专利名称：一种从金莲花中提取荭草苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种从金莲花中提取荭草苷的方法，特别是涉及一种采用大孔树脂和 中压硅胶柱分离荭草苷的方法。
背景技术：
荭草苷，荭草素；2_(3，4-二羟基苯基)-8-BETA-D-吡喃葡萄糖基_5，7_ 二羟 基-4H-1-苯并吡喃-4-酮。分子式=C21H2tlO11；分子量448·38理化性质熔点260_285°C，可溶于水、乙醇，略溶于丙酮、正丁醇、乙酸乙酯等，不 溶于氯仿、乙醚、石油醚等非极性溶剂。荭草苷广泛存在于植物中，尤其是金莲花最高，含量高达2 %。荭草苷具有杀菌、抗 病毒作用，并具有抗氧化性。目前，荭草苷提取工艺主要是色谱分离法，部分文献中国专利(申请号200610041165) “一种乌蕨荭草苷和牡荆素提取纯化方法”，该 工艺采用反向硅胶柱分离，该方法处理量小，成本高。中国专利(申请号CN200410093126. 4) “短瓣金莲花总黄酮和几种高纯度药用物 质的制备工艺”，该种方法采用逆流色谱制备，制备量小。中国专利(申请号CN200710121800. 9) “荭草苷标准品的制备方法”，该专利采用
凝胶柱分离，制备较小。此外还有文献李德强发表的“金莲花有效成分的提取分离和药动学研究”，该文献 采用常压硅胶柱分离，周期较长。
发明内容
本发明的目的是为了克服上述现有技术的缺陷及不足，提供一种处理量较大、成 本低的荭草苷提取方法。本发明的技术解决方案是一种从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于包含以下步骤1)提取把金莲花原料粉碎加入10-20倍量80-95%乙醇溶液加热提取1_2小时， 提取2-3次，合并提取液；2)大孔树脂富集上述提取液减压回收乙醇至浸膏状加水ph3_5的酸性水溶解， 滤出不溶物，滤液加入大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用4-7BV40-60%乙醇溶 液洗脱有效成分，收集洗脱液；3)浓缩萃取将上述洗脱液加入减压浓缩，浓缩液加入乙酸乙酯萃取2-3次，得萃 取液；4)中压硅胶柱分离将上述萃取液减压回收乙酸乙酯加入硅胶拌样烘干，装入中压硅胶柱，氯仿甲醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集荭草苷高浓度流分，回收试剂，加入洗脱 剂回流溶解，冷藏结晶，结晶物真空干燥即得荭草苷。所述步骤1)中的提取温度控制在50_70°C。所述步骤2)中的酸为盐酸、硫酸或磷酸的一种，大孔树脂型号可选HZ816、DlOU SPD100.AB-8 中的一种。所述步骤4)中的中压硅胶柱为直径为10-50cm，径高比1 15_20，压力 0. 8-1. 2Mpa.，硅胶选 200-300 目硅胶。所述步骤4)中的氯仿甲醇洗脱为10_20BV氯仿甲醇(20 1_3)—氯仿甲醇 (15 4)。所述步骤4)中的结晶溶剂为氯仿甲醇(15 4)混合溶液。本发明的优点是金莲花为原料，高浓度乙醇提取减少了多糖蛋白的溶出；酸性 水分散，可除去非水溶性黄酮，利于大孔树脂富集；后段乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯用量少； 中压硅胶柱可选粒度细的硅胶分离度好，加压洗脱处理速度快。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式
具体实施例方式实施例1 金莲花粉碎，称取Ikg加入小型不锈钢提取罐，再加入10L80%乙醇加热70°C，提 取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph3的盐酸水溶液溶解充分 溶解，滤去不溶物，滤液加入700mlHZ816大孔树脂柱吸附，流速不超过lL/h，吸附结束后先 水洗至糖反应呈阴性，再用4. 9L40%乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加 入3BV乙酸乙酯萃取3次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新 硅胶1 10装入中压柱(直径为10cm，径高比1 20)，先用IOBV氯仿甲醇(20 3)洗 脱杂质，再用氯仿甲醇(15 4)荭草苷，压力控制0.8-1. 2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分 回收试剂，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干 燥得到50g荭草苷，含量98%。实施例2 金莲花粉碎，称取Ikg加入小型不锈钢提取罐，再加入10L90%乙醇加热60°C，提 取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph5的硫酸水溶液溶解充分 溶解，滤去不溶物，滤液加入800mlD101大孔树脂柱吸附，流速不超过900ml/h，吸附结束后 先水洗至糖反应呈阴性，再用4. 8L50%乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液 加入2BV乙酸乙酯萃取4次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和 新硅胶1 15装入中压柱(直径为10cm，径高比1 15)，先用15BV氯仿甲醇(10 1) 洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15 4)荭草苷，压力控制0.8-1. 2mpa.，薄层监测，收集高浓度流 分回收试剂，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压 干燥得到52. 5g荭草苷，含量98. 5%。实施例3 金莲花粉碎，称取Ikg加入小型不锈钢提取罐，再加入10L95%乙醇加热50°C，提取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇全浸膏状，加入ph4的磷酸水溶液溶解充分 溶解，滤去不溶物，滤液加入800ml SPD100大孔树脂柱吸附，流速不超过lL/h，吸附结束后 先水洗至糖反应呈阴性，再用3. 2L60%乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液 加入等体积乙酸乙酯萃取5次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再 和新硅胶1 20装入中压柱(直径为10cm，径高比1 20)，先用20BV氯仿甲醇(20 1) 洗脱杂质，再用氯仿甲醇(15 4)荭草苷，压力控制0.8-1. 2mpa.，薄层监测，收集高浓度流 分回收试剂，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压 干燥得到47g荭草苷，含量99 %。实施例4 金莲花粉碎，称取5kg加入小型不锈钢提取罐，再加入15L90%乙醇加热60°C，提 取2小时，提取2次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph5的盐酸水溶液溶解充分 溶解，滤去不溶物，滤液加入3. 5L AB-8大孔树脂柱吸附，流速不超过5L/h，吸附结束后先 水洗至糖反应呈阴性，再用21L50%乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加 入3BV乙酸乙酯萃取3次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新 硅胶1 15装入中压柱(直径为20cm，径高比1 20)，先用15BV氯仿甲醇(20 3)洗 脱杂质，再用氯仿甲醇(15 4)荭草苷，压力控制0.8-1. 2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分 回收试剂，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干 燥得到240g荭草苷，含量98. 2%。实施例5 金莲花粉碎，称取IOkg加入小型不锈钢提取罐，再加入100L85%乙醇加热60°C， 提取2小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状，加入ph4的盐酸水溶液溶解充 分溶解，滤去不溶物，滤液加入7LHZ816大孔树脂柱吸附，流速不超过7L/h，吸附结束后先 水洗至糖反应呈阴性，再用35L60%乙醇溶液洗脱荭草苷，收集洗脱液回收乙醇，浓缩液加 入2BV乙酸乙酯萃取4次，收集乙酸乙酯层回收，加入硅胶(200-300目)拌样烘干，再和新 硅胶1 :20装入中压柱(直径为30cm，径高比1 20)，先用15BV氯仿甲醇(20 3)洗脱 杂质，再用氯仿甲醇(15 4)荭草苷，压力控制0.8-1. 2mpa.，薄层监测，收集高浓度流分回 收试剂，再用氯仿甲醇(15 4)混合溶液，回流溶解冷藏结晶，滤出结晶物，真空减压干燥 得到490g荭草苷，含量98%。
权利要求
一种从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于包含以下步骤1)提取把金莲花原料粉碎加入10 20倍量80 95％乙醇溶液加热提取1 2小时，提取2 3次，合并提取液；2)大孔树脂富集上述提取液减压回收乙醇至浸膏状加水ph3 5的酸性水溶解，滤出不溶物，滤液加入大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用4 7BV40 60％乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液；3)浓缩萃取将上述洗脱液加入减压浓缩，浓缩液加入乙酸乙酯萃取2 3次，得萃取液；4)中压硅胶柱分离将上述萃取液减压回收乙酸乙酯加入硅胶拌样烘干，装入中压硅胶柱，氯仿甲醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集荭草苷高浓度流分，回收试剂，加入洗脱剂回流溶解，冷藏结晶，结晶物真空干燥即得荭草苷。
2.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤1)中的提 取温度控制在50-70°C。
3.如权利要求1所述从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤2)中的酸为 盐酸、硫酸或磷酸的一种，大孔树脂型号可选HZ816、D101、SPD100、AB-8中的一种。
4.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的 中压硅胶柱为直径为10_30cm，径高比1 15-20，压力0. 8-1. 2Mpa.，硅胶选200-300目硅 胶。
5.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的氯 仿甲醇洗脱为10-20BV氯仿甲醇(20 1-3)—氯仿甲醇(15 4)。
6.如权利要求1所述的从金莲花中提取荭草苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的结 晶溶剂为氯仿甲醇(15 4)混合溶液。
全文摘要
本发明涉及一种从金莲花中提取荭草苷的方法，工艺是以金莲花为原料，乙醇加热提取，提取液回收乙醇，浸膏加pH2-5酸性水溶解滤过，加入大孔树脂树脂柱吸附，40-60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩加乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩拌硅胶烘干装入中压硅胶柱，氯仿甲醇洗脱，洗脱液浓缩再结晶，干燥即得产品。本工艺操作简单，分离纯化周期短，处理量大，成本低，产品含量高，适合小规模工业化生产。
文档编号C07D407/04GK101973983SQ20101023574
公开日2011年2月16日 申请日期2010年7月26日 优先权日2010年7月26日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司