专利名称：一种穗花牡荆提取物的制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种植物提取物的制备方法及其用途，特别涉及穗花牡荆提取物的制备方法及用途。
背景技术：
经前期综合症是多发病，在育龄妇女中发病率高达30%_80%，尤其多发于30-40岁的女性。其症状表现为紧张、易怒、嗜睡、情绪低落、性冷淡、乳痛、头痛、小腹疼痛等，症状于经前期出现，经后消失，以青壮年妇女最为常见。随着经前期综合症的临床研究不断进展和深入，发现经前期综合症影响育龄妇女的生活、学习、工作等，使家庭关系紧张，增加犯罪和冲动性行为的发生，引起了广泛的关注。经前期综合症的发生不仅与生物因素相关，还与社会文化、心理等因素相关。而在我国国内，治疗经前期综合症并无特效药物，也缺少相应的保健食品。临床上常用利尿剂如螺内酯或激素调节剂进行治疗，不但作用不明显，而且副作用大(如嗜睡、恶心、焦虑、头痛等)，无法有效治疗此病症。与经前期综合征相似，更年期综合症的发生与女性体内激素分泌有关。更年期综合症是由雌激素水平下降而引起的一系列症状。更年期妇女，由于卵巢功能减退，垂体功能亢进，分泌过多的促性腺激素，引起植物神经功能紊乱，从而出现一系列程度不同的症状， 如月经变化、面色潮红、心悸、失眠、乏力、抑郁、多虑、情绪不稳定、易激动、注意力难于集中等。给更年期的女性造成较大的负面影响。穗花牡荆(Vitex Agnus-castus L.)是马鞭草科植物，原产欧洲南部、地中海沿岸和中亚凹地与河岸，果实大小如胡椒子，呈深棕色至黑色。穗花牡荆中含多种黄酮类化合物，如紫花牡荆素等亲脂性的黄酮类成分，以及荭草素、异牡荆黄素等亲水性黄酮苷，其中紫花牡荆素在穗花牡荆中含量较高，研究结果表明，紫花牡荆素是穗花牡荆干果实中重要的药用活性成分之一。在欧洲，穗花牡荆提取物有用于治疗妇科病的历史。现有技术中，对穗花牡荆的提取一般仅采用乙醇为溶剂进行简单提取，所得产品有效成分含量较低。
发明内容
本发明的目的是提供一种有效成分含量较高的穗花牡荆提取物及其制备方法，同时还提供一种穗花牡荆提取物在制备治疗或辅助治疗经前期综合症和更年期综合症的药物或保健食品上的用途。为实现上述目的，本发明采取的技术方案为一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)称取若干重量的穗花牡荆干果实，按照每千克穗花牡荆干果实需要纩20L乙醇溶液比例，称取乙醇溶液，其中，所述乙醇溶液的浓度为30-95% ；
(2)将穗花牡荆干果实粉碎，采用冷浸、温浸、渗漉或加热回流进行提取，提取后得提取
液；
(3)将步骤(2)中的提取液过滤，得过滤液；(4)将步骤(3)中所得过滤液减压浓缩，操作温度为30-70°C，得浓缩液；
(5)将步骤(4)中所得浓缩液除杂，干燥，得穗花牡荆提取物。优选地，步骤(2)中采用多级连续逆流渗漉进行提取。优选地，步骤(4)中浓缩的操作温度为35_50°C。优选地，步骤(5)的除杂过程采用大孔树脂或聚酰胺作为填料对浓缩液进行吸附， 用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液。优选地，步骤(5)中除杂过程为在步骤(4)所得的浓缩液中加适量纯化水稀释， 得稀释液，然后用水饱和正丁醇萃取4次，合并萃取液，其中，所加纯化水的量以将所述浓缩液稀释到比重为1.02-1.08 (25°C)为宜；稀释后所得的稀释液有利于除杂，可防止除杂过程中发生乳化、难分层的现象。 优选地，用水饱和正丁醇萃取时，第一次水饱和正丁醇的体积为所述稀释液体积的100%，第二、三、四次水饱和正丁醇的体积均为所述稀释液体积的80%。优选地，上述所述除杂过程还包括将所得萃取液减压回收溶剂，所得固形物加适量纯化水溶解，用水相微孔滤膜过滤，所得滤液采用反相制备液相分离。一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)称取若干重量的穗花牡荆干果实，粉碎，过M目筛，装入萃取釜中，将萃取釜升温至50°C、解析釜52°C，每千克穗花牡荆干果实加入1-1. 5L浓度为95%的乙醇溶液作为夹带剂；
(2)打开(X)2气瓶对系统进行加压，当操作压力达到25MPa时，开始循环萃取，萃取1-2 小时；
(3)从解析釜中放出物料，减压蒸去溶剂后得流膏，干燥，即得穗花牡荆提取物。根据上述方法所得穗花牡荆提取物中总黄酮苷的含量为20%_99%，所得穗花牡荆提取物中含有紫花牡荆素。根据上述方法所得穗花牡荆提取物，可用于制备治疗或辅助治疗经前期综合症和更年期综合症的药物或保健食品。本发明可有效富集穗花牡荆干果实中脂溶性成分，而且着眼于适于工业化生产的工艺，通过提取、分离工艺的合理使用，获得较高的提取收率，采用较低的操作温度，且不使用毒性大的溶剂，产品溶剂残留少，安全性高。本发明穗花牡荆提取物的制备工艺易于操作，根据本发明所提供方法制备的穗花牡荆提取物的总黄酮含量较高，且可检出含有紫花牡荆素。所得穗花牡荆提取物可与益母草、芦荟、珍珠、枸杞子等中药材的提取物配伍使用，也可与如维生素E、维生素B、维生素C、 维生素D等维生素类或钙补充剂(如碳酸钙、葡萄糖酸钙等)配伍使用，对于治疗经前期综合症和更年期综合症有确切的疗效，并可作为保健食品原料，制成改善女性经前期不适应症状或更年期不适症状的保健食品。
具体实施例方式实施例1
本发明实施例一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤 (1)取30kg穗花牡荆干果实，60%的乙醇300L ；(2)将穗花牡荆干果实粉碎，过10目筛后置于多功能提取罐中，加入60%乙醇180L，加热至回流，保持提取2小时，放出提取液，药渣加60%乙醇120L再加热至回流，保持提取1. 5 小时，放出提取液；
(3)将步骤(2)所得提取液用200目滤网过滤，得滤液；
(4)将步骤(3)所得滤液减压浓缩(真空度为0.09MPa，浓缩温度为70°C)，待蒸出液基本无醇味后，放出流膏；
(5)加适量水将步骤(4)所得流膏稀释至比重小于1.05(25°C)，经800目滤布过滤， 滤液上DlOl大孔树脂柱，待达到吸附饱和，依次加水及20%的乙醇洗去亲水性杂质，用70% 乙醇洗脱黄酮苷，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得穗花牡荆提取物。实施例2
本发明实施例一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)取30kg穗花牡荆干果实，30%的乙醇360L；
(2)将穗花牡荆干果实粉碎，过12目筛后置于提取罐中，温浸提取，温度为50°C，保持提取8小时，放出提取液；
(3)将步骤(2)所得提取液用200目滤网趁热过滤，然后将滤液放冷至30°C以下，再用 800目不锈钢网过滤，得过滤液；
(4)将步骤(3)所得过滤液减压浓缩(真空度为0.09MPa，浓缩温度为50°C)，待蒸出液基本无醇味后，放出流膏；
(5)加适量水将步骤(4)中所得的流膏稀释到比重为1.03(25°C)的稀释液，所得稀释液经600目滤布过滤，水液上聚酰胺柱，待达到吸附饱和，依次加水及20%的乙醇洗去亲水性杂质，用50%乙醇洗脱黄酮苷，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得穗花牡荆提取物。实施例3
本发明实施例一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)取30kg穗花牡荆干果实，95%的乙醇MOL；
(2)将穗花牡荆干果实粉碎，过12目筛后置于提取罐中，冷浸提取，保持提取M小时， 放出提取液；
(3)将步骤(2)所得提取液用500目滤网过滤，得过滤液；
(4)将步骤(3)所得过滤液减压浓缩(真空度0.09MPa，浓缩温度为45°C)，待蒸出液基本无醇味后，放出流膏；
(5)加适量水将步骤(4)中所得的流膏稀释到比重为1.04(25°C)的稀释液，所得稀释液经500目无纺布滤膜过滤，水液上AB-8大孔树脂柱，待达到吸附饱和，依次加水及20%的乙醇洗去亲水性杂质，用60%乙醇洗脱黄酮苷，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得穗花牡荆提取物。实施例4
本发明实施例一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)取30kg穗花牡荆干果实，60%的乙醇溶液适量，所述乙醇溶液的量以满足步骤(2) 中的需要为宜；
(2)将穗花牡荆干果实粉碎，过12目筛后装入多级连续逆流渗漉装置，以60%的乙醇为提取溶媒，浸泡12小时，再用此浓度的乙醇溶液，以細1/ (kg-min)流速渗漉，收集最后一根柱的渗漉液，一共收集3倍柱体积的渗漉液；
(3)将步骤(2)所得渗滤液用200目滤网粗滤，然后将滤液再用600目滤布过滤，得过滤液；
(4)将步骤(3)所得过滤液减压浓缩(真空度为0.09MPa，浓缩温度为45°C)，待蒸出液基本无醇味后，放出流膏；
(5)加适量水将步骤(4)中所得的流膏稀释到比重为1.02(25°C)的稀释液，所得稀释液经600目滤布过滤，水液上DlOl大孔树脂柱，待达到吸附饱和，依次加水及20%的乙醇洗去亲水性杂质，用60%乙醇洗脱黄酮苷，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得穗花牡荆提取物。实施例5
本发明实施例一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)取30kg穗花牡荆干果实，50%的乙醇溶液适量，所述乙醇溶液的量以满足步骤(2) 中的需要为宜；
(2)将穗花牡荆干果实粉碎，过10目筛后置于多级逆流渗漉装置中，以50%的乙醇为提取溶媒，浸泡12小时，再用此浓度的乙醇溶液，以:3ml/ (kg-min)流速渗漉，收集最后一根柱的渗漉液，一共收集3倍柱体积的渗漉液；
(3)将步骤(2)所得渗漉液用300目滤布过滤，得过滤液；
(4)将步骤(3)所得过滤液减压浓缩(真空度0.09MPa、浓缩温度为50°C)，待蒸出液基本无醇味后，放出流膏；
(5)加适量纯化水将步骤(4)所得流膏稀释成20000ml，比重为1.04(25°C)，用水饱和正丁醇萃取4次，第一次水饱和正丁醇的体积为20000ml，第二、三、四次水饱和正丁醇的体积均为16000ml，合并萃取液，于65°C下减压回收溶剂，减压干燥，得穗花牡荆提取物。实施例6
本发明实施例一种穗花牡荆提取物的制备方法，包括以下步骤
(1)取3kg穗花牡荆干果实，60%的乙醇溶液适量，所述乙醇溶液的量以满足步骤(2)中的需要为宜；
(2)将穗花牡荆干果实粉碎，过10目筛后置于多级逆流渗漉装置中，以60%的乙醇为提取溶媒，浸泡12小时，再用此浓度的乙醇溶液，以:3ml/ (kg-min )流速渗漉，收集最后一根柱的渗漉液，一共收集3倍柱体积的渗漉液；
(3)将步骤(2)所得渗漉液用300目尼龙滤布过滤，得过滤液；
(4)将步骤(3)所得过滤液减压浓缩(真空度0.09MPa、浓缩温度为45°C)，待蒸出液基本无醇味后，放出流膏；
(5)在流膏中加纯化水适量，稀释至比重为1.05 (25°C)，得稀释液3400ml，用水饱和正丁醇萃取四次，第一次:3400ml，第二、三、四次2700ml ；
(6)合并正丁醇层，减压浓缩回收溶剂(真空度0.09MPa,温度65°C )，残渣加5倍量乙醇溶解；溶解后用中速滤纸过滤，滤液再用孔径为0. 45um的有机相微孔滤膜过滤，所得滤液采用反相制备液相分离制备柱为十八烷基硅烷键合硅胶(C18)，柱径5cm，柱长55cm，有机相为甲醇，水相为0. 1%甲酸水溶液，梯度条件见表1。检测波长348nm，流速为20ml/min，每次进样量为20ml处理好的滤液。以紫花牡荆素峰为目标峰，收集相应的流分，合并，于60°C下减压回收溶剂，干燥，粉碎，得穗花牡荆提取物。
表1梯度条件
权利要求
1.一种穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)称取若干重量的穗花牡荆干果实，按照每千克穗花牡荆干果实需要纩20L乙醇溶液的比例，称取乙醇溶液，其中，所述乙醇溶液的浓度为30-95% ；(2)将穗花牡荆干果实粉碎，采用冷浸、温浸、渗漉或加热回流进行提取，提取后得提取液；(3 )将步骤(2 )中的提取液过滤，得过滤液；(4)将步骤(3)中所得过滤液减压浓缩，操作温度为30-70°C，得浓缩液；(5)将步骤(4)中所得浓缩液除杂，干燥，得穗花牡荆提取物。
2.如权利要求1所述穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于步骤(2)中采用多级连续逆流渗漉进行提取。
3.如权利要求1所述的穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于步骤(4)中浓缩的操作温度为35-50°C。
4.如权利要求1所述的穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于步骤(5)的除杂过程采用大孔树脂或聚酰胺作为填料对浓缩液进行吸附，用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液。
5.如权利要求1所述的穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于步骤(5)中除杂过程为在步骤(4)所得的浓缩液中加适量纯化水稀释，得稀释液，然后用水饱和正丁醇萃取4 次，合并萃取液。
6.如权利要求5所述的穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于用水饱和正丁醇萃取时，第一次水饱和正丁醇的体积为所述稀释液体积的100%，第二、三、四次水饱和正丁醇的体积均为所述稀释液体积的80%。
7.如权利要求5或6所述的穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于所述的除杂过程还包括将所得萃取液减压回收溶剂，所得固形物加适量纯化水溶解，用水相微孔滤膜过滤， 所得滤液采用反相制备液相分离。
8.一种穗花牡荆提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)称取若干重量的穗花牡荆干果实，粉碎，过M目筛，装入萃取釜中，将萃取釜升温至50°C、解析釜52°C，每千克穗花牡荆干果实加入1-1. 5L浓度为95%的乙醇溶液作为夹带剂；(2)打开C02气瓶对系统进行加压，当操作压力达到25MPa时，开始循环萃取，萃取1-2 小时；(3)从解析釜中放出物料，减压蒸去溶剂后得流膏，干燥，即得穗花牡荆提取物。
9.如权利要求1或8所述方法制备的穗花牡荆提取物，其特征在于所述穗花牡荆提取物中总黄酮苷的含量为20%-99%，所述穗花牡荆提取物中含有紫花牡荆素。
10.如权利要求9所述穗花牡荆提取物的用途，其特征在于所述穗花牡荆提取物在制备治疗或辅助治疗经前期综合症和更年期综合症的药物或保健食品上的应用。
全文摘要
本发明公开一种穗花牡荆提取物的制备方法及用途。一种穗花牡荆提取物的制备方法，称取若干重量的穗花牡荆干果实，按照每千克穗花牡荆干果实需要8~20L乙醇溶液的比例，称取乙醇溶液，其中，所述乙醇溶液的浓度为30-95%，采用冷浸、温浸、渗漉、加热回流或CO2超临界萃取进行提取，过滤、浓缩、除杂、干燥后，即得穗花牡荆提取物。采用本发明公开方法制得的穗花牡荆提取物中总黄酮含量较高，且检测含有紫花牡荆素。所得穗花牡荆提取物可用于制备治疗或辅助治疗经前期综合症和更年期综合症的药物或保健食品。
文档编号A61K36/85GK102228565SQ201110123759
公开日2011年11月2日 申请日期2011年5月13日 优先权日2011年5月13日
发明者叶志明, 张奋鹏, 陈麟林 申请人:潮州市泽润制药有限公司