稳定的蛋白激酶激活剂及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：：稳定的蛋白激酶激活剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及医药
技术领域：
，具体地说是提供新颖稳定的蛋白激酶激活剂一环磷腺苷盐的水合物及其制备和用途。
背景技术：
：目前公开的文献仅报道了环磷腺苷某些盐，到目前为止，国内外尚没有公开的文献报道用于心绞痛、心力衰竭、心肌梗死、心肌炎、心律失常及心源性休克，改善风湿性心脏病的心悸、气急、胸闷等症状、急性白血病、神经系统疾病、呼吸系统疾病、肝炎和银屑病等的新颖稳定的蛋白激酶激活剂——环磷腺苷盐的水合物及其制备方法和用途。
发明内容本发明所涉及的是报道用于心绞痛、心力衰竭、心肌梗死、心肌炎、心律失常及心源性休克，改善风湿性心脏病的心悸、气急、胸闷等症状、急性白血病、神经系统疾病、呼吸系统疾病、肝炎和银屑病等疾病预防或治疗的蛋白激酶激活剂环磷腺苷盐的水合物及其制备和用途。其化学名称为3'，5'-环磷酸腺苷盐的水合物(AdenosineCyclophosphate)，其分子式为{[cAMP]mAnH20，cAMP为C10H12N506P或C10HnN506P，m=13，n=0.888.5}，m=1或2或3，n可以是O.88、1、1.25、1.5、2、2.5、3.0、3.5、4、5、6、7、8、8.5或其之间的数字。A选自药学上可接受的金属离子或有机碱的一种。其中有机碱包括三乙胺、二乙胺、乙醇胺、葡甲胺、葡乙胺、氨丁三醇，哌嗪、吗啉丄-赖氨酸J-赖氨酸，DL-赖氨酸、L-精氨酸、D-精氨酸、DL-精氨酸、组氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸等中的一种，氨基酸均包括消旋和手性的氨基酸(D或L型氨基酸)，金属离子为锂、钾、钠、钙、镁、锌、铝或铋中的一种。本发明获得的含有结晶水的环磷腺苷的盐不同于环磷腺苷较难溶于水的特性，令人惊奇的是，不含结晶水的环磷腺苷的盐引湿性远高于含有结晶水的环磷腺苷的盐，含有结晶水的环磷腺苷的盐的水合物比不含结晶水的更能稳定的存在，便于储存和运输，其中一些盐在室温下具有良好的水溶性，易于制成水溶性的制剂。特征性的，本发明的水合物的热分析(TG-DSC或者TG-DTA)图谱可以看出失重平台具有强烈的对应的吸热峰，热分析图谱显示出环磷腺苷L-精氨酸1水合物(C1QH12N506P*C6H14N402*H20)、环磷腺苷L-赖氨酸1水合物(C10H12N506PC6H14N202H20)、环磷腺苷葡甲胺1水合物(C10H12N506PC7H17N05H20)、环磷腺苷钠2水合物(Q。HnNAPNa*2H20)、环磷腺苷镁盐8水合物[(C^nN^P)2*Mg*8H20]、环磷腺苷钙盐3.5水合物[(CwHu^OePhCa3.5H20]等，用卡尔费休法测定其水分，其结果与热分析结果一致。本发明还包括环磷腺苷D-精氨酸1水合物、环磷腺苷D-赖氨酸1水合物、环磷腺苷DL-赖氨酸1水合物、环磷腺苷L-瓜氨酸1水合物、三乙胺、二乙胺等。本发明的环磷腺苷的盐的水合物，能稳定存储。将上述环磷腺苷的盐的水合物和环磷腺苷的盐无水物样品分别密闭与西林瓶中进行加速稳定性试验(色谱条件色谱柱Cls(250mmX4.6mm，5um);流动相0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(内含0.Olmol/L四丁基溴化铵)-乙腈(85:15);流速lml/min;温度室温；检测波长259nm)，出人意料地发现，本发明的环磷腺苷的盐的水合物的含量和有关物质变化较少，环磷腺苷的盐无水物加速试验6个月与0月相比(40°C，RH75%)，有关物质增加的倍数高于环磷腺苷的盐的水合物。按中国药典要求进行引湿性试验取环磷腺苷的盐无水物和本发明的水合物约5g，置于干燥恒重的表面皿中，精密称重。25t:、相对湿度为75%，分别于试验0h和48h取样，计算引湿增重的百分率，结果显示，无水物引湿性比本发明的水合物高得多，说明本发明的环磷腺苷的盐的水合物具有更好的存储稳定性。结果见表16。此外，无水物的潮解使得在处理时要隔绝空气防止粘连等，不似水合物具有良好的滑动性，改善制剂的可操作性。表1.本发明环磷腺苷L精氨酸盐1水合物加速稳定性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>表2.本发明环磷腺苷L赖氨酸盐1水合物加速稳定性试验结果取样时间(月)性状标示含量(W有关物质(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>表3.本发明环磷腺苷葡甲胺盐1水合物加速稳定性试验结果取样时间(月)性状标示含量(%)有关物质(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>表4.本发明环磷腺苷钙8水合物加速稳定性试验结果取样时间(月)性状标示含量(%)有关物质(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>表5.加速稳定性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>环磷腺苷为蛋白激酶激活剂。它是在人体内广泛存在的一种具有生理活性的重要物质，由三磷酸腺苷在腺苷环化酶催化下生成，能调节细胞的多种功能活动。作为激素的第二信使，在细胞内发挥激素调节生理机能和物质代谢作用，能改变细胞膜的功能，促使网织肌浆质内的钙离子进入肌纤维，从而增强心肌收縮，并可促进呼吸链氧化酶的活性，改善心肌缺氧，缓解冠心病症状及改善心电图。此外，对糖、脂肪代谢、核酸、蛋白质的合成调节等起着重要的作用。本发明环磷腺苷的衍生物中除含有蛋白激酶激活剂的环磷腺苷外，还含有重要的碱金属和碱土金属离子或氨基酸等，这些离子或氨基酸具有多种生理功能，例如镁是人体必需的常量元素，镁离子具有多种生物学活性，是维持正常神经肌肉兴奋性和组织细胞能量代谢必不可少的因子，镁离子是生物体内多种酶系统中重要的辅助因子在人体新陈代谢过程中发挥着重要的生理功能。其主要作用有如下1、维持酶的活性镁是许多酶系的辅助因子或激动剂，可启动体内300多种酶，包括己糖激酶，Na+-K+ATP酶、羧化酶、丙酮酸脱氢酶、肽酶、胆碱酯酶等，参与体内许多重要代谢过程，包括蛋白质、脂肪和碳水化合物及核酸的代谢，氧化磷酸化，离子转运，神经冲动的产生和传递，肌肉收縮等，几乎与生命活动的各个环节有关。2、维持可兴奋细胞的兴奋性镁离子对中枢神经系统、神经肌肉和心肌等，均起抑制作用。对于神经肌肉应激性，Mg2+与Ca2+是协同的，对于心肌又是拮抗的。3、维持细胞的遗传稳定性镁是DNA相关酶系中的主要辅助因子和决定细胞周期和凋亡的细胞内调节者。在细胞浆中，它可维持膜完整性、增强对氧化应激的耐受力、调节细胞增殖、分化和凋亡；在细胞核则为维持DNA结构、DNA复制的保真度，启动DNA的修复过程，包括核苷切除修复、碱基切除修复和错配修复，并剌激微管装配。目前，含镁药物在降压、利胆、导泻、抗惊厥等方面具有重要作用，在治疗哮喘、毛细支气管炎、重症肺炎合并心衰、呼衰、脑衰及肺动脉高压等呼吸系统疾病中发挥了解痉、平喘、镇静、祛痰等多方面的综合作用，并在动物实验和大量的临床实践中得到了证实。钙离子是机体各项生理活动不可缺少的离子。它对于维持细胞膜两侧的生物电位，维持正常的神经传导功能。维持正常的肌肉伸縮与舒张功能以及神经-肌肉传导功能，还有一些激素的作用机制均通过钙离子表现出来。主要作用或机制为1、钙离子是凝血因子，参与凝血过程；其机制为细胞内的钙调节蛋白与钙离子结合，形成的一种复合物，可激活体内多种酶的活性。如果皮肤被割伤了，流血了，钙离子立刻发出信号，逐级激活凝血酶，启动凝血机制，以止血。2、参与肌肉(包括骨骼肌、平滑肌)收縮过程，促使心脏跳动。其机制为带正电的钙离子，让细胞内外发生电位差。带正电的钙离子，穿过细胞膜，进入心肌细胞，因细胞内外的钙浓度相差较大，形成较大电位差，产生了剌激细胞膜收縮的生理效应。心肌细胞收縮，又将钙离子给泵出了细胞膜外，形成反向的电位差，心肌细胞膜在这种反向电位差的作用下，开始舒张；舒张后，细胞膜的通透性增强，钙离子再次穿过细胞膜进入心肌细胞，再次引起心肌收縮，如此往复，心脏就有节律地跳动起来。3、参与神经递质合成与释放、激素合成与分泌，并传导神经信号。其传导机制为促进神经递质分泌。当第一个细胞兴奋时，产生了一个电冲动，此时，细胞外的钙离子流入该细胞内，促使该细胞分泌神经递质，神经递质与相邻的下一级神经细胞膜上的蛋白分子结合，促使这一级神经细胞产生新的电冲动。以此类推，神经信号便一级一级地传递下去，从而构成复杂的信号体系，乃至最终出现学习、记忆等大脑的高级功能。当机体缺钙时，神经递质的释放受到阻隔，人体的兴奋机制和抑制机制遭到破坏。如果是儿童缺钙，会夜啼、夜惊、烦躁失眠，严重的导致大脑发育障碍，出现反应迟钝、多动、学习困难等症，影响大脑成熟和智力。4、是骨骼构成的重要物质。30-40岁的成人，成骨细胞和破骨细胞活性相当，骨钙水平维持着高骨峰值的水平；40岁后，破骨细胞活性大于成骨细胞。但是，生命中后期尽管不能增加骨密度，如果钙摄入量充足，至少能保持已有的骨密度并且增加骨矿含量。5、传递御敌信号。其机制为当外来抗原激活T细胞受体，启动了钙离子介导的信号通路，促使免疫细胞分化和生长。当病菌、细菌、毒物等外来入侵者侵入人体时，钙离子首先发出预警信号；随后钙离子又发出入侵者有何特性的信号，免疫系统随之组织相应的免疫细胞，捕获和吞噬敌人。一旦钙缺乏，就会发生免疫系统功能下降、紊乱，引发疾病。如自身免疫性疾病红斑狼疮、风湿病；皮肤病皮炎、痤疮等。补钙，对治疗这些病有重要作用，反证了钙的功能。精氨酸是一种条件必须氨基酸，在体内参与能量代谢中的三羧酸循环及具有解毒作用的尿素循环，促使机体能量平衡，用药后可降低血氨，促进有毒物质排出体外，达到消除疲劳之目的。其药理作用广泛，其主要作用有精氨酸(arginine，Arg)是人体一氧化氮的来源，一氧化氮(NO)促使血管舒张，促进血液循环。Arg可促进心率的恢复，增加冠状动脉的血流量，改善心脏功能，对心肌具有一定的保护作用，提示补充Arg有助于保护运动时心脏的正常供血功能，对延缓疲劳的发生和促进恢复具有一定的作用。心肌缺血患者补充L-Arg后的次极量运动实验的结果表明，Arg补充组在运动实验时冠状动脉血流量明显好转。L-Arg补充能明显提高冠状动脉血管痉挛性心绞痛患者的运动能力，且具有较好的持续性，并使血浆NO水平显著提高。研究表明，精氨酸能有效的降低心肌梗塞的发生率，同时具有舒张血管、降血压、促进血液循环顺畅的作用，对于心血管疾病的预防及动脉硬化患者，心肌梗塞的发生率具有明显的降低作用，精氨酸也具有抗氧化作用，可以降低低密度脂蛋白(LDL)氧化，形成血管内层乳糜沉淀的作用，因此对于心脏小血管阻塞、造成心肌坏死的机率下降。此外，精氨酸具有特异性免疫促进作用。精氨酸及其代谢产物如一氧化氮(NO)等，在免疫防御、免疫调节、维持和保护肠道粘膜功能以及肿瘤的特异性免疫等方面发挥着重要作用。精氨酸可有效提高免疫力、促进免疫系统分泌自然杀手细胞、吞噬细胞、白介素1等内生性物质，有利于对抗癌细胞及预防病毒感染。无论是正常饮食还是静脉输入Arg，均能特异性增强正常或创伤动物的细胞免疫功能(增加胸腺重量、细胞数、增强其转化反应能力等)；在创伤和患肿瘤动物中，除减轻创伤导致的免疫抑制外，Arg还能增强淋巴细胞功能，并具有潜在的IL-2免疫抗肿瘤作用，能够促进T细胞有丝分裂、改善氮平衡、提高动物生存率、增强对过敏的延迟反应。另外，精氨酸是鸟氨酸及脯氨酸的前趋物，脯氨酸是构成胶原蛋白的重要元素，补充精氨酸对于严重外伤、烧伤等需要大量组织修护的康护，具有明显的帮助，同时具有降低感染及发炎的效果。其中，精氨酸的含量测定(HPLC法)及鉴别可参照中国药典2005年版，P588盐酸精氨酸片的方法进行。赖氨酸属碱性氨基酸，分子中含两个氨基，是人体必须8种氨基酸之一，赖氨酸为合成肉碱提供结构组分，而肉碱会促使细胞中脂肪酸的合成。特别是在儿童发育期、病后恢复期、妊娠授乳期，对赖氨酸的需要量更高。由于在大米、玉米等食物中含量较低，容易造成人体缺乏，被称为"第一缺乏氨基酸"。赖氨酸缺乏会引起发育不良、食欲不振、体重减轻、负氮平衡、低蛋白血症、牙齿发育不良、贫血、酶活性下降及其它生理机能障碍。赖氨酸有提高智力、促进生长、增强体质；增进食欲、改善营养不良状况；改善失眠，提高记忆力；帮助产生抗体、激素和酶，提高免疫力、增加血色素；帮助钙的吸收，治疗防止骨质疏松症；帮助神经组织修复，促进神经细胞再生，提高中枢神经组织功能的作用。赖氨酸能提高血脑屏障通透性，有助于药物进入脑细胞内，临床用作治疗颅脑外伤、慢性脑组织缺血、缺氧性疾病的脑保护剂，或对其他脑病的辅助治疗，也可用于赖氨酸缺乏引起的小儿食欲不振、营养不良及脑发育不全。其中赖氨酸的测定参照文献农辉等.盐酸赖氨酸及其注射液的HPLC测定，化工技术与开发，2003，32(2):33。组氨酸的咪唑基能与Fe2+或其他金属离子形成配位化合物，促进铁的吸收，因而可用于防治贫血。组氨酸能降低胃液酸度，缓和胃肠手术的疼痛，减轻妊娠期呕吐及胃部灼热感，抑制由植物神经紧张而引起的消化道溃烂，对过敏性疾病，如哮喘等也有功效。此外，组氨酸可扩张血管，降低血压，临床上用于心绞痛、心功能不全等疾病的治疗。类风湿性关节炎患者血中组氨酸含量显著减少，使用组氨酸后发现其握力、走路与血沉等指标均有好转。L-瓜氨酸可提高免疫系统功能，维护关节运动机能，平衡正常血糖水平，吸收有害自由基，帮助保持胆固醇正常水平，提高健康性功能，维护健康的肺功能，提高脑力清晰度，降低压力和克服沮丧情绪。瓜氨酸可在人体内与氨作用，生成精氨酸和一氧化氮作血管舒张剂，并用于治疗精神和体力疲劳以及性功能障碍。瓜氨酸属于氨基酸类药物，可同鸟氨酸、精氨酸等合用于治疗高氨血症。瓜氨酸可以完全吸收到血液中，产生一氧化氮，参与多种多样的生理过程，如神经传递、血管张力、括约肌松弛、微生物的杀灭以及阴茎勃起等，对男性性功能有非常重要作用。一氧化氮是在氧分子和血红蛋白存在下，由一氧化氮合成酶(N0S)催化L-精氨酸胍基氧化脱氨成L-瓜氨酸时形成的。本发明化合物中含有药学上可接受的金属离子或有机碱，金属离子包括碱金属离子或碱土金属离子等，有机碱包括氨基酸、三乙胺、二乙胺、乙醇胺等，其中氨基酸均包括消旋和手性的氨基酸(D或L型氨基酸)，并形成稳定的化合物，使得其在不同疾病的预防或治疗中比单一的环磷腺苷更具有优势，或者使得在制备环磷腺苷其它的衍生物时更方便。环磷腺苷的盐的水合物制备方法包括方法A.在反应容器中，加水和环磷腺苷，搅拌，按反应的摩尔比加药学上可接受的有机碱或金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐或其溶液，搅拌，待反应完毕，过滤，缓慢加入C3-C7的低级酮，如丙酮，或低分子醇Cl-C6如甲醇、乙醇、异丙醇，C2-C8的低级醚的一种或几种，冷却，过滤，固体物用有机溶剂Cl-C6的低分子醇，如甲醇、乙醇、异丙醇、C3-C7的低级酮，如丙酮、C2-C6的低级醚如乙醚、或水中一种或几种润洗，抽干，干燥，得到环磷腺苷的金属盐或其有机碱盐的水合物；或者方法B.将金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐或有机碱的溶液按反应的摩尔比投入到含有环磷腺苷和水的反应容器中，搅拌，控制温度O5(TC之间，搅拌，待反应完毕，活性炭脱色，一次或多次过滤，将其冷冻到-70-301:，升温，真空干燥，得有环磷腺苷盐的水合物；或者方法C.将分别将金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐或药学上可接受的有机碱的一种或其溶液按反应的摩尔比加入含有环磷腺苷和水的反应容器中，搅拌，控制温度-54(TC之间，反应0.524h，待反应完毕，活性炭脱色，一次或多次过滤，喷雾干燥，得环磷腺苷盐的水合物。喷雾干燥中，进风温度可在10014(TC之间，出风温度可在70IO(TC之间，喷压可在1.02.0kg/cm2。将环磷腺苷的盐的水合物在6012(TC之内，一般在9012(TC之内，五氧化二磷为干燥剂，高真空干燥8小时以上，得环磷腺苷的盐无水物。并可将所得的产物用于引湿性试验或加速稳定性试验的比较。本发明中的低级酮或低分子酮定义为C3-C7，如丙酮，丁酮等；低级醇或低分子醇定义为Cl-C6，如甲醇、乙醇、异丙醇，低级醚或低分子醚定义为C2-C8，如乙醚、丁醚等。所提到金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐，分别可为氧化钙、氢氧化钙、氧化镁、碱式碳酸镁、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氧化锌、三氧化二铝、氢氧化钾、碳酸钾、硝酸铋，其金属盐包括碳酸盐或碳酸氢盐或碱式碳酸盐。本发明的环磷腺苷的盐的水合物用途本发明的环磷腺苷的盐的水合物用于制备注射用冻干粉针制剂、或者大输液制剂、或者小水针注射剂，无菌分装的粉针，经肠道给药制剂，包括片剂、胶囊、颗粒剂，经皮肤外用制剂包括软膏、凝胶剂等。用于制备固体制剂的片剂、胶囊或颗粒剂，这些制剂中可含有药学上可接受的填充剂，如淀粉、变性淀粉、乳糖、微晶纤维素、环糊精、山梨醇、甘露醇、磷酸钙、氨基酸等；药学上可接受的崩解剂，如淀粉、变性淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、表面活性剂；药学上可接受的润湿剂和粘合剂，如胶化淀粉、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、聚乙烯毗咯烷酮、海藻酸及其盐；药学上可接受的润滑剂和助流剂，如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇4000-8000、滑石粉、微粉硅胶、十二烷基硫酸镁等；药学上可接受的甜味剂和香精，如阿斯巴甜、甜蜜素、糖精钠、三氯蔗糖、食用香精等。本发明的结晶水合物不同于无水物的潮解使得在处理时要隔绝空气防止粘连等，而结晶水合物具有良好的滑动性，从而改善制剂的可操作性；并使制备的固体制剂具有良好的溶出性能，使得其容易被吸收进入血液循环，改善生物利用度，并有利于快速发挥其作用。从另一个方面，使得其防止出现在进行无菌分装时不易因为吸潮而导致分装时产生堵塞使得装量发生差异导致剂量不足，从而带来产品的不合格，或因为不合格的产品没有被抽检到形成实际上的漏检，进而流入市场，在临床治疗中对患者的治疗代理负面的效果，或者因剂量不足危及病人的生命。或者在分装时，因为吸潮而导致整个生产线被迫暂停，严重降低设备的生产能力，大大增加工时费用等的隐患。由于环磷腺苷微溶解于水，一般情况下需要加油溶性的辅料，易于污染，而且较难清洗，本发明的环磷腺苷的盐的水合物的存储稳定性和一般易溶解于水的特性，使得在制备凝胶剂方面更具有制剂的易操作性，其所制备的凝胶剂具有良好的释放性能，使得其容易被吸收进入血液循环，提高生物利用度，并有利于快速发挥其作用。无需加油溶性的辅料，不易污染，而且较易清洗。环磷腺苷盐的水合物的凝胶制备将环磷腺苷盐水合物与5095%基质混匀，基质可以是乙醇、甘油、三乙醇胺、甘油明胶、聚乙二醇2008000、泊洛沙姆、聚乙烯毗咯烷酮、半合成硬脂肪酸脂、水溶性单甘酯、卡波姆系列(931、934、940、974、AA-1、1342等)、吐温60-80。凝胶中可含有药学上可接收的防腐剂和稳定剂，制备时可分别将卡波姆用水分散，加入甘油、聚乙二醇2008000、加热，搅拌混合，加处方量的环磷腺苷盐水合物、搅拌、用药学上可接收的无机碱或者有机碱调节pH=5.07.8左右，加水至全量、搅拌至匀、分装，即得。环磷腺苷的盐的水合物针剂，其制备方法为环磷腺苷的盐的水合物无菌分装粉针制剂可按照常规方法制备。冻干粉针制剂的制备方法为取环磷腺苷的盐的水合物，可以加药学上可接受的冻干支持剂或辅形剂，加注射用水搅拌使溶解，若需要，可用药学上可接受的酸碱调节PH为4.07.5，加活性碳0.0050.5%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水，无菌过滤，按20200mg/瓶(以环磷腺苷计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品。环磷腺苷的盐的水合物小容量注射液及其制备工艺环磷腺苷的盐的水合物加注射用水和药学上可接受的附加剂，例如药学上可接受的PH调节剂、药学上可接受的抗氧剂、惰性气体，过滤、除菌制成灭菌小容量注射液，其pH值在4.07.5之间。其药学上可接受的pH调节剂可以是药学上可接受的无机酸或有机酸、无机碱或有机碱，也可以是广义的路易斯酸或碱，可以含有一种或者几种，可以是盐酸、磷酸、丙酸、醋酸及醋酸盐、如醋酸钠等，乳酸以及乳酸药用盐、枸橼酸药用盐、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸盐、酒石酸及其药用盐、硼砂、硼酸、丁二酸、己酸、己二酸、反丁烯二酸、顺丁烯二酸、三羟基氨基甲烷、二乙醇胺、乙醇胺、异丙醇胺、二异丙醇胺、2-氨基-2-(羟甲基)1，3-丙二醇胺、1，2_己二胺、N-甲基葡萄胺、二异丙胺以及它们的盐，多羟基羧酸及药用盐，如葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、乳糖酸、苹果酸、苏糖酸、葡庚糖酸、氨基酸及氨基酸盐等中的一种或者几种。其药学上可接受的抗氧剂和稳定剂可以是亚硫酸、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦亚硫酸盐、连二亚硫酸盐、硫代硫酸盐，有机硫化合物硫脲、谷胱甘肽、二巯基丙醇、巯基乙酸及盐、硫代乳酸及盐、硫代二丙酸及盐、苯酚类化合物，如没食子酸及盐、咖啡酸、咖啡酸盐、阿魏酸、阿魏酸盐、二叔丁基对苯酚、2，5-二羟基苯甲酸、2，5-二羟基苯甲酸盐、苯酚或其衍生物、水杨酸或其盐；氨基酸以及其盐；抗坏血酸及抗坏血酸盐、异抗坏血酸及异抗坏血酸盐、烟酰胺、酒石酸、硝酸盐、磷酸盐、醋酸药用盐、柠檬酸盐、EDTA及EDTA盐、如EDTA二钠、EDTA四钠、N-二(2-羟乙基)甘氨酸等中的一种或者几种。其药学上可接受的等渗调节剂可以是葡萄糖、果糖、木糖醇、山梨醇、甘露醇、转化糖、麦芽糖、右旋糖酐、氯化钠、氯化钾、乳酸钠等中的一种或几种。去热源和除菌方式可以是加入配液量0.0053%的活性炭去热源，微孔滤膜除菌和热压灭菌，也可以采用超滤除菌、去热源。超滤方法中，超滤器可选用平板式、巻式、管式、中空纤维式或圆盒式等，优选巻式和中空纤维式超滤器，采用截留相对分子质量为5万至30万的滤膜除去大部分发热性物质和细菌后，再采用截留相对分子质量300030000的超滤膜除去剩余热源，优选相对分子质量600020000的超滤膜。本发明的环磷腺苷的盐的水合物，适用于制备下列对所引起的人和动物感染的治疗或预防的药物中的应用在制备用于心绞痛、心力衰竭、心肌梗死、心肌炎、心律失常及心源性休克，改善风湿性心脏病的心悸、气急、胸闷等症状、急性白血病、神经系统疾病、呼吸系统疾病、老年慢性支气管炎、肝炎和银屑病等治疗或预防的药物中的应用。用量用法一般情况下，于成人，取本发明药物0.0200.2g于0.9%氯化钠或者510%葡萄糖20500毫升中，作静脉推注或滴注，每日12次；取本发明药物0.0200.2g溶于注射用水中，肌内注射，每日12次；儿童减半量以上使用。经胃肠道给药用量用法1070kg体重的人或动物，一般情况下40600mg/天，分2-3次给药；儿童减半量以上使用。外用给药，直接涂于患处，每天一次到六次。图1环磷腺苷的镁盐8水合物的热分析图谱。图2为环磷腺苷葡甲胺盐1水合物的热分析图谱。图3为环磷腺苷L-精氨酸盐1水合物的热分析图谱。图4为环磷腺苷L-赖氨酸盐1水合物的热分析图谱。图5为环磷腺苷钠盐2水合物的热分析图谱。测试条件Setaram公司Setsys16，PE6300TGDTA，样品量约5mg，升温速度10K/min，N2流速50ml/min，室温400°C。具体实施例方式实施例1环磷腺苷的镁盐8水合物的制备在250ml三颈烧瓶中，加环磷腺苷0.lmol，水100ml、搅拌，加入0.05mol的氧化镁，2060。C下搅拌3090分钟，使溶解，过滤，加15倍量的丙酮使固体析出，冷却到-1015t:，放置124小时，过滤，固体物5(TC左右干燥24小时得类白色结晶性粉末23.6g，熔点；227。C分解(未校正)，HPLC:环磷腺苷含量39.86%，卡氏法测定水分为17.57%，热分析平台失重约17.16%(见附图1)，这与样品含有8个结晶水的结果(理论值17.48%)在误差范围内。元素分析理论值C29.12%，H4.64%，N16.98%P7.51%，Mg2.95%;实测值C29.33%，H4.52%，N17.11%P7.67%，Mg3.23%。实施例2环磷腺苷钙盐3.5水合物的制备在250ml三颈烧瓶中，加折纯后的环磷腺苷O.lmol，水100ml、搅拌，加入0.05mol的氢氧化f丐或氧化f丐，2060°C下搅拌3090分钟，使溶解，过滤，加15倍量的无水乙醇和异丙醇(1:1)，冷却到-1015°C，放置124小时，待固体析出，过滤，5(TC左右干燥46小时干燥，得类白色固体19.2克，熔点223。C分解(ELECTROTHERMALMELTINGPOINTAPPARATUS,未校正)，红外光谱卡氏法测定水分为8.52%，热分析平台失重约8.4%，这与样品含有3.5个结晶水的结果(理论值8.30%)在误差范围内；元素分析理论值:C31.63%，H3.85%，N18.44%P8.16%，Ca5.28%;实测值:C31.57%，H3.94%，N18.36%P8.07%，Ca5.35%。实施例3环磷腺苷葡甲胺1水合物的制备将折纯后的环磷腺苷lOg和以及等摩尔的葡甲胺投入反应瓶中，加水200ml，搅拌，控制温度106(TC之间，反应10120min，加溶液总量的百分之一的活性炭搅拌半小时过滤，再用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600030000的超滤膜过滤，其冷冻到-70_30°C，保持24小时左右，升温至2(TC左右，真空干燥，再203(TC干燥36小时左右，得类白色结晶性粉末，易溶于水，熔点6771.°C(ELECTROTHERMALMELTINGPOINTAPPARATUS,未校正)；HPLC:环磷腺苷含量为60.79%，ESI:m/z:523;水分(卡氏法)3.51%，热分析平台失重约3.31%，这与样品含有l个结晶水的结果(理论值3.32%)在误差范围内(见附图3);元素分析理论值C37.64%，H5.76%，N15.49%P5.71%;实测值C37.52%，H5.87%，N15.37%P5.56%。实施例4环磷腺苷L-精氨酸1水合物的制备将折纯后的环磷腺苷10g和以及等摩尔的L-精氨酸投入反应瓶中，加水200ml，搅拌，控制温度106(TC之间，反应10120min，加溶液总量的百分之一的活性炭搅拌半小时过滤，再用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600030000的超滤膜过滤，其冷冻到-70-30°0，保持24小时左右，升温至-2(TC左右，真空干燥，再203(TC干燥28小时左右，得类白色结晶性粉末，易溶于水，熔点189195°C(ELECTROTHERMALMELTINGPOINTAPPARATUS，未校正)，HPLC:环磷腺苷含量为63.07%，精氨酸33.31%;ESI:m/z:502;卡氏法测定水分为3.82%，热分析平台失重约3.61%(见附图4)，这与样品含有1个结晶水的结果(理论值3.46%)在误差范围内。元素分析理论值:C36.86%，H5.41%，N24.18%，P5.94%;实测值:C37.08%，H5.20%，N24.36%，P5.75%。实施例5环磷腺苷L-赖氨酸1水合物的制备将折纯后的环磷腺苷10g和以及等摩尔的L-赖氨酸投入反应瓶中，加水220ml，搅拌，控制温度106(TC之间，反应10120min，加溶液总量的百分之一的活性炭搅拌半小时过滤，再用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600030000的超滤膜过滤，其冷冻到-70-30°0，保持24小时左右，升温至2(TC左右，真空干燥，再203(TC干燥36小时左右，得类白色结晶性粉末，易溶于水，熔点19520rC分解(ELECTROTHERMALMELTINGPOINTAPPARATUS，未校正)；HPLC:环磷腺苷含量为66.65%，赖氨酸29.46%;ESI:m/z:474;水分(卡氏法)3.96%，热分析平台失重约4.01%(见附图5)，这与样品含有1个结晶水的结果(理论值3.65%)在误差范围内；实施例6将环磷腺苷钠2水合物的制备将环磷腺苷10g置于反应瓶中，加水200ml，搅拌，缓慢向反应瓶中加入与环磷腺苷等摩尔的碳酸氢钠，搅拌，控制温度106(TC之间，反应10120min，加溶液总重量0.2%的活性炭搅拌半小时过滤，再用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，其冷冻到-70-30°C，保持24小时左右，升温至-2(TC左右，真空干燥，再203(TC干燥36小时左右，得类白色结晶性粉末，易溶于水，熔点227t:分解(ELECTROTHERMALMELTINGPOINTAPPARATUS,未校正)；含量测定HPLC法环磷腺苷含量为84.82X;水分(卡氏法)9.47%，热分析平台失重约9.03%(见附图6)，这与样品含有2个结晶水的结果(理论值9.31%)在误差范围内;ESI:m/z:350;元素分析理论值:C31.02%，H3.90%，N18.09%，P8.00%，Na5.94%;实测值:C30.88%，H4.03%，N18.19%，P8.12%，Na5.83%。实施例7取环磷腺苷L-精氨酸1水合物或环磷腺苷葡甲胺1水合物200g，加葡萄糖或甘露醇或木糖醇2.05g加新鲜的注射用水1020L搅拌使溶解，用2M盐酸或2M氢氧化钠适量，调节pH为5.08.5，加活性碳0.010.5%(W/V)搅拌1545min，过滤，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，按20mg、30mg/瓶或40mg或50mg/瓶或60mg/瓶或100mg/瓶或120mg/瓶分装(以环磷腺苷计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品。实施例8取环磷腺苷L-精氨酸1水合物或环磷腺苷葡甲胺1水合物10g(以环磷腺苷计)，加甘露醇40g，加406(TC注射用水14601850ml搅拌使溶解，用1M的枸橼酸或氢氧化钠调节pH为5.08.O，加活性碳O.010.5%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水至2000ml，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，按20、30mg/瓶或60mg/瓶或100mg/或120mg/瓶(按环磷腺苷计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品。实施例9取无菌的环磷腺苷的盐的水合物20Kg(以环磷腺苷计)，以无菌分装工艺按20、30mg/瓶或50mg/瓶、或60mg/瓶或100mg/瓶分装，加塞、压塞，轧铝盖得成品。实施例10环磷腺苷钠2水合物或环磷腺苷L-精氨酸1水合物或环磷腺苷葡甲胺1水合物(按环磷腺苷计)10g，加盐酸半胱氨酸0.8g，EDTA二钠0.lg，加注射用水搅拌使溶解，2M乳酸和乳酸钠调节pH为5.07.8，加活性碳0.5%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水至1000ml，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，按210m1/瓶分装，灭菌得成品。实施例11环磷腺苷钠2水合物10g，加注射用水搅拌使溶解，加活性碳0.3%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水至2000ml，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，按25ml/瓶分装，冷冻干燥，压塞，得成品。实施例12环磷腺苷钠2水合物或环磷腺苷L-精氨酸1水合物或环磷腺苷葡甲胺1水合物大容量注射液的制备称取葡萄糖500g加入注射用水中，搅拌使溶解完全，加入配液量O.05%的活性炭，加热1030分钟左右，放冷，过滤脱炭；将环磷腺苷的盐的水合物(以环磷腺苷计)4.Olg用新鲜的注射用水溶解完全后，与上述滤液混合均匀，加盐酸L-半胱氨酸lg，EDTA二钠0.2g，用1M乳酸溶液调节pH值在5.27.5的范围内，加注射用水至10000ml，加配液量0.010.5%(W/V)的活性炭，加热搅拌1030分钟左右，过滤脱炭，再经O.22um微孔滤膜精滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，经半成品化验，待其含量、pH值和澄明度合格后，灌封于50ml或100ml或200ml的玻璃瓶中，灭菌，成品检查，包装即得。实施例13环磷腺苷的盐的水合物氯化钠输液的制备将环磷腺苷的盐的水合物(以环磷腺苷计)4g、氯化钠85g、焦亚硫酸钠1.lg、EDTA二钠0.2g，加入注射用水中，搅拌使溶解完全，用1M的枸橼酸和枸橼酸钠溶液调节pH值在4.07.5的范围内，加注射用水至10000ml，加配液量0.05%的活性炭，加热搅拌1030分钟左右，过滤脱炭，再经0.22um微孔滤膜精滤或者采用截留相对分子质量600020000的超滤膜过滤，经半成品化验，待其含量、pH值和澄明度合格后，灌封于50ml或100ml或200ml的玻璃瓶中，灭菌，成品检查，包装即得。实施例13.环磷腺苷镁8水合物或环磷腺苷L-精氨酸1水合物片剂(250mg/片，以环磷腺苷计)处方环磷腺苷镁8水合物或环磷腺苷L-精氨酸1水合物250g(以环磷腺苷计)微晶纤维素200g羧甲基淀粉钠20g阿斯巴甜2g聚乙烯吡咯烷酮5%适量硬脂酸镁2g将环磷腺苷镁8水合物或环磷腺苷L-精氨酸1水合物、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、阿斯巴甜过100目筛，用5%的聚乙烯吡咯烷酮适量制软材，过18_24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加微粉硅胶、硬脂酸镁混合，压片。实施例14环磷腺苷的盐水合物胶囊(100mg/粒，以环磷腺苷计)处方环磷腺苷的盐水合物100g(以环磷腺苷计)微晶纤维素100g乳糖20g胶化淀粉10%适量硬脂酸镁2g将本发明的环磷腺苷的盐水合物、微晶纤维素、乳糖过100目筛，用10%的胶化淀粉适量制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加硬脂酸镁混合，灌装胶囊。实施例15环磷腺苷的盐水合物颗粒包括环磷腺苷钠2水合物或环磷腺苷镁8水合物或环磷腺苷葡甲胺1水合物或环磷腺苷L-精氨酸1水合物或环磷腺苷L-赖氨酸1水合物等颗粒(50mg/包，以环磷腺苷计)处方环磷腺苷的盐水合物50g(以环磷腺苷计)甘露醇180g蔗糖20g甜蜜素2g固体食用香精lg聚乙烯吡咯烷酮5%适量将环磷腺苷的盐水合物、甘露醇、蔗糖、甜蜜素、食用香精过100目筛，用5%的聚乙烯毗咯烷酮适量制软材，过18-24目筛制粒，6(TC以下干燥，过14-20目筛整粒后，分包装。实施例16本发明的环磷腺苷盐水合物的凝胶处方环磷腺苷的盐水合物25g(以环磷腺苷计，投料)聚乙二醇600050g聚乙二醇40010g甘油5ml卡波姆9348g卡波姆13422g水400-500ml将分别将卡波姆1342和卡波姆934用水分散，加入甘油、聚乙二醇6000、聚乙二醇400、搅拌混合，加环磷腺苷的盐水合物，加热、搅拌至匀、用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠溶液调节pH=5.07.0左右，分装即得。可以理解，很多细节的变化是可能的，这并不因此限制本发明范围和精神，本发明并不限于上述实施例。权利要求稳定的蛋白激酶激活剂——环磷腺苷的盐的水合物，其特征在于环磷腺苷的盐的水合物，分子式为{[cAMP]m·A·nH2O，cAMP为C10H12N5O6P或C10H11N5O6P，m＝1或2或3，n＝0.88～8.5}，A选自药学上可接受的金属离子或有机碱的一种。2.根据权利要求1所述的稳定的蛋白激酶激活剂，其特征在于；有机碱为三乙胺、二乙胺、乙醇胺、葡甲胺、葡乙胺、氨丁三醇，哌嗪、吗啉丄-赖氨酸J-赖氨酸，DL-赖氨酸、L-精氨酸、0-精氨酸JL-精氨酸、组氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸中的一种。3.根据权利要求1所述的稳定的蛋白激酶激活剂，其特征在于金属离子为锂、钾、钠、牵丐、镁、锌、铝或铋中的一种。4.根据权利要求l所述的稳定的蛋白激酶激活剂，其特征在于环磷腺苷盐的水合物为环磷腺苷L-精氨酸1水合物。5.根据权利要求l所述的稳定的蛋白激酶激活剂，其特征在于环磷腺苷盐的水合物为环磷腺苷L-赖氨酸1水合物。6.根据权利要求l所述的稳定的蛋白激酶激活剂，其特征在于环磷腺苷盐的水合物为环磷腺苷葡甲胺l水合物。7.根据权利要求l所述的稳定的蛋白激酶激活剂，其特征在于环磷腺苷盐的水合物为环磷腺苷钠2水合物或环磷腺苷钙3.5水合物或环磷腺苷镁8水合物。8.稳定的蛋白激酶激活剂的制备方法，其特征在于其制备方法选自如下方法方法A.在反应容器中，加水和环磷腺苷，搅拌，按反应的摩尔比加药学上可接受的有机碱或金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐或其溶液，搅拌，待反应完毕，过滤，缓慢加入C3-C6的低级酮，如丙酮，或低分子醇Cl-C6如甲醇、乙醇、异丙醇，C2-C6的低级醚的一种或几种，冷却，过滤，固体物用有机溶剂Cl-C6的低分子醇，如甲醇、乙醇、异丙醇、C3-C6的低级酮，如丙酮、C2-C6的低级醚如乙醚、或水中一种或几种润洗，抽干，干燥，得到环磷腺苷的金属盐或其有机碱盐的水合物；或者方法B.将金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐或有机碱的溶液按反应的摩尔比投入到含有环磷腺苷和水的反应容器中，搅拌，控制温度05(TC之间，搅拌，待反应完毕，活性炭脱色，一次或多次过滤，将其冷冻到-70_301:，升温，真空干燥，得有环磷腺苷盐的水合物；或者方法C.将分别将金属的氧化物或氢氧化物或其金属盐或有机碱的一种或其溶液按反应的摩尔比加入含有环磷腺苷和水的反应容器中，搅拌，控制温度_54(TC之间，反应O.524h，待反应完毕，活性炭脱色，一次或多次过滤，喷雾干燥，得环磷腺苷盐的水合物。9.稳定的蛋白激酶激活剂的用途，其特征在于在制备注射用冻干粉针制剂、或者无菌分装粉针制剂、或者小水针注射剂、或者大输液制剂、固体制剂，包括片剂、胶囊、颗粒剂，经皮肤外用制剂包括软膏、凝胶剂上的应用。10.稳定的蛋白激酶激活剂的用途，其特征在于制备适用于下列引起人和哺乳动物疾病，包括心绞痛、心力衰竭、心肌梗死、心肌炎、心律失常及心源性休克，改善风湿性心脏病的心悸、气急、胸闷等症状、急性白血病、神经系统疾病、呼吸系统疾病、老年慢性支气管炎、肝炎和银屑病等的治疗或预防的药物中的应用。全文摘要本发明涉及新颖稳定的蛋白激酶激活剂环磷腺苷盐衍生物，该衍生物具有较好的存储稳定性和制剂性能，制备适用于下列引起人和哺乳动物疾病，包括心绞痛、心力衰竭、心肌梗死、心肌炎、心律失常及心源性休克，改善风湿性心脏病的心悸、气急、胸闷等症状、急性白血病、神经系统疾病、呼吸系统疾病、老年慢性支气管炎、肝炎和银屑病等的治疗或预防的药物中的应用。文档编号A61K31/7076GK101781348SQ20101002903公开日2010年7月21日申请日期2010年1月18日优先权日2010年1月18日发明者刘力申请人:刘力