专利名称：苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物制剂，尤其是一种经口服给药用于治疗消化系肿瘤的苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球及其制备方法。本发明制备的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球是将pH敏感性和磁靶向性双重释药机制集合而成的双重释药响应的水凝胶小球。
背景技术：
苦豆子{Sophora alopecuroidesL.)属豆科槐属植物，广泛生长于我国西北地区，药用资源丰富，有清热解毒和止痛杀虫等作用。苦豆子总碱是其干燥全草或种子提取而得的总生物碱，属于喹诺里西啶类生物碱，其成分主要包括苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐定碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐胺碱、莱曼碱、野啶碱和苦豆碱等约21种生物碱。现代药理研究表明，苦豆子总碱具有以下药理作用中枢神经系统作用强心、抗心·律失常和降压作用，抗病毒、抗炎、抗菌及免疫调节作用，抗肿瘤作用。目前，以苦豆子总碱为原料研究的剂型主要有苦豆子壳聚糖口腔溃疡贴，苦豆子栓剂，苦豆子总碱泡腾栓，苦豆子总碱的骨架片，苦豆子总碱微丸。
发明内容
本发明的目的在于提供一种经口服给药用于治疗消化系肿瘤的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球及其制备方法，该制剂具有PH敏感性释药机制和磁靶向性释药机制，可使苦豆子总碱在不同PH环境的消化道部位，按pH梯度释放药物，并可在外加磁场的引导下，聚集在肿瘤部位，具有靶向定位的智能释药特征，从而可提高苦豆子总碱的生物利用度，增强临床治疗效果。本发明的一种苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的制备方法是，将壳聚糖
0.04g 0. 08g溶入体积比为1%的醋酸溶液20ml中，将0. 3g 0. 7g CaCl2加至前述壳聚糖溶液20ml中，将海藻酸钠0. 15g 0. 25g，均匀撒入IOml纯化水得到海藻酸钠水溶液，将苦豆子总碱I. Og I. 5g、Fe304纳米粒0. 04g 0. 07g,加至前述的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，量取前述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球。根据本发明所述的一种苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的制备方法可制得的苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球。本发明中的壳聚糖是一种天然线形高分子碱性多糖，含有自由的氨基基团。其来源丰富，价格低廉，具有很好的生物相容性和生物降解性，无毒、无刺激、无过敏性，黏附性、成膜性良好，环境友好，不污染环境，广泛应用于医药、化工、食品等领域，是一极具发展前途的药用辅料。
本发明中的海藻酸钠是一种天然阴离子聚合物，具有较好的生物相容性和生物降解性，其结构中的羧基可以与壳聚糖分子中的氨基阳离子发生离子反应形成聚合电解质复合物，该过程不涉及热交联过程中的高温及化学交联过程中的共价键形成，对包载物的性质无影响，因此作为药物、生物制品、疫苗及细胞的载体有着极大的优越性。本发明中的Fe3O4纳米粒作为磁性物质，具有毒性低、易得、饱和磁化强度高等特点，有利于苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球在外加磁场诱导下，在消化道中的肿瘤部位靶向定位，当药物释放完毕后，自身可随粪便 排出体外，在体内不会造成蓄积中毒或影响机体功能。本发明制备的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球具有pH敏感性释药机制和磁靶向性释药机制的双重释药响应特征。首先，利用其PH敏感性，使苦豆子总碱在胃、十二指肠，小肠，结肠等不同PH环境的消化道部位，按pH梯度释放。此外，该水凝胶小球含有Fe3O4纳米粒，具有良好的磁响应性，可利用外加磁场的诱导性能，将水凝胶小球定向转运至靶区，使苦豆子总碱定位释放，从而实现对消化道肿瘤的双重靶向定位给药，增加苦豆子总碱在消化道肿瘤部位的药物浓度，减少全身药物浓度，可降低药物毒副作用和不良反应，提高药物生物利用度，增强临床治疗效果，降低药物服用次数和剂量，增加患者的依从性。本发明以天然药物苦豆子中的活性成分苦豆子总碱为主要成分，以天然高分子材料壳聚糖和海藻酸钠为主要药用辅料，CaCl2为交联剂，Fe3O4纳米粒为磁性物质，溶剂是纯化水，采用离子胶凝化法，通过相关药学技术研究，制备成具有良好释药性能的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。本制剂具有pH敏感性和磁靶向性双重敏感性，可使苦豆子总碱定位靶向释放，从而可实现对消化道肿瘤的双重靶位定向给药，提高药物生物利用度，增强药物临床治疗效果，减少药物不良反应和毒副作用，减少给药次数和剂量，改善患者的依从性。
图I.实施例I所得的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的外观形态图，图中a.为湿苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球数码照片；b为干燥苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球数码照片；c为.放大65倍数的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的扫描电镜照片；d为.放大400倍数的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的扫描电镜照片。图2为实施例I所得的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球红外光谱图，图中A为壳聚糖；B为海藻酸钠；C为空白pH/磁双重敏感性水凝胶小球；D为苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球；E为苦豆子总碱。图3.实施例I所得的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的X射线衍射谱图，图中a为壳聚糖；b为海操酸纳；c为Fe3O4纳米粒；d为古ii子总喊；e为空白pH/磁双重敏感性水凝胶小球；f为苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球。图4.实施例I所得的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的磁滞曲线图，图中A为苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球；B为Fe3O4纳米粒。图5.实施例I所得的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球在不同pH环境中的溶胀度图。图6.为实施例I所得的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球在不同pH环境中的药物累积释放曲线图。
具体实施例方式下面是本发明的实施例，但本发明不仅限于实施例。实施例I :
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。 3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g、Fe304纳米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例2
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 15g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为I. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g,Fe3O4纳米粒0. 04g，加至上述I. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例3
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。
3)称取海藻酸钠0. 20g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 0%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g,Fe3O4纳米粒0. 04g，加至上述2. 0%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3 O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例4
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g、Fe304纳米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例5
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g、Fe304纳米粒0. 07g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例6
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为2. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g、Fe304纳米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。 实施例I
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 7g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为3. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g,Fe3O4纳米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例8
I)称取0. 06g壳聚糖，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 3%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 3%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g,Fe3O4纳米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例9
I)称取壳聚糖0. 08g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 4%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 4%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 25g、Fe304纳米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶 液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到上述20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例10
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 0g、Fe3O4纳米粒0. 04g，加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。实施例11
I)称取壳聚糖0. 04g，均匀撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置过夜，搅拌至溶解完全，得到浓度为0. 2%的壳聚糖溶液，备用。2)称取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%的壳聚糖溶液20ml中，搅拌使溶解，得到壳聚糖和CaCl2的混合溶液，CaCl2在壳聚糖溶液中的浓度为I. 5%，备用。3)称取海藻酸钠0. 25g，均匀撒入IOml纯化水中，放置过夜，搅拌至完全溶解，得到浓度为2. 5%的海藻酸钠溶液，备用。4)分别称取苦豆子总碱I. 5g、Fe3O4纳米粒0. 04g,加至上述2. 5%的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，备用。
5)量取上述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，通过5ml注射器滴加到上述20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的外观形态观察
分别称取实施例I所得湿和干燥后的苦豆子总碱PH/磁双 重敏感性水凝胶小球适量喷金处理，控制加速电压为30kV，放大倍数为65及400倍。于室温条件下用肉眼和扫描电子显微镜(SEM)观察苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的表面形态及微观结构。从图I可以看出苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球干燥前呈较圆整的球形，形状较规贝1J，黑褐色，表面光滑，平均直径为3mm(a);室温放置自然干燥后，仍保持其球形形态，但体积缩小，直径约为lmm(b)。由SEM图片(c，d)可以看出，该水凝胶小球呈较圆整的球形，形状较规则，但由于凝胶小球网络结构脱水而使表面粗糙，且具有孔沟和褶皱，结果见图I。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的红外光谱分析
分别称取壳聚糖、海藻酸钠、空白PH/磁双重敏感性水凝胶小球、实施例I所得苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球和苦豆子总碱适量，研碎后与KBr细粉以I :100的比例混合，在玛瑙乳钵中研磨至均匀，装入压片模具，均匀铺布后，边抽气边加压，至压强约20MPa时维持压力5min，得到厚约Imm的透明KBr样品片，置于红外光谱仪的样品光路中，录制红外光谱图。比较壳聚糖、海藻酸钠、空白PH/磁双重敏感性水凝胶小球、苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球和苦豆子总碱的红外光谱图可以看出，壳聚糖的特征吸收峰位于1095、1033、1598、1655，2877和3444 cnT1处。海藻酸钠的特征吸收峰位于1029,1427和1626cm—1处。海藻酸钠和壳聚糖形成聚电解质复合物之后，分别在1609、1416、1094和1032CHT1处出现了壳聚糖和海藻酸钠的特征吸收峰，说明所得的空白和苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球中同时含有二者的成分。苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球和空白pH/磁双重敏感性水凝胶小球中可见,Fe3O4纳米粒的特征吸收峰出现在561cm 1处。苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球的红外光谱图中，出现了苦豆子总碱的特征吸收峰2928CHT1，说明苦豆子总碱被成功载入该水凝胶小球网络结构中。结果见图2。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的X-衍射分析
分别称取壳聚糖、海藻酸钠、Fe3O4纳米粒、苦豆子总碱、空白pH/磁双重敏感性水凝胶小球和实施例I所得苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球适量，置玛瑙乳钵中研磨粉碎，均匀铺布后上机检测，选择扫描角度2 0的范围为10°、0°。比较壳聚糖、海藻酸钠、Fe3O4纳米粒、苦豆子总碱、空白pH/磁双重敏感性水凝胶小球和苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的晶形可见，壳聚糖的衍射角为20°，海藻酸钠的衍射角为19°、28°、29.5°、32.5°、34.5°。而两者形成水凝胶后壳聚糖和海藻酸钠的衍射角均消失，这是因为分子间作用破坏了两种物质间的氢键。并且，Fe3O4纳米粒的衍射角为35. 9°和43. 45°，在水凝胶小球中可见其衍射角，说明Fe3O4纳米粒未发生晶体构型转变，稳定地存在于该水凝胶小球中。苦豆子总碱的主要特征结晶衍射角为11°、15°和18. 5°。而苦豆子总碱的PH/磁双重敏感性水凝胶小球中未见到苦豆子总碱的特征晶体衍射峰，说明苦豆子总碱在水凝胶小球内不是以晶体形式而是以分子形式被载入。结果见图3。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的磁性能测定分别称取Fe3O4纳米粒及实施例I所得苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球粉末适量，于室温条件下用振动样品磁强计(VSM)测定Fe3O4纳米粒和苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的磁滞曲线，考察该水凝胶小球的磁响应特征。结果显示Fe3O4磁性纳米粒具有较高的饱和磁化强度，可达到58. 57emu/g ;剩余磁化强度和矫顽力都为零，表现出典型的超顺磁性，在体内应用时不会产生聚集。苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球的饱和磁化强度约为5. 02emu/g，且矫顽力为零，该性质可使水凝胶小球在体内不会产生聚集，在磁场消失后又可以快速的重新分散。结果见图4。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的溶胀性试验
精密称取实施例I所得苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球各30mg，分别置于pHl. 5的模拟胃液盐酸溶液和不同pH值的磷酸盐缓冲溶液液pH5. O、pH6. 8、pH7. 4、pH8. 0中，温度为37±0.5 °C，在预定时间定点取出，用滤纸吸干表面水分后称重，考察苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球在模拟胃液pHl. 5及不同pH值的磷酸盐缓冲液中的溶胀性能。按以下公式计算溶胀度SR= (W - W0)/W0 ;其中W为苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球溶胀后的总质量(g)，Wtl为干燥苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球溶胀前的质量(g)。结果表明该水凝胶小球在不同PH值环境中溶胀度有明显的差异。在pH1.5的·酸性环境中，该水凝胶小球的溶胀度很小，约为1.0 ;而随着溶液pH值的增加，溶胀度明显增大，在PH6. 8的磷酸盐缓冲溶液中，该水凝胶小球的溶胀度可高达28左右。以上结果表明苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球在人工胃液pH值条件下具有较低的溶胀性，而在小肠、结肠位置PH值条件下具有很好的溶胀性，因此该水凝胶小球可作为抗消化道肿瘤靶向定位给药的药物制剂，具有明显的PH敏感性，即环境pH越低，溶胀度越小，药物释放较少；环境PH越高，溶胀度越大，有利于药物释放。结果见图5。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的释放行为试验
按《中华人民共和国药典》2010年版二部附录释放度测定法中第一法规定进行累积释放度测定。称取实施例I所得苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球5份，每份2. Og,精密称定，分别以pHl. 5、pH5. O、pH6. 8、pH7. 4、pH8. 0的不同pH值的磷酸盐缓冲溶液500ml为溶出介质，在转速为每分钟100转，温度为37.0±0. 5°C条件下依法测定，分别于规定时间定点取样，每次精密量取释放介质1ml，并同时补加相同温度、相同体积的空白释放介质lml，用0. 22 ii m微孔滤膜过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液5 U 1，注入高效液相色谱仪(Agilent 1200型，美国)，测定苦参碱在220nm波长处的峰面积，并代入标准曲线方程计算累积释放度，根据测定结果绘制释放曲线。色谱条件为色谱柱为美国安捷伦公司ZORBAXEclipse XDB-C18 (250mmX4. 6mm，5 y m);流动相为甲醇0. 1% 磷酸(三乙胺调 pH 为 6. 8)=55:45 ;柱温为30°C ;流速为I. Oml mirT1 ;检测波长为220nm ;进样量为5yl。理论塔板数按苦参碱峰计不低于2000。药物累积释放度(%) = [Rt/L] X 100，其中，Rt表示t时间内药物的累计释放量，L表示最初载入的药物总量。结果显示，苦参碱在不同pH值磷酸盐缓冲溶液中的释放行为有明显差异。由苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球在不同pH环境中的药物累积释放曲线图可见，在pHl. 5的酸性溶液中释药量较低，2小时释放49. 17%，且该时间点后药物释放较慢；而在PH6. 8的弱碱性溶液中释药量较大，2小时释放87. 43%，且释药较快。以上结果表明苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球具有明显的pH敏感性，这也与溶胀实验结果一致，即环境PH越低，水凝胶小球不易溶胀破裂，药物释放越少；环境pH越高，水凝胶小球易于溶胀破裂，药物释放越多。结果见图6。苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球释放动力学
采用p印pas方程对实施例I所得苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的释放机制进行探讨。peppas方程为Mt/M = ktn ;Mt/M 表示药物在某一时刻的累积释放分数(以％表示);t为释放时间；k为速率常数；n为释放参数，是表征peppas方程中释放机制的特征参数，当0. 43〈n〈0. 85时，药物的释放机制为非Fick扩散，由药物扩散和骨架溶蚀共同作用；当n〈0. 43时，为Fick扩散；当n>0. 85时，为骨架溶蚀机制。结果见表I。表I实施例I所得苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球在不同pH环境中的
权利要求
1.一种苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球的制备方法，其特征在于将壳聚糖O.04g O. 08g溶入体积比为1%的醋酸溶液20ml中，将O. 3g O. 7g CaCl2加至前述壳聚糖溶液20ml中，将海藻酸钠O. 15g O. 25g，均匀撒入IOml纯化水得到海藻酸钠水溶液，将苦豆子总碱I. Og I. 5g、Fe304纳米粒O. 04g O. 07g,加至前述的海藻酸钠溶液IOml中，超声处理30分钟，搅拌均匀，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，量取前述含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液10ml，在缓缓搅拌下，滴加到20ml的壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应20分钟，反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤3次，室温放置自然干燥，得到苦豆子总碱PH/磁双重敏感性水凝胶小球。
2.权利要求I所述的一种苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的制备方法制备的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。
全文摘要
本发明涉及一种经口服给药用于治疗消化系肿瘤的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球及其制备方法。本发明的苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球的制备方法是，将适量壳聚糖溶入醋酸溶液中，再适量CaCl2加至前述壳聚糖溶液中，将适量海藻酸钠，均匀撒入纯化水得到海藻酸钠水溶液，将适量苦豆子总碱和Fe3O4纳米粒加至前述的海藻酸钠溶液中，得到含苦豆子总碱、Fe3O4纳米粒和海藻酸钠的混悬液，再将混悬液滴加到壳聚糖和CaCl2的混合溶液中，交联反应结束后过滤，用适量纯化水洗涤、干燥，得到苦豆子总碱pH/磁双重敏感性水凝胶小球。
文档编号A61K47/02GK102727572SQ201210242850
公开日2012年10月17日 申请日期2012年7月14日 优先权日2012年7月14日
发明者刘涛, 李平, 李晓强, 李玉民, 焦海胜, 黄缓梅 申请人:兰州大学第二医院