专利名称：注射用阿魏酸钠冻干粉组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，尤其涉及一种注射用阿魏酸钠冻干粉组合物及其制备方法。
背景技术：
心肌缺血再灌注损伤(MRI)是指心肌细胞因缺血发生可逆的、可存活的损伤，在缺血纠正时，这种损伤反而加重，继而引起细胞死亡或进一步功能障碍。所有器官都能耐受一定时间的缺血，超过一定时间后，则会发生再灌注损伤。氧化脂蛋白对血管内皮的入侵，造成血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)减少，是发生动脉粥样硬化的重要原因之一。自由基的作用是缺血再灌注损伤的重要发病学环节。缺血再灌注时，自由基生成增多，将使膜脂质过氧化增强、蛋白质功能抑制、核酸及染色体破坏，因此清除过多的自由基，可减轻缺血再灌注损伤。
发明内容
本发明的目的在于提供一种注射用阿魏酸钠冻干粉组合物及其制备方法，该复方制剂有很强的协同作用，疗效迅速，在临床上能很好的起到对心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。本发明的具体技术方案为一种注射用阿魏酸钠冻干粉组合物，其特征在于，该组合物的主药为质量百分比
0.1% 99. 9%的阿魏酸钠和99. 9% 0. 1%的精氨酸。一种以阿魏酸钠和精氨酸为主药制备注射用冻干粉针的方法，其特征在于，具体操作步骤为(I)将质量百分比为0. 1% 99. 9%的阿魏酸钠、99. 9% 0. 1%精氨酸，和主药I 10倍的甘露醇加到注射用水中；(2)搅拌溶解后加入NaOH溶液调节pH值6. 5 7. 5 ;(3)加入0. 1%的活性炭搅拌30分钟；(4)滤除活性炭，药液再经0. 45 m和0. 22 y m微孔滤膜过滤；(5)将过滤后的药液罐装，送入冷冻干燥机中，降温至_40°C，保温2小时后，缓慢升温至-5V 0°C升华干燥，再升温至35°C后，保温3小时；(6)冷冻干燥结束，出箱，即得到注射用阿魏酸钠和精氨酸的冻干粉针。精氨酸(Arg)为氨基酸类药，参与鸟氨酸循环，在肝精氨酸酶活力下促进氨转化为无毒的尿素由尿中排出，以降低血氨。主要用于血氨增高引起的肝昏迷及各类肝昏迷忌用谷氨酸钠的病人。新的药理研究发现Arg是氮NO的生理性前提，经NO合成酶(NOS)作用后生成NO。NO在体内具有多种生理活性作用舒张血管，抗血小板聚集，抗血栓形成和抗血管平滑肌增生等。因而作为合成NO的底物，提供外源性的Arg，通过Arg-NO通路，促进体内NO浓度增加，Arg在临床中能起到对心肌缺血-再灌注损伤有保护作用。
阿魏酸钠(Sodium ferulate,商品名当归素)是阿魏酸(4_轻基3_甲氧基肉桂酸的钠盐。阿魏酸普遍存在于当归、川芎、蜂胶、酸枣仁等中药材中，具有抑制血小板聚集、促进血小板解聚、抗血栓形成、解除血管平滑肌痉挛、抗氧化和自由基、提高膜稳定性，以及抗炎、镇痛、抗生育、调节免疫功能、利肝保湿等药理作用。阿魏酸钠对家兔心肌缺血-再灌注损伤有保护作用，能明显改善左室收缩压(LVSP)、左室终末舒张压(LVEDP)、左室内压最大上升和下降速度，使缺血及再灌注状态下心脏顺应性及射血功能得到良好的保护。研究发现，阿魏酸钠可以降低高胆固醇导致的动脉粥样硬化斑块面积，改善高脂血清导致的内皮细胞损伤，其机制可能与降低血清甘油三酯水平、增加内皮细胞NO分泌及改变细胞因子的表达有关。所以阿魏酸钠和精氨酸冻连用能很好的起到对心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。本发明用冻干工艺生产注射用阿魏酸钠和精氨酸的冻干粉针有以下优点1)液体加工方便，简化了无菌作业过程；2)提高了制剂的稳定性；3)无需经过热处理就能去除产品中的水分；4)增强了制剂的复水(溶解)性。
具体实施例方式为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。实施例一、注射用阿魏酸钠组合物冻干粉针的制备，以1000支计I.处方
阿魏酸钠IOOg 精氨酸40g 甘露醇1()%
注射用水2000ml2.制备工艺将处方量的的阿魏酸钠、精氨酸和甘露醇加到注射用水中，搅拌溶解后加入NaOH溶液调节pH值6. 5 7. 5，加入0. 1%的活性炭搅拌30分钟，滤除活性炭，药液再经0. 45 y m和0. 22 u m微孔滤膜过滤，罐装，送入冷冻干燥机中，降温至_40°C，保温2小时后，缓慢升温至-5°C 0°C升华干燥，再升温至35°C后，保温3小时，冷冻干燥结束，出箱。实施例二、注射用阿魏酸钠组合物冻干粉针的制备，以1000支计I.处方 阿魏酸钠IOOg
精氨酸bOg
甘露醇IOOg
注射用水2000m L2.制备工艺将处方量的的阿魏酸钠、精氨酸和甘露醇加到注射用水中，搅拌溶解后加入NaOH溶液调节pH值6. 5 7. 5，加入0. 1%的活性炭搅拌30分钟，滤除活性炭，药液再经0. 45 y m 至-5°C 0°C升华干燥，再升温至35°C后，保温3小时，冷冻干燥结束，出箱。实施例三、注射用阿魏酸钠组合物冻干粉针的制备，以1000支计I.处方
阿魏酸钠IOOg
精氨酸80g
甘露醇IOOg
注射用水2000ml2.制备工艺将处方量的的阿魏酸钠、精氨酸和甘露醇加到注射用水中，搅拌溶解后加入NaOH溶液调节pH值6. 5 7. 5，加入0. 1%的活性炭搅拌30分钟，滤除活性炭，药液再经0. 45 y m和0. 22 u m微孔滤膜过滤，罐装，送入冷冻干燥机中，降温至_40°C，保温2小时后，缓慢升温至-5°C 0°C升华干燥，再升温至35°C后，保温3小时，冷冻干燥结束，出箱。实验资料材料与方法I. I研究对象与分组大白兔40只，健康雄性，体重2. 5 3. 0 kg,应用随机排列表分成五组正常对照组、假手术组、阿魏酸钠组(实施例一组，实施例二组，实施例三组)，每组8只。阿魏酸钠组(实施例一组，实施例二组，实施例三组缺血前30 min由兔耳缘静脉持续滴注)。1.2动物模型的制作以30 g/L戊巴比妥钠I ml/kg (30 mg/kg)经耳缘静脉注射麻醉，沿胸骨左缘第3 4肋间打开胸腔，纵行切开心包膜，暴露心脏，并将心包膜缝合于胸壁呈吊篮状，于冠状动脉左回旋支(LCX)远端1/3 1/2处进行结扎，建立急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI )模型。240 min后放松结扎线 120 min,以使冠状动脉再通形成再灌注，即缺血再灌注模型。对照组及阿魏酸钠组结扎240 min，再松解120min，分别建立AMI及再灌注模型。假手术组冠脉下只穿线，不结扎，无AMI，也无再灌注。1.3模型制作成功判定方法血管结扎后供血区心肌颜色由鲜红转为暗紫，心电图示ST段弓背向上抬高大于0. 5 mV，局部心肌变成紫红色并有节段性运动不良，证实闭塞有效，松开结扎前后ST庐T下降1/2以上，局部心肌变红，为缺血再灌注模型成功。1.4心肌病理染色及区域划分再灌注后，按I ml/kg从左心房注入硫黄素，使复流区着色，无复流区不着色；再于原位重新结扎LCX，从左心房再注入Evan’s蓝，使结扎区外着蓝色，结扎区不着蓝色。立即取出心脏，沿心脏长轴分为5 6心肌短轴切片，结果非结扎区心肌呈蓝色，结扎区在紫外线(波长365 nm)下无复流区不显色，有复流处显色。对切片拍照，计算出左心室室壁心肌面积、结扎区(无蓝色)心肌面积及无复流区(紫外线下不显色)面积；同样依结扎区心肌面积/左心室室壁心肌面积计算出结扎区心肌范围(ligationarea，LA)，依无复流区面积/结扎区心肌面积计算出心肌无复流心肌范围(area of no庐 reflow, ANR)。I. 5血液样本及心肌组织选择素(Ps)的采集及测定三实验组分别于结扎前5min、结扎后240 min、再灌注后120min抽取静脉血2 ml。注入2 ml放入普通试管中，离心取血清_20°C保存待检。取各区域心肌标本用40 g/L多聚甲醛固定，石蜡包埋，常规制片，免疫组化法测定各区域心肌组织中的Ps表达水平。结果①对照组和阿魏酸钠组AMI后240 min、再灌注后120 min的血清IL6均显著高于假手术组(P均<0.01);阿魏酸钠组各时间点除AMI前血清IL庐6均显著低于对照组(P均<0.05)。②Ps免疫组化显示，对照组及阿魏酸钠组中，Ps在复流区及无复流区血管内皮细胞有强表达，明显强于正常区及假手术组(P均< 0. 01);阿魏酸钠组与对照组比较，Ps在复流区及无复流区表达均明显减弱(P均<0.01)。③病理染色分析示，阿魏酸钠组结扎区心肌范围与对照组相比差异无统计学意义(P均> 0. 05)。以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征以及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些 变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
权利要求
1.ー种注射用阿魏酸钠冻干粉组合物，其特征在于，该组合物的主药为质量百分比O. 1% 99. 9%的阿魏酸钠和99. 9% O. 1%的精氨酸。
2.一种以权利要求I所述组合物的主药制备注射用冻干粉针的方法，其特征在于，具体操作步骤为 (1)将质量百分比为O.1% 99. 9%的阿魏酸钠、99. 9% O. 1%精氨酸，和主药I 10倍的甘露醇加到注射用水中； (2)搅拌溶解后加入NaOH溶液调节pH值6.5 7. 5 ; (3)加入O.1%的活性炭搅拌30分钟； (4)滤除活性炭，药液再经O.45 μ m和O. 22 μ m微孔滤膜过滤； (5)将过滤后的药液罐装，送入冷冻干燥机中，降温至_40°C，保温2小时后，缓慢升温至-5°C O °C升华干燥，再升温至35 °C后，保温3小吋； (6)冷冻干燥结束，出箱，即得到注射用阿魏酸钠和精氨酸的冻干粉针。
全文摘要
一种注射用阿魏酸钠冻干粉组合物及其制备方法，涉及医药领域，该组合物的主药为阿魏酸钠和精氨酸；制备注射用冻干粉针的具体操作步骤为将质量百分比为0.1%～99.9%的阿魏酸钠、99.9%～0.1%精氨酸，和主药1～10倍的甘露醇加到注射用水中；搅拌溶解后加入NaOH溶液调节pH值6.5～7.5；加入0.1%的活性炭搅拌30分钟；滤除活性炭，药液再经0.45μm和0.22μm微孔滤膜过滤；将过滤后的药液罐装，送入冷冻干燥机中，降温至-40℃，保温2小时后，缓慢升温至-5℃～0℃升华干燥，再升温至35℃后，保温3小时；冷冻干燥结束，出箱，即得到注射用阿魏酸钠和精氨酸的冻干粉针。本发明的优点液体加工方便，简化了无菌作业过程；提高了制剂的稳定性；无需经过热处理就能去除产品中的水分；增强了制剂的复水(溶解)性。
文档编号A61P9/10GK102657638SQ20121016994
公开日2012年9月12日 申请日期2012年5月29日 优先权日2012年5月29日
发明者汪六一, 汪金灿 申请人:海南卫康制药(潜山)有限公司