一种作用于FGF受体的4,6-二甲基-噁唑并[5,4-d]嘧啶-5,7（4H,6H）-二酮衍生物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种作用于FGF受体的4,6-二甲基-噁唑并[5,4-d]嘧啶-5,7(4H,6H)-二酮衍生物，本发明以1，3-二甲基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮为起始原料，用NaNO2进行亚硝化，然后用Na2S2O4还原，再与芳香醛进行Schiff碱反应，最后用SOCl2环合得目标化合物。本发明的4,6-二甲基-噁唑并[5,4-d]嘧啶-5,7(4H,6H)-二酮衍生物对实验用细胞有一定抑制作用，表现出一定的抗肿瘤活性。对于H460细胞，化合物N5a、N5g和N5k的IC50值均小于阳性对照药；对于B16F10细胞，化合物N5f、N5h、N5i和N5k的IC50值小于阳性对照药；对于A549细胞，阳性对照的IC50值偏高，化合物N5f、N5g、N5h和N5l的IC50值均小于该阳性对照药。
【专利说明】—种作用于FGF受体的4, 6- 二甲基-噁唑并[5, 4-d]嘧啶-5, 7 (4H, 6H)-二酮衍生物
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药化学【技术领域】，尤其涉及一种作用于FGF受体的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H) - 二酮衍生物。
【背景技术】
[0002]恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的常见及多发病，人类因恶性肿瘤而引起的死亡率仅次于心脑血管疾病而高居于第二位。目前其治疗方法虽有多种，但仍主要以化疗为主。传统的抗肿瘤药物作用虽强，但缺乏选择性，毒副作用也比较大，限制了其临床应用，因此人们一直希望能通过基于肿瘤信号的传导机制来研发药物。
[0003]蛋白激酶是一种磷酸转移酶，通过催化磷酸基团从ATP转移到底物蛋白的受体上而在调节代谢、基因表达、细胞生长、细胞分裂和细胞分化等方面起关键作用。在蛋白激酶家族的抗肿瘤研究中，以受体酪氨酸激酶(RTKs)为靶点的分子靶向抗肿瘤药物研发已成为当今生命科学和药物科学的热点和前沿领域。近年来通过研究人员的不断探索研究证实，抑制酪氨酸蛋白激酶可达到治疗肿瘤的目的，RTKs抑制剂的研究逐渐成为抗肿瘤药物研究的一个热点。目前，已有将近120种RTKs抑制剂药物陆续上市或进入临床试验阶段，其中大多数的抑制剂是针对表皮生长因子受体(EGFR)、人血小板衍生生长因子受体(PDGFR)、人血管内皮生长因子受体(VEGFR )等络氨酸激酶，而针对FGFR的抑制剂研究相对较少，且该类抑制剂多为多靶点的络氨酸激酶抑制剂。鉴于越来越多的报道FGFR信号通路在诱发肿瘤生长和血管增生中的作用，开展FGFR抑制剂的研究显得尤为迫切。
[0004]成纤维细胞生长因子受体(FGFRs)是一类跨膜的酪氨酸激酶型受体，它与成纤维细胞生长因子(FGFs)结合所构成的FGF/FGFR信号传递能够介导多条信号转导通路，对正常细胞和肿瘤细胞的增殖、分化以及肿瘤的生长和转移等方面均发挥重要的调节作用。许多研究报道指出，肿瘤的发生、生长和转移都与FGF/FGFR表达异常及其信号通路激活密切相关，具体表现为:1.在膀胱癌、胃癌、结肠癌、子宫内膜癌、前列腺癌、纤维瘤、横纹肌肉瘤、神经胶质瘤和黑色素瘤等多种肿瘤细胞中，均发现了 FGF/FGFR的突变或高水平的表达，最高可以超出正常值100倍以上。2.FGFR通路是促增殖信号，可促进肿瘤细胞的异常增殖。3.FGFR信号通路的激活还可以刺激血管生长。血管新生不但为肿瘤细胞提供养分和氧气，促进其生长，还为肿瘤细胞的侵袭、转移和扩散提供了物质基础。(4) FGFR还可介导广谱的抗肿瘤药物耐药性，而肿瘤细胞对化疗药物的抗药性和在转移性肿瘤治疗中化疗的有限疗效是临床上最主要的两个挑战。因此，FGFR被视为肿瘤治疗靶标之一而备受关注。
[0005]FGF作为细胞外刺激信号，通过HSPG结合到RTK胞外区，使受体蛋白形成二聚体，激活胞内区的RTK活性区发生自身磷酸化，然后诱发PLC-gamma途径、P-1-3K-AKT-PKB途径、Ras2/Raf/MAPK途径发挥一系列生理病理作用。其中Ras2/Raf/MAPK途径中活化的MAP激酶(包括ERKs、p38和JNKs)进入细胞核，使多种基因调节蛋白磷酸化，从而影响基因的合成、转录等过程。对于肿瘤细胞主要是使细胞周期素的基因转录增加，细胞周期素依赖性蛋白激酶被激活，激活后的细胞周期素依赖性蛋白激酶再激活细胞周期前进基因，导致细胞周期缩短、增殖加速，从而诱发肿瘤的形成。
[0006]基于FGFR为靶点的抑制剂大体可以分为两类:即胞外阻断FGF与FGFR结合的抑制剂和胞内信号转导抑制剂。其中胞外抑制剂主要分为多阴离子抑制剂，糖类抑制剂和肽类抑制剂。胞内抑制剂的研究中，基于活性区域的ATP磷酸化靶点研究尤为活跃。目前已有多种重要的小分子FGFR-1抑制剂:如吲哚类的如SU4984和SU5402;吡啶类如HH73074以及吲哚酮类的Sunitinib。SU4984和SU5402抑制FGFRl激酶活性的IC5tl值为10-20 μ Μ。TO173074是目前唯一合成的选择性FGFR抑制剂，其对FGFRl抑制的IC5tl值为纳摩尔级。另外，辉瑞公司研发的吲哚酮类FGFR抑制剂Sunitinib以获得FDA批准上市，该药物也是一
种多靶点的络氨酸激酶抑制剂。
[0007]
【权利要求】
1.一种作用于FGF受体的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物的化学结构如下:
2.如权利要求1所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物是2-[4-(苄氧基)-苯基]-4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮，化学结构如下:
3.如权利要求1所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物是2-(3-1Η-吲哚基)-4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮，化学结构如下:
4.如权利要求1所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物是2-[1- (2-羟基)萘基)]-4，6_ 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮，化学结构如下:
5.一种制备如权利要求2所述的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7(4H, 6H)- 二酮衍生物的方法，其特征在于:所述方法的具体步骤如下: (1)以每5gl，3-二甲基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)_三酮加入140ml乙酸和水的混合液的比例，在75°C下加热30min至反应混合物匀质，将温度降低到50°C，分批加入NaN024.0g,加入完毕后，冷却至室温，并搅拌lh，得到沉淀物，过滤，水洗，抽滤，干燥，得1，3- 二甲基-5-亚硝基嘧啶-2,4,6 (1H，3H，5H)-三酮； (2)将每0.01moll，3-二甲基-5-亚硝基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮加入40ml 14.5%NH40H的比例，在70°C下搅拌30min，直至混合物匀质，将温度将至50°C，分批加Λ 1，3-二甲基-5-亚硝基嘧啶-2，4，6 (1Η，3Η，5Η)-三酮物质的量2倍的Na2S2O4,并继续搅拌30min，旋转蒸发旋出氨水，析出固体，冰箱冷却，抽干，即得I，3- 二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_ 三酮； (3)将1，3_二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮和4-苄氧基苯甲醛以1:1的比例，每毫摩尔加入15ml无水乙醇中，在80°C下搅拌反应3h后于冰箱冷却，抽滤，水洗，干燥即得中间体I，3-二甲基-5-亚胺基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮； (4)每毫摩尔1，3_二甲基-5-亚胺基嘧啶-2，4，6(1札3!1，5!0-三酮加入1.5ml重蒸后二氯亚砜，于60°C搅拌lh，旋转蒸发旋出二氯亚砜，加少许水溶解，用氨水调PH至7，静置，抽滤，即得2-[4_ (苄氧基)_苯基]-4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于:步骤(1)中，乙酸和水的混合液中乙酸与水的体积比为1:1。
7.一种制备如权利要求3所述的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7(4H, 6H)- 二酮衍生物的方法，其特征在于:所述方法的具体步骤如下: (1)以每5gl，3-二甲基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)_三酮加入140ml乙酸和水的混合液的比例，在75°C下加热30min至反应混合物匀质，将温度降低到50°C，分批加入NaN024.0g,加入完毕后，冷却至室温，并搅拌lh，得到沉淀物，过滤，水洗，抽滤，干燥，得1，3- 二甲基-5-亚硝基嘧啶-2,4,6 (1H，3H，5H)-三酮； (2)将 每0.01moll，3-二甲基-5-亚硝基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮加入40ml 14.5%NH40H的比例，在70°C下搅拌30min，直至混合物匀质，将温度将至50°C，分批加入I，3-二甲基-5-亚硝基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮物质的量2倍Na2S2O4,并继续搅拌30min，旋转蒸发旋出氨水，析出固体，冰箱冷却，抽干，即得1，3-二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_ 三酮； (3)将1，3_二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮和4-苄氧基苯甲醛以1:1的比例，每毫摩尔加入15ml无水乙醇中，在80°C下搅拌反应3h后于冰箱冷却，抽滤，水洗，干燥即得中间体I，3-二甲基-5-亚胺基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮； (4)每毫摩尔1，3_二甲基-5-亚胺基嘧啶-2，4，6(1札3!1，5!0-三酮加入1.5ml重蒸后二氯亚砜，于60°C搅拌lh，旋转蒸发旋出二氯亚砜，加少许水溶解，用氨水调PH至7，静置，抽滤，即得2-[4_ (苄氧基)_苯基]-4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于:步骤(1)中，乙酸和水的混合液中乙酸与水的体积比为1:1。
9.如权利要求1-4任一项所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7(4H, 6H)- 二酮衍生物在治疗肿瘤中的用途。
【文档编号】A61P35/00GK103880861SQ201410060513
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2014年2月21日 优先权日:2014年2月21日
【发明者】叶发青, 郭平, 谢自新, 刘剑敏, 王跃武, 宋晓琴, 陈梁芳 申请人:温州医科大学