蛋白激酶抑制剂香豆素及其制备方法和医药应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学技术领域，具体涉及蛋白激酶抑制剂香豆素的靶向设计、及 其制备方法以及其在抗肿瘤细胞增殖中的应用。
【背景技术】
[0002] 蛋白激酶是细胞内最大的蛋白家族之一，人类基因组内共含有500多个蛋白激酶 基因。其要功能是将ATP的γ磷酸基转移到底物蛋白特定的氨基酸上，进而调节底物蛋白 的活性，在调节代谢、基因表达、细胞生长、分裂和分化等方面起关键作用。与肿瘤发生、发 展密切相关，成为热门的抗癌靶点，并已有十余种蛋白激酶抑制剂作为抗癌药物成功上市。 蛋白激酶CK2是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸类蛋白激酶，通过磷酸化多种底物，参与诱导 细胞生长、抑制细胞凋亡及调节信号通路中癌基因和抑癌基因的活性等生理过程，具有促 增长且抗凋亡的特性而成为重要的抗癌靶标。人源CK2全酶结构是由两个催化亚基（α和 /或α'）和两个调节亚基β构成的不均一四聚体。其中CK2a是由富含β-折叠的N端、 富含α-螺旋结构的C端和位于两结构域之间的催化活性口袋组成。
[0003] 香豆素类化合物及其衍生物在自然界中分布极其广泛，具有抗菌、消炎、抗肿瘤、 抗凝结等生物活性，具有潜在的药用价值，被认定为重要的药物先导化合物。现有技术表 明，7-羟基香豆素类化合物仅与活性口袋形成单一的极性作用，因此对蛋白激酶CK2表现 出中等程度的抑制活性。针对7-羟基香豆素化合物骨架，选择恰当的取代位置进行官能团 修饰，以期得到具有高CK2抑制活性及抗肿瘤细胞增殖活性的化合物。
【发明内容】
[0004] 本发明涉及4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素及其制备方法，及其在蛋白激酶抑 制剂和抗肿瘤细胞增殖医药领域中的应用。
[0005] ATP竞争性抑制剂通过结合到催化活性口袋而发挥抑制功能。其中该靶酶的催化 活性口袋主要由铰链区（Glull4, Valll6)、正电性区（Lys68, Glu81和水分子1)及疏水区 (Val66, F113, Metl63和Ilel74)三个亚位点组成。针对仅与CK2催化活性口袋正电性区 形成单一极性作用7-羟基香豆素类化合物，本发明人提出能够与结合口袋各亚位点形成 作用（尤其可同时与铰链区和正电性区形成极性作用）是保证化合物具有高抑制活性的重 要结构基础。因此，本发明人基于7-羟基香豆素骨架结构，为增加化合物与铰链区氨基酸 GlulH和Vallie的极性作用，选择恰当的取代位置进行适当的官能团修饰，提出在&位引 入CF3取代基，以得到具有高蛋白激酶CK2抑制活性及抗肿瘤细胞增殖活性的化合物。
[0006] 本发明提供结构式1所示4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素或其可药用盐（本 发明的4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素，当其羟基以氧负离子形式存在时，可与阳离子 结合形成化合物盐，如钠盐、钾盐、铵盐等）。
[0007] 4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素的结构式如下：
[0008]
【主权项】
1. 4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素或其可药用盐，其中4-三氟甲基-7-羟基-8-氯 香豆素的结构式如下：
2. 4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素的制备方法，其特征在于：将化合物 2-氯-1，3-苯二酚2分散于无机酸水溶液中，随后加入化合物三氟乙酰乙酸乙酯3,该反应 液在搅拌下加热的条件下反应，反应完全后，恢复至室温，分液。洗涤，干燥，分离，即得；反 应式如下：
3. 按照权利要求2的方法，其特征在于，无机酸水溶液的质量浓度60% -80% ;加热的 温度至60°C -90°C ;反应1小时-3小时。
4. 按照权利要求2的方法，其特征在于，无机酸为盐酸、硫酸和高氯酸中的任一种。
5. 按照权利要求2的方法，其特征在于，化合物2:无机酸水溶液：化合物3为 (0· 2-0. 6) g : (1-3) mL : (0· 20-0. 40) mL。
6. 按照权利要求2的方法，其特征在于，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯分液，有机相用饱 和食盐水洗涤后，以无水硫酸镁干燥，正己烷：乙酸乙酯的体积比=2 :1进行柱层析分离。 7. 4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素或其可药用盐作为蛋白激酶抑制剂的应用。
8. 按照权利要求7的4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素或其可药用盐作为蛋白激酶 抑制剂的应用，其特征在于，蛋白激酶为CK2。 9. 4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素或其可药用盐作为抗肿瘤药物中的应用。
10. 按照权利要求9的4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素或其可药用盐作为抗肿瘤药 物中的应用，其特征在于，包括肺癌细胞A549、宫颈癌细胞Hela以及乳腺癌细胞MCF-7中的 一种或几种。
【专利摘要】蛋白激酶抑制剂香豆素及其制备方法和医药应用，属于药物化学技术领域。4-三氟甲基-7-羟基-8-氯香豆素的结构式如下：，经体外蛋白激酶活性及抗肿瘤细胞增殖活性检测，该化合物可抑制蛋白激酶CK2活性，并对肺癌A549、宫颈癌Hela及乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有一定的抑制作用，可应用作为蛋白激酶抑制剂及抗肿瘤药物。
【IPC分类】A61P35-00, C07D311-16
【公开号】CN104529972
【申请号】CN201510026529
【发明人】张娜, 周玥, 陈文娟, 钟儒刚
【申请人】北京工业大学
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2015年1月20日