专利名称：一种高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种高纯度银黄可溶性粉，以及高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法。
背景技术：
银黄制剂主要由金银花、黄芩组成，具有清热解毒、抗菌消炎等功效，是我国历史悠久的传统药物之一，在国内外的研究和应用中，发现了它的多方面药理作用和临床功能， 兽医主要用于畜禽外感发热，肺炎气喘和由多种细菌引起的混合感染。另外，也有一些资料证明其抗菌、消炎作用显著，对变形杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌有明显的抑菌作用；对细菌内毒素也有显著的抑制作用。黄芩能泻实火，除湿热， 止血，安胎；治壮热烦渴，肺热咳嗽，湿热泻痢，黄痘，热淋，吐、衄、崩、漏，目赤肿痛，胎动不安，痈肿疔疮。金银花能清热，解毒；治温病发热，热毒血痢，痈疡。肿毒，瘰疬，痔漏。两味药相辅相成，用于主治壮热烦渴，肺热咳嗽，湿热泻痢，黄痘，热淋，吐、衄、崩、漏，目赤肿痛， 胎动不安，痈肿疔疮等。中华人民共和国药典收录有银黄口服液即主要用于外感风热、咽喉肿痛、发热等证。我们根据上面的理论为依据，组方制得银黄可溶性粉，长期的临床实践证明，该方具有良好的清热解毒，宣肺化痰，止咳平喘，燥湿止痢作用，同时有广谱抗菌和抗病毒作用， 能阻止毒素吸收，增强免疫功能，减轻或消除应激反应，提高毛细血管抵抗力，保护黏膜上皮和肝细胞功能。虽然涉及银黄制剂制备方法的报道很多，但是方法比较复杂，成本高，不利于推广、开发和应用。
发明内容
本发明的目的是提供一种高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法。目的之一，提供一种高纯度银黄可溶性粉的制备方法，包括如下步骤取黄芩适量，加水煎煮2至4次，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩至相对密度为 1. 10-1. 35 ；用盐酸调节pH值至1. 0-2. 0，60_80°C保温，静置，滤过；沉淀物加适量水搅勻，用30-40%氢氧化钠调节pH值至6. 5-7. 5 ；加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1. 0-2.0，60-80°C保温，
静置，滤过；沉淀依次用适量水及不同浓度的乙醇洗至PH值至6. 5-7. 5 ；挥尽乙醇，减压干燥，即黄芩提取物；取金银花适量，加水煎煮1至3次，合并煎煮液，滤液减压浓缩至相对密度为 1. 10-1. 25 (50-700C )的清膏；加乙醇使含醇量达80-90%，静置M小时，过滤；
滤渣加乙醇使含醇量达75-95%，静置18-30小时，过滤；合并两次的滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1. 15-1. 30 (50-700C )；喷雾干燥，即得金银花提取物；合并黄芩提取物及金银花提取物，加碳酸氢钠定量，而后加葡萄糖至定量，混合均勻，即得银黄可溶性粉。本发明中的银黄可溶性粉为一种新型的中兽药制剂，经过充分水提生药中的有效成分，浓缩、干燥所得，有效成分提取完全，水溶性好；经提取后显著提高了药物的生物利用度，增强了疗效；本药饮水给药，用药简单方便，药量容易控制；以提取物制成粉剂，体积小，保存运输方便，易为广大养殖户和经销商所接受；由于中药本身无残留，大力推广银黄可溶性粉后，可明显减少抗生素和化学药物的应用，提高肉蛋品质，保障人类健康，社会效益显著。目的之二，提供一种高纯度银黄可溶性粉的质量检测方法，包括如下步骤1、鉴别，(1)取银黄可溶性粉定量，加75%乙醇定量，摇勻，作为供试品溶液；(2) 另取黄芩苷对照品及绿原酸对照品，分别加75%乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液，作为对照品溶液；C3)照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各定量，分别点于同一聚酰胺薄膜上， 以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；(4)供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。2、检查，(1)水分，照水分测定法测定，不得超过5.0% ； (2)其他，除含量均勻度外，应符合可溶性粉项下的各项规定。3、含量测定，金银花照高效液相色谱法测定。(1)色谱条件与系统适应性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(10 90)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000 ； (2)对照品溶液的制备，取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加50 %甲醇适量，制成每Iml含50 μ g的溶液，即得；(3) 供试品溶液的制备，精密称取本品定量，置于容量瓶中，加水至刻度，使溶解，摇勻，精密吸取该溶液定量，置棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各定量，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每Ig含金银花以绿原酸(C16H18O9)计，不得少于1. 7mg。4、含量测定，黄芩照高效液相色谱法测定。(1)色谱条件与系统适应性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(50 50 0. 2)为流动相；检测波长为274nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500 ； (2)对照品溶液的制备，取黄芩苷对照品定量，精密称定，置于量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，精密量取定量，置于量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml含黄芩苷50 μ g) ； (3)供试品溶液的制备，精密量取本品定量，置于容量瓶中，加水至刻度，使溶解，摇勻，精密量取该溶液定量，置于量瓶中， 加水稀释至刻度，摇勻，精密量取定量，置于量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各定量，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每Ig含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于18. Omg0本发明药物提取工艺简便、产品纯度高、质量控制方法可靠、产品质量稳定。
具体实施例方式下面通过实施例对本发明做进一步阐述基于本方法制备高纯度银黄可溶性粉的实施例实施例1取黄芩375g，加水煎煮四次，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1. 10 ；用盐酸调节PH值至1. 7，60°C保温，静置，滤过；沉淀物加适量水搅勻，用40%氢氧化钠调节 PH值至6. 5 ；加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1. 7，70°C保温，静置， 滤过；沉淀依次用适量水及不同浓度的乙醇洗至PH值至7.0;挥尽乙醇，减压干燥，得黄芩提取物29. 6g ；取金银花500g，加水煎煮一次；合并煎煮液，滤液减压浓缩至相对密度为 1. 10 (700C )的清膏；加乙醇使含醇量达95%，静置M小时，过滤；滤渣加乙醇使含醇量达 95%，静置18小时，过滤；合并两次的滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1. 15 (50°C )； 喷雾干燥，得金银花提取物102. 4g ；合并上述两种提取物，加碳酸氢钠55g，而后加葡萄糖 813g，混合均勻，即得银黄可溶性粉1000g。对银黄可溶性粉进行质量检测的实施例实施例21、鉴别，取银黄可溶性粉lg，加75%乙醇9ml，摇勻，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品及绿原酸对照品，分别加75%乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。2、检查，水分，照水分测定法测定，不得超过5. 0% ；其他，除含量均勻度外，应符合可溶性粉项下的各项规定。3、含量测定，金银花，照高效液相色谱法测定。(1)色谱条件与系统适应性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(10 90)为流动相；检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。(2)对照品溶液的制备，取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加50%甲醇适量，制成每Iml含50 μ g的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备，精密称取本品lg，置于IOml的容量瓶中，加水至刻度，使溶解，摇勻，精密吸取该溶液5ml，置25ml棕色容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。本品每Ig含金银花以绿原酸(C16H18O9)计，不得少于1. 7mg。4、含量测定，黄芩照高效液相色谱法测定。(1)色谱条件与系统适应性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(50 50 0. 2)为流动相；检测波长为274nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500 ； (2)对照品溶液的制备，取黄芩苷对照品10mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，精密量取5ml，置IOml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml含黄芩苷50 μ g) ； (3)供试品溶液的制备， 精密量取本品lg，置于IOml的容量瓶中，加水至刻度，使溶解，摇勻，精密量取该溶液5ml， 置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，精密量取:3ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每Ig含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于18. Omgo实施例3 关于银黄可溶性粉的制备及质量检测方法的研究和实验银黄可溶性粉中黄芩提取工艺的研究黄芩(Sctellaria Baicalensis Georgi)是一种常用的中药，其主要成分是黄酮类化合物，其中黄芩甙(Baicalin)的含量最高，有很好的提取利用价值。药理上已证实其具有抑菌、清热、利尿、利胆、抗炎、抗变态、解毒等功能。本试验利用黄芩苷在酸性溶液中易析出的性质，可方便的将其提取和纯化。1仪器与试药1. 1仪器SHIMADZU L VP C-10AT高效液相色谱仪；SPD-10A VP紫外可见监测器； 色谱柱SHIMADZU 0DSC18 柱(150 X 4. 6mm，5 μ m)。1. 2药材黄芩，符合《中华人民共和国兽药典》2000版第二部的相关规定，购于河北省安国市；黄芩苷标准品，中国药品生物制品检定所提供；乙醇、磷酸(分析醇)磷酸二氢钾(分析醇)、甲醇(色谱醇)，购于北京市化学试剂公司。2试验方法为了便于研究，将整个工艺路线研究分为二步进行①黄芩苷提取工艺的优选，研究从“黄芩药材”到“煎煮液”;②黄芩苷结晶工艺的优选，研究从“煎煮液”到“黄芩苷”。采用高效液相色谱法，以黄芩苷的含量为考察指标，进行因素水平的分析。2. 1黄芩苷的测定方法2. 1. 1色谱条件色谱柱0DSC18柱(150X4. 6mm，5ym)；流动相甲醇-0. 5%磷酸二氢钾，0. 5% 磷酸二氢钾溶液用磷酸调节PH值为2. 6，检测波长316nm ；柱温40°C ；流速lml/min。2. 1. 2标准品溶液的制备精密称取黄芩苷标准品2. 5mg，置于50ml的容量瓶中，加甲醇至刻度，超声溶解15 分钟，制成浓度为50 μ g/ml的溶液，过滤备用。2. 1.3样品溶液的制备精密称取黄芩提取物2. 5mg，置于50ml的容量瓶中，加甲醇至刻度，超声溶解15分钟，制成浓度为50 μ g/ml的溶液，过滤备用。2. 1.4样品测定分别精密吸取标准品溶液和样品溶液各10 μ 1注入色谱仪，测定即得。2. 2黄芩苷提取工艺的优选2. 2. 1试验方法称取黄芩粉400g，分四份，加水量分别是中药量的10、15、25倍，每份加水煎煮2 次、3次、4次，煎煮时间分别为30min、60min和90min，提取液过滤后离心分离，40°C下加盐酸调pH 1-2，并在80°C保温60分钟，静置3小时离心分离，干燥，得黄芩苷粗品。2. 2. 2正交设计本试验重点考察加水量、煎煮时间和煎煮次数三个因素，每个因素选择三个水平进行分析。因素水平表见表1
表1黄芩提取物正交因素水平表
权利要求
1.一种高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法，包括如下步骤取黄芩适量，加水煎煮2至4次，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1. 10-1. 35 ；用盐酸调节PH值至 1. 0-2. 0，60-80°C保温，静置，滤过；沉淀物加适量水搅勻，用30-40%氢氧化钠调节pH值至 6. 5-7. 5 ；加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1. 0-2. 0，60-80°C保温， 静置，滤过；沉淀依次用适量水及不同浓度的乙醇洗至PH值至6. 5-7. 5 ；挥尽乙醇，减压干燥，即黄芩提取物；取金银花适量，加水煎煮1至3次，合并煎煮液，滤液减压浓缩至相对密度为1. 10-1. 25 (50-70°C)的清膏；加乙醇使含醇量达80-90%，静置M小时，过滤；滤渣加乙醇使含醇量达75-95%，静置18-30小时，过滤；合并两次的滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1. 15-1. 30 (50-700C )；喷雾干燥，即得金银花提取物；合并黄芩提取物及金银花提取物，加碳酸氢钠定量，而后加葡萄糖至定量，混合均勻，即得银黄可溶性粉。其特征在于该制剂由黄芩、金银花分别经提取之后组合而成。
2.根据权利要求1所述的一种高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法，其特征在于每IOOg本品相当于原生药70-90g。
全文摘要
一种高纯度银黄可溶性粉的制备及质量检测方法，步骤如下1、取黄芩适量，加水煎煮2至4次，合并煎煮液，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.10-1.35；2、用盐酸调节pH值至1.0-2.0，60-80℃保温，静置，滤过；3、沉淀物加水搅匀，用30-40％氢氧化钠调节pH值至6.5-7.5；4、加等量乙醇，搅拌溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1.0-2.0，60-80℃保温，静置，滤过；5、沉淀依次用适量水及不同浓度乙醇洗至pH值至6.5-7.5；6、挥尽乙醇，减压干燥，即黄芩提取物；7、取金银花适量，加水煎煮1至3次，合并煎煮液，滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.25(50-70℃)的清膏；8、加乙醇使含醇量达80-90％，静置24小时，过滤；9、滤渣加乙醇使含醇量达75-95％，静置18-30小时，过滤；10、合并两次滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.15-1.30；11、喷雾干燥，得金银花提取物；12、合并黄芩提取物及金银花提取物，加碳酸氢钠定量，后加葡萄糖至定量，混合均匀，即得银黄可溶性粉。
文档编号A61K36/539GK102397331SQ201010284440
公开日2012年4月4日 申请日期2010年9月17日 优先权日2010年9月17日
发明者侯晓礁, 李学良, 江厚生, 王秀敏 申请人:北京生泰尔生物科技有限公司