囊泡制剂的制作方法

专利名称：囊泡制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种能有效地将生理活性物质导入肝实质细胞内、并使生理活性物质在肝实质细胞内有效作用的囊泡(小胞体，vesicle)及其用途。
背景技术：
本发明涉及能将抗病毒剂、化疗剂、肽、核苷酸、寡核苷酸、反义核酸、适体、诱杀剂以及它们的类似物、小核酸分子例如siRNA、miRNA、dsRNA或shRNA等生理活性物质有效地导入肝实质细胞内，并使生理活性物质在肝实质细胞内有效作用的囊泡。已知在肝实质细胞内导入基因等核酸或抗肿瘤剂等生理活性物质而试图实现基因表达、基因调节、肿瘤缩小的例子。对于核酸相关的导入，作为使用了病毒载体的例子，有kherr等的论文(非专利文献1)以及公开专利(专利文献1)，作为施加水压而导入细胞内的流体动力注入的例子， 有Song等的论文(非专利文献2)和公开专利(专利文献2)。但是，使用病毒载体的导入方法对人的安全性存在问题，不适合广泛的普通治疗目的。另外，施加水压的导入方法虽然可以在生物体外导入至细胞，但也不适合以治疗目的应用于人。此外，作为向肝实质细胞的输送方法，已知利用以肝脏表面的糖受体为靶标的受体介导的胞吞作用的方法。脱唾液酸糖蛋白受体(非专利文献幻对肝细胞是特异性的，可以与具有半乳糖末端的糖蛋白例如脱唾液酸血清类黏蛋白结合。有介绍利用该原理的含有半乳糖修饰阳离子性胆固醇的脂质体组合物(专利文献幻。但是，在输送siRNA的实施例中，虽然与未修饰半乳糖的情况相比效果稍有提高，但是在肺、肾脏、脾脏以及心脏中也可见基因表达，因此可知不是对肝脏特异性地输送siRNA，不能说是有效的技术。还提出了将乳糖与磷脂的磷脂酰乙醇胺结合并与正离子脂质体配合的组合物 (非专利文献4)、使用糖修饰肽并与脂质体同样以肝脏的糖受体为靶标的输送(专利文献 4)。但是，以肝脏的糖受体为靶标的脂质体的输送中，通过胞吞作用进入后，在内体内发生核酸的分解，存在几乎不能发挥基因表达以及基因调节的效果的问题。另一方面，还介绍有以下的技术避开作为生物体的防御系统的网状内皮系统 (以下RES :reticulo-endothelial system)而提高血液滞留性，其结果提高了向肝实质细胞的输送效率(专利文献幻。使脂质体表面化学结合水溶性的聚合物(甲氧基聚乙二醇 mPEG)而避开由RES产生的异物识别的技术被称为被动靶向(passive targeting)，与作为抗癌药阿霉素的脂质体制剂而市售(Doxil)的技术相同。除了具有由于血管通透性的亢进而容易聚集在肿瘤组织或新生血管部位的特长外，一部分也会进入RES细胞，因此也不能说是向肝实质细胞的有效的输送技术。由于作为脂溶性维生素的维生素E (生育酚)具有抗氧化功能，因此能以在囊泡中少量(一般0.2%左右)添加的形式使用来达到防止脂囊泡中的不饱和脂肪酸氧化的目的 (专利文献6、7)。
另外，Nishina等报道了，使作为维生素E的主成分的α -生育酚与siRNA化学结合而将siRNA用于向肝脏的输送的例子，其中利用了以下事实来源于食物的维生素E被小肠吸收并在血液中由血清成分的乳糜微粒运送至肝脏，而且来源于食物以外的维生素E在血液中容易被HDL(高密度脂蛋白)和LDL(低密度脂蛋白)运送(非专利文献5)。但是， 由于使siRNA与α-生育酚以1 1结合在工业范围上存在制造上的困难，而且作为前药要求高纯度，因此有必要除去未反应原料和副产物。由于这些制造工序和纯化工序引起的收率的降低，以及导入肝脏后由水解引起的siRNA的游离也是必然的，因此为了获得治疗效果，不得不大量使用高价的siRNA，从而存在经济上的问题。另夕卜，已知将维生素A与市售的细胞导入用正离子脂质体以及质粒或siRNA之类的核酸混合制成乳液，向肝卫星细胞输送的方法(专利文献8)。肝卫星细胞与网状内皮系细胞一样是非实质细胞，在细胞内具有脂肪滴并贮藏有高浓度的维生素A。使用该维生素A 的向非实质细胞的输送方法的情况下，如果血液中存在大量的维生素A，则由于容易由血液中的维生素A结合蛋白输送至肝卫星细胞(非实质细胞)，因此不必控制粒径和表面电荷等。但是，将生理活性物质特异性地输送至肝实质细胞内时，为了不使粒子被非实质细胞截留，有必要适当调节全部粒子的粒径和表面电荷。迄今为止，尚未开发出最适合向肝实质细胞输送用的输送粒子。
背景技术：
文献 专利文献专利文献1 日本特开2007-110995号专利文献2 日本特开2008-054681号专利文献3 日本特开2007-112768号专利文献4 日本特开1999-290073号专利文献5 日本特开2004-196675号专利文献6 日本特开2007-112768号专利文献7 日本特表2008-530215号
专利文献8 日本特开2008-50375号非专利文献非专利文献 1 =Scherr, M. et al.，Oligonucleotides, 2003 ；13 :353_363非专利文献 2 :Song, Ε. et al.，Nature Medicine, 2003 ；9 :347_351非专利文献3 :ffu, GY and Wu, CH, J. Biol. Chem.，1987 ；262 4429-4432非专利文献4 =Watanabe, T. et al.，J. Hepatol.，2007 ；47 :744_750非专利文献5 =Nishina, K. et al.，Molecular Therapy, 2008 ； 16 (4) :734_740

发明内容
发明要解决的课题本发明是鉴于以上的情况而进行的，其目的涉及一种组合物，该组合物能有效且特异性地将生理活性物质输送导入至肝实质细胞，并使生理活性物质在肝实质细胞内有效作用。解决课题用的手段
本发明人对向肝实质细胞的输送技术进行了深入的研究，结果发现通过在含有生理活性物质的囊泡表面上吸附或化学结合充分量的维生素E来识别血清成分，从而血清成分极其有效地将含有生理活性物质的囊泡输送至肝实质细胞，且生理活性物质能快速发挥效果，从而完成了本发明。本发明人还发现了一种极其安全且有效的方法，该方法不通过与生理活性物质的结合，而是利用维生素E在血液中容易被运送至肝实质细胞的性质作为生理活性物质的输送因素。S卩，本发明涉及以下(1) 04)的发明。(1) 一种囊泡，其特征在于，该囊泡含有下述(i)和(ii)，在该囊泡表面吸附有维生素E，或者维生素E化学结合至构成囊泡的两亲物，⑴两亲物(ii)包含具有阳离子性的物质和/或具有阴离子性的物质的有机物质。(2)根据(1)中记载的囊泡，其特征在于，前述具有阳离子性的物质为阳离子脂质。(3)根据O)中记载的囊泡，其特征在于，前述阳离子脂质由下述式(I)表示。式(I)
权利要求
1.一种囊泡，其特征在于，该囊泡含有下述(i)和(ii)，在该囊泡表面吸附有维生素E， 或者维生素E化学结合至构成囊泡的两亲物，(i)两亲物( )包含具有阳离子性的物质和/或具有阴离子性的物质的有机物质。
2.权利要求1所述的囊泡，其特征在于，前述具有阳离子性的物质为阳离子脂质。
3.权利要求2所述的囊泡，其特征在于，前述阳离子脂质由下述式(I)表示，
4.权利要求2所述的囊泡，其特征在于，前述阳离子脂质含有选自下列物质中的至少1种以上饱和或不饱和脂肪族伯胺(硬脂胺、油胺)、饱和或不饱和仲、叔胺(二硬脂酰三甲铵丙烷、二油酰三甲铵丙烷)、以及季胺盐(DODAC(双十八烷基二甲基氯化铵dioctadecyldimethylammonium chloride)、DTDAB (双十四烷基二甲基溴化铵 ditetradecyldi me thy lammonium bromide)、DOTMA (N-(2，3- 二油酰)丙基-N，N, N-三甲铵N-(2，3-dioleyloxy)propyl-N，N, N-trimethylammonium)、DDAB (双十二烷基溴化铵:didodecylammonium bromide)、DTAB(双十四烧基溴化铵:ditetradecylammonium bromide)、DOTAP (1，2- 二油酰氧基-3-三甲铵丙烷1，2-dioleoyloxy-3-trimethyla mmonio propane) ,0,0'-双十四酰_N_( α -三甲铵-乙酰基)-二乙醇胺氯化物0， 0 ‘ -ditetradecanoyl-N-(α -trime thylammonio-acetyl)-diethanolamine chloride> 0,0'-双十六酰-Ν_(α-三甲铵-乙酰基)-二乙醇胺氯化物0，0' -dihexadecanoyl-N-(α -trimethylammo nio-acetyl) -diethanolamine chloride>0,0'—双十乂V酉先_N—( α _三 ψ^ -)_ 二Zi酉享月安tHL 0, 0' -dioctadecanoyl-N-( α -trimethylammonio-ac etyl)-diethanolamine chloride, DC-Cho 1 (3 β -N- (N‘，N'，-二甲氨基乙烷)氨甲酰基胆固醇盐酸盐3 β-N-(N' ,N' , -dimethyl-aminoethane) -carbamol cholesterol hydro chloride) ,DMRIE (1，2- 二肉豆蔻酰氧基丙基 _3_ 二甲基羟基乙铵1，2-dimyristoyloxypr opyl-3-dimethylhydroxyethyl ammonium) ,DOSPA (2, 3- 二油烯基氧基-N-[2 (精胺甲酰胺基)乙基]-N, N- 二甲基-1-丙基三氟乙酸胺2, 3-dioleyloxy-N-[2 (sperminecarboxami do) ethyl] -N, N-dimethyl-l-propanaminum trifluoroacetate))。
5.权利要求1所述的囊泡，其特征在于，前述两亲物为选自磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、甲氧基聚乙二醇(mPEG)加成磷脂酰乙醇胺、 磷脂酸、鞘磷脂、心磷脂以及缩醛磷脂中的至少1种以上的磷脂。
6.权利要求5所述的囊泡，其特征在于，前述磷脂酰胆碱选自蛋黄磷脂酰胆碱、氢化蛋黄磷脂酰胆碱、大豆磷脂酰胆碱、氢化大豆磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、棕榈酰-油酰磷脂酰胆碱、二亚油酰磷脂酰胆碱、 二亚麻酰磷脂酰胆碱、二癸酰磷脂酰胆碱、二芥酰磷脂酰胆碱、双二十碳酰磷脂酰胆碱、双二十碳三烯酰磷脂酰胆碱、双二十碳五烯酰磷脂酰胆碱、双二十二碳烯酰磷脂酰胆碱以及双二十二碳六烯酰磷脂酰胆碱；前述磷脂酰乙醇胺选自蛋黄磷脂酰乙醇胺、氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、大豆磷脂酰乙醇胺、氢化大豆磷脂酰乙醇胺、二月桂酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺、棕榈酰-油酰磷脂酰乙醇胺、二亚油酰磷脂酰乙醇胺、二亚麻酰磷脂酰乙醇胺、二癸酰磷脂酰乙醇胺、二芥酰磷脂酰乙醇胺、双二十碳酰磷脂酰乙醇胺、双二十碳三烯酰磷脂酰乙醇胺、双二十碳五烯酰磷脂酰乙醇胺、双二十二碳烯酰磷脂酰乙醇胺以及双二十二碳六烯酰磷脂酰乙醇胺；前述磷脂酰甘油选自蛋黄磷脂酰甘油、氢化蛋黄磷脂酰甘油、大豆磷脂酰甘油、氢化大豆磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、棕榈酰-油酰磷脂酰甘油、二亚油酰磷脂酰甘油、 二亚麻酰磷脂酰甘油、二癸酰磷脂酰甘油、二芥酰磷脂酰甘油、双二十碳酰磷脂酰甘油、双二十碳三烯酰磷脂酰甘油、双二十碳五烯酰磷脂酰甘油、双二十二碳烯酰磷脂酰甘油以及双二十二碳六烯酰磷脂酰甘油；前述磷脂酰丝氨酸选自蛋黄磷脂酰丝氨酸、氢化蛋黄磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰丝氨酸、氢化大豆磷脂酰丝氨酸、二月桂酰磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰丝氨酸、二油酰磷脂酰丝氨酸、棕榈酰-油酰磷脂酰丝氨酸、二亚油酰磷脂酰丝氨酸、二亚麻酰磷脂酰丝氨酸、二癸酰磷脂酰丝氨酸、二芥酰磷脂酰丝氨酸、双二十碳酰磷脂酰丝氨酸、双二十碳三烯酰磷脂酰丝氨酸、双二十碳五烯酰磷脂酰丝氨酸、双二十二碳烯酰磷脂酰丝氨酸以及双二十二碳六烯酰磷脂酰丝氨酸；前述磷脂酰肌醇选自蛋黄磷脂酰肌醇、氢化蛋黄磷脂酰肌醇、大豆磷脂酰肌醇、氢化大豆磷脂酰肌醇、二月桂酰磷脂酰肌醇、二肉豆蔻酰磷脂酰肌醇、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰肌醇、棕榈酰-油酰磷脂酰肌醇、二亚油酰磷脂酰肌醇、 二亚麻酰磷脂酰肌醇、二癸酰磷脂酰肌醇、二芥酰磷脂酰肌醇、双二十碳酰磷脂酰肌醇、双二十碳三烯酰磷脂酰肌醇、双二十碳五烯酰磷脂酰肌醇、双二十二碳烯酰磷脂酰肌醇以及双二十二碳六烯酰磷脂酰肌醇；前述甲氧基聚乙二醇(mPEG)加成磷脂酰乙醇胺选自mPEG2000-蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG2000-氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、 mPEG2000-大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG2000-氢化大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-氢化大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-氢化大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG2000- 二月桂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400_ 二月桂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二月桂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG2000_ 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400_ 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、mPEG2000- 二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400- 二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、 mPEG2000- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG2000- 二油酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400- 二油酰磷脂酰乙醇胺以及 mPEG5000-二油酰磷脂酰乙醇胺；前述磷脂酸选自蛋黄磷脂酸、氢化蛋黄磷脂酸、大豆磷脂酸、氢化大豆磷脂酸、二月桂酰磷脂酸、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酸、二硬脂酰磷脂酸、二油酰磷脂酸、二亚油酰磷脂酸、棕榈酰-油酰磷脂酸、二亚麻酰磷脂酸、二癸酰磷脂酸、二芥酰磷脂酸、双二十碳酰磷脂酸、双二十碳三烯酰磷脂酸、双二十碳五烯酰磷脂酸、双二十二碳烯酰磷脂酸以及双二十二碳六烯酰磷脂酸；前述鞘磷脂为来源于蛋黄的鞘磷脂或来源于牛乳的鞘磷脂；前述心磷脂选自蛋黄心磷脂、氢化蛋黄心磷脂、大豆心磷脂、氢化大豆心磷脂、二月桂酰心磷脂、二肉豆蔻酰心磷脂、二棕榈酰心磷脂、二硬脂酰心磷脂、二油酰心磷脂、棕榈酰-油酰心磷脂、二亚油酰心磷脂、二亚麻酰心磷脂、二癸酰心磷脂、二芥酰心磷脂、双二十碳酰心磷脂、双二十碳三烯酰心磷脂、双二十碳五烯酰心磷脂、双二十二碳烯酰心磷脂以及双二十二碳六烯酰心磷脂。
7.权利要求1所述的囊泡，其特征在于，前述具有阳离子性的物质为阳离子性聚合物。
8.权利要求7所述的囊泡，其特征在于，前述阳离子性聚合物为聚乙烯亚胺或聚赖氨酸。
9.权利要求1所述的囊泡，其特征在于，前述具有阴离子性的物质为酸性磷脂。
10.权利要求9所述的囊泡，其特征在于，前述酸性磷脂含有选自磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、甲氧基聚乙二醇加成磷脂酰乙醇胺以及磷脂酸中的至少1种以上。
11.权利要求10所述的囊泡，其特征在于，前述磷脂酰甘油选自蛋黄磷脂酰甘油、氢化蛋黄磷脂酰甘油、大豆磷脂酰甘油、氢化大豆磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、棕榈酰-油酰磷脂酰甘油、二亚油酰磷脂酰甘油、 二亚麻酰磷脂酰甘油、二癸酰磷脂酰甘油、二芥酰磷脂酰甘油、双二十碳酰磷脂酰甘油、双二十碳三烯酰磷脂酰甘油、双二十碳五烯酰磷脂酰甘油、双二十二碳烯酰磷脂酰甘油以及双二十二碳六烯酰磷脂酰甘油；前述磷脂酰丝氨酸选自蛋黄磷脂酰丝氨酸、氢化蛋黄磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰丝氨酸、氢化大豆磷脂酰丝氨酸、二月桂酰磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰丝氨酸、二油酰磷脂酰丝氨酸、棕榈酰-油酰磷脂酰丝氨酸、二亚油酰磷脂酰丝氨酸、二亚麻酰磷脂酰丝氨酸、二癸酰磷脂酰丝氨酸、二芥酰磷脂酰丝氨酸、双二十碳酰磷脂酰丝氨酸、双二十碳三烯酰磷脂酰丝氨酸、双二十碳五烯酰磷脂酰丝氨酸、双二十二碳烯酰磷脂酰丝氨酸以及双二十二碳六烯酰磷脂酰丝氨酸；前述磷脂酰肌醇选自蛋黄磷脂酰肌醇、氢化蛋黄磷脂酰肌醇、大豆磷脂酰肌醇、氢化大豆磷脂酰肌醇、二月桂酰磷脂酰肌醇、二肉豆蔻酰磷脂酰肌醇、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰肌醇、棕榈酰-油酰磷脂酰肌醇、二亚油酰磷脂酰肌醇、 二亚麻酰磷脂酰肌醇、二癸酰磷脂酰肌醇、二芥酰磷脂酰肌醇、双二十碳酰磷脂酰肌醇、双二十碳三烯酰磷脂酰肌醇、双二十碳五烯酰磷脂酰肌醇、双二十二碳烯酰磷脂酰肌醇以及双二十二碳六烯酰磷脂酰肌醇；前述甲氧基聚乙二醇(HiPEG)加成磷脂酰乙醇胺选自mPEG2000-蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG2000-氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-氢化蛋黄磷脂酰乙醇胺、 mPEG2000-大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG2000-氢化大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG3400-氢化大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG5000-氢化大豆磷脂酰乙醇胺、mPEG2000- 二月桂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400_ 二月桂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二月桂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG2000_ 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400_ 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、mPEG2000- 二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400- 二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、 mPEG2000- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG5000- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、mPEG2000- 二油酰磷脂酰乙醇胺、mPEG3400- 二油酰磷脂酰乙醇胺以及 mPEG5000-二油酰磷脂酰乙醇胺；前述磷脂酸选自蛋黄磷脂酸、氢化蛋黄磷脂酸、大豆磷脂酸、氢化大豆磷脂酸、二月桂酰磷脂酸、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酸、二硬脂酰磷脂酸、二油酰磷脂酸、二亚油酰磷脂酸、棕榈酰-油酰磷脂酸、二亚麻酰磷脂酸、二癸酰磷脂酸、二芥酰磷脂酸、双二十碳酰磷脂酸、双二十碳三烯酰磷脂酸、双二十碳五烯酰磷脂酸、双二十二碳烯酰磷脂酸以及双二十二碳六烯酰磷脂酸。
12.权利要求1所述的囊泡，其特征在于，前述维生素E含有选自α-生育酚、生育酚、Y-生育酚以及S-生育酚中的至少1种以上。
13.权利要求1所述的囊泡，其特征在于，前述维生素E为dl-α-生育酚。
14.权利要求1 13中任一项所述的囊泡，其特征在于，以构成囊泡的物质的总摩尔数的10 50%的范围含有前述具有阳离子性的物质。
15.权利要求1 14中任一项所述的囊泡，其特征在于，以构成囊泡的物质的总摩尔数的3 30%的范围吸附或化学结合前述维生素E。
16.权利要求1 14中任一项所述的囊泡，其特征在于，以构成囊泡的物质的总摩尔数的5 20%的范围吸附或化学结合前述维生素E。
17.权利要求1 16中任一项所述的囊泡，其特征在于，前述囊泡的粒径为50 150nm 的范围。
18.权利要求1 17中任一项所述的囊泡，其特征在于，囊泡包封选自质粒DNA、 siRNA, miRNA、反义寡核苷酸、抗病毒剂和细胞毒性物质中的至少1种以上的生理活性物质，和/或该生理活性物质与囊泡的成分疏水结合或静电结合。
19.权利要求18所述的囊泡，其特征在于，囊泡表面的ζ电位为阴离子型。
20.权利要求18所述的囊泡，其特征在于，前述生理活性物质为抗病毒剂。
21.权利要求18所述的囊泡，其特征在于，前述细胞毒性物质含有选自抗代谢药、钼类药、烷化剂、植物碱、分子靶向药、生物反应调节剂以及抗癌性抗生素中的至少1种以上。
22.权利要求21所述的囊泡，其特征在于，前述抗代谢药选自依诺他滨、卡培他滨、卡莫氟、克拉屈滨、吉西他滨、阿糖胞苷、阿糖胞苷酯、替加氟、替加氟-尿嘧啶、替吉奥、脱氧氟尿苷、奈拉滨、羟基脲、氟尿嘧啶、氟达拉滨、培美曲塞、喷司他丁、巯基嘌呤以及甲氨蝶呤；前述钼制剂选自奥沙利钼、卡钼、顺钼以及奈达钼；前述烷化剂选自异环磷酰胺、环磷酰胺、达卡巴嗪、替莫唑胺、尼莫司汀、白消安、美法仑以及雷莫司汀；前述植物碱选自伊立替康、依托泊苷、索布佐生、多西他赛、拓扑替康、紫杉醇、长春烯碱、长春新碱、长春地辛、长春碱，分子靶向药选自伊马替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、西妥昔单抗、索拉非尼、帕尼单抗、贝伐珠单抗、硼替佐米；前述生物反应调节剂选自干扰素-α、干扰素-β、干扰素-Y、白介素；前述抗癌性抗生素选自阿柔比星、表柔比星、柔红霉素、阿霉素、吡柔比星、博来霉素、 丝裂霉素C以及米托蒽醌。
23.用于在血清存在下将生理活性物质运送至肝实质细胞的试剂盒，该试剂盒含有权利要求18 22中任一项所述的囊泡以及药学上容许的载体。
24.在对象中将生理活性物质运送至肝实质细胞的方法，该方法包含将权利要求18 22中任一项所述的囊泡给予对象的工序。
全文摘要
本发明发现利用血清成分将维生素E运送至肝实质细胞的性质，通过使维生素E吸附或化学结合于囊泡表面，从而可以将囊泡中所含的生理活性物质有效且特异性地运送至肝实质细胞。
文档编号A61K9/127GK102292069SQ200980155850
公开日2011年12月21日 申请日期2009年11月26日 优先权日2008年11月26日
发明者中野善郎, 小原道法, 水谷幸雄, 蜂须丽, 须藤正幸 申请人:中外制药株式会社, 北海道先进科技有限公司, 财团法人东京都医学综合研究所