专利名称：一种具有抗氧化功能的复方软胶囊及其制备方法
技术领域：
本发明属于保健品领域，具体涉及通过CO2超临界萃取技术从丹参、三七和川芎中提取出具有抗氧化功能的有效成分，并且将其与食用油混合制成软胶囊及其制备方法。
背景技术：
自由基是一种因失去一个电子而成的不对称、不稳定的原子或分子，具有很大的能量，它可以攻击细胞组织中的脂质、蛋白质、糖类和DNA等物质，企图夺取一个电子以达到新的平衡，这就造成了脂质的过氧化、蛋白质的变性酶的失活、DNA的氧化损伤等。细胞内产生的过氧化脂质可使有关的细胞膜和局部组织受到伤害，如果溢出细胞可使血清过氧化脂质水平升高，进而导致粥样动脉硬化和血管的老化。抗氧化就是任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质”，它可以直接作用于自由基，也可以间接消耗容易生成自由基的物质，以终止自由基的链式反应。机 体抗氧化的能力越强，人就越健康，生命也越长。自由基理论指出，在正常情况下，体内自由基的产生和清除应处于平衡状态。但随着年龄的增长，我们体内抗氧化酶类如超氧化物歧化酶(SOD)等的活性下降，体内清除自由基的能力也随之下降，体内过量的自由基会引起脂质的过氧化，大量研究表明，氧自由基是促进人体衰老的罪魁祸首，是诱发高血压，动脉粥样硬化等心脑血管疾病，癌症、糖尿病，老年痴呆症，肾炎，白内障等疾病的重要病因。因此，抗氧化、清除体内过量的氧自由基便成为了人们通向健康的必由之路。事实上，治病不如防病，由于生活节奏快，人们长期疲劳，环境辐射增多都可导致人体自由基过多，许多人都处于“亚健康”状态，并无器质性病变。加之研究人员发现由于抗氧化药物存在一定的副作用且服用剂量不好控制，而从中草药中提取得到的天然抗氧化有效成分高效低毒。所以，我们将从丹参、三七、川芎中提取得到的天然抗氧化有效成分组合物制成了安全有效的抗氧化保健品来满足人们的迫切需求。检索相关文献，结果有关以丹参、三七、川芎有效成分组方进行抗氧化的研究情况及专利如下。中国专利(CN201010256454. 7)报道一种含丹参、三七有效部位的中药组合物具有较好的抗心肌缺血作用，并有一定的抗血栓形成和抗凝血作用；对抗心肌缺血时心肌组织的过氧化有良好功效。该专利中制剂组成包括丹参总酚酸10-99份、丹参酮0-50份、三七总皂昔10-99份、降香总黄酮0-50份、降香油总菇0-20份。其中丹参酮的制备方法丹参药材水提液，减压浓缩，加水沉淀，干燥既得；三七总皂昔的制备方法三七药材水提液上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，弃掉水洗液，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，干燥即得。中国专利(CN201110162520. 9)报道了一种治疗心脑血管疾病的复方丹参滴丸。该复方制剂由丹参、三七、冰片组成，其重量百分比分别为82. 84%、16. 21%,0. 95%。该专利是利用水提醇沉的方法对丹参三七中的有效成分进行提取的。
中国专利(CN201110330186. 3)报道了一种抗氧化，治疗冠心病、高脂血症、脑血管病的中药及其有效化学组分的制备方法和制剂。配方由丹参、人参、麦冬、葛根、三七、川芎六味药物组成。其中丹参川芎脂溶性有效成分的提取如下将原料粉碎后，加乙醇溶液加热回流提取，合并醇提液，过滤，滤渣保留以备后用，滤液浓缩，浓缩液用大孔树脂吸附，水洗柱后用乙醇溶液洗脱，洗脱液回收溶剂，干燥即得。中国专利(CN201010580567. 2)报道了一种具有抗氧化活性的药物组合物。其原料配方组成如下葡萄籽10份；新鲜苹果80份；越橘40份；松花90份；梓檬20份；山碴30份，紫丹参25份；桑堪25份；构祀30份；党参15份；红景天30份；糯米糠90份；仙灵脾10份；葡萄糖酸锌5份。其中丹参中有效成分的提取方法粉碎成颗粒，放入到超声波提取罐中，加入20倍的水，超声波提取1-2小时，离心分离并保留药液，将药液在65°C下真空浓缩成糖浆状，转入真空干燥箱干燥，控制温度70°C以下干燥至得到水分含量低于3%。
中国专利(CN201110321204. I)报道了一种治疗高血压、高血脂、高胆固醇、脂肪肝的中成药内服丸剂。该方剂由田三七90g、灵芝100g、山碴200g、银杏100g、丹参200g、何首乌IOOg组成。药材，打细粉，制成黄豆大小的水丸，口服，具有良好效果。中国专利(CN201110238762. I)中报道了一种治疗高血脂、高血压症的中药制剂，其原料药的重量组份分别是山碴2-7份、川芎1-8份、丹参1-9份、地龙2-4份、干姜1-2份。其中可以用水或乙醇提取其有效成分。中国专利(CN 200910196963. 2)中报道了一种当归-川芎超临界CO2提取物中纯化生物碱部位的制备方法。以“当归-川芍”超临界CO2提取物中总生物碱部位为原材料，用有机溶剂萃取，得到“当归-川芍”超临界CO2提取物中的生物碱部位，然后将生物碱部位作为上柱液，用洗脱剂经大孔吸附树脂进行洗脱，收集含药洗脱液，回收洗脱剂，就得到了纯化的生物碱部位。将其应用于抗心肌缺血、抗血栓、降血脂和改善动脉粥样硬化时疗效很好。综上所述可知，丹参、三七、川芎在抗氧化、预防和治疗心脑血管疾病方面的疗效十分确切。但现有专利报道的三者的提取工艺均较复杂，成本高，或者提取效率不高，因此不宜于应用。而迄今为止，国内外尚未见通过CO2超临界萃取技术从丹参、三七、川芎中提取抗氧化、清除自由基的有效成分，并且将其溶于食用油中制成软胶囊的专利报道。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种通过CO2超临界萃取技术从丹参、三七和川芎中提取出具有抗氧化功能的有效成分，并且将其与苏子油混合制成软胶囊的方法。本发明采取的技术方案是参考2010版药典的服用量及预实验结果，本发明组分的具体用量以重量份计如下丹参40-60份，三七15-30份，川芎15-30份优选为丹参40份，三七15份，川弯20份本发明的组合物提取物可通过如下制备方法得到(a)将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按配比混合粉碎至一定粒度，放入超临界釜中，在萃取温度40-45°C，压力20-35MPa，C02流量20_25kg/h，提取时间1-2. 5h的条件下超临界提取有效组分，得到组合物提取物。
(b)取含有800g丹参药材，300g三七药材，400g川芎药材的超临界萃取物加苏子油定容至100ml，再加入尼泊金乙酯混合均匀；(C)将上述混合均匀的药物上软胶囊机制得组合物软胶囊，即将明胶、甘油和水溶解后制成胶带，并将上述混合均匀的药物置于两块胶板之间，上软胶囊机用钢模压制，经检验合格后，得抗氧化组合物软胶囊。本发明所用的食物油是苏子油、橄榄油、大豆油、芝麻油、玉米油、麻油、棉籽油、蓖麻油、茶油、红花油、中长链脂肪酸酯中的一种或两种或两种以上的混合物，其中优选苏子油。本发明中所述的防腐剂选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯甲酸、山梨酸中一种或两种或两种以上的混合物。本发明中所述的防腐剂的用量为尼泊金甲酯0.015-0.2% (W/V)、尼泊金乙酯0. 015-0. 2% (W/V)、苯甲酸 0.01-0. I % (W/V)、山梨酸 0.05-0. 2% (W/V)。 本发明中所述的软胶囊囊壳，配方比例为明胶甘油水=I 0. 2-0. 6 0. 5-1. 5。由于上述技术方案的运用，本发明具有如下优点(I)本发明采用CO2超临界萃取技术从从丹参、三七和川芎中提取出丹参酮IIaJII芎嗪等具有良好抗氧化功能的有效成分，该方法操作简单，与传统的提取方法相比，无有害溶剂残留，提取效率高，可以更加有效的解决提取工艺繁琐，成本高，不宜于应用的问题。CO2-超临界萃取方法具有提取效率高，溶剂用量小，快速和准确的特点。与传统方法相比具有如下有益效果①CO2-超临界萃取为环境无害工艺。超临界萃取比溶解萃取的步骤相对少，流程短，操作参数也易于控制。②由于CO2-超临界萃取能力取决于流体密度，因而很容易通过调节压力和温度使二氧化碳与萃取物迅速分为两相(气、液)，达到迅速地、选择性的提取中药中有效成分的目的。不仅萃取效率高、耗能低，而且萃取物杂质减少、有效成分高度富集。③超临界萃取所用溶剂CO2具有无毒、无味、不燃不腐蚀、价格便宜、易于精制、易于回收等优点。与传统溶剂提取法相比，无溶剂残留。同时不仅避免大量有机溶剂的使用，也防止了提取过程对人体健康的危害和对环境的污染。④超临界萃取CO2-超临界萃取还具有抗氧化灭菌作用，有利于保证和提高天然物产品的质量。(2)本发明采用的苏子油富含a_亚麻酸，而a_亚麻酸具有降低血脂、血压、胆固醇、抗血栓、抗衰老、抗癌等作用，因此我们选用保健功效非常良好的苏子油作为溶解用食用油。(3)本发明采用软胶囊作为本品的剂型，避免了空气、湿度对药物的影响，具有密封稳定、含量准确、生物利用度高、易被患者接受等特点。(4)抗氧化属于中医滋补范畴。研究表明氧自由基与动脉粥样硬化、冠心病等心脑血管疾病密切相关，因此，从清除氧自由基出发，才能真正保护我们的心和脑。本方由丹参，三七，川芎三味药组成，在药理作用上相辅相承，具有协同作用，共奏益气活血，祛瘀通络，调衡阴阳之效，让我们真正远离心脑血管疾病。
其中2010年版药典记载丹参具有活血祛瘀，凉血消痈，清心除烦之功效；主要具有降血脂、降血压，抗动脉粥样硬化，抗血栓形成，保护心肌，抗肿瘤等药理作用。其中，作为丹参中脂溶性代表成分，丹参酮IIa在超临界萃取物中的含量很高，临床主要应用于治疗心血管疾病，具有抗动脉粥样硬化、抑制左心室肥厚、抗心肌缺氧、改善血管平滑肌状态、抗心律失常等药理作用。抗氧化作用机理丹参酮IIa是一种细胞内脂质过氧化产物与DNA相互作用的抑制剂，它能够通过消除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应；不仅如此，丹参酮IIa还能够消除心肌线粒体膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基，从而维持线粒体呼吸功能正
堂
巾o而2010版药典收载的三七具有散瘀止血，消肿定痛之功效，常用于降血脂，抗动 脉粥样硬化；降血压，降低心肌耗氧量，改善心肌缺血，抗衰老和降血糖。抗氧化研究表明三七总皂苷能够显著降低大鼠脑组织和血液中过氧化脂质的含量，同时，还能明显提高脑组织及血液中超氧化物歧化酶SOD的活性，能够更好地辅助丹参起到抗氧化的作用。其实丹参配伍三七的使用由来已久，名医施金墨在论治心绞痛时有如下经验“冠心病心绞痛之初起，尚无器质性病变者，则重用丹参，少佐三七”，且三七总皂苷类成分对丹参的有效成分具有增溶与稳定的作用。2010版药典收载的川芎具有活血行气之功效，常用于治疗心脑血管疾病。川芎嗪作为川芎生物碱的代表成分是一种很强的抗氧化剂。抗氧化作用机理川芎嗪可以通过清除氧自由基、钙拮抗而发挥抗缺血、抗再灌注损伤的作用；它还可使胞浆和线粒体中谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、过氧化氢酶CAT、SOD等抗氧化酶的活性增加，逐渐降低丙二醛的含量，弥补丹参三七的不足，共同发挥抗氧化、清除自由基的作用。本发明工艺设计简便合理，易于操作和质量控制，提取物有效成分含量高，成本低，服用方便，能够很好地起到抗氧化的作用，避免氧自由基对我们的心脑血管的损伤。
具体实施例方式下面通过具体的实施方式对本发明的技术方案作进一步的说明，其中例举的实施例仅仅是对本发明的说明，而不限制本发明的保护范围。实施例I :用于抗氧化软胶囊的重量份构成所选取的原料药由下列重量份构成丹参40份,三七15份,川弯20份实施例2 :活性组合物的提取将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按5 2 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度45°C，压力25MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。实施例3 :活性组合物的提取将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按5 2 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度40°C，压力25MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。 实施例4 活性组合物的提取
将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按5 2 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度45°C，压力20MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。实施例5 :活性组合物的提取将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按5 2 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度45°C，压力30MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。实施例6 :活性组合物的提取 将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按4 1.5 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度45°C，压力25MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。实施例7 :活性组合物的提取将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按4 1.5 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度40°C，压力25MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。实施例8 :活性组合物的提取将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按4 1.5 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度45°C，压力20MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。 实施例9 活性组合物的提取将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按4 1.5 2配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度45°C，压力30MPa，CO2流量23kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取2h得到活性成分组合物提取物。实施例10 :组合物提取物溶于食物油将含有800g丹参药材，300g三七药材，400g川芎药材的超临界萃取物加苏子油定容至100ml，再加入尼泊金乙酯混合均匀。实施例11 :(10)中所述的提取用食物油可以是苏子油、橄榄油、大豆油、芝麻油、玉米油、麻油、棉籽油、蓖麻油、茶油、红花油、中长链脂肪酸酯中的一种，或两种，或两种以上的混合物。实施例12 :将(10)中混合均匀的药物上软胶囊机制得组合物软胶囊，即将明胶、甘油和水溶解后制成胶带，并将上述混合均匀的药物置于两块胶板之间，上软胶囊机用钢模压制，经检验合格后，得抗氧化组合物软胶囊。药效学实验本发明组合物对正常小鼠超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响取小白鼠60只，雌雄兼用，随机分为空白对照组，阳性药愈风宁心片(I. 428g/kg)组，本发明组合物高、中、低剂量组(113. 6mg/kg、75. 7mg/kg、37. 8mg/kg),每组12只。给药组按0. 2ml/10g体重灌胃给药,对照组给予等体积的蒸懼水。每天用药一次,连续IOd,于末次给药后lh，从小鼠眼眶静脉丛取血，分离血清，按试剂盒方法测定血清中SOD活力及MDA含量，结果见下表。
表I本发明组合物对正常小鼠SOD活性及MDA含量的影响(x土 s)
权利要求
1.一种用于抗氧化的软胶囊，其特征在于，它是由下列方法制得的 ①将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度40-45°C，压力20-35MPa，CO2流量20_25kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取时间为1-2. 5h得到活性成分组合物提取物。
②将超临界萃取得到的活性成分提取物溶解于食用油中，混合均匀，即取含有800g丹参药材，300g三七药材，400g川芎药材的超临界萃取物加苏子油定容至100ml，再加入常用的防腐剂混合均匀。
③将明胶、甘油和水溶解后制成胶带，并将上述混合均匀的药物置于两块胶板之间，上软胶囊机用钢模压制，经检验合格后，得抗氧化组合物软胶囊。
2.根据权利要求I所述的一种用于抗氧化的软胶囊及其制备方法，其特征在于川芎、三七和丹参的比例为I. 5-3 1.5-3 4-6。
3.根据权利要求I所述的一种用于抗氧化的软胶囊及其制备方法，其特征在于溶解活性成分的食物油是苏子油、橄榄油、大豆油、芝麻油、玉米油、麻油、棉籽油、蓖麻油、茶油、红花油、中长链脂肪酸酯中的一种或两种或两种以上的混合物。
4.根据权利要求3所述的一种用于抗氧化的软胶囊及其制备方法，其特征在于提取用食物油优选苏子油。
5.根据权利要求I所述的一种用于抗氧化的软胶囊及其制备方法，其特征在于防腐剂选自尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、苯甲酸、山梨酸中一种，或两种，或两种以上的混合物；防腐剂的用量为尼泊金甲酯O. 015-0. 2% (W/V)、尼泊金乙酯O. 015-0. 2% (W/V)、苯甲酸O.01-0. 1% (W/V)、山梨酸 O. 05-0. 2% (W/V)。
6.根据权利要求I所述的一种用于抗氧化的软胶囊及其制备方法，其特征在于软胶囊囊壳的配方比例为明胶甘油水=I O. 2-0. 6 O. 5-1. 5。
全文摘要
本发明提供一种用于抗氧化的药物组合物软胶囊及其制备方法，涉及保健品技术领域。将去除杂质及残茎的丹参，三七，川芎按配比混合粉碎至一定粒度，在萃取温度40-45℃，压力20-35MPa，CO2流量20-25kg/h的条件下超临界提取有效组分，提取时间为1-2.5h，得到活性成分组合物提取物。将超临界萃取得到的活性成分提取物溶解于食用油中，混合均匀，即取含有800g丹参药材，300g三七药材，400g川芎药材的超临界萃取物加苏子油定容至100ml，再加入常用的防腐剂混合均匀；将上述混合均匀的药物上软胶囊机制得抗氧化软胶囊。本发明具有提取工艺简单，质量可控，提取物有效成分含量高，成本低，无污染，适用于工业化生产；而且服用方便，具有很好的抗氧化、清除自由基、裨益心脑血管的作用。
文档编号A61K9/48GK102670710SQ201210177348
公开日2012年9月19日 申请日期2012年6月1日 优先权日2012年6月1日
发明者刘京硕, 周平, 宋岐, 李金卓, 杨悦婧, 王诗涵, 白金, 童卉琦, 金向群 申请人:吉林大学