO: 15、16*17;SEQ ID NO :21、22 和 23 ;SEQ ID NO :27、28 和 29 ;SEQ ID NO :33、34 和 35 ;SEQ ID NO :39、40 和 41 ;SEQ ID NO :44、45 和 46 ;SEQ ID NO :49、50 和 51 ;SEQ ID N0:54、55 禾口 56 ；SEQ ID NO :59、60 和 61 ；以及 SEQ ID NO :64、65 和 66 构成的组的 VH-CDR1、VH-CDR2 和VH-CDR3氨基酸序列；并且其中包含所述VL-CDR3的抗体或其抗原结合片段特异性结合 IGF-IR0在一些实施方案中，本发明涵盖包含编码抗体VL多肽的核酸的分离的多聚核苷 酸，其中所述VL多肽包含选自由SEQ ID NO :69、70和71 ;SEQ ID NO :74、75和76 ;SEQ ID NO :79,80 和 81 ；SEQ ID NO :84、85 和 86 ；SEQ ID NO :89、90 和 91 ；SEQ ID NO :94、95 和 96 ；SEQ ID NO :99、100 禾口 101 ;SEQ ID NO 104、105 禾口 106 ;SEQ ID NO :109、110 和 111 ； SEQ ID NO 114、115 和 116 ；以及 SEQ ID NO :119、120 和 121 构成的组的 VH-CDR1、VH_CDR2
16和VH-CDR3氨基酸序列；并且其中包含所述VL-CDR3的抗体或其抗原结合片段特异性结合 IGF-IR0在一些实施方案中，上述多聚核苷酸还包含融合至抗体VH多肽或抗体VL多肽的 信号肽的编码核酸。在某些其它实施方案中，上述多聚核苷酸还包含编码融合至该VH多肽的重链恒 定区CHl结构域、编码融合至该VH多肽的重链恒定区CH2结构域、编码融合至该VH多肽的 重链恒定区CH3结构域、或编码融合至所述VH多肽的重链铰链区的核酸。在另外的实施方 案中，重链恒定区是人IgG4。在某些其它实施方案中，该IgG4被突变以去除糖基化位点。 在另外的实施方案中，该IgG4突变包含使用Kabat编号系统的SMlP和T318A。在一些实施方案中，上述多聚核苷酸包含编码融合至所述VL多肽的轻链恒定区 结构域的核酸。在另外的实施方案中，轻链恒定区是人kappa。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，该抗体或其抗原结合片段包含由该核酸 编码的、与选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组的 参考单克隆Fab抗体片段或与由选自由P2A7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B11、 P1E2. ;3B12和P1G10. 2B8构成的组的杂交瘤生产的参考单克隆抗体特异性结合相同IGF-Rl 表位的多肽。在上述多聚核苷酸的多种实施方案中，该抗体或其抗原结合片段包含由该核酸 编码的、竞争性地抑制选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组的参考单克隆Fab抗体片段或由选自由P2A7. 3E1U20C8. 3B8, P1A2. 2B11、 20D8. 24B1UP1E2. 3B12和P1G10. 2B8构成的组的杂交瘤生产的参考单克隆抗体的多肽。在上述多聚核苷酸的多种实施方案中，该VH多肽或VL多肽的框架区除了五个或 更少的氨基酸替换外为人源。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，本发明涵盖包含由该核酸编码的、结合线 性表位或非线性构型表位的多肽的抗体或其抗原结合片段。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段为多价体，且包含了至少两条重链和至少两条轻链。在上述多聚核苷酸的某些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段为多特异性的。在另外的实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段为双特异性的。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段包含完全人源的重链和轻链可变域。在另外的实施方案中，重链和轻链可变域与 选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组的单克隆 Fab 抗体片段一致。在上述多聚核苷酸的某些其它实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其 抗原结合片段包含鼠源的重链和轻链可变域。在另外的实施方案中，重链和轻链可变域与 由选自由 P2A7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组 的杂交瘤生产的单克隆抗体一致。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段是人源化的。
在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段是灵长源化的。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段是嵌合的。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段是完全人源的。在上述多聚核苷酸的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段是Fab片段、Fab'片段、F (ab) 2片段或Fv片段。在上述多聚核苷酸的某些实施 方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合片段是单链抗体。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段通过以解离常数(Kd)不大于 hl(T2M、10-2M、5xl(^M、10-3M、5xl0-4M、10-4M、5xl0-5M、
1(Γ"Μ、5χ10~Μ、1(Γ12Μ、5Χ10^Μ、1(Γ"Μ、5Χ1(ΓμΜ、1(ΓμΜ、5Χ1(Γ15Μ、或 10-1 表征的亲和力特异 性结合IGF-Rl多肽或其片段，或IGF-IR变体多肽。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段相对于鼠IGF-IR多肽或其片段或者非人灵长动物IGF-IR多肽或其片段优先结合 人IGF-IR多肽或其片段。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段结合人IGF-IR多肽或其片段，并且还结合非-人灵长动物IGF-IR多肽或其片段。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段结合在细胞表面上表达的IGF-1R。在另外的实施方案中，细胞是恶性肿瘤细胞、肿 瘤性细胞、肿瘤细胞或转移细胞。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段阻断胰岛素生长因子与IGF-IR的结合。在另外的实施方案中，胰岛素生长因子是 胰岛素生长因子-I(IGF-I)或胰岛素生长因子-2(IGF-2)。在上述多聚核苷酸的某些其它 实施方案中，所述抗体或其片段同时阻断IGF-I和IGF-2与IGF-IR的结合。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原 结合片段抑制IGF-IR-介导的细胞增殖、抑制IGF-I或IGF-2-介导的IGF-IR磷酸化、抑制 肿瘤细胞生长或抑制IGF-IR内在化。在一些实施方案中，上述多聚核苷酸还包含编码外源多肽的核酸。在上述多聚核苷酸的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗 原结合片段结合至选自由细胞毒素剂、治疗剂、细胞抑制剂、生物毒素、前药、肽、蛋白、酶、 病毒、脂质、生物应答调节剂、药剂、淋巴因子、外源抗体或其片段、可检测的标记、聚乙二醇 (PEG)构成的组的制剂、以及两种或多种任意所述制剂的组合，或联合使用。在另外的实施 方案中，该细胞毒素剂(和IGF-IR抗体结合或联合使用)选自由放射性核、生物毒素、酶活 毒素、细胞抑制或细胞毒性治疗剂、前药、免疫活性配体、生物应答调节剂构成的组、或是两 种或多种任意所述细胞毒素剂的组合。在某些其它实施方案中，该可检测的标记选自由酶、 荧光标记、化学发光标记、生物发光标记、放射活性标记构成的组、或是两种或多种任意所 述可检测的标记的组合。
在一些实施方案中，本发明涵盖包含上述多聚核苷酸的组合物。在某些其它实施方案中，本发明涵盖包含上述多聚核苷酸的载体。在另外的实施 方案中，多聚核苷酸和启动子可操作地关联。在另外的实施方案中，本发明提供包含这种载 体的宿主细胞。在另外的实施方案中，本发明提供其中多聚核苷酸和启动子可操作地关联 的载体。在另外的实施方案中，本发明涵盖制备特异性结合IGF-IR的抗体或其片段的方 法，包括培养包含上述多聚核苷酸的载体的宿主细胞；以及回收所述抗体或其片段。在另外 的实施方案中，本发明提供由上述方法制备的分离的多肽。在一些实施方案中，本发明涵盖由上述多聚核苷酸编码的分离的多肽。在上述多肽的另外的实施方案中，包含所述多肽的抗体或其片段特异性结合 IGF-IR0其它实施方案包括包含上述多肽的分离的抗体或其片段。在一些实施方案中，本发明涵盖包含分离VH编码多聚核苷酸和分离VL编码多聚 核苷酸的组合物，其中该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸分别包含与选自由SEQ ID NO 4 和 SEQ ID NO 68 ；SEQ ID NO 8 和 SEQ ID NO 73 ；SEQ ID NO 14 和 SEQ ID NO 78 ；SEQ ID NO :20和 SEQ ID NO 83 ；SEQ ID NO :26和 SEQ ID NO 88 ；SEQ ID NO :32 禾口 SEQ ID NO 93 ；SEQ ID NO :38 禾口 SEQ ID NO 98 ；SEQ ID NO :43 禾口 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID NO 48 和 SEQ ID NO 108 ；SEQ ID N0:53 禾口 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID N0:58 禾口 SEQ ID NO :113; 以及SEQ ID NO :63和118构成的组的参考氨基酸序列至少具有90%—致性的氨基酸序 列的编码核酸；并且其中由该VH和VL编码多聚核苷酸所编码的抗体或其片段特异性结合 IGF-IR0在另外的实施方案中，该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸分别包含选 自由 SEQ ID NO :4 禾口 SEQ ID NO 68 ； SEQ ID NO :8 禾口 SEQ ID NO 73 ； SEQ ID NO: 14 禾口 SEQ ID NO 78 ；SEQ ID NO 20 禾口 SEQ ID NO 83 ；SEQ ID NO 26 禾口 SEQ ID NO 88 ；SEQ ID NO 32 和 SEQ ID NO 93 ；SEQ ID NO 38 和 SEQ ID NO 98 ；SEQ ID NO 43 和 SEQ ID NO :103 ； SEQ ID NO 48 和 SEQ ID NO :108 ；SEQ ID NO 53 和 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID NO 58 和 SEQ ID NO :113 ；以及SEQ ID NO 63和118构成的组的氨基酸序列的编码核酸。在某些其它实施方案中，本发明的涵盖部分提供包含分离VH编码多聚核苷酸和 分离VL编码多聚核苷酸的组合物，其中该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸分 别包含除了少于20个保守氨基酸替换外与选自由SEQ ID NO 4和SEQ ID NO 68 ；SEQ ID NO 8 和 SEQ ID NO 73 ；SEQ ID NO :14 禾口 SEQ ID NO 78 ；SEQ ID NO 20 和 SEQ ID NO 83 ； SEQ ID NO :26 和 SEQ ID NO 88 ；SEQ ID NO :32 和 SEQ ID NO 93 ；SEQ ID NO :38 和 SEQ ID NO 98 ；SEQ ID NO :43 和 SEQ ID NO :103 ；SEQ ID NO :48 和 SEQ ID NO :108 ；SEQ ID NO 53 和 SEQ ID NO 103 ；SEQ ID N0:58 禾口 SEQ ID NO :113;以及 SEQ ID NO :63 和 118 构成的组 的参考氨基酸序列一致性的氨基酸序列的编码核酸；并且其中由该VH和VL编码多聚核苷 酸所编码的抗体或其片段特异性结合IGF-1R。在另外的实施方案中，该VH编码多聚核苷 酸编码包含选自由 SEQ ID NO :5、6 和 7 ；SEQ ID NO :10、11 和 12 ；SEQ ID NO 15、16 和 17 ； SEQ ID NO 21,22 和 23 ；SEQ ID NO :27、28 和 29 ；SEQ ID NO :33、34 和 35 ；SEQ ID NO :39、 40 禾口 41;SEQ ID NO :44、45 和 46 ;SEQ ID NO :49、50 和 51 ;SEQ ID NO :54、55 和 56 ;SEQ ID NO :59,60 和 61 ；以及 SEQ ID NO :64、65 和 66 构成的组的 VH-CDR1、VH_CDR2 和 VH-CDR3 氨 基酸序列的VH多肽；其中该VL编码多聚核苷酸编码包含选自由SEQ ID NO :69,70和71 ；SEQ ID NO 74,75 和 76 ；SEQ ID NO :79、80 和 81 ；SEQ ID NO :84、85 和 86 ；SEQ ID NO :89、 90 和 91 ；SEQ ID NO :94、95 和 96 ；SEQ ID NO :99,100 禾口 101 ；SEQ ID NO 104、105 禾口 106 ； SEQ ID NO :109、110 和 111 ;SEQ ID NO 114、115 和 116 ；以及 SEQ ID N0:119、120 禾口 121 构成的组的VL-CDRl、VL-CDR2和VL-CDR3氨基酸序列的VL多肽；并且其中由该VH和VL编 码多聚核苷酸编码的抗体或其片段特异性结合IGF-1R。在上述组合物的各种实施方案中，VH编码多聚核苷酸还包含融合至抗体VH多肽 的信号肽的编码核酸。在上述组合物的各种实施方案中，VL编码多聚核苷酸还包含融合至抗体VL多肽 的信号肽的编码核酸。在上述组合物的一些实施方案中，VH编码多聚核苷酸还包含编码融合至该VH多 肽的重链恒定区CHl结构域的核酸、还包含编码融合至该VH多肽的重链恒定区CH2结构域 的核酸、还包含编码融合至该VH多肽的重链恒定区CH3结构域的核酸、或还包含编码融合 至所述VH多肽的重链铰链区的核酸。在另外的实施方案中，重链恒定区是人IgG4。在某些 其它实施方案中，该IgG4被突变以去除糖基化位点。在另外的实施方案中，该IgG4突变包 含使用Kabat编号系统的S241P和T318A。在上述组合物的一些实施方案中，VL编码多聚核苷酸还包含编码融合至所述VL 多肽的轻链恒定区结构域的核酸。在另外的实施方案中，轻链恒定区是人kappa。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片 段与选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组的参考单克 隆 Fab 抗体片段或与由选自由 P2A7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B11、P1E2. 3B 12 和P1G10. 2B8构成的组的杂交瘤生产的参考单克隆抗体特异性结合相同IGF-Rl表位。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片 段竞争性地抑制选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的 组的参考单克隆Fab抗体片段或由选自由P2A7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B11、 P1E2. 3B 12和P1G10. 2B8构成的组的杂交瘤生产的参考单克隆抗体与IGF-IR的结合。在上述组合物的一些实施方案中，该VH和VL多肽的框架区除了五个或更少的氨 基酸替换外为人源。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片 段结合线性表位或非线性构型表位。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片 段为多价体，且包含了至少两条重链和至少两条轻链。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片 段是多特异性的。在另外的实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片段 是双特异性的。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片 段包含完全人源的重链和轻链可变域。在另外的实施方案中，重链和轻链可变域与选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组的单克隆 Fab 抗体片段一致。在上述组合物的一些实施方案中，由VH和VL编码多聚核苷酸编码的抗体或其片段包含鼠源的重链和轻链可变域。在另外的实施方案中，重链和轻链可变域与由选自由 P2A7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组的杂交瘤
生产的单克隆抗体一致。在上述组合物的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段是人源化的。在上述组合物的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段是灵长源化的。在上述组合物的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段是嵌合的。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段是完全人源的。在上述组合物的各种实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段是Fab片段、Fab'片段、F (ab) 2片段或Fv片段。在上述组合物的某些实施方案中，包 含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合片段是单链抗体。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结 合片段通过以解离常数(Kd)不大于 ^ 1(Γ2Μ、1(Γ2Μ、5χ103Μ、1(Γ3Μ、5χ1(Γ4Μ、1(Γ4Μ、5χ1(Γ5Μ、
1(Γ"Μ、5χ10~Μ、1(Γ12Μ、5Χ10^Μ、1(Γ"Μ、5Χ1(ΓμΜ、1(ΓμΜ、5Χ1(Γ15Μ、或 10-1 表征的亲和力特异 性结合IGF-Rl多肽或其片段，或IGF-IR变体多肽。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段相对于鼠IGF-IR多肽或其片段或者非人灵长动物IGF-IR多肽或其片段优先结合人 IGF-IR多肽或其片段。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段结合人IGF-IR多肽或其片段，并且还结合非-人灵长动物IGF-IR多肽或其片段。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段结合在细胞表面上表达的IGF-1R。在另外的实施方案中，细胞是恶性肿瘤细胞、肿瘤性 细胞、肿瘤细胞或转移细胞。在上述组合物的一些实施方案中，包含由所述核酸编码的多肽的抗体或其抗原结 合片段阻断胰岛素生长因子与IGF-IR的结合。在另外的实施方案中，胰岛素生长因子是胰 岛素生长因子-I(IGF-I)或胰岛素生长因子-2(IGF-2)。在上述组合物的某些其它实施方 案中，所述抗体或其抗原结合片段同时阻断IGF-I和IGF-2与IGF-IR的结合。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段抑制IGF-IR-介导的细胞增殖、抑制IGF-I或IGF-2-介导的IGF-IR磷酸化、抑制肿瘤 细胞生长或抑制IGF-IR内在化。在一些实施方案中，上述组合物、VH编码多聚核苷酸、VL编码多聚核苷酸或VH和 VL编码多聚核苷酸还包含编码外源多肽的核酸。在上述组合物的一些实施方案中，包含由该核酸编码的多肽的抗体或其抗原结合 片段结合至选自由细胞毒素剂、治疗剂、细胞抑制剂、生物毒素、前药、肽、蛋白、酶、病毒、月旨 质、生物应答调节剂、药剂、淋巴因子、外源抗体或其片段、可检测的标记、聚乙二醇(PEG)构成的组的制剂、以及两种或多种任意所述制剂的组合，或联合使用。在另外的实施方案 中，该细胞毒素剂(和IGF-IR抗体结合或联合使用)选自由放射性核、生物毒素、酶活毒 素、细胞抑制或细胞毒性治疗剂、前药、免疫活性配体、生物应答调节剂构成的组、或是两种 或多种任意所述细胞毒素剂的组合。在某些其它实施方案中，该可检测的标记选自由酶、荧 光标记、化学发光标记、生物发光标记、放射活性标记构成的组、或是两种或多种任意所述 可检测的标记的组合。在上述组合物的一些实施方案中，该VH编码多聚核苷酸包含于第一载体，而该VL 编码多聚核苷酸包含于第二载体。在另外的实施方案中，该VH编码多聚核苷酸和第一启动 子可操作地关联而该VL编码多聚核苷酸和第二启动子可操作地关联。在某些其它实施方 案中，该第一和第二启动子为同一启动子的拷贝。在另外的实施方案中，该第一和第二启动 子不一致。在上述组合物的各种实施方案中，该第一和第二载体包含于单个宿主细胞。在上述组合物的某些其它实施方案中，该第一和第二载体包含于独立的宿主细 胞。在一些实施方案中，本发明涵盖制备特异性结合IGF-IR的抗体或其片段的方法， 包括培养上述宿主细胞；以及回收所述抗体或其片段。在其它的实施方案中，本发明涵盖制备特异性结合IGF-IR的抗体或其片段的方 法，包括共培养独立的宿主细胞，；以及回收所述抗体或其片段。在上述方法的另外的实施 方案中，本发明提供了合并该VH和VL编码多肽，以及回收所述抗体或其片段。在一些实施方案中，本发明涵盖由上述制备的特异性结合IGF-IR的抗体或其片 段。在一些实施方案中，本发明涵盖其中该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷 酸在相同载体上的组合物、及其中的载体。在上述载体的多种实施方案中，该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸均 和启动子可操作地关联。在上述载体的多种实施方案中，该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸进 行框内融合，从与之可操作地关联的单个启动子进行共同转录，并共同翻译成单链抗体或 其抗原结合片段。在上述载体的多种实施方案中，该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸从 与之可操作地关联的单个启动子进行共同转录，但单独翻译。在另外的实施方案中，载体还 包含位于该VH编码多聚核苷酸和该VL编码多聚核苷酸之间的IRES序列。在某些其它实 施方案中，该编码VH的多聚核苷酸和该编码VL的多聚核苷酸分别可操作地关联单独启动 子并单独转录。在另外的实施方案中，该独立的启动子为同一启动子的拷贝或该独立的启 动子不一致。在一些实施方案中，本发明涵盖包含上述载体的宿主细胞。在其它的实施方案中，本发明涵盖制备特异性结合IGF-IR的抗体或其片段的方 法，包括培养上述宿主细胞；以及回收所述抗体或其片段。在一些实施方案中，本发明涵盖由上述方法制备的特异性结合IGF-IR的抗体或 其片段。
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在一些实施方案中，本发明涵盖在动物中治疗过度增殖病症的方法，包括向需要 治疗的动物施用包含以下成分的组合物a)上述分离的抗体或其片段；以及b)药学上可接 受的载体。在另外的实施方案中，本发明涵盖在动物中治疗过度增殖病症的方法，包括向需 要治疗的动物施用包含以下成分的组合物a)上述分离的抗体或其片段；以及b) —种或多 种用于治疗过度增殖病症的另外的制剂；c)药学上可接受的载体。在另外的实施方案中， 本发明涵盖在动物中治疗过度增殖病症的方法，包括向需要治疗的动物施用a)包含上述 分离的抗体或其片段和药学上可接受的载体的组合物；b)包含一种或多种用于治疗过度 增殖病症的另外的制剂和药学上可接受的载体的一种或多种单独组合物(其中所述单独 组合物以任何的顺序、以任何的时间段同时或顺序施用)。在另外的实施方案中，过度增殖 病症选自由癌症、赘生物、肿瘤、恶性肿瘤或其转移性病灶构成的组。在上述方法的各种实施方案中，抗体或其片段特异性结合在恶性肿瘤细胞的表面 上表达的IGF-1R。在另外的实施方案中，抗体或其片段结合恶性肿瘤细胞导致恶性肿瘤细 胞的生长抑制。在上述方法的各种实施方案中，抗体或其片段抑制IGF和恶性肿瘤细胞的结合。 在另外的实施方案中，IGF是IGF-I或IGF-2。在上述方法的各种实施方案中，抗体或其片段抑制IGF-I结合所述恶性肿瘤细 胞，但不抑制IGF-2。在某些其它实施方案中，抗体或其片段抑制IGF-2结合所述恶性肿瘤 细胞，但不抑制IGF-I。在上述方法的各种实施方案中，抗体或其片段促进IGF-IR内在化进入所述恶性 肿瘤细胞。在上述方法的各种实施方案中，抗体或其片段抑制IGF-IR磷酸化或抑制肿瘤细 胞增殖。在另外的实施方案中，肿瘤细胞增殖通过预防或延缓转移生长而受到抑制。在上述方法的各种实施方案中，抗体或其片段抑制肿瘤细胞转移。在另外的实施 方案中，肿瘤细胞增殖通过预防或延缓肿瘤扩散至邻近组织而受到抑制。在上述方法的各种实施方案中，过度增殖疾病或病症是位于下列部位的赘生物 前列腺、结肠、腹部、骨、乳房、消化系统、肝脏、胰脏、腹膜、肾上腺、甲状旁腺、垂体腺、睾丸、 卵巢、胸腺、甲状腺、眼、头、颈、中枢神经系统、周围神经系统、淋巴系统、骨盆、皮肤、软组 织、脾脏、胸部或泌尿生殖道。在上述方法的各种实施方案中，过度增殖疾病或病症是癌症，所述癌症选自由下 列疾病构成的组上皮鳞状细胞癌、黑素瘤、白血病、骨髓瘤、胃癌、脑癌、肺癌、胰腺癌、子宫 颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、前列腺癌、睾丸癌、甲状腺癌和头颈癌。 在另外的实施方案中，所述癌症选自由下列疾病构成的组胃癌、肾癌、脑癌、膀胱癌、结肠 癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌和前列腺癌。在上述方法的各种实施方案中，动物是哺乳动物。在另外的实施方案中，哺乳动物 是人。


图1 :IGF-1R特异性Fab的结合活性。㈧由ELISA所得的纯化抗-IGF-1R Fab抗 体对重组IGF-lR-his和IGFlR-Fc蛋白的结合。(B)通过流式细胞仪所得的纯化抗-IGF-IRFab抗体对在3T3上表达的人IGF-IR的结合。图2 =Fab对MCF-7细胞上表达的IGF-IR的结合活性。图3 抗-IGF-IR Fab在MCF7细胞中抑制(A) IGF-I和(b) IGF-2诱导的磷酸化。图4 由ELISA所得的IGF-1R Fab片段抗体与可溶性IGF-IR(A)和INSR(B)的结
口 O图5 对G4.P. agly型完全人源M13-C06和M14-C03抗体的非还原型和还原型SDA PAGE分析。图6 由ELISA测定的完全人源G4. P(A)和G4. P. agly (B)型抗-IGF-1R抗体的结 合活性。图7 由流式细胞仪测定的完全人源抗体对MCF_7(A)、IGF_1R/3T3(B)细胞上表达 的IGF-IR的结合。在MCF-7上的结合EC50在2. 7-12xl0-10nM范围内。图8 由RIA测定的G4型完全人源抗体阻断IGF-1 (A)和IGF-2 (B)结合IGF-1R的 能力。图9 (A) G4型完全人源抗体对H_23肿瘤细胞响应IGF-I的增殖的抑制；(B)G4型 完全人源抗体对H-23肿瘤细胞响应IGF-2的增殖的抑制；(C) G4型完全人源抗体对Calu_6 肿瘤细胞响应IGF-I的增殖的抑制。图 10 :M13. C06. G4. P. agly、M14. C03. G4. P. agly 和 M14. Gl 1. P 抗体 IGF-I (A)和 IGF-2(B)驱动的受体磷酸化的抑制。图11 :M13. C06. G4. P. agly对下游信号转导的抑制。(A)磷酸化Akt (Thr308)和 总Akt分别在顶部和底部行中显示，(B)顶部磷酸化p44/42 MAI3K和总p44/42 MAI3K分别 在顶部和底部行显示。图12 选择的IGF-IR mAbs对IGF-I介导的肿瘤细胞生长的抑制。(A)H23 ；⑶ Calu-6 ； (C)Panc-I ； (D)BxPC3 ； (E)MaPaCa ；和(F)Colo205。柱表示平均值和 SD。图13 抗-IGF-IR抗体对IGF-1和IGF-2驱动的H-23细胞的增殖的抑制。图14 :M13-C06. G4. P. agly抗体对BxPC3细胞增殖(由重组人IGF-I和IGF-2驱 动)的抑制。图 15 :M13-C06. G4. P. agly 抗体对 NCI-H23 细胞增殖(由重组人 IGF-I 和 IGF-2 驱动)的抑制。图16 :M13-C06. G4. P. agly抗体对A549细胞增殖(由重组人IGF-I和IGF-2驱 动)的抑制。图17 完全人源IGF-IR抗体对IGF-1和IGF-2诱导的Akt的氨基酸残基kr473 磷酸化的抑制。图18 完全人源M13. C06. G4. P. agly抗体在胰腺癌模型中显示了体内剂量依赖性 肿瘤生长抑制。图19 完全人源M13. C06. G4. P. agly抗体在肺癌模型中显示了体内剂量依赖性肿 瘤生长抑制。图20 完全人M13. C06. G4. P. agly抗体联合吉西他滨施用在抑制肿瘤生长中显示 了增强的效力。图21 完全人源M13. C06. G4. P. agly抗体与食蟹猴成纤维细胞系上表达的IGF-1R的结合。图22 =IGF-IR抗体结合表位的交叉竞争性结合分析。图23 IRS-I和p85(PI3K的调节亚基)的共免疫沉淀证实了 M13-C06. G4. P. agly 介导的IGF-IR信号转导抑制。图M :IGF_1R和INSR在哺乳动物细胞中的免疫沉淀证实了 M13. C06. G4. P. agly 抗体结合IGF-IR但不结合胰岛素受体。以采用鼠抗-人顶㈧或鼠抗-人IGF-IR(B)免 疫印迹(Western印迹)分析检测IGF-IR和INSR蛋白。图 25 :M13-C06Fab 对(A)hlGF-lR-Fc 禾Π (B)mlGF-lR-Fc 的相对结合亲和力测定。 (A)和⑶的χ-和y_轴比例相同。在各图的底部显示了用于结合拟合的残余物以表明该 1 1结合模型在测定M13-C06对各个受体的相对亲和力中的适用性。图26 :M13. C06抗体在SI3R测定中结合hIGF_lR_Fc和mlGF-lR-Fc对照与抗体结 合IGF-IR突变蛋白SD006 (结合阳性)和SD015 (结合阴性)的实施例。图27 :IGF-1R和INSR的结构表示A) IGF-IR的结构示意图。FnIII_2包含如图 所示的体内蛋白水解处理的环状结构。跨膜区显示为横跨磷脂双层图的螺旋环。IGF-IR 中的IGF-1/IGF-2结合位点的位置以星号显示。经证明仅一种IGF-1/IGF-2分子结合至各 IGF-IR异源二聚分子。B和C)定位至同源INSR结构表面的M13-C06 IGF-IR结合表位。 M13-C06 IGF-IR结合表位基于过度同源性INSR晶体结构建模。B)具有对应IGF-IR中同 源性位置V462-H464的氨基酸残基位置(即INSR中的L472-K474)的INSR结构的表面表 示以黑色阴影显示。对应IGF-IR的前三个结构域(即L1-CR-L2)(例如包含在本文中所述 平头IGF-IR(1-46 -Fc构建体)显示为灰色阴影。C)具有暴露表面区域至溶剂以及在对 应IGF-IR的462-464 (即INSR的472-474)的残基的14A (埃)半径(或28A直径)之内 的残基的INSR结构的表面表示以黑色阴影显示。对应IGF-IR氨基酸462-464的残基的具 有灰色阴影以显示实验确认的该目标表位的表面区域。图28 在以M13. C06.G4.P. agly抗体处理的鼠肿瘤中体内1GF-1R表达的免疫印 迹(Western印迹)分析。图四由原发人结肠肿瘤生成的肿瘤中M13-C06. G4. P. agly的体内抗肿瘤活性。图30 由乳腺癌(MCF-7)细胞生成的肿瘤中M13-C06. G4. P. agly的体内抗肿瘤活 性。图31 :M13-C06抗体体外不显示ADCC活性。图 32 抗体 M13-C06、M14-C03、M14-G11 和 IR3 对人 IGF-IHis 结合生物素化 hIGF-lR-Fc 的抑制。图 33 抗体 M13-C06、M14-C03、M14-G11、P1E2 和 IR3 对人 IGF_2His 结合生物素化 hIGF-lR-Fc 的抑制。图；34 =ELISA分析来检测人IGF-IHis与生物素化hlGF-lR的结合。人IGF-IHis 在PBST(圆圈)和含有2μΜ M13-C06的PBST(方块)中连续稀释。图35 突变影响M13-C06与hIGF-lR-Fc结合的残基被图示至同源顶胞外结构域 的结构。IGF-IR氨基酸残基415、427、468、478和532的突变对于M13-C06抗体结合具有 无法检测的影响。IGF-IR氨基酸残466、467、533、564和565的突变对于M13-C06抗体结 合具有微弱不利影响。IGF-IR氨基酸残基459、460、461、462、464、482、483、490、570和571的突变对于M13-C06抗体结合具有强烈不利影响。参见表20编辑的突变分析结果。图36 突变影响M14-G11与hIGF_lR_Fc结合的残基被图示至人IGF-1R的前三个 胞外结构域的结构。IGF-IR氨基酸残基观、227、237、285、286、301、327和412的突变对于 M14-G11抗体结合具有无法检测的影响。IGF-IR氨基酸残基257、259、沈0、263和沈5的突 变对于M14-G11抗体结合具有微弱不利影响。IGF-IR氨基酸残基254的突变对于M14-G11 抗体结合具有中等不利影响。IGF-IR氨基酸残基248和250的突变对于M14-G11抗体结合 具有强烈不利影响。参见表20编辑的突变分析结果。图37 突变影响IR3和P1E2与hIGF_lR_Fc结合的残基被图示至人IGF-IR的前 三个胞外结构域的结构。IGF-IR氨基酸残基28,227,237,250,259,260,264,285,286,306 和412的突变对于抗体结合具有无法检测的影响。IGF-IR氨基酸残基257、沈3、301、303、 308,327和389的突变对于抗体结合具有微弱不利影响。IGF-IR氨基酸残基248和254的 突变对于M14-G11抗体结合具有中等不利影响。IGF-IR氨基酸残基265的突变对于抗体结 合具有强烈不利影响。参见表20编辑的突变分析结果。图38 示出在无血清的条件下通过联合不同IGF-IR表位的抗体靶向而增强抑制 由IGF-1/IGF-2刺激的BXPC3 (胰腺癌细胞系)细胞生长。图39 示出和在相同对于抗体浓度处单独使用抗体观察到的情况相比，在 500nM至5nM之间的浓度处联合等摩尔量的M13. C06. G4. P. agly (C06)和M14. Gll. G4. P. agly (Gll)抗体导致明显增强抑制BXPC3细胞生长。图40 示出在存在10%胎牛血清的标准细胞培养条件下生长的H322M中观察到的 效果的例子，其中和单独抗体相比，由于C06/G11抗体而导致明显更强地抑制细胞生长。图41A和B 示出M13-C06和埃罗替尼单独和联合对于NSCLC细胞生长的影响。图42 示出M13-C06和埃罗替尼单独和联合对于胰腺癌细胞生长的影响。图43 示出M13-C06和埃罗替尼单独和联合对于结肠癌细胞生长的影响。图44 示出M13-C06和埃罗替尼单独和联合在NSCLC细胞系中对于AKT和MAI3K信 号转导的影响。图45A和B 示出在弥散的A549肺肿瘤模型中M13-C06作为单一制剂介导抗肿瘤 活性(A)和增强Tarceva的抗肿瘤活性(B)。图46A和B 示出M13-C06和雷帕霉素单独和联合对于NSCLC细胞生长的影响。图47 示出M13-C06和雷帕霉素单独和联合对于胰腺癌细胞生长的影响。图48 示出M13-C06和雷帕霉素单独和联合对于结肠癌细胞生长的影响。图49 示出M13-C06和雷帕霉素单独和联合对于肉瘤细胞生长的影响。图50 示出M13-C06和雷帕霉素单独和联合在NSCLC细胞系中对于AKT和S6K信 号转导的影响。图51 示出M13-C06和雷帕霉素单独和联合在肉瘤系中对于AKT和S6K信号转导 的影响。图52 示出在SK-ES-I肉瘤模型中M13-C06作为单一制剂抑制肿瘤生长。图53A和B 示出M13-C06和PD0325901单独和联合对于NSCLC细胞生长的影响。图M 示出M13-C06和PD0325901单独和联合对于胰腺癌细胞生长的影响。图55 示出M13-C06和PD0325901单独和联合对于结肠癌细胞生长的影响。
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图56A和B 示出M13-C06和PI-103单独和联合对于NSCLC细胞生长的影响。图57 示出M13-C06和PI-103单独和联合对于胰腺癌细胞生长的影响。图58 示出M13-C06和PI-103单独和联合对于结肠癌细胞生长的影响。图59 示出M13-C06和索拉非尼单独和联合对于两种肝细胞癌细胞系生长的影 响。
具体实施例方式下列申请通过引用的方式全部并入本文中美国临时专利申请 No. 60/786,347 0006年3月28日提交)；美国临时专利申请No. 60/876，5 (2006年12月 22日提交)；美国专利申请No. 11/727，887 (2007年3月观日提交)；美国临时专利申请 No. 60/968，540 (2007 年 8 月 28 日提交)；美国专利申请 No. 12/200，766 (2008 年 8 月 28 日 提交)；美国临时专利申请No. 61/071,087(2008年4月11日提交)；国际PCT公开No. WO 2007/126876 (PCT/US2007/007664 ；2007 年 3 月 28 日提交；2007 年 11 月 8 日公开)和国际 PCT 公开 No. WO 2009/032145 (PCT/US2008/010176 ；2008 年 8 月 28 日提交；2009 年 3 月 12 日公开)。本发明涉及联合治疗，特别是涉及通过联合使用两种或多种治疗剂来治疗过度增 殖病症(例如癌症)。特别地，本发明涉及联合结合IGF-IR的抗体和其它治疗剂以减轻或 消除细胞生长和增殖、致癌作用、肿瘤发生和/或转移性病灶。当和使用单一制剂治疗的效 果比较时，本发明的联合治疗可在治疗癌症和减轻细胞过度增殖、致癌作用、肿瘤发生和/ 或转移性病灶中具有协同效果。本发明的联合包括联合结合IGF-IR的抗体(或其片段)和 任何治疗上用于治疗过度增殖疾病或病症的另外的制剂，而无论所述另外的制剂是否具有 抗过度增殖活性。例如，在另外的制剂不具有任何抗癌活性的情况下，联合IGF-IR抗体的 另外的制剂可用于通过减轻或缓解征兆来治疗癌症。因此，本发明的联合包括提供IGF-IR 抗体(或其片段)和另外的一种或多种制剂，其中所述另外的一种或多种制剂通过有益于 被治疗的受试者的活性而支持癌症的治疗，尽管这种活性可能不是抗过度增殖的。例子是 联合具有抗过度增殖活性的IGF-IR抗体(或其片段)和促红细胞生成素(EPO)，所述促红 细胞生成素刺激血红细胞产生，但是其借助于其抗贫血活性而在癌症治疗中是有益的。联合IGF-IR抗体(或其片段)的另外的制剂也不限于在本说明书中特定或一般 鉴定的具体药物、化合物、化学品或分子中的任一种。当然，可以在治疗上用于治疗过度增 殖疾病或病症的任何另外的药物、化合物、化学品或分子都可以联合IGF-IR抗体(或其片 段)以起到所述疾病或病症的治疗效果。因此，在本说明书中特定或一般鉴定的所有药物、 化合物、化学品和分子都仅仅是以提供例子的方式来鉴定，无论如何并不意欲以任何方式 限制本发明的联合。另外，本发明的实施方案包括联合可以用于治疗过度增殖疾病或病症 的第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九、第十和任何更多数量的另外的制剂(例 如10-20、20-100、100-1000、1000-1000000、或多于1，000，000的范围内的任何数量的另外 的制剂)。可以联合IGF-IR抗体(或其片段)使用的化疗化合物的一些特定例子包括但不 限于3-,1式-视黄酸 2-CDA 2-續腹氧瞧苷 5-露杂胞苷 5-戴原嘧啶
5-FU
6-·■呤 6-MP 6-TG
6-硫鸟嘌呤 ABRAXANE Φ ACCUTANE@
放射菌素-D ADRIAMYCJN ADRUCIL @ AGRYLIN ⑩ ALA-CORT @ 國地白介素 B仑单抗 ALIMTA @ H利維A酸 ALKABAN-AQ ALKERAN 全-反或视黄酸
α-干扰素 六甲魔胺 甲鱔蝶_ H*斯T S蠡米特 續味
ANANDRON Φ 耳则I冲 可拉伯糙跑苕啶 ARA-C ARANESP @ AREDIA Φ ARiMiDEX AROMASIN ARRANON -^Z::系申
天冬酰胺酶 ATR.AGEN ATRA4V AVASTIN 翹.杂跑苷
AZD6244 (ARRY-1428&6) BCG《卡介前》
BCNU (1,3-双α-雪乙墓)-1-亚 墓
靨)
贝伐单抗 贝沙罗汀 BEXXAR tt卡鲁胺 BICNtI @ BLENQXANE 脚来5橐 波替单抗 白消安
B USULFEX
C225 mafmm
CAMPATH CAM PTOSAR
mmm-ιι
卡培他滨 CARAC 卡tt 卡無芥 卡氣芥It CASODEX OC!-^ 013 CCI-779
CCNU (1-(2 _.驅I CDDP ι. Ii' CEENU CERUBIDINE <B ffl si晉单Ia 苯丁酸麗芥
晴橙菌因子 克拉屈渙 可tt機
COSMEGEN CPT-Il 环磷酰胺 CYTADREN 可 I跑苷 B糖跑苷I旨质体 CYTOSAR-U CYTOXAN @ 觀燔曛膽 DAC0GEN@ 放射菌棄D
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DEFOROL1MUS (AP23573), DEUTA-CORTEF @ DELTASONE 地尼白介素2 DEPOCYT
权利要求
1.一种治疗动物中的过度增殖病症的方法，该方法包括向需要治疗的动物施用一种或 多种组合物，所述组合物包含a)第一制剂，其中所述制剂是分离的IGF-IR(胰岛素样生长因子-1受体)抗体或其片 段，其中所述抗体其片段抑制IGF-IR介导的信号转导；以及b)第二制剂，其中所述第二制剂是治疗上用于治疗过度增殖病症的。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二制剂抑制一个或多个生物进程，所述生 物进程选自由下列生物进程构成的组a)细胞生长；b)细胞增殖；和c)细胞存活，或者其中所述第二制剂抑制调节一个或多个生物进程的一种或多种信号转导途径，所 述生物进程选自由下列生物进程构成的组d)细胞生长；e)细胞增殖；和f)细胞存活。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述第二制剂是第二分离的抗体或其片段。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述第二制剂是小分子。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述第二制剂是选自由下列物质构成的组的 大分子a)蛋白；b)多聚核苷酸；c)脂质；和d)碳水化合物。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述动物是哺乳动物。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述哺乳动物是人。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述过度增殖病症选自由下列疾病 构成的组癌症、赘生物、肿瘤、恶性肿瘤、或其转移性病灶。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述过度增殖病症是位于下列部位的赘生物前 列腺、结肠、腹部、骨、乳房、消化系统、肝脏、胰脏、腹膜、肾上腺、甲状旁腺、垂体腺、睾丸、卵 巢、胸腺、甲状腺、眼、头、颈、中枢神经系统、周围神经系统、淋巴系统、骨盆、皮肤、软组织、 脾脏、胸部或泌尿生殖道。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述过度增殖病症是癌症，所述癌症选自由下列 疾病构成的组上皮鳞状细胞癌、黑素瘤、白血病、骨髓瘤、胃癌、脑癌、骨癌、肺癌、胰腺癌、 子宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、前列腺癌、睾丸癌、甲状腺癌、头颈 癌、非小细胞肺癌、肉瘤和骨肉瘤。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是选自由下列物质构成的组的分 离的抗体或其片段a)M13-C06.G4. P ；b)M14-Gll.G4. P ；c)M14-C03.G4. ).d)M14-B01.G4. ).e)M12-E01.G4. ).f)M12-G04.G4. ).g)M13-C06.G4. ).aglyh)M14-Gll.G4. ).aglyi)M14-C03.G4. ).aglyj)M14-B01.G4. ).aglyk)M12-E01.G4. ).agly1)M12-G04.G4. )· agly。
12.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是选自由下列物质构成的组的分 离的Fab抗体a)M13-C06；b)M14-Gll；c)M14-C03；d)M14-B01；e)M12-E01；和f)M12-G04o
13.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是由杂交瘤细胞系制备的分离的 抗体，所述杂交瘤细胞系选自由下列物质构成的组a)P2A7.3E11 ；b)20C8.3B8 ；c)P1A2.2B11 ；d)20D8.24B11 ；e)PlE2.3B12 ；和f)PlG10.2B8。
14.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是由细胞系制备的分离的抗体， 所述细胞系选自由下列物质构成的组a)以美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏号PTA-7444保藏的中华仓鼠卵巢(CHO)细 胞系；b)指定以ATCC保藏号PTA-7445保藏的CHO细胞系；c)以ATCC保藏号PTA-7855保藏的CHO细胞系；d)以ATCC保藏号PTA-7485保藏的杂交瘤细胞系；e)以ATCC保藏号PTA-7732保藏的杂交瘤细胞系；f)以ATCC保藏号PTA-7457保藏的杂交瘤细胞系；g)以ATCC保藏号PTA-7456保藏的杂交瘤细胞系；h)以ATCC保藏号PTA-7730保藏的杂交瘤细胞系；和i)以ATCC保藏号PTA-7731保藏的杂交瘤细胞系。
15.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是由权利要求14所述的细胞系制备的分离的抗体，其中所述细胞系由ATCC保藏说明指定，所述ATCC保藏说明选自由下列保 藏说明构成的组a)中华仓鼠卵巢(CHO):C06-40B5 ；CHO DG44Biogen Idec EA03. 14.06 ；b)中华仓鼠卵巢(CHO):C03-2CH0 DG44Biogen Idec DA 03. 14.06 ；c)中华仓鼠卵巢细胞系G1170 8e6细胞08. 09. 2006 ；d)杂交瘤8.P2A7. 3D11 ；e)杂交瘤细胞系:7.20C8. 3B8 ；f)杂交瘤:5.P1A2. 2B11 ；g)杂交瘤:7.20D8. 24. Bll ；h)杂交瘤细胞系:9.P1E2. 3B12 ；和i)杂交瘤细胞系:5P1G10.2B8。
16.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是特异性结合多肽结构域的分离 的抗体或其抗原结合片段，所述多肽结构域由胰岛素样生长因子-1受体(IGF-IR)的纤连 蛋白III型结构域-I (FNIII-I)构成。
17.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是抑制胰岛素样生长因 子-I(IGF-I)和胰岛素样生长因子-2(IGF-2)与IGF-IR结合的分离的抗体或抗原结合片 段。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述抑制是变构性的。
19.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是特异性结合多肽结构域的分离 的抗体或其抗原结合片段，所述多肽结构域由IGF-IR的富半胱氨酸区域(CRR)构成。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述抗体抑制IGF-I和IGF-2配体与IGF-IR的纟口口。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述抑制是竞争性的。
22.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是特异性结合多肽结构域的分离 的抗体或其抗原结合片段，所述多肽结构域由IGF-IR的富半胱氨酸区域(CRR)和第二富亮 氨酸重复结构域(L2)构成。
23.根据权利要求22所述的方法，其中所述抗体抑制IGF-I而不抑制IGF-2配体与 IGF-IR的结合。
24.根据权利要求23所述的方法，其中所述抑制是变构性的。
25.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是特异性结合和参考单克隆Fab 抗体片段或由杂交瘤制备的参考单克隆抗体相同的胰岛素样生长因子受体-I(IGF-IR) 表位的分离的抗体或其抗原结合片段，所述参考单克隆Fab抗体片段选自由M13-C06、 M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组，所述杂交瘤选自由 P2A7. 3E11、 20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组。
26.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是特异性结合IGF-IR的分离的 抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其片段竞争性地抑制参考单克隆Fab抗体片段或 由杂交瘤制备的参考单克隆抗体与IGF-IR的结合，所述参考单克隆Fab抗体片段选自由 M13-C06、M14-G11、M14-C03、Μ14-Β01、Μ12-Ε01 和 M12-G04 构成的组，所述杂交瘤选自由 Ρ2Α7. 3E1U20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组。
27.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一制剂是特异性结合IGF-IR的分离的抗 体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其片段包含和单克隆Fab抗体片段或由杂交瘤制备 的单克隆抗体的抗原结合域等同的抗原结合域，所述单克隆Fab抗体片段选自由M13-C06、 M14-G11、M14-C03、M14-B01、M12-E01 和 M12-G04 构成的组，所述杂交瘤选自由 P2A7. 3E11、 20C8. 3B8、P1A2. 2B1U20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组。
28.根据权利要求25至27中任一项所述的方法，其中所述抗体重链和轻链可变域 来自单克隆Fab抗体片段，所述单克隆Fab抗体片段选自由M13-C06、M14-G11、M14-C03、 M14-B0UM12-E01 和 M12-G04 构成的组。
29.根据权利要求25至27中任一项所述的方法，其中所述抗体重链和轻链可变域是鼠源。
30.根据权利要求25至27中任一项所述的方法，其中所述抗体重链和轻链可变域 来自由杂交瘤制备的单克隆抗体，所述杂交瘤选自由Ρ2Α7. 3E1U20C8. 3Β8, Ρ1Α2. 2Β11、 20D8. 24B1UP1E2. 3Β12 和 P1G10. 2Β8 构成的组。
31.根据权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述一种或多种组合物包含除了 所述第一和第二制剂之外的多种制剂，其中所述多种其它制剂是治疗上用于治疗过度增殖 病症的。
全文摘要
本发明涉及使用联合治疗的治疗方法，其中多种治疗上有用的化合物可联合结合胰岛素样生长因子受体-1(IGF-1R)的抗体。提供了抑制IGF-1R-介导的促生存和肿瘤增殖途径的特异性人和鼠单克隆抗体及其变体、片段和衍生物。还提供了阻断配体、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子2(IGF-2)结合IGF-1R的能力的特异性人和鼠单克隆抗体、以及该种抗体的片段、变体和衍生物。本发明还包括编码上述抗体或其片段、变体或衍生物的多聚核苷酸、以及包含该种多聚核苷酸的载体和宿主细胞。本发明尤其包括使用本发明的利用IGF-1R抗体的联合治疗来治疗癌症的方法。
文档编号A61K39/395GK102065895SQ200980122583
公开日2011年5月18日 申请日期2009年4月10日 优先权日2008年4月11日
发明者砍德萨米·哈里哈兰, 董建英 申请人:比奥根艾迪克Ma公司