专利名称：用于寡核苷酸递送的新型低分子量阳离子脂质的制作方法
用于寡核苷酸递送的新型低分子量阳离子脂质
背景技术：
本发明涉及可以与其它脂质组分如胆固醇和PEG-脂质联合使用以与寡核苷酸形成脂质纳米粒、促进细胞摄取和内体逃逸以及在体外和体内敲低靶mRNA的新型阳离子脂质。之前已经公开了阳离子脂质和阳离子脂质在用于递送寡核苷酸，特别是SiRNA和miRNA的脂质纳米粒中的用途。之前已经公开了脂质纳米粒和脂质纳米粒用于递送寡核苷酸，特别是siRNA和miRNA的用途。之前已经公开了寡核苷酸(包括siRNA和miRNA)和寡核苷酸的合成。(参见美国专利申请:US 2006/0083780,US 2006/0240554,US 2008/0020058、US 2009/0263407 和 US 2009/0285881 和 PCT 专利申请:W0 2009/086558,W02009/127060,W02009/13213U W02010/042877, W02010/054384, W02010/054401, W02010/054405 和W02010/054406)。还参见 Semple S.C.等人，Rational design of cationic lipids forsiRNA delivery, Nature Biotechnology, 2010, 28, 172-176。在美国专利申请:US2009/0263407、US 2009/0285881、US 2010/0055168、US 2010/0055169、 US 2010/0063135、 US 2010/0076055、 US 2010/0099738 和 US2010/0104629中公开了其它阳离子脂质。传统阳离子脂质，如CLinDMA和DLinDMA已用于向肝递送siRNA,但受:困于非最佳的递送效率以及在较高剂量下的肝毒性。本发明的一个目的是提供表现出增强的效力以及由于肝中较低的脂质水平而导致的较低的肝毒性的阳离子脂质支架(scaffold)。本发明使用具有一个短脂质链的低分子量阳离子脂质以增强siRNA的体内递送的效率和耐受性。
发明概沭
本发明提供可以与其它脂质组分如胆固醇和PEG-脂质联合使用以与寡核苷酸形成脂质纳米粒的新型阳离子脂质。本发明的一个目的是提供表现出增强的效力以及由于肝中较低的脂质水平而导致的较低的肝毒性的阳离子脂质支架。本发明使用具有一个短脂质链的低分子量阳离子脂质以增强siRNA的体内递送的效率和耐受性。附图简沭
图1: LNP (化合物I)在小鼠中的效力。图2.LNP (化合物32和33)在大鼠中的效力(ApoB siRNA)。图3.大鼠肝中的阳离子脂质(化合物32和33)水平。图4.LNP (化合物 32 和 33，ApoB siRNA)在 NHP 中的效力。图5.LNP (化合物32和33，β -连环蛋白siRNA)在NHP中的效力。图6.LNP给药后NHP中的峰ALT水平(化合物32和33 )。图7.NHP肝中的阳离子脂质(化合物32和33)水平。图8.TRE-Met小鼠中的肝β -连环蛋白mRNA KD (化合物33 )。图9.TRE-Met小鼠中的肿瘤β -连环蛋白mRNA KD (化合物33 )。图10.TRE-met小鼠中的肿瘤生长抑制(化合物33)。图11.LNP (化合物32和33)在小鼠中的效力。图12.TRE-Met小鼠中的肝β -连环蛋白mRNA KD (化合物32 )。
图13.TRE-Met小鼠中的肿瘤β -连环蛋白mRNA KD (化合物32)。图14.TRE-met小鼠中的肿瘤生长抑制(化合物32)。发明详沭
本发明的各种方面和实施方案涉及可用在脂质纳米粒中的新型阳离子脂质用于向任何靶基因递送寡核苷酸，特别是siRNA和miRNA的用途。(参见美国专利申请:US 2006/0083780、US 2006/0240554、US 2008/0020058、US 2009/0263407 和 US2009/0285881 和 PCT 专利申请:WO 2009/086558、W02009/127060、W02009/132131、W02010/042877、W02010/054384、TO2010/054401、W02010/054405 和 TO2010/054406)。还参见 Semple S.C.等人，Rational design of cationic lipids for siRNA delivery,Nature Biotechnology, 2010, 28, 172-176。本发明的阳离子脂质是用于递送寡核苷酸，尤其是siRNA和miRNA的脂质纳米粒中的有用组分。在本发明的第一实施方案中，该阳离子脂质由式A或其任何药学上可接受的盐或立体异构体表示:
权利要求
1.式A的阳离子脂质或其任何药学上可接受的盐或立体异构体:
2.根据权利要求1的式A的阳离子脂质或其任何药学上可接受的盐或立体异构体， 其中: R1和R2各自是甲基； R3 是H; η是O ; L1选自C4-C24烷基和C4-C24烯基；和 L2选自C3-C9烷基和C3-C9烯基。
3.根据权利要求1的式A的阳离子脂质或其任何药学上可接受的盐或立体异构体， 其中: R1和R2各自是甲基； R3 是H; η是2 ; L1选自C4-C24烷基和C4-C24烯基；和 L2选自C3-C9烷基和C3-C9烯基。
4.阳离子脂质，其选自: (20Ζ, 23Ζ) -N, N- 二甲基二十九碳-20，23- 二烯-10-胺(化合物 I)； (17Ζ, 20Ζ)-Ν, N- 二甲基二十六碳-17，20- 二烯-9-胺(化合物 2)； (16Ζ, 19Ζ) -N, N- 二甲基二十五碳-16，19- 二烯-8-胺(化合物 3)； (13Ζ, 16Ζ)-Ν, N- 二甲基二十二碳-13，16- 二烯-5-胺(化合物 4)； (12Ζ, 15Ζ)-Ν, N- 二甲基二i^一碳-12，15- 二烯-4-胺(化合物 5)；
5.阳离子脂质，其是: (13Z, 16Z)-N，N-二甲基-3-壬基二十二碳-13，16-二烯-1-胺(化合物 32)； 或其任何药学上可接受的盐或立体异构体。
6.包含根据权利要求1的式A的阳离子脂质、胆固醇、DSPC和PEG-DMG的LNP组合物。
7.包含阳离子脂质(13Z，16Z)tV，#_二甲基-3-壬基二十二碳-13，16-二烯-1-胺(化合物32)、胆固醇、DSPC和PEG-DMG的LNP组合物。
8.根据权利要求1的阳离子脂质用于制备脂质纳米粒的用途。
9.根据权利要求1的阳离子脂质作为用于递送寡核苷酸的脂质纳米粒中的组分的用途。
10.根据权利要求9的用途，其中所述寡核苷酸是siRNA。
全文摘要
本发明提供可以与其它脂质组分如胆固醇和PEG-脂质联合使用以与寡核苷酸形成脂质纳米粒的新型阳离子脂质。本发明的一个目的是提供表现出增强的效力以及由于肝中较低的脂质水平而导致的较低的肝毒性的阳离子脂质支架。本发明使用具有一个短脂质链的低分子量阳离子脂质以增强siRNA的体内递送的效率和耐受性。
文档编号A61K9/127GK103167866SQ201180045234
公开日2013年6月19日 申请日期2011年9月20日 优先权日2010年9月20日
发明者M.G.斯坦顿, B.W.布兹克, G.L.博伊特纳, H.廖 申请人:默沙东公司