专利名称：精浆的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及精浆的用途。
背景技术：
肿瘤发生是由于细胞电子平衡失调所致。活性氧(自由基R0S)是一种缺乏电子的物质(不饱和电子物质)，进入人体后到处争夺电子，如果夺去细胞蛋白分子的电子，使蛋白质接上支链发生烷基化，形成畸变的分子而致癌。该畸变分子由于自己缺少电子，又要去夺取邻近分子的电子，又使邻近分子也发生畸变而致癌。这样，恶性循环就会形成大量畸变的蛋白分子。这些畸变的蛋白分子繁殖复制时，基因突变，形成大量癌细胞，最后出现癌症症状。而当自由基或畸变分子抢夺了基因的电子时，人就会直接得癌症。人体得到负离子后，由于负离子带负电荷，有多余的电子，可提供细胞缺失的电子，从而阻断恶性循环，癌细胞就可防止或被抑制。
专利CN200710017785.3已描述了动物精液药材在治疗肿瘤、抑郁症等多种疾病中的药物应用，而精液包括精浆与精子，精浆是由前列腺液、精囊液、附睾液和尿道球腺分泌的少量液体一起组成，精浆是输送精子的必须介质，并为精子提供能量和营养物质；精浆由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌产生，精浆里含有果糖和蛋白质，是精子的营养物质，精浆中还含有前列腺素和一些酶类物质，是一类天然有机物质，没有毒副作用。
现有技术并未确定动物精液中何种物质起到抑制肿瘤等疾病的作用，直接应用动物精液制备的药物纯度也较低，因此效用较差，患者的服用剂量大；同时，在传统的认识中，人们并没有发现精浆的药用价值。发明内容
本发明提供的精浆的新用途，主要用于抑制癌细胞的扩散，特别是大于3kDa的精浆蛋白，对癌细胞的扩散抑制效果非常明显。
本发明的具体技术解决方案如下:
精浆用于抑制癌细胞的扩散，精浆用于抑制肺癌细胞、乳腺癌细胞、大肠癌细胞、宫颈癌细胞、肝癌细胞或胃癌细胞等癌细胞的扩散。
精浆为活性成分的药物制剂。
精浆在制备治疗癌症的药物中的应用。
精浆在制备治疗肺癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、肝癌或胃癌等癌症的药物中的应用。
精浆用于制备胶囊、颗粒、片剂、滴丸、中西药复方制剂、口服液或注射液。
精浆蛋白用于抑制癌细胞的扩散，精浆蛋白用于抑制肺癌细胞、乳腺癌细胞、大肠癌细胞、宫颈癌细胞、肝癌细胞或胃癌细胞等癌细胞的扩散。
精浆蛋白为活性成分的药 物制剂。
精浆蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用。
精浆蛋白在制备治疗肺癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、肝癌或胃癌等癌症的药物中的应用。
精浆用于制备胶囊、颗粒、片剂、滴丸、中西药复方制剂、口服液或注射液。
上述精浆蛋白尤其是分子直径大于3kDa，和/或浓度大于2.5 %的精浆蛋白，效果更佳。
本发明的优点在于:
本发明通过大量的实验研究，突破现有技术应用上的局限性，获取了精浆在治疗肺癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、肝癌或胃癌等癌症的药物中的应用。
同时，本发明通过实验发现，抑制癌细胞的作用还与精浆中精浆蛋白的分子直径以及与精浆浓度有关，精浆蛋白分子大于3kDa后抑制作用明显，精浆浓度或精浆蛋白浓度处于2.5% 5.0 %时效果一般，5.0% 7.5%效果较佳，大于7.5% 10.0 %后抑制作用明显。
精浆可制成可制成胶囊、颗粒、片剂、滴丸、口服液、注射液等各种制剂应用于临床，优选为胶囊。本品也可与其他药物制成中西药复方制剂应用。
具体实施方式
人大细胞肺肿瘤细胞株NC1-H460分析，所用试剂如下:
RPM1-1640培养基为 Thermo公司(北京)产品；胎牛血清为Thermo公司(北京)产品；MTT为Invitrogen公司产品；其余试剂均为进口分析纯；
磷酸缓冲盐溶液(PBS)=NaCl 8g，KCl 0.2g, Na2HPO4 1.44g, KH2PO40.24g，溶于800mlddH20, HCl调节PH值至7.4，定容至1L，121°C高压灭菌，4°C保存。
0.25%胰酶溶液:1.25g胰酶，溶解于500mlPBS，过滤除菌后4°C保存。
首先进行样品分离:取-20°C保存于精液37°C缓慢融化后，冰浴条件下，吸取2ml样品，4°C，3000rpm离心lOmin，精液样品清晰分层，其中上清部分为精浆，将精浆移入另一支EP管中，标记为“上清”，沉淀部分为精子，以2mlPBS重悬，标记为“沉淀”；
同取融化后样品，冰浴条件下，吸取4ml，加入超滤离心管中，4°C，7500rpm离心30min,吸取滤过液补足4ml，标记为“小分子”，吸取PBS将滤出部分充分混悬并补足4ml，标记为“大分子”；
其次进行目标细胞培养:复苏NC1-H460 —支，37°C，5% CO2培养5天至细胞增殖至一定数量，0.25 %胰酶消化，1640培养基将细胞稀释至1*105个/ml，接种至96孔板，每孔100 μ L，继续于37°C，5% CO2培养24h至细胞稳定贴壁；
然后进行加药及检测:按表I所示浓度分别加入样品，每个浓度取3个副孔，370C，5% CO2培养24h后，换液并用PBS轻柔吹吸洗去孔内残余培养液后，每孔加入MMT溶液5 μ L，新鲜培养基100 μ Lo 37°C孵育3h，吸去培养基，每孔加入DMS0150 μ L将MTT-甲充分溶解，溶解液转移至96孔酶标板中，每孔转移IOOy L，490nm处读取吸光度。
按表I所示浓度分别加入样品上清、沉淀，大分子部分、小分子部分，每个浓度取4个副孔，37°C，5% CO2培养24h后，换液并用PBS轻柔吹吸洗去孔内残余培养液后，每孔加入MMT溶液5 μ L，新鲜培养基100 μ L0 37°C孵育3h，吸去培养基，每孔加入DMS0150 μ L将MTT-甲充分溶解，溶解液转移至96孔酶标板中，每孔转移100μ L，490nm处读取吸光度。
表1样品浓度梯度
权利要求
1.精浆用于抑制癌细胞的扩散。
2.精浆用于抑制肺癌细胞、乳腺癌细胞、大肠癌细胞、宫颈癌细胞、肝癌细胞或胃癌细胞的扩散。
3.精浆在制备治疗癌症的药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的精浆，其特征在于:所述癌症是肺癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、肝癌或胃癌。
5.根据权利要求4所述的精浆，其特征在于:所述精浆用于制备胶囊、颗粒、片剂、滴丸、中西药复方制剂、口服液或注射液。
6.精浆蛋白用于抑制癌细胞的扩散。
7.精浆蛋白用于抑制肺癌细胞、乳腺癌细胞、大肠癌细胞、宫颈癌细胞、肝癌细胞或胃癌细胞的扩散。
8.精衆蛋白在制备治疗癌症的药物中的应用。
9.根据权利要求6至8任一所述的精浆蛋白，其特征在于:所述精浆蛋白大于3kDa。
10.根据权利要求9所述的精浆蛋白，其特征在于:所述精浆蛋白的浓度大于2.5%。
11.根据权利要求10所述的精浆蛋白，其特征在于:所述精浆蛋白的浓度大于5.0 %。
12.根据权利要求11所述的精浆蛋白，其特征在于:所述精浆蛋白的浓度大于7.5%。
13.根据权利要求12所述的精浆蛋白，其特征在于:所述癌症是肺癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、肝癌或胃癌。
14.根据权利要求13所述的精浆蛋白，其特征在于:所述精浆蛋白用于制备胶囊、颗粒、片剂、滴丸、中西药复方制剂、口服液或注射液。
全文摘要
本发明提供的精浆的新用途，主要用于抑制癌细胞的扩散，特别是大于3kDa的精浆蛋白，对癌细胞的扩散抑制效果非常明显。可用于抑制肺癌细胞、乳腺癌细胞、大肠癌细胞、宫颈癌细胞、肝癌细胞或胃癌细胞等癌细胞的扩散。同时，本发明提供了精浆在制备治疗癌症的药物中的应用，包括精浆在制备治疗肺癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、肝癌或胃癌等癌症的药物中的应用。
文档编号A61K38/17GK103156884SQ20121013229
公开日2013年6月19日 申请日期2012年4月28日 优先权日2012年4月28日
发明者李偃, 程辉 申请人:陕西精健新星生物医药有限公司