金莲花提取物在制备治疗病毒性疾病药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了金莲花提取物在制备治疗病毒性疾病药物中的应用。所述金莲花提取物的纯度为：金莲花提取物总黄酮含量大于50%。所述的金莲花提取物，是从含有该成分的植物、中药材及中药饮片中提取出来的。金莲花提取物在可以制备治疗流感病毒H1N1的；可以制备治疗呼吸道合胞病毒RSV药物；可以制备治疗腺病毒Adv3抑制活药物。所述金莲花提取物可以和药学上可以接受的载体或赋形剂混合制备临床上可接受的药物制剂。本发明发现了中药金莲花提取物治疗病毒性疾病的药效物质，为其临床应用提供了科学依据，使金莲花提取物可做为一个天然的抗病毒剂，具有无成瘾性、用量小的特点。
【专利说明】金莲花提取物在制备治疗病毒性疾病药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药【技术领域】，涉及金莲花提取物在制药领域的新用途，具体涉及金莲花提取物在制备治疗病毒性疾病药物中的应用。
【背景技术】
[0002]从2003年“SARS病毒”横行肆虐，到2009年“甲型HlNl流感”汹汹来袭，再到今年“H7N9禽流感”余威尚存，短短十年间，我们已一而再、再而三地遭到病毒的攻击。虽然历史的记载告诉我们，病毒作为一类物种的存在时间远远超过人类，在人类的发展史上，它对人类带来的生存威胁也远超其他物种。
[0003]由各种呼吸道病毒所引起的病毒感染性疾病是一组常见病，其发病率在全球呈逐步上升趋势，而且不断出现新的致病病毒。如2003年初在我国部分省市流行的非典型肺炎(SARS)就是由冠状病毒的变异病毒所引起的一种严重的病毒性传染病。H5N1病毒及目前出现的H1N1、H7N9等病毒感染的疾病，都属于病毒感染性疾病。
[0004]病毒感染性疾病的危害不仅仅在于所引起的各种感染，更主要是其大多继发或合并细菌感染，故致使临床症状较重，病程较长，表现多样化，一直是危害人类健康的主要疾病之一。
[0005]目前临床治疗病毒性疾病以化学合成和半合成的药物为主。但是，由于半个多世纪以来化学合成和半合成抗菌、抗病毒药物的广泛使用，已诱发病菌产生了耐药性菌株，且日渐增多条件性致病菌。加之其毒副作用较大等缺点，致使该类药物尽管作为一线治疗药、但已存在诸多不足。因此，抗病毒中药具有副作用小而具有广阔的应用前景，此新药的开发成功将产生重大的社会效益。
·[0006]中国药典1977年版中规定金莲花为毛茛科植物金莲花chinensisBunge的干燥花。夏季花开时采摘，除去杂质，阴干。苦，寒。归肝经。具有清热散风，解毒消肿，平肝明目。用于口疮喉肿，浮热牙宣，耳疼目痛，山岚瘴气，疔疮火毒，上呼吸道感染，急性肠炎，泌尿系统感染及疮疖脓肿等作用。
[0007]金莲花提取物是一种由天然植物、中药材或中药饮片金莲花提取出来的具有显著抗病毒作用的提取物。金莲花提取物中含有多种化学成分，现已发现该类提取物主要以黄酮类成分为主，包含各种类型的黄酮成分，如黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、二轻异黄酮、查尔酮等大类成分。
【发明内容】
[0008]本发明所要解决的技术问题是提供一种金莲花提取物用于治疗病毒性疾病的新用途。在临床上可以制备成用于治疗病毒性疾病的药物制剂。所述的金莲花提取物，是从毛茛科植物金莲花^>o77ii/5.chinensis Bunge的干燥花中提取出来的一大类物质。用该金莲花提取物做为药效成分来制备用于治疗病毒性疾病的药物制剂，可单独或与制药工艺中可接受的赋形剂结合，按照常规方法制成口服给药、腔道、黏膜给药、肌肉或静脉给药的药物剂型。所述金莲花提取物总黄酮含量大于50%以上。金莲花提取物在制备治疗流感病毒HlNl的药物中的应用；金莲花提取物在制备治疗呼吸道合胞病毒RSV药物中的应用；金莲花提取物在制备治疗腺病毒Adv3抑制活药物中的应用。
[0009]本发明优点是，本发明发现了中药金莲花提取物治疗病毒性疾病的药效物质，为其临床应用提供了科学依据，使金莲花提取物可做为一个天然的抗病毒剂，具有无成瘾性、用量小的特点。金莲花提取物采用体外培养法筛选实验，结果表明:在625μ g/ml的浓度时对甲型流感病毒Al的抑制率为75.6%、212.5 μ g/ml的浓度时对呼吸道合胞病毒RSV的抑制率为62.3%,39.07 μ g/ml的浓度时对腺病毒Adv3的抑制率为67.1%。金莲花提取物为一种从天然植物中提取得到的抗病毒物质，总黄酮含量在50%以上，是一种具有开发前景的抗病毒中药新药制剂。
[0010]目前临床治疗病毒性疾病以化学合成和半合成的药物为主。但是，由于半个多世纪以来化学合成和半合成抗菌、抗病毒药物的广泛使用，已诱发病菌产生了耐药性菌株，且日渐增多条件性致病菌。加之其毒副作用较大等缺点，致使该类药物尽管作为一线治疗药、但已存在诸多不足。因此，抗病毒中药具有副作用小而具有广阔的应用前景，此新药的开发成功将产生重大的社会效益。
【具体实施方式】
[0011]实施例1:金莲花提取物体外对流感病毒(HlNl)抑制活性检测 材料与方法
1.体外宿主细胞=MDCK (狗肾传代细胞)细胞。
[0012]2.病毒株:流感病毒A型(HlNl) (A3/京科/30/95)。
[0013]3.CPE法检测药物对细胞的毒性。
[0014]4.CPE法(细胞病变)检测药物对流感病毒的抑制作用。
试验过程
(I).药物的细胞毒性检测
MDCK细胞在96孔细胞培养板中培养形成单层后，加入不同浓度的药液，继续培养3天，用CPE法检测药物对MDCK细胞的毒性。
[0015](2).药物抗流感病毒作用检测
MDCK细胞在96孔细胞培养板中培养形成单层后，用100TCID50的流感病毒感染细胞，再加入无毒浓度下的系列浓度的含药培养液，继续培养3天，经CPE法确定药物对流感病毒的抑制作用。
实验结果:
实验结果表明金莲花提取物体对MDCK细胞的无毒浓度为625ug/ml，即(TC0=625ug/ml)，金莲花提取物在625ug/ml的浓度时对流感病毒A型(H1N1)的抑制率分别为75.6%。
[0016]实施例2:金莲花提取物体外对呼吸道合胞病毒(RSV)抑制活性检测 材料与方法
1.体外宿主细胞=Vero (非洲绿猴肾细胞)细胞。
[0017]2.病毒株:呼吸道合胞病毒(RSV)。
[0018]3.CPE法检测药物对细胞的毒性。[0019]4.CPE法(细胞病变)检测药物对呼吸道合胞病毒的抑制作用。
试验过程
(I).药物的细胞毒性检测
Vero细胞在96孔细胞培养板中培养形成单层后，加入不同浓度的药液，继续培养3天，用CPE法检测药物对Vero细胞的毒性。
[0020](2).药物抗呼吸道合胞病毒作用检测 Vero细胞在96孔细胞培养板中培养形成单层后，用100TCID50的呼吸道合胞病毒(RSV)感染细胞，再加入无毒浓度下的系列浓度的含药培养液，继续培养3天，经CPE法确定药物对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用。
实验结果:
实验结果表明金莲花提取物体对Vero细胞的无毒浓度为212.5ug/ml,即(TC0=625ug/ml)，金莲花提取物在212.5ug/ml的浓度时对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制率分别为62.3%。
[0021]实施例3:金莲花提取物体外对腺病毒(Adv3)抑制活性检测 材料与方法
1.体外宿主细胞=Vero (非洲绿猴肾细胞)细胞。
[0022]2.病毒株:腺病毒(Adv3)。
[0023]3.CPE法检测药物对细胞的毒性。
[0024]4.CPE法(细胞病变)检测药物对腺病毒的抑制作用。
试验过程
(I).药物的细胞毒性检测
Vero细胞在96孔细胞培养板中培养形成单层后，加入不同浓度的药液，继续培养3天，用CPE法检测药物对Vero细胞的毒性。
[0025](2).药物抗腺病毒作用检测
Vero细胞在96孔细胞培养板中培养形成单层后，用100TCID50的腺病毒(Adv3)感染细胞，再加入无毒浓度下的系列浓度的含药培养液，继续培养3天，经CPE法确定药物对腺病毒(Adv3)的抑制作用。
实验结果:
实验结果表明金莲花提取物体对Vero细胞的无毒浓度为39.07ug/ml,即(TC0=39.07ug/ml),金莲花提取物在39.07ug/ml的浓度时对腺病毒的抑制率分别为67.1%。
[0026]实施例4:
取金莲花提取物25g，加入淀粉细粉200g，用等量递增法混匀，加入滑石粉5g，硬脂酸镁2g，混匀，用85%乙醇制粒，干燥，整粒，压制成1000片，每日3次，每次2片。
[0027]实施例5:
取金莲花提取物25g，加入淀粉细粉150g，滑石粉10g，硬脂酸镁5g，混匀，制粒，干燥，装入胶囊，制成1000粒，每日3次，每次2片。
[0028]实施例6:
取金莲花提取物50g，加入微晶纤维素250g，交联聚乙烯吡咯烷酮50g，混匀，加入90乙醇制粒，干燥，整粒，加入羧甲基淀粉钠log，硬脂酸镁5g，混匀，压制成1000片，每日服用3次，每次I片。
[0029]实施例7:
取金莲花提取物50g，甘露醇150g，加注射用水2000ml，搅拌使溶解，用IM NaOH溶液调pH至9.60~10.0，搅拌使溶解，滤过，滤液按I %溶液体积量加入活性炭，在70~80°C下加热30分钟，粗滤过，管道及容器用400mL注射用水洗涤，加水到2500ml，药液经0.22 μ m无菌过滤器过滤，灌装，冻 干，压塞，轧盖，制成1000瓶，即得。
【权利要求】
1.金莲花提取物在制备治疗病毒性疾病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于:所述金莲花提取物的纯度为:金莲花提取物总黄酮含量大于50%。
3.根据权利要求1中所述的应用，其特征在于:所述的金莲花提取物，是从含有该成分的植物、中药材及中药饮片中提取出来的。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述的金莲花中药材为:毛茛科植物金莲花 Trollius chinensis Bunge 的干燥花。
5.根据权利要求1中所述的应用，其特征在于:金莲花提取物在制备治疗流感病毒HlNl的药物中的应用；金莲花提取物在制备治疗呼吸道合胞病毒RSV药物中的应用；金莲花提取物在制备治疗腺病毒Adv3抑制活药物中的应用。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于:所述金莲花提取物可以和药学上可以接受的载体或赋形剂混合制备临床上可接受的药物制剂。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于:所述的药物制剂为口服给药制剂；阴道、肛门、鼻腔、滴眼剂黏膜给药制剂；肌肉或静脉给药制剂。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于:所述的口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、缓释制剂、滴丸。
【文档编号】A61P31/14GK103623076SQ201310634976
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年12月3日 优先权日:2013年12月3日
【发明者】张国刚 申请人:沈阳药科大学