专利名称：作为syk或jak蛋白激酶抑制剂的2,6-二氨基-嘧啶-5-基甲酰胺类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用作脾酪氨酸激酶(syk)和/或JAK激酶抑制剂的嘧啶_5_甲酰胺化 合物。本发明还涉及含嘧啶-5-甲酰胺化合物的药用组合物，以及用该化合物或组合物治 疗特征在于其它适应症的病症的方法。本发明还涉及制备本文中所述化合物的方法。
背景技术：
蛋白激酶组成结构相关酶的大家族，这些酶负责调控细胞内多种信号转导过程 (参见例如Hardie禾口Hanks，The Protein Kinase Facts Book，I and II，Academic Press， San Diego，Calif.，1995)。由于它们的结构和催化功能的保守性，蛋白激酶被认为是共有 祖基因的进化产物。几乎所有激酶都含相似的250-300氨基酸催化域。可通过被它们磷酸 化的底物将激酶划分为不同家族(例如蛋白-酪氨酸、蛋白-丝氨酸/苏氨酸、脂质等)。 已鉴定出通常对应于这些家族中各家族的序列基元(参见例如Hanks & Hunter，(1995)， FASEB J. 9 :576-596 ；Knighton 等，(1991)，Science 253 :407-414 ；Hiles 等，(1992)，Cell 70 :419-429 ；Kunz 等，(1993)，Cell 73 :585-596 ；Garcia-Bustos 等，(1994)，EMBO J. 13 2352-2361)。许多疾病与由蛋白激酶介导的事件触发的异常细胞反应有关。这些疾病包括自身 免疫病、炎性疫病、骨病、代谢疾病、神经和神经变性疾病、癌症、心血管病、过敏、哮喘、早老 性痴呆和激素相关疾病。因此，在药物化学领域，已对寻找用作治疗药物的蛋白激酶抑制剂 做了大量工作。免疫受体酪氨酸激活基元(ITAM)介导的信号为信号通路中与人类疾病有关的主 要事件。ITAM介导的信号事件是使免疫细胞中传统免疫受体例如T细胞受体、B细胞受体、 Fc受体和血小板中GPVI和Fc y RIIa被引发的激活信号传递至下游细胞内分子例如syk和 ZAP-70 的关键因素(Underhill，D. M and Goodridge, H. S.，Trends Immunol. ,28 :66-73, 2007)。配体与含ITAM的受体结合触发信号事件，这导致从称为Src家族的非受体酪氨酸 激酶家族中募集蛋白。这些激酶将ITAM序列中酪氨酸残基磷酸化，ITAM序列是与syk或 ZAP-70上SH2域串联的区域。Syk与Zap-70 —起为蛋白酪氨酸激酶syk家族的一员。syk或ZAP-70与二磷 酸化ITAM序列相互作用诱发激酶构象改变，该改变使激酶自身的酪氨酸磷酸化。磷酸化的Syk家族成员将众多下游信号通路蛋白激活，此类蛋白包含含有Src同源2 (Sffi)域的 76kDa(SLP-76)的白细胞特异性磷蛋白、激活的T细胞(LAT)和PLC(磷酸酯酶C)、2的接 头。归因于功能异常的ITAM介导的信号事件的人疾病包括自身免疫病，例如类风湿 性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化、溶血性贫血、免疫性血小板减少性紫癫、肝素引起 的血小板减少症和动脉粥样硬化。有意义的是，据认为，通过抗体使Fc受体交联能够导致 发生上述疾病中的很多疾病，所述抗体通过syk在肥大细胞、嗜碱性粒细胞和其它免疫细 胞中激活信号级联，导致负责炎性反应的细胞介质释放。在依赖IgE刺激的过敏和炎性反 应中，可通过抑制syk的酪氨酸激酶活性控制肥大细胞和嗜碱细胞中的介质释放和细胞因 子产生(Rossi，A. B 等，J Allergy Clin Immunol. , 118 :749-755,2006) 在免疫血小板 减少症中，脾通过Fc受体/ITAM/syk介导的过程清除与血小板结合的抗体(Crow，A.R等， Blood, 106 摘要2165，2005)。由肝素-血小板因子4免疫复合物造成的药物引起的血小 板减少症还涉及受体参与(engagement)的syk信号事件下游，肝素-血小板因子4免疫复 合物激活血小板 Fc YRIIa(Reilly，M. P. , Blood, 98 :2442-2447,2001) 血小板激动剂诱导内向外(inside-out)整联蛋白信号，导致纤维蛋白原结合和 血小板聚集。由此启动外向内(outside-in)信号，该信号进一步刺激血小板。syk在整联蛋 白信号的两个期间均被激活，表明syk的抑制可以抑制血小板与固定化蛋白的粘着(Law， D. A等，Blood, 93 =2645-2652,1999)。由胶原引起的花生四烯酸和5-羟色胺释放以及syk 缺乏小鼠的血小板中的血小板聚集显著抑制(Poole，A等，EMBO J. ,16 =2333-2341,1997) 因此，syk抑制剂也具有抗凝作用。由于syk在Ig引起的血小板激活中所起的作用，所以，它可能在动脉粥样硬化和 再狭窄中很重要。动脉粥样硬化是特征在于血管动脉壁增厚和硬化的一类疾病。尽管所有 血管均对该严重变性疾病敏感，但服务于心脏的主动脉和冠状动脉通常受影响最大。因为 动脉粥样硬化可增加心脏病发作、心肌梗塞、中风和主动脉瘤的风险，所以它具有深远的临 床重要性。对动脉粥样硬化的传统治疗包括用于将阻滞不很严重的血管再通的方法和用于 将较重阻滞的冠脉搭桥术。血管内方法的严重缺点是，在大量的治疗个体中某些或所有治 疗的血管发生再狭窄(即再缩窄)。例如，在10-50%的接受该方法的患者中出现PTCA后 的动脉粥样硬化的冠状动脉再狭窄，随后需要再次血管成形术或冠状动脉分流移植。另外， 植入支架后，在10-20%的接受该方法的患者中出现动脉粥样硬化的冠状动脉再狭窄，随后 需要重复治疗，以维持适当血流通过受影响的动脉。再狭窄通常发生在治疗后的相对短暂 时间期，例如约小于6个月。虽然尚未测定到促进再狭窄的确切的激素和细胞过程，但据认为，再狭窄的原因 部分源于气囊导管或其它血管内装置对血管壁造成的机械性损伤。例如，除打通阻塞的动 脉外，PTCA过程还损伤冠状动脉平滑肌细胞(SMC)。作为对于该损伤的响应，粘连血小板、 浸润巨噬细胞、白细胞或平滑肌细胞自身释放细胞衍生(cell-derived)的生长因子，例如 血小板衍生生长因子(PDGF)，随后中膜SMC增殖并通过内弹性层迁移到血管内膜的区域。 内膜SMC进一步增殖和增生，而最重要的是，在3-6月期间产生大量细胞外基质从而导致血 管空间填充和收窄至足以显著阻塞血流。
24
syk除在Ig引起的血小板激活中起作用外，syk还在胶原介导的信号中起极重要 的作用。负责血小板粘着和激活的主要粘连蛋白是胶原。胶原为包含在粉瘤的纤维变性罩 内的丝状蛋白，在噬斑破裂期间，丝状蛋白暴露于血液。胶原最初通过与von Willebrand 因子结合起作用，该因子通过与血小板膜GPrt结合束缚血小板。然后，胶原通过连结血小 板上的两个胶原受体GPVI和整联蛋白α2β1起作用。GPVI以与FcRY的复合物形式存在于血小板膜中，与FcR γ复合是GPVI表达所 需要的相互作用。激活血小板上的Fc γ RIIa导致血小板形状改变、分泌和血栓形成。通过 FcRy的ITAM域的酪氨酸磷酸化，然后募集syk，启动GPVI/FcRy复合物发出信号。GPVI激 活导致诱发多种血小板功能，它们包括激活整联蛋白α 2β 1从而加固血小板粘着，激活 能够介导血小板聚集和血栓生长的GP IIb-IIIa ；分泌血小板，以使炎性蛋白例如⑶40L、 RANTES和TGF β传递到血管壁；表达P-选择蛋白，以募集白细胞。因此，人们认为syk抑 制剂可抑制由血小板粘连、激活和聚集介导的血栓形成事件。据报道，通过刺激IgG抗体的受体Fc γ R而诱发的细胞内蛋白的酪氨酸磷酸化 (激活)和由Fc γ R介导的吞噬在源自syk缺乏小鼠的巨噬细胞中均被显著抑制(Crowley， Μ. Τ.等，J. Exp. Med.，186 :1027-1039,1997)。该结果说明，syk 在 Fc γ R 介导的巨噬细胞
吞噬中具有显著重要作用。又据报道，syk的反义寡核苷酸能够抑制由GM-CSF诱发的对嗜酸性粒细胞的凋亡 抑制(Yousef i, S.等，J.E.Med.，183 1407-1414，1996)，这说明 syk 对由 GM-CSF 等造成的 嗜酸性粒细胞的生命延长信号至关重要。因为嗜酸性粒细胞的生命延长与过敏性疾病(例 如哮喘)中疾病转变为慢性疾病紧密相关，所以syk抑制剂也可作为慢性嗜酸性炎症的治 疗药物。Syk对通过B细胞抗原受体来激活B细胞而言很重要，它涉及磷脂酰肌醇代谢 和由抗原受体刺激造成的细胞内钙浓度增加(Hutchcroft, J E.等，J. Biol. Chem.，267 8613-8619，1992 ；和 Takata，M.等，EMBO J.，13 1341-1349，1994)。因此，syk 抑制剂可用 于调节B细胞的功能，因此预计可用作与抗体相关的疾病的治疗药物。Syk与T细胞抗原受体结合，通过受体交联而迅速经历酪氨酸磷酸化，对由Src酪 氨酸激酶例如Lck介导的细胞内信号起协同作用(Couture，C.等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA,91 :5301-5305,1994 ；禾口 Couture, C.等，Mol. Cell. Biol.，14 :5249-5258,1994)。syk 存在于成熟T细胞群例如表皮内γ δΤ细胞和原初α β T细胞，据报道，它可使TCR信号级 联放大的若干组分磷酸化(Latour，S.等，Mol Cell Biol. ,17 :4434-4441,1997) 因此， syk抑制剂可用作抑制由T细胞抗原受体介导的细胞免疫的药物。近期比较基因组杂交研究发现，syk是在套细胞淋巴瘤(MCL)的发病机理中起作 用的另一种重要基因(Chen，R.等 Journal of Clinical Oncology, 2007 ASCO Annual Meeting Proceedings(Post-Meeting Edition).第 25 卷，No 18S (June 20 Supplement), 2007:8056)。MCL占所有非霍奇金淋巴瘤的5_10 %，它是一种难以治疗的淋巴瘤形式。在 具有3年存活率中值的B细胞淋巴瘤中，它的预后最差。据报道，Syk在MCL中过度表达 (Rinaldi，A，等，Br. J. Haematol.，2006 ；132 :303-316)，且 Syk 在滤泡细胞、套细胞、伯基特 细胞和弥散性大B细胞非霍奇金淋巴瘤中介导mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶标)存活信号 (Leseux, L.等，Blood, 2006 ； 108 :4156-4162)。
若干条证据显示，多种B细胞淋巴瘤依赖于B细胞受体(BCR)介导的存活信号。 通过SRC家族激酶，BCR信号诱发Iga和β免疫受体基于酪氨酸的激活基元的受体寡聚 和磷酸化。ITAM磷酸化导致syk的募集和激活，从而启动下游事件并放大原始BCR信号。 鉴于紧张性BCR信号在正常B细胞中的作用和体外非霍奇金淋巴瘤细胞系依赖于syk的 存活(Chen, L.等，Blood, 2006 ； 108 :3428-3433)，有人报道，对于某些B细胞淋巴瘤和慢 性淋巴白血病(CLL)而言，抑制syk是有前途的合理的治疗靶标(Mefania Gobessi,Luca Laurenti, Pablo Longo, Laura Carsetti, Giuseppe Leone, Dimitar G. Efremov,慢性淋巴 白血病B细胞中的蛋白酪氨酸激酶Syk的组成型激活(Constitutive activation of the protein tyrosine kinase Syk in Chronic Lymphocytic Leukemia B-cells), Blood, 2007，110，Abstract 1123)。近期发表的数据说明，在CLL患者中给予抑制syk的多激酶 (multikinase)抑制剂可能具有显著临床活性(Friedberg JW等，Blood 2008 ；112(11)，摘 要3)。已有关于脾酪氨酸激酶(Syk)在多个不同环境中的致癌潜力的描述。据报道， 在临床上，Syk在套细胞淋巴瘤中过度表达(Rinaldi，A等，Br. J. Haematol.，2006 ；132 303-316)，通过染色体易位(t(9 ；12) (q22 ；pl2))产生的TEL-Syk融合蛋白(易位ETS 白血病)导致Syk活性增加，且与骨髓增生异常综合征有关(Kimo，Y.等，Blood, 2001 ； 97 :1050-1055)。在小鼠中，通过过继转移表达人TEL-Syk的骨髓细胞能够诱发白血病 (ffossning, T.，JEM, 2006 ；203 =2829-2840)。另外，在小鼠初级骨髓细胞中，Syk的过度表 达导致 IL-7 在培养基中独立生长(ffossning, T.等，JEM, 2006 ；203 =2829-2840)。有意义的是，在人和小鼠中，B细胞发育和存活似乎需要Syk信号。B细胞受体 (Lam, K.等，Cell，1997 ;90 :1073-1083)或 Iga (Kraus,M.等，Cell，2004 ； 117 :787-800)的 诱发性损失(inducible loss)导致小鼠中外周B细胞损失。已知蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-RO 的过度表达能够负向调节Syk活性，这种表达在源自非霍奇金氏淋巴瘤的细胞系中抑制增 殖并诱导凋亡(Chen，L.等，Blood, 2006 ； 108 =3428-3433) 0因此，B细胞淋巴瘤很少出现 BCR表达缺失，抗个体遗传型疗法(idiotype therapy)很少导致耐药(Kuppers，R. Nat Rev Cancer,2005 ；5 :251-262)。抗原特异性B细胞受体(BCR)的参与(engagement)能够激活多个信号通路， 这些通路最终调节细胞激活状态、促进存活和克隆扩充。BCR与免疫球蛋白超家族的两 个其它成员Iga和Ig^的结合使得通过BCR发出信号成为可能，Iga和Ig^各自携 有基于免疫-酪氨酸的激活基元(ITAM) (Jumaa, Hendriks等，Annu Rev Immunol 23 415-45(2005)). ITAM域被响应于BCR参与的Src家族激酶直接磷酸化。脾酪氨酸激酶 (Syk)与ITAM对接并将其磷酸化，这是增强其激酶活性的过程，导致Syk自磷酸化以及多个 下游底物的酪氨酸磷酸化(Rolli，feillwitz 等.Mol Cell 10 (5) : 1057-69 (2002))。当表 达新形成的前BCR时，该信号通路对处于从原B细胞开始到转变为前B细胞的发育阶段中 的B细胞有活性。事实上，在敲除Syk的小鼠中，B细胞发育停止在原B细胞阶段(Cheng， Rowley 等，1995 ;Turner，Mee 等，Nature 378(6554) :303-6 (1995))。在小鼠中，B 细胞受体 (Lam，Kuhn 等，Cell 90(6) :1073-83(1997))或 Iga (Kraus,Alimzhanov 等· Cell 117(6) 787-800(2004))的诱发性损失导致外周B细胞损失。人B细胞的增殖和存活似乎也需要 Syk。过度表达的蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-RO为Syk活性的负性调节剂，它在源自非霍奇金
26氏淋巴瘤(NHL)的细胞系中抑制增殖并诱导凋亡(Chen，Juszczynski等，Blood 108(10) 3428-33 (2006))。通过NHL系SUDHL-4中的siRNA敲除Syk导致细胞周期的G1/S转变阻 断(Gururajan，Dasu 等，J Immunol 178(1) :111-21 (2007)) 这些数据结合表明人和小鼠
B细胞发育、增殖、甚至存活需要Syk信号。相反，已经有关于Syk在多个不同环境中致癌潜力的描述。据报道，在临床上，Syk 在套细胞淋巴瘤中过度表达(Rinaldi，Kwee 等，Br J Haematol 132(3) :303-16(2006)), 通过染色体易位(t(9 ；12) (q22 ；pl2))产生的TEL-Syk融合蛋白(易位ETS白血病)导致 Syk活性增加，且与骨髓增生异常综合征有关(Kuno，Abe等，Blood 97(4) 1050-5 (2001)) 0 在小鼠中，通过表达人TEL-Syk的骨髓细胞的过继转移能够诱发白血病(Wossning，Herzog 等，J Exp Med 203(13) =2829-40 (2006)) 0另外，在小鼠初级骨髓细胞中，Syk的过度表达 导致IL-7在培养基中独立生长(Wossning，Herzog等，2006)。同样，据报道，Syk在滤泡细 胞、套细胞、伯基特细胞和弥散性大B细胞NHL中介导mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶标)存 活信号(Leseux, Hamdi等，Blood 108(13) :4156-62 (2006))。其它近期研究也显示，依赖 Syk的存活信号可能在B细胞恶性肿瘤中起作用，B细胞恶性肿瘤包括DLBCL、套细胞淋巴瘤 和滤泡淋巴瘤(Gururajan，Jennings 等，2006 ;Irish，Czerwinski 等，J Immunol 176(10) 5715-9(2006)).鉴于紧张性BCR信号在正常B细胞中的作用和体外NHL细胞系依赖syk 的存活，对于某些B细胞淋巴瘤的治疗而言，特异性抑制Syk是有前途的。据近期报道，R406 (Rigel Pharmaceuticals)能够抑制响应于各种刺激(包括 Fc ε Rl 和 BCR诱发的 Syk激活)的 ITAM信号(Braselmann，iTaylor 等，JPharmacol Exp Ther 319(3) =998-1008 (2006)) ο有意义的是，Syk的该ATP竞争性抑制剂对Flt3、cKit和JAK激 酶也有活性，但对Src激酶无活性(Braselmann，Taylor等，2006)。Flt3的激活突变与AML 有关，对该激酶的抑制目前正在进行临床开发研究(Burnett and Knapper Hematology Am Soc Hematol Educ Program 2007 :似9_34 Q007))。酪氨酸激酶cKit的过度激活还与血液 恶性肿瘤有关，为癌症治疗的靶标(Heinrich，Griffith等，Blood 96(3) =925-32 (2000)) 同样，JAK3信号与白血病和淋巴瘤有关，目前用作潜在治疗靶标(Heinrich，Griffith等， 2000)。重要的是，R406的多激酶抑制活性能够减弱在淋巴瘤细胞系和原发人淋巴瘤样品中 的 BCR 信号，导致前者凋亡(Chen，Monti 等，Blood 111(4) :2230-7 (2008))。另外，II 期临 床试验报道了该化合物在顽固性NHL和慢性淋巴细胞白血病中的有利结果(Friedberg Jff 等，Blood 2008 ;112(11)，摘要3)。尽管不清楚R406作用的精确机理，但数据显示，对在淋 巴细胞中介导存活信号的激酶进行抑制在临床上有益。另外一些近期研究还提示，依赖syk的存活信号可能在B细胞恶性肿瘤中起作用， B细胞恶性肿瘤包括DLBCL、套细胞淋巴瘤和滤泡淋巴瘤(参见例如S. Linfengshen等， Blood, Feb.2008 ；111 :2230-2237 ;J. Μ. Irish 等，Blood，2006 ； 108 :3135-3142 ；A. Renaldi 等，Brit J. Haematology,2006 ；132 :303-316 ；Μ. Guruoajan 等，J. Immunol, 2006 ；176 5715-5719 ；L. Laseux 等，Blood, 2006 ； 108 :4156-4162)。关于取代的嘧啶二胺化合物的专利和专利申请包括2003年1月31日提交的美 国专利申请序列号10/355, 543 (US2004/0029902A1) ,2003 ^ ι月31日提交的国际专利 申请序列号PCT/US03/03022(W0 03/063794)、2003年7月29日提交的美国专利申请序 列号 10/631，0 、国际专利申请序列号 PCT/US03/24087(W0 04/014382)、2004 年 7 月 30日提交的美国专利申请序列号10/903，263和国际专利申请序列号PCT/US2004/24716(W0 05/016893)，以上公开引入本文作为参考。关于取代的嘧啶二胺化合物的论述还可参见 国际专利申请公开号W0 02/059110、WO 03/074515、WO 03/106416、WO 03/066601、WO 03/063794,WO 04/046118,WO 05/016894,WO 05/122294,WO 05/066156,WO 03/002542,WO 03/030909, WO 00/39101, WO 05/037800 和美国专利公布号 2003/0149064。虽然在本领域中已经取得了进展，但本领域中仍存在对抑制syk激酶的化合物的 需求，也存在对可从这种抑制中受益的患者中治疗疾病例如再狭窄、血栓和/或炎症的方 法的需求。另外，还需要相对于其它激酶而言能够选择性抑制这些激酶中的一种的化合物。 本发明满足了该需求和其它需求。
发明内容
本发明提供具有作为syk活性抑制剂(又称为“syk抑制剂”)、JAK激酶活性抑制 剂(在本文中又称为“ JAK抑制剂”)的新化合物；它们的制备和使用方法以及含所述化合 物的药用组合物。此类化合物或其药学上可接受的盐具有以下结构(I)
(E1^1
D、NH O
(I)其中D1、E1和Y1定义如下。本发明还提供药用组合物，该组合物含治疗有效量的式I化合物或其药学上可接 受的盐以及药学上可接受的载体和/或稀释剂。本发明化合物具有多种治疗用途，通常而言，可用于在男人和妇女以及哺乳动物 (在本文中又称为“患者”)中治疗多种至少部分由syk活性介导的病症。例如，此类病症 包括但不限于与心血管疾病、炎性疾病或自身免疫疾病有关的那些病症。更具体地说，本发 明化合物可以用于治疗疾病或病症，这些疾病或病症包括但不限于再狭窄、血栓形成、炎 症、肝素引起的血小板减少症、扩张型心肌炎、镰状细胞病、动脉粥样硬化症、心肌梗塞、血 管炎、不稳定心绞痛、急性冠状动脉综合征、过敏、哮喘、类风湿性关节炎、B细胞介导的疾病 例如非霍奇金氏淋巴瘤、抗磷脂综合征、红斑狼疮、银屑病、多发性硬化、晚期肾病、溶血性 贫血、免疫血小板减少性紫癜和慢性淋巴细胞白血病。因此，在一个实施方案中公开方法， 该方法包括通常以药用组合物的形式将有效量的式(I)化合物给予有需要的患者。与心血管病相关的病症选自急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、不稳定心绞痛、顽固 性心绞痛、在血栓溶解治疗后或冠状动脉血管成形术后发生的闭塞性冠状动脉血栓形成、 血栓形成介导的脑血管综合征、栓塞中风、血栓形成中风、一过性局部缺血发作、静脉血栓 形成、深静脉血栓形成、肺栓塞、凝血病、弥散性血管内凝血、血栓形成性血小板减少性紫 癜、血栓闭塞性脉管炎、与肝素引起的血小板减少症有关的血栓形成疾病、与体外循环有关
28的血栓形成并发症、与器械操作法例如心脏或其它血管内导管插入、主动脉内气囊泵、冠状 动脉支架或人造心脏瓣膜有关的血栓形成并发症和需要安装假肢装置的病症。本发明还提供抑制血液样品中的syk激酶活性的方法，该方法包括使所述样品与 本发明化合物接触。本发明还提供纯化形式的化合物和化学中间体。通过参考以下详述和附图，本发明的这些和其它方面、目的和优点显而易见。为 此，在本文中列出各种参考文献，它们更详细地描述了一些背景信息、方法、化合物和/或 组合物，各自通过引用全文结合到本文中。
图1显示Syk如何在细胞生物学和多种疾病中作为Fc受体介导的信号的关键介 质。图2显示如何对Syk进行基因靶向证明了 Syk是动脉血小板生物学中的关键介质 和治疗动脉血栓形成的选择性靶标。图3显示本发明化合物的通用合成方法。图4A、B和C提供说明本发明化合物及其syk IC50的表2A、B和C。图5提供说明本发明化合物及其syk IC50的表3。图6提供说明本发明化合物及其syk IC50的表4。图7A和7B提供说明本发明化合物及其syk IC50的表5A和B。图8显示在纯化激酶测定中发现选择性抑制Syk的一系列化合物。图8A)在300nM 浓度中，筛选抗Millipore纯化激酶系列(用10 μ M ATP测试的270种激酶的化合物(实 施例596和实施例87和Ρ420-89)，以测定对Syk的效力和选择性。将数据描绘为在底部定 义的热图(heat-map)。图8Β)被3种化合物中任一化合物抑制的纯化激酶的抑制率> 80% 的部分。实施例596仅抑制Syk和MLKl。50nM(大于其Syk IC50 IOx)的实施例87化 合物仅抑制Syk。P420-89抑制包括Syk、JAK2和JAK3在内的多种激酶。在热图的左边，报 道各化合物对Syk的抑制IC50。在该热图内的各方框中给出激酶抑制百分率。图9显示对非霍奇金氏淋巴瘤细胞系中Syk的选择性抑制。在标示浓度的Syk 特异性抑制剂实施例596和实施例87化合物(图9A和图10B)或Syk/JAK双重抑制剂 P420-89(图9C)的存在下，用抗BCR抗体刺激B细胞。然后，对全细胞溶胞物进行蛋白质印 迹分析，以评价Syk激酶活性(pBLNKY84和总BLNK ；上部两条凝胶)和Src激酶活性(pSyk Y352和总Syk ；下部两条凝胶)。对每种溶胞物进行2-3次实验，柱状图代表pBLNK Y84的 均值士S.D.。在这些图之上列出计算出的抑制Syk激酶的IC50。图11显示在NHL细胞系中Syk特异性抑制与Syk/JAK双重抑制的对比。在所述各 种浓度的各抑制剂的存在下，用抗BCR(图11A)或IL-4(图11B)刺激B细胞15min。然后， 通过磷酸-流式细胞仪评价细胞中信号通路的抑制。图11A)代表在各种处理条件下经BCR 刺激后Src活性(pSyk Y352 MFI)和Syk活性(pERK Y204 MFI)的柱状图(均值士S. D.， n = 3)。图11Β)描绘在所述各种浓度的各抑制剂的存在下用IL-4刺激后pSTAT-6Y641MFI (均值士S.D.，n = 3)的柱状图。图12显示Syk特异性抑制剂如何干扰NHL细胞系增殖和存活以及诱发NHL细胞系
29凋亡。已有关于依赖Syk的“BCR型”和不依赖Syk的“非BCR型"NHL细胞系的描述(Polo， Juszczynski 等.Proc Natl Acad Sci USA 104(9) :3207-12 (2007)。图 12A)将细胞用 1 和 3 μ M实施例87Syk特异性抑制剂处理72h。通过对活性半胱酸天冬氨酸酶3进行FACS分 析测定凋亡；数据用柱状图表示。图12B)测试其它细胞系对Syk特异性抑制(实施例596 和实施例87)和Syk/JAK(P420-89)双重抑制的相对敏感性。柱状图表示经各种条件处理 后半胱酸天冬氨酸酶3阳性细胞百分率均值士S. D. (n = 3)。图13显示选择性抑制Syk如何阻止BCR诱发小鼠初级B细胞激活。图13提供在 NHL细胞系对Syk特异性抑制和Syk/JAK双重抑制的对比。在所述各种浓度的各抑制剂的 存在下，用抗BCR刺激B细胞(图13C)15min。然后，通过磷酸-流细胞计量术评价细胞中 信号事件通路的抑制。图13C)代表在各种处理条件下，经BCR刺激后，Src活性(pSyk Y352 MFI)和Syk活性(pERK Y204 MFI)的流式细胞计图(均值士 S. D.，η = 3)。图14显示在小鼠关节炎模型中特异性抑制Syk的效能。图15显示小鼠模型中组织病理学如何确认Syk特异性抑制剂的临床分数。图16显示小鼠关节炎模型中Syk/JAK抑制的剂量依赖型作用。图17提供小鼠免疫血小板减少症模型。图18显示Syk抑制如何在异种移植NHL细胞系的小鼠模型阻止NHL肿瘤形成。选 择性Syk抑制剂实施例87阻止肿瘤形成。Syk抑制在异种移植小鼠中阻止NHL肿瘤形成。 从肿瘤细胞接种日起，开始给予小鼠10、15或20mg/kg实施例87化合物或溶媒对照，每日 两次。A)在接种4周后，测定用各处理条件处理后的肿瘤重量。在图中，以P值表示相对于 溶媒对照的统计学差异。B)柱状图描绘用各浓度的实施例87化合物或溶媒对照处理的小 鼠的正常血细胞计数(均值士S. D.，η = 13-15)。发明详述
除另有说明外，本文中所述以下术语具有以下含义
1.缩写和定义
除另有定义外，本文中使用的缩写为常规术语。使用以下缩写
AcOH =乙酸
AIBN =偶氮双异丁腈
aq.含水的
1 =叔丁基羧基
Bz =苄基
BOP =苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)-磷鐺六
BPO =过氧化苯甲酰
nBuOH =正丁醇
CBr4 =四溴甲烷
mCPBA =间-氯过氧苯甲酸
CH2Cl2 或 DCM =二氯甲烷
Cs2CO3碳酸铯
ι ι =氯化亚铜
DPPA =叠氮磷酸二苯酯0074]DIBAL =氢化二异丁基铝0075]DIEA =Hunig' s碱或二异丙基乙胺0076]DME =二甲醚0077]DMF =二甲基甲酰胺0078]DMSO =二甲亚砜0079]Et3N =三乙胺0080]EtOAc =乙酸乙酯0081]g =克0082]HATU =2- (1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鐺六0083]氟磷酸盐0084]H2 =氢气0085]H2O =水0086]HBr =溴化氢0087]HCl =氯化氢0088]HIV =人免疫缺陷病毒0089]HPLC =高效液相色谱0090]h =小时0091]IgE =免疫球蛋白E0092]IC50 =体外抑制50%酶需要的抑制剂的浓度0093]IPA =异丙醇0094]kg =千克0095]KCN =氰化钾0096]KOH =氢氧化钾0097]K2PO4 =磷酸钾0098]LDA =二异丙胺基锂(lithium diisopropylamine)0099]LiAlH4 =氢化铝锂0100]LiOH =氢氧化锂0101]MeCN =乙腈0102]MS =质谱0103]m/z =质量与电荷的比例0104]MHz =兆赫0105]MeOH =甲醇0106]μ M =微摩尔0107]μ L =微升0108]mg =毫克0109]mm =毫升0110]mM =毫摩尔0111]mmol =毫摩尔0112]mL =毫升
3110/343 页
0113]
0114]
0115]
0116]
0117]
0118]
0119]
0120] 0121] 0122]
0123]
0124]
0125]
0126]
0127]
0128]
0129]
0130]
0131]
0132]
0133]
0134]
0135]
0136]
0137]
0138]
0139]
0140]
0141]
0142]
0143]
0144]
0145]
0146]
0147]
0148]
0149]
0150]
0151]
mOD/min ....‘=
M =
Na2CO3 = ng = NaHCO3 = NaNO2 = NaOH = Na2S2O3 = Na2SO4 = NBS = NH4Cl = NH4OAc = NaSMe = NBS = n-BuLi = nm = nM = N = NMP = 匪R = Pd/C = Pd(PPh3)4 = pM
Pin = PEG =
PPh3 或 I3Ii3P = RLV = Ra-Ni = SOCl2 = RT = TEA = THF = TFA = TLC = TMS = Tf = TSC =
毫光密度单位/分钟 分钟 摩尔 碳酸钠 纳克
碳酸氢钠 亚硝酸钠 氢氧化钠 硫代亚硫酸钠 硫酸钠
N-溴代琥珀酰胺 氯化铵 乙酸铵 甲硫醇钠 N-溴代琥珀酰胺 正丁基锂 纳米 纳摩尔
当量(Normal) N-甲基吡咯烷 核磁共振 披钯炭
四(三苯基膦)合钯 皮摩尔
戊酉先(pinacolato)
聚乙二醇 三苯基膦 劳贝尔白血病病毒 Rainey 银 亚硫酰氯 室温 三乙胺 四氢呋喃 三氟乙酸 薄层层析 三甲基甲硅烷基 三氟甲磺酰基 柠檬酸三钠
在本文中应注意，除上下文中另有明确说明外，在本说明书及其权利要求中使用的单数形式“一”和“该”包括复数指代物。除另有说明外，单独或作为另一个取代基的一部分的“烷基”表示具有指定数目的 碳原子的直链或支链全饱和脂族烃基。例如，“C"烷基”是指含1-8个碳原子的通过除去母 体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生的直链或支链烃基。短语“未取代的烷基”是指不含 全饱和脂族烃基之外的基团的烷基。因此，该短语包括直链烷基，例如甲基、乙基、丙基、丁 基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。该短语还包括支链烷基异构 体，例如异丙基、叔丁基、异丁基、仲丁基等。代表性烷基包括具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、 11或12个碳原子的直链和支链烷基。其它代表性烷基包括具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳 原子的直链和支链烷基。单独或作为另一个取代基的一部分的“烯基”是指具有指定数目的碳原子的可为 单或多不饱和度的直链或支链。例如，"C2-C8烯基”表示具有2、3、4、5、6、7或8个原子的通 过除去母体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生的烯基。实例包括但不限于乙烯基、2-丙 烯基即-CH = C (H) (CH3)、-CH = C (CH3) 2、-C (CH3) = C (H) 2、_C (CH3) = C (H) (CH3)、-C (CH2CH3) =CH2、丁二烯基例如2-( 丁二烯基)、戊二烯基例如2，4-戊二烯基和3-(1，4_戊二烯基)， 和己二烯基等，及其高级同系物和立体异构体。“取代的”烯基包括其中非碳或非氢原子与 具有碳-碳双键的碳结合的烯基以及其中非碳或非氢原子中的一个与不与碳-碳双键连接 的碳结合的那些烯基。各不饱和位点可为环绕双键的顺或反式构型。单独或作为另一个取代基的一部分的术语“炔基”表示具有标示数目的碳 原子的可为单或多不饱和度的直链或支链烃基。例如"C2-C8炔基”表示具有2-8个 碳原子的通过除去母体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生的炔基。“未取代的炔 基”是指直链和支链基团，例如所述以上定义的未取代的烷基但在两个碳原子之间存 在至少一个三键的那些基团。实例包括但不限于乙炔基例如-C ε C(H) u-丙炔基例 如-C 三 C(CH3) >-C = C(CH2CH3)、-C(H2)C = C(H) ,-C(H)2C = C(CH3)和—C(H)2C = C(CH2CH3) 等，及其高级同系物和立体异构体。“取代的”炔基包括其中非碳或非氢原子与具有碳-碳 三键的碳结合的炔基以及其中非碳或非氢原子中的一个与不与碳-碳三键连接的碳结合 的那些炔基。单独或作为另一个取代基的一部分的“亚烷基”表示由烷衍生的二价基团，例 如-CH2CH2CH2CH2-O通常，亚烷基具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子，通过除去母体烷的单 个碳原子上的一个氢原子衍生得到。除另有说明外，单独或与其它术语联合的“环烷基”或“碳环”代表环状形式的“烷 基”、“烯基”和“炔基”，其中所有环原子为碳。“环烷基”或“碳环”是指单环或多环基团。当 与环烷基取代基联用时，术语“多环”在本文中是指稠合和非稠合的烷基环结构。“环烷基” 或“碳环”可形成桥接环或螺环。环烷基可具有一个或多个双键或三键。术语“环烯基”是 指在环顶点之间具有至少一个烯基不饱和位点的环烷基。术语“环炔基”是指在环顶点之 间具有至少一个炔基不饱和位点的环烷基。当“环烷基”与“烷基”联用时，例如在C3_8环 烷基c3_8亚烷基-中，环烷基部分具有所述数目的碳原子(例如3-8个碳原子)，而亚烷基 部分具有1-8个碳原子。典型的环烷基取代基具有3-8个环原子。环烷基的实例包括环戊 基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。单独或作为另一个取代基的一部分的“芳基”是指含6-14个碳原子的多不饱和芳族烃基，该基团可为单环或稠合在一起或共价连接的多环(高达3环)。因此，该短语包括 但不限于基团例如苯基、联苯基、蒽基、萘基。未取代的芳基的非限制性实例包括苯基、1-萘 基、2-萘基和4-联苯基。“取代的芳基”包括例如-CH20H( —个碳原子和一个置换碳原子 的杂原子)和_CH2SH。单独或作为另一个取代基的一部分的术语“亚杂烷基”表示由杂烷 基衍生的二价基团，例如-CH2-CH2-S-CH2CH2--和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。对于亚杂烷基 而言，杂原子也可占据链的任一或两个末端(例如亚烷氧基(alkyleneoxy)、亚烷基二氧基 (alkylene dioxy)、亚烷基氨基、亚烷基二氨基等)。再者，对于亚烷基和亚杂烷基连接基团 而言，不指定连接基团的取向。术语“杂环”、“杂环基”或“杂环状”是指含至少一个杂原子的饱和或不饱和非芳 族环基团。本文中使用的术语“杂原子”包括氧(0)、氮(N)、硫⑶和硅(Si)。可在任何 可利用的环碳或杂原子上使杂环连接。各杂环可具有一个或多个环。当存在多环时，它 们可稠合在一起或共价连接。各杂环通常含1、2、3、4或5个独立选择的杂原子。优选， 这些基团含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子；0、1、2、3、4或5个氮原子；0、1或2个硫 原子和0、1或2个氧原子。更优选，这些基团含1、2或3个氮原子；0-1个硫原子和0-1 个氧原子。杂环基团的非限制性实例包括吗啉-3-酮、哌嗪-2-酮、哌嗪-1-氧化物、吡 啶-2-酮、哌啶、吗啉、哌嗪、异巧 1唑啉(isoxazoline)、吡唑啉、咪唑啉、吡唑_5_酮、吡咯 烷-2，5- 二酮、咪唑烷-2，4- 二酮、吡咯烷、四氢喹啉基、十氢喹啉基、四氢苯并氧氮杂革基 (tetrahydrobenzooxazepinyl)、三M1 三苯并氧杂| (dihydrodibenzooxepin)。“杂芳基”是指含选自N、0和S的1-5个杂原子的环状或多环状芳族基团，其中氮 和硫原子任选被氧化，氮原子任选被季铵化。杂芳基可通过杂原子或碳原子与分子的其余 部分连接，并可含5-10个碳原子。杂芳基的非限制性实例包括1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡 咯基、1-吡唑基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、批嗪基、2-p;f、唑基、4-^fJ坐基、5-唑基、3-异唑基、4-异Wf唑基、5-异巧悉唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃 基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基和4-嘧 啶基。若未具体说明，各上述芳基和杂芳基环系统的取代基选自本文中所述的可接受的取 代基。“取代的杂芳基”是指以上定义的未取代的杂芳基，其中一个或多个环原子与例如 以上对取代的烷基和取代的芳基描述的非氢原子结合。代表性取代基包括直链和支链烷 基-CH3、-C2H5, -CH2OH, -OH、-OCH3> -OC2H5, -OCF3> -OC ( = 0) CH3> -OC ( = 0)NH2、-OC ( = 0) N (CH3) 2、_CN、-NO2、-C ( = 0) CH3、-CO2H, -CO2CH3、-CONH2、-NH2、-N (CH3) 2、-NHSO2CH3、-NHCOCH3 > -NHC ( = 0) OCH3> -NHSO2CH3 > -S02CH3> -SO2NH2 和卤代。“双环杂芳基”是指含选自N、0和S的1-5个杂原子的双环芳族基团，其中氮和硫 原子任选被氧化，氮原子任选被季铵化。双环杂芳基可通过杂原子或碳原子与分子的其余 部分连接，并可含5-10个碳原子。双环杂芳基的非限制性实例包括5-苯并噻唑基、嘌呤 基、2-苯并咪唑基、苯并吡唑基、5-吲哚基、吖吲哚(Etzaindole)U-异喹啉基、5-异喹啉基、 2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。若未具体说明，各上述芳基和杂芳基环 系统的取代基选自本文中所述的可接受的取代基。“芳基杂芳基”或“亚芳基杂芳基”是指其中杂芳基部分按非稠合方式与芳基部分 连接的基团。芳基通过碳原子与分子的其余部分连接并可含5-10个碳原子。以上描述了
34芳基和杂芳基的非限制性实例。术语“苯基杂芳基”或“亚苯基杂芳基”是指连接苯基部分 的杂芳基部分，苯基与分子的其余部分连接。“芳基杂环基，，或“亚芳基杂环基，，是指其中杂环基部分按非稠合方式与芳基部分 连接的基团。芳基通过碳原子与分子的其余部分连接并可含5-10个碳原子。以上描述了 芳基和杂芳基的非限制性实例。术语“苯基杂环基”或“亚苯基杂环基”是指连接苯基部分 的杂芳基部分，苯基与分子的其余部分连接。在标示原子数目例如“C"”的以上各实施方案中，包括具有少一个(one fewer)原 子的所有可能的实施方案。非限制性实例包括CV7、c2_8、C2-7、C3-8、C3_7等。除另有说明外，本文中各术语(例如“烷基”、“杂烷基”、“芳基”和“杂芳基”)包括 “未取代”和任选“取代”形式的所述基团。除另有说明外，通常，各基团被0、1、2、3、4或5 个取代基取代。以下提供各类型基团的取代基的实例。“取代的”是指本文中定义的基团，其中连接碳或氢的一个或多个键被连接非氢和 非碳原子“取代基”的键置换，非氢和非碳原子为例如但不限于卤素原子，例如F、Cl、Br和 I ；基团例如羟基、烷氧基、芳氧基和酰氧基中的氧原子；基团例如硫醇基、烷基和芳基硫醚 基团、砜基团、磺酰基和亚砜基团中的硫原子；基团例如氨基、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷 基芳基胺、二芳基胺、烷氧基氨基、羟基氨基、酰基氨基、磺酰基氨基、N-氧化物、二酰亚胺和 烯胺中的氮原子；和各种其它基团中的其它杂原子。“取代基”还包括基团，其中连接碳或 氢的一个或多个键被连接杂原子的高位阶键(higher-order)(例如双键或三键)置换，杂 原子为例如氧代、酰基、酰氨基、烷氧基羰基、氨基羰基、羧基和酯基中的氧；基团例如亚胺、 肟、腙和腈中的氮。“取代基”还包括基团，其中连接碳或氢的一个或多个键被连接环烷基、 杂环基、芳基和杂芳基的键置换。代表性“取代基”包括但不限于基团，其中连接碳或氢的 一个或多个键被连接氟、氯或溴基团的键置换。另一个代表性“取代基”是三氟甲基和含三 氟甲基的其它基团。其它代表性“取代基”包括那些取代基，其中连接碳或氢的一个或多个 键被连接氧原子的键置换，以使取代的烷基含羟基、烷氧基或芳氧基。其它代表性“取代基” 包括烷基，此类烷基具有胺，或取代或未取代的烷基胺、二烷基胺、芳基胺、(烷基)(芳基) 胺、二芳基胺、杂环基胺、二杂环基胺、(烷基)(杂环基)胺或(芳基)(杂环基)胺基团。 再其它代表性“取代基”包括那些取代基，其中连接碳或氢的一个或多个键被连接烷基、环 烷基、芳基、杂芳基或杂环基的键置换。本文中定义的基团可包括本领域中常用的前缀和/或后缀，以形成其它公认的取 代基。例如，“烷基氨基”是指式-NRaRb基团。除另有说明外，对于含RaUf和『的基 团而言，Ra*Rb各自独立选自H、烷基、烷氧基、硫代烷氧基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基， 或任选与它们所连接的原子连接在一起形成环状基团。当Ra* Rb与同一个氮原子连接时， 它们可与该氮原子结合形成5元、6元或7元环。例如，-NRaRb包括1-吡咯烷基和4-吗啉 基。『、炉、1^和Rf各自独立选自本文中定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、 杂芳基、杂环基或亚烷基芳基。通常，特定基团具有0、1、2或3个取代基，在本发明中，优选具有2个或更少取代 基的那些基团。更优选，基团未被取代或一取代。最优选，基团未被取代。烷基和杂烷基(以及称为亚烷基、烯基、亚杂烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环基的那些基团)的“取代基”可为选自以下的多种基团_0Ra、= 0、= NRa、= N-0Ra、-NRaRb、-SRa、 卤素、-SiRaRbRc、-OC (0) R\ -C (0) R\ -CO2Ra, -CONRaRb, -OC (0) NRaRb -NRbC (0) R\ -NRa-C (0) N RbRc, -NRa-SO2NRbRc, -NRbCO2Ra, -NH-C (NH2) = NH、-NRaC (NH2) = NH、-NH-C (NH2) = NR\-S(O) Ra、-SO2Ra, -SO2NRaRb, -NRbSO2R, -CN和-NO2,取代基的数目为0_3，尤其优选具有0、1和2个 取代基的基团。在某些实施方案中，烷基和杂烷基的“取代基”选自_0Ra、= 0、-NRaR\ _SRa、 卤素、-SiRaRbRc、-OC(O)Ra、_C(0)Ra、-(X)2Ra、-CONRaRb、-OC(O)NRaRb、-NRbC(O)Ra、-NRbCO2Ra 、-NRa-SO2NRbRc、-S (0) R\ -SO2Ra, -SO2NRaRb, -NRcSO2R, -CN 和-NO2，其中 Ra 和 Rb 定义同上。 在某些实施方案中，取代基选自_0Ra、= 0、-NRaRb、卤素、-OC (0) R\-CO2Ra, -CONRaRb、-OC (0) NRaRb、-NRbC (0) Ra、-NRbCO2Ra, -NRa-SO2NRbRc, -SO2Ra, -SO2NRaRb、-NR〃 SO2R, -CN 和-NO2。取代的烷基的实例为_(CH2) 3NH2、- (CH2) 3NH (CH3)、_ (CH2) 3NH (CH3) 2、-CH2C (= CH2) CH2NH2、-CH2C ( = 0) CH2NH2、-CH2S ( = 0)2CH3、-CH2OCH2NH2、-CO2H。取代的烧基的取代 基的实例为CH2OH, -OH、-OCH3> -OC2H5, -OCF3> -OC( = 0)CH3> -OC( = 0)NH2、-OC( = 0) N (CH3) 2、_CN、-NO2、-C ( = 0) CH3、-CO2H, -CO2CH3、-CONH2、-NH2、-N (CH3) 2、-NHSO2CH3、_NHC0CH3、 -NHC ( = 0) OCH3> -NHSO2CH3 > -S02CH3> -SO2NH2 和卤代。同样，芳基和杂芳基的“取代基”有多种，选自_卤素、-0『、-0((0)1^、41^^、-51 \ -R\ -CN、-NO2,-CO2Ra, -CONRaRb, -C (0) R\ -OC (0) NRaRb,-NRbC (0) R\ -NRbC (0) 2R\ -NRa-C (0) nrbrc, -nh-c (nh2) = nh、-nrac (nh2) = nh、-nh-c (nh2) = nr\ -s (0) ra、-s (0) 2r\ -s (0) 2nra 'Rb、_N3、-CH(Ph)2、全氟代CV8烷氧基和全氟代CV8烷基、取代基的数目为0至芳环系统上 的开放价键总数；其中Ra、Rb* Re独立选自氢、CV6烷基和杂烷基、未取代的芳基和杂芳基、 (未取代的芳基)-(V8烷基和(未取代的芳基)氧基-CV8烷基。芳基或杂芳基环的相邻原子上的2个“取代基”可任选被式-T-C (0) - (CH2) q-U-的 取代基置换，其中T和U独立为-NH-、-0-、-CH2-或单键，q为0、1或2。或者，芳基或杂芳 基环的相邻原子上的2个取代基任选被式-A- (CH2) r-B-的取代基置换，其中A和B独立为-CH2-、-0-、-NH-、-S-、-S (0) -、-S (0)2-、-S (0)2NRa-或单键，r 为 1、2 或 3。由此形成的新环的 单键中的一个任选被双键代替。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的2个取代基任选被 式-(CH2)s-X-(CH2) t-的取代基置换，其中s和t独立为0-3的整数，X为-0-、-NRa-、-S-、_ S(O)-,-S (0) 2-或-S (0) 2NRa-。-NRa-和-S (0) 2NRa-中的取代基Ra选自氢或未取代的烷基。 另外，R'定义同上。除另有说明外，通过依次命名官能团的末端部分和与连接点相邻的官能团对本文 中未明确定义的取代基命名。例如，取代基“芳基烷基氧基羰基”是指基团(芳基)_(烷 基)-O-C (O)-O术语“酰基”是指基团_C( = 0)R%其中Re为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳 基、杂芳基或杂环基。酰基包括“乙酰基”-c( = o)ch3。“酰基氨基_”是指基团_NRaC( = 0)R%其中Re为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯 基、芳基、杂芳基或杂环基。“酰氧基”是指_0C( = 0)_R%其中Re为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂 芳基或杂环基。“烷氧基”是指_0Rd，其中Rd为本文中定义的烷基。烷氧基的代表实例包括甲氧基、
36乙氧基、叔丁氧基、三氟甲氧基等。“烷氧基氨基”是指基团-NHORd,其中Rd为烷基。“烷氧基羰基”是指_C( = 0)0Rd，其中Rd为烷基。代表性烷氧基羰基包括例如下 示那些基团。结合本文中的公开内容，这些烷氧基羰基可被进一步取代对具有有机和药物化学 技能的技术人员而言是显而易见的。“烷氧基羰基氨基”是指_NRaC( = 0)0Rd，其中Rd为烷基。“烷氧基磺酰基氨基”是指基团_NRaS( = 0)2_0Rd，其中Rd为烷基。“烷基羰基”是指基团_C( = 0)R%其中Re为烷基。“烷基羰基氧基”是指_0C( = 0)_R%其中Re为烷基。“烷基羰基氨基”是指-NRaC( = 0)R%其中Re为烷基。代表性烷基羰基氨基包 括例如-NHC( = 0) CH3> -NHC( = 0) CH2CH3、-NHC( = 0) CH2NH(CH3)、-NHC( = 0) CH2N(CH3)2 或-NHC ( = 0) (CH2) 30H。“烷基硫烷基”、“烷硫基”或“硫代烷氧基”是指基团S_Rd，其中Rd为烷基。“烷基磺酰基”是指_S( = 0)2R%其中IT为烷基。用于本发明化合物的烷基磺酰基 通常为Cp6烷基磺酰基。“烷基磺酰基氨基”是指_NRaS( = 0)2-Re，其中Re为烷基。“炔氧基”是指-0-炔基，其中炔基定义同本文。炔氧基包括例如乙炔氧基、丙炔氧
基等ο“脒基”是指基团_C( = NRa)NRbR%其中Rb和Re独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯 基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基、杂环，其中Rb和Re任选与连接它们的氮连接在一 起形成杂环或取代的杂环。Ra选自氢、烷基、烯基、炔基、环炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳 基、杂环、取代的杂环、硝基、亚硝基、羟基、烷氧基、氰基、-N = N-N-烷基、-N(烷基)SO2-烷 基、一N = N = N-烷基、酰基和-SO2-烷基。“氨基”是指一价基团-NRaRb或二价基团-NRa-。术语“烷基氨基”是指基团_NRaRb， 其中RaS烷基，Rb为H或烷基。术语“芳基氨基”是指基团-NRaRb，其中1^或铲中的至少 一个为芳基。术语“(烷基)(芳基)氨基”是指基团-NRaRb，其中Ra为烷基，Rb为芳基。另 外，对于二烷基氨基，烷基部分可相同或不同，且也可和与它们各自连接的氮原子结合形成 3-7元环。因此，以-NRaRb代表的基团包括哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、氮杂环丁烷基等。
ο
“氨基羰基”或“氨基酰基”是指酰胺-C ( = 0) _NRaRb。术语“烷基氨基羰基”在本 文中是指基团-C( = 0)-NRaRb,其中Ra为烷基，Rb为H或烷基。术语“芳基氨基羰基”在本 文中是指基团_C( = 0)-NRaRb,其中Ra或Rb为芳基。代表性氨基羰基包括例如下示那些基 团。结合本文中的公开内容，这些烷氧基羰基可被进一步取代对具有有机和药物化学技能 的技术人员而言是显而易见的。
权利要求
1.式(I)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐
2.权利要求1的化合物，其中Y1为
3.权利要求1，其中Y1为
4.前述权利要求中任一项的化合物，其中Z为S。
5.前述权利要求中任一项的化合物，其中Z为0。
6.权利要求1-3中任一项的化合物，其中Z为S。
7.前述权利要求中任一项的化合物，其中D1为苯基。
8.权利要求7的化合物，其中R5为杂芳基。
9.权利要求7的化合物，其中R5为杂环基。
10.权利要求7的化合物，其中R5为C"亚烷基杂环基。
11.权利要求7的化合物，其中R5为亚苯基杂芳基。
12.权利要求7的化合物，其中R5为亚苯基杂环基。
13.权利要求7的化合物，其中R5为-L-苯基。
14.权利要求7的化合物，其中R5为-L-杂环基。
15.权利要求13或14的化合物，其中L为-CO-。
16.权利要求13或14的化合物，其中L为-0-。
17.权利要求13或14的化合物，其中L为-S02-。
18.权利要求13或14的化合物，其中L为-C0NH-。
19.权利要求13或14的化合物，其中L为-C0NHCH2-。
20.权利要求7的化合物，其中R5为乙酰氧基。
21.权利要求1-3中任一项的化合物，其中D1为萘基。
22.权利要求1-3中任一项的化合物，其中D1-选自
23.权利要求1-3中任一项的化合物，其中D1为C3_8环烷基。
24.权利要求1-3中任一项的化合物，其中D1选自环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
25.权利要求1-3中任一项的化合物，其中D1为杂芳基。
26.权利要求1-3中任一项的化合物，其中D1为杂环基。
27.前述权利要求中任一项的化合物，其中单独或作为含杂芳基的基团的一部分的所 述杂芳基选自
28.前述权利要求中任一项的化合物，其中单独或作为含杂芳基的基团的一部分的所 述杂芳基选自
29.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R5选自
30.权利要求四的化合物，其中R5选自
31.权利要求四的化合物，其中R5选自
32.权利要求1-3中任一项的化合物，其中=D1为双环杂芳基。
33.权利要求32的化合物，其中D1选自
34.权利要求33的化合物，其中D1选自
35.权利要求34的化合物，其中D1选自
36.权利要求34的化合物，其中D1选自
37.权利要求36的化合物，所述化合物选自
38.权利要求1-3中任一项的化合物，其中各E1独立选自C1-8烷基、杂芳基、杂环基、卤卤代烷基、C1-8烷氧基、C1-8酰基、氨基C1-8烷基、氨基磺酰基、C1-8烷基磺酰基和酰氨基。
39.权利要求38的化合物，其中各E1独立选自
40.权利要求38的化合物，其中各E1独立选自
41.前述权利要求中任一项的化合物，其中R2为氨基t
42.权利要求2的化合物，其中所述部分
43.权利要求2的化合物，其中所述部分
44.权利要求2的化合物，其中所述部分
45.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有下式
46.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有下式 f(E1)n
47.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有下式
48.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有下式
49.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有下式
50.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有选自以下的式
51.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有选自以下的式
52.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有选自以下的式
53.权利要求2的化合物，其中所述化合物具有下式
54.权利要求46的化合物，所述化合物选自
55.权利要求46的化合物，所述化合物选自
56.权利要求M的化合物，所述化合物具有下式
57.权利要求M的化合物，所述化合物具有下式
58.权利要求M的化合物，所述化合物具有下式
59.权利要求3的化合物，其中所述部分
60.权利要求59的化合物，其中所述化合物具有下式
61.权利要求59的化合物，其中所述化合物具有下式
62.权利要求59的化合物，其中所述化合物具有选自以下的式
63.权利要求59的化合物，其中Rla选自CV8烷基、C3_8环烷基、芳基、杂芳基和杂环基
64.权利要求2的化合物，其中所述部分
65. 一种化合物或其互变异构体或药学上可接受的盐，所述化合物具有选自式IIa-C的结构
66.式(IId)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐
67.下式的化合物
68.式(IIe)的化合物
69.权利要求68的化合物，其中D2为任选被1-2个取代基E2b取代的萘基，所述取代 基独立选自卤代、C1^8烷氧基和(V8烷基氨基羰基。
70.权利要求68的化合物，其中D2为
71.权利要求68的化合物，其中D2为且波纹线表示与分子其余部分的连接点。
72.权利要求68的化合物，其中D2选自
73.权利要求68的化合物，所述化合物具有下式
74.化合物，所述化合物具有实施例中给出的结构。
75.化合物，所述化合物具有表中列举的结构。
76.化合物，所述化合物具有图中所示结构。
77.组合物，所示组合物含前述权利要求中任一项的化合物和药学上可接受的载体或 稀释剂。
78.抑制syk或JAK激酶或至少部分由syk激酶活性介导的信号转导通路的方法，所述 方法包括使细胞与前述权利要求中任一项的化合物接触的步骤。
79.在患者中治疗至少部分由syk激酶活性介导的病症或疾病的方法，所述方法包括 给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求77的组合物的步骤。
80.权利要求79的方法，其中所述病症或疾病选自心血管病、炎性疾病和自身免疫疾 病及细胞增殖病症。
81.权利要求79的方法，其中所述心血管病选自再狭窄、血栓形成、免疫血小板减少性 紫癜、肝素引起的血小板减少症、扩张型心肌炎、镰状细胞病、动脉粥样硬化症、心肌梗塞、 脉管炎症、不稳定心绞痛和急性冠状动脉综合征。
82.权利要求79的方法，其中所述炎性疾病选自过敏、哮喘、类风湿性关节炎、B细胞介 导的疾病例如非霍奇金氏淋巴瘤、抗磷脂综合征、红斑狼疮、银屑病、多发性硬化和晚期肾 病。
83.权利要求79的方法，其中所述心血管病选自血栓形成、免疫血小板减少性紫癜和 肝素引起的血小板减少症。
84.权利要求79的方法，其中所述炎性疾病为类风湿性关节炎或非霍奇金氏淋巴瘤。
85.权利要求79的方法，其中所述镰状细胞病选自镰状细胞贫血病、血红蛋白C疾病、 镰状细胞β +地中海贫血和镰状细胞β 0地中海贫血。
86.权利要求79的方法，其中所述免疫相关疾病选自T细胞介导的疾病、自身免疫疾 病、移植物抗宿主病、异种移植物抗宿主病、IV型过敏反应和同种异体移植物排斥。
87.权利要求79的方法，其中所述自身免疫疾病选自溶血性贫血、免疫血小板减少性 紫癜、多发性硬化、斯耶格伦综合征、糖尿病、类风湿性关节炎、红斑狼疮和银屑病。
88.权利要求79的方法，其中所述细胞增殖症为白血病、淋巴瘤、骨髓增生症、血癌和 慢性自发性骨髓纤维变性。
89.权利要求79的方法，其中所述病症为急性骨髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病 或非霍奇金淋巴瘤。
90.药盒，所述药盒含权利要求77的组合物、包装和使用说明书。
全文摘要
本发明涉及式I-V化合物、其互变异构体或其药学上可接受的盐、酯和前药，它们为syk激酶抑制剂。本发明还涉及用于制备这种化合物的中间体、制备这些化合物的方法、含这些化合物的药用组合物、抑制syk激酶活性的方法、抑制血小板凝集的方法，以及预防或治疗至少部分由syk激酶活性介导的多种疾病，例如心血管疾病、炎性疾病、自身免疫性疾病以及细胞增长性疾病的方法。在式(I)中，Y1选自(a)和(b)；Z为O或S；D1选自(a)被基团R5取代的苯基；(b)萘基；(c)C3-8环烷基；(d)杂芳基；(e)杂环基。
文档编号A61K31/506GK102066339SQ200980122548
公开日2011年5月18日 申请日期2009年4月16日 优先权日2008年4月16日
发明者A·潘迪, B·凯恩, C·文卡塔拉曼尼, J·W·罗斯, M·梅赫罗特拉, S·M·鲍尔, Z·J·贾, 宋永红, 徐亲, 黄沃林 申请人:波托拉医药品公司