一种抗动脉粥样硬化的药物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种抗动脉粥样硬化的药物及其制备方法。药物由以下成分组成：按重量计，普洱茶20-30份，山楂20-30份，白菊花10-20份，陈皮10-20份，乌梅10-20份。药物的制备方法为：步骤A：按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅；步骤B：提取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅中的有效成分后，制成粉剂、丸剂或汤剂等。不仅具有较好的抗As作用，可以改善血脂代谢紊乱、血小板异常状态、胰岛素异常和异常增高的DNA甲基化水平，可以降低患者体重，而且所用的药材均采用常用食材，没有毒副作用和不良反应。
【专利说明】一种抗动脉粥样硬化的药物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药领域，具体而言，涉及一种抗动脉粥样硬化的药物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 动脉粥样硬化（Atherosclerosis，As)，作为心脑血管疾病的共同病理基础，长期 以来始终是心血管病研宄领域的重点和热点之一，As也是心血管疾病致残致死的主要原 因。因此，预防As对于心血管疾病患者的治疗及远期预后的改善至关重要。此外，As患者 常伴有血小板活性异常和胰岛素水平异常。血栓素 A2 (thromboxane，TXA2)是前列腺素中 的一种，由血小板产生，具有血小板凝聚及血管收缩作用，与前列腺素 I2(PGI2)作用相反， 两者动态平衡以维持血管收缩功能及血小板聚集作用。血栓素 A2水平异常见于动脉粥样 硬化、心绞痛、冠心病、糖尿病、高脂血症等，TXA2/PGI2比值升高易于导致血小板聚集、血栓 形成，促使动脉粥样硬化和冠心病。
[0003] 而由于生活方式尤其是饮食方式的改变，导致患者出现胰岛素抵抗，常出现肥胖、 胰岛素水平异常和高脂血症等现象，即代谢综合征，而目前具有综合调整血脂、改善体重、 改善胰岛素水平和血小板状态的药物并不多见，仅有的药物（例如，阿托伐他汀钙）都有毒 副作用，且常伴有不良反应；所以研发一种毒副作用小，安全可靠的，并且从多重角度预防 和改善As的药物具有广阔的市场。
[0004] 有鉴于此，特提出本发明。
【发明内容】
[0005] 本发明的第一目的在于提供一种抗动脉粥样硬化的药物，所述的药物不仅具有较 好的抗As作用，可以改善血脂代谢紊乱、血小板异常状态、胰岛素异常和异常增高的DNA 甲基化水平，可以降低患者体重，而且所用的药材均采用常用食材，没有毒副作用和不良反 应。
[0006] 本发明的第二目的在于提供一种所述的抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，该方 法简单，有效成分提取率高。
[0007] 为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
[0008] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0009] 按重量计，普洱茶20-30份，山楂20-30份，白菊花10-20份，陈皮10-20份，乌梅 10-20 份。
[0010] 上述药物选用普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅五种常见的茶饮食材，以特定的 比例组合而成，各药材的功效发生协同效应，产生抗动脉粥样硬化的显著功效。同时，由于 均选用食材，因此该药物无毒副作用，无不良反应。
[0011] 其中，普洱茶温和，具有暖胃、减肥、降脂、防止动脉硬化、防止冠心病、降血压之功 效；山楂具有开胃消食、活血化瘀之功效，可强心、降血脂、降血压，适用于动脉粥样硬化和 冠心病患者；白菊花性凉，味甘苦，具有疏风清热、明目解毒的功效，可调整血脂；陈皮理气 开胃、燥湿化痰、可减肥降脂。乌梅敛肺、涩肠、生津、安蛔，可改善血脂和血压。
[0012] 另外，由于长期服用本发明的药物，并不会产生毒副作用，反而对身体有保健作 用，改善健康状态，因此，饮用人群更广泛。
[0013] 经试验证明，上述药物对As有显著疗效，能显著降低血脂水平和As指数，显著降 低TXA2/PGI2比值，显著降低体重和血清胰岛素水平，以及血清DNA甲基化水平。
[0014] 进一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-20份，陈皮10-20份，乌梅 10-20 份。
[0015] 进一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-15份，陈皮10-20份，乌梅 10-20 份。
[0016] 进一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-15份，陈皮15-20份，乌梅 10-20 份。
[0017] 进一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-15份，陈皮15-20份，乌梅 15-20 份。
[0018] 进一步地，普洱茶25份，山楂25份，白菊花15份，陈皮15份，乌梅15份。
[0019] 进一步地，山楂为生山楂，和/或，普洱茶为熟普洱，和/或，白菊花为杭白菊，和/ 或，乌梅为制乌梅。采用这些优异品种的茶叶制成的药物的口味更具浓郁的茶香味。
[0020] 上述抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，包括下列步骤：
[0021] 步骤A :按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅；
[0022] 步骤B :提取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅中的有效成分后，制成中药制剂。
[0023] 上述制备方法中，提取方法根据中药制剂（粉剂、丸剂、汤剂等）的类型有所不同。
[0024] 其中，优选的制剂类型为汤剂，即方便饮用，又能以茶饮料的形式扩大消费者群。
[0025] 在提取有效成分时，即可采用药物领域常规的提取方法，也可以采用以下经过创 新改进的提取方法：
[0026] 将山楂、白菊花、陈皮和乌梅混合，再加入9. 5-10. 5倍量的水，进行煎煮，得到第 一煎液和药渣；
[0027] 向所述药渣中加入6-7倍量的水，进行煎煮，得到第二煎液；
[0028] 合并所述第一煎液和所述第二煎液后，加入普洱茶，在90-100°C下浸泡8-12min， 再过滤，得到药液；
[0029] 将所述药液浓缩，得到汤剂。
[0030] 利用该方法既可以提高有效成分的提取率，有不会发生普洱茶煮沸时间过久易伤 及脾胃的问题。
[0031] 进一步地，将所述药液浓缩至原体积的1/4?1/5。浓缩至该程度后，药物既有浓 香、香甜的口味，又有较高的生物利用度。
[0032] 进一步地，在浓缩之后还可以加入白糖、冰糖或蜂蜜，以增加药物的甜味，改善药 物的适口度。
[0033] 与现有技术相比，本发明的有益效果为：
[0034] (1)对动脉粥样硬化（As)有明显疗效，并且能够综合调整As伴随的各种异常指 标，例如，降低血脂水平，降低TXA2/PGI2比值，降低超长体重，改善胰岛素水平，降低血清 DNA甲基化水平。
[0035] (2)无毒副作用和不良反应，安全性高。
[0036] (3)原料均为常见食材，来源广泛，原料成本低。
[0037] (4)制备方法简单，生产成本低。
[0038] (5)药物的生物利用度高。
[0039] (6)制剂类型可选择汤剂，口感类似凉茶，具有茶的浓香味，避免了服用者对药物 的抵触情，扩大了消费人群。
[0040] (7)长期饮用无不良反应，反而具有强身健体的效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0041] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0042] 图1为实验例中尚脂喂养12周后ApoE Z小鼠主动脉出现典型的As斑块图；
[0043] 图2为实验例中给药后各组小鼠血脂水平的比较；
[0044] 图3为实验例中给药后各组小鼠动脉粥样硬化指数（Al)的比较；
[0045] 图4为实验例中IPP图像分析后各组小鼠校正后主动脉斑块面积比较；
[0046] 图5为实验例中茶饮料对高脂喂养12周ApoE+小鼠主动脉斑块内细胞外脂质成 分的影响；
[0047] 图6为实验例中IPP图像分析后各组小鼠校正后主动脉斑块内胶原成分的比较；
[0048] 图7为实验例中HPLC法检测各组小鼠血清DNA甲基化水平；
[0049] 图8为实验例中ELISA法检测各组小鼠血清DNMT水平；
[0050] 图9为实验例中茶饮料对高脂喂养12周ApoE+小鼠血清胰岛素水平的影响；
[0051] 图10为实验例中ELISA法检测各组小鼠血清TXAJP PGI2水平；
[0052] 图11为实验例中间接换算得到的各组小鼠血清TXA2/PGI2比值。
【具体实施方式】
[0053] 下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会 理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体 条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为 可以通过市售购买获得的常规产品。
[0054] 实施例1
[0055] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0056] 按重量计，普洱茶20份，山楂20份，白菊花10份，陈皮10份，乌梅10份。
[0057] 实施例2
[0058] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0059] 按重量计，普洱茶22份，山楂21份，白菊花11份，陈皮11份，乌梅11份。
[0060] 实施例3
[0061] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0062] 按重量计，普洱茶24份，山楂23份，白菊花13份，陈皮13份，乌梅14份。
[0063] 实施例4
[0064] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0065] 按重量计，普洱茶25份，山楂24份，白菊花14份，陈皮14份，乌梅15份。
[0066] 实施例5
[0067] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0068] 按重量计，普洱茶26份，山楂22份，白菊花13份，陈皮15份，乌梅15份。
[0069] 实施例6
[0070] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0071] 按重量计，普洱茶28份，山楂24份，白菊花15份，陈皮16份，乌梅16份。
[0072] 实施例7
[0073] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0074] 按重量计，普洱茶30份，山楂26份，白菊花16份，陈皮15份，乌梅15份。
[0075] 实施例8
[0076] -种抗动脉粥样硬化的药物，由以下成分组成：
[0077] 按重量计，普洱茶25份，山楂25份，白菊花15份，陈皮15份，乌梅15份。
[0078] 实施例9
[0079] 抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，包括下列步骤：
[0080] 按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅，分别磨粉，再混合、过筛，得到粉 剂。
[0081] 该粉剂可以冲泡服用。
[0082] 实施例10
[0083] 抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，包括下列步骤：
[0084] 按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅，分别磨粉，再混合、过筛；再以面 糊为粘合剂，经过起膜、成丸、盖面、干燥、选丸制成丸剂。
[0085] 该丸剂可直接服用。
[0086] 实施例11
[0087] 抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，包括下列步骤：
[0088] 将山楂、白菊花、陈皮和乌梅混合，再加入10倍量的水，进行煎煮，得到第一煎液 和药渣；
[0089] 向所述药渣中加入6-7倍量的水，进行煎煮，得到第二煎液；
[0090] 合并所述第一煎液和所述第二煎液后，加入普洱茶，在90-100°C下浸泡lOmin，再 过滤，得到药液；
[0091] 将所述药液浓缩至原体积的1/5,得到汤剂。
[0092] 该汤剂可直接服用。
[0093] 为详细说明本发明的技术效果，以下提供了具体的动物试验例。
[0094] 实验方法
[0095] 1.实验动物及处理
[0096] ApoE^小鼠（C57BL/6J家系），鼠龄6-8周，体重18-20g。饲以含脂肪21 % (wt/ wt)、胆固醇0. 15%的西方类型膳食饲料，然后在喂养的第6周开始给予药物干预，6周后处 死，眶下静脉丛取血，保留血清，无菌条件下取心脏，心脏用4%多聚甲醛固定。
[0097] 2.药物来源、成分
[0098] 阿托伐他汀钙，商品名立普妥，上海辉瑞制药公司，批号H20051408。配方采用实施 例8,煎煮方法如下：
[0099] 将茶饮料（普洱茶除外）分别浸泡于不锈钢锅中，按10g/100ml的比例加入自来 水（液面最终至少超过药物2-3cm)，浸泡Ih ;将电磁炉为温度设置在180°C，使药液迅速 煮沸，本过程大概需要IOmin ;待药液煮沸后5min将温度降至130°C，保持药液微沸状态 30min-lh，至药液量大致100-150ml时倒出第一煎药液；再次添水，本次添水量大致为第一 次所加水量之三分之二，煎煮方法同第一煎；将两次所煎药液混匀，加入普洱茶，电磁炉温 度设置在l〇〇°C，浸泡lOmin，然后将普洱茶滤出，然后对其浓缩，温度设置在130°C ;目测浓 缩量，待药液冷却后用量筒测其体积，至体积为67±5ml时停止浓缩，本次浓缩完成。将浓 缩液倒入IOOml试剂瓶中，密封保存于4°C冰箱保存，于瓶身注明熬制日期备用。
[0100] 3.实验试剂
[0101] 血清总胆固醇（TC)和血清甘油三酯（TG)氧化酶法测定试剂盒；血清低密度脂蛋 白胆固醇（LDL-C)测定试剂盒和血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C)测定试剂盒。高效液 相色谱法（HPLC)法测定小鼠血清DNA甲基化水平，和双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试 验（ELISA)法检测小鼠血清DNA甲基化转移酶（DNMT)试剂盒。VG染色试剂盒。油红0染 色试剂盒。小鼠（Mouse)胰岛素（INS) ELISA检测试剂盒；小鼠（Mouse)血栓素 A2(TX-A2) ELISA检测试剂盒；小鼠（Mouse)儿茶酚胺（CA) ELISA检测试剂盒；小鼠（Mouse)前列环素 (PGI2) ELISA检测试剂盒。
[0102] 4.实验分组及给药剂量
[0103] ?模型组：η = 10。
[0104] ?立普妥（阳性对照组）：3mg/kg，η = 10。
[0105] ?茶饮料组：405. 5mg/kg, η = 10。
[0106] 所有给药组剂量根据成人每日用药临床推荐的常用剂量，并按成人与小鼠的给药 剂量换算系数折算成小鼠用量灌胃给药，每日1次，灌胃给药6周。模型组给予等量的生理 盐水。另设正常组同品系小鼠6只。
[0107] 5.检测方法与指标
[0108] 5. 1采用氧化酶法和直接法检测茶饮料对高脂喂养12周Ap0E+小鼠血清TC、TG、 LDL-C和HDL-C水平以及对动脉粥样硬化指数（Al)的影响。
[0109] 动脉粥样硬化指数（atheroslcerosis index, Al) = (TC-HDL-C)/HDL-C
[0110] 5. 2采用ELISA法检测茶饮料对高脂喂养12周Ap0E+小鼠血清胰岛素水平、血清 血栓素 A2(TXA2)、前列环素 I2(PGI2)和DNA甲基化转移酶（DNMT)水平的影响。
[0111] 5. 3采用高效液相色谱法（HPLC)法检测茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠血 清DNA甲基化水平的影响。
[0112] 5. 4采用HE病理染色和IPP图像软件分析测量小鼠主动脉As斑块面积，具体如 下：
[0113] ?测量管腔面积（lumen area, LA, mm2)、内弹力膜围绕面积（internal elastic laminal area. IELa, mm2)，并计算斑块面积、校正后斑块面积。公式换算如下：
[0114] ?斑块面积（plaque area, PA, mm2) = IELa - LA
[0115] ?校正后斑块面积=PA/IELa
[0116] 5. 5采用油红O染色和IPP图片分析软件测量小鼠主动脉斑块内脂质成分面积。
[0117] ?斑块内脂质成分面积（lipid area, LA, mm2)
[0118] ?斑块面积（plaque area, PA, mm2)
[0119] ?校正后斑块内脂质面积=LA/PA
[0120] 5. 6采用VG染色和IPP图像软件分析观察茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠 主动脉As斑块内胶原成分的影响。
[0121] ?斑块内胶原成分面积（collagen area, CA, mm2)
[0122] ?斑块面积（plaque area, PA, mm2)
[0123] ?校正后斑块内胶原面积=CA/PA
[0124] 6.统计学方法
[0125] 所有数据均用；士S形式表示，采用SPSS11·5软件，组间比较用单因素 AN0VA* 析。
[0126] 实验结果
[0127] 注：所有结果的附图中，表示与模型组相比，P〈0. 01 表示与模型组相比， P〈0.05。
[0128] 1.高脂喂养12周后，ApoE-/-小鼠主动脉出现典型的As斑块
[0129] 与正常组同品系C57小鼠（图1A)相比，高脂饲料喂养12周后的ApoE-/-小鼠主 动脉管壁上可观察到典型的富含胆固醇酯的As斑块（图1B，黑箭头所示），斑块有成熟的 纤维帽覆盖。说明复制As模型成功。
[0130] 2.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠血清血脂水平和动脉粥样硬化指数的影 响
[0131] 采血后，室温放置1小时后，3500转离心15分钟后，血液分层。各组小鼠上清液数 码相机拍照后可见：模型组小鼠上清液呈白色乳糜状，而茶饮料组小鼠血清与模型组相比， 比较清澈，透明度较高。
[0132] 检测各组小鼠血清血脂，结果显示：与模型组相比，茶饮料组和立普妥组小鼠血清 TC和TG水平明显降低，小鼠血清HDL-C水平明显升高，具有统计学差异（P〈0. 01)(图2)。 至于间接换算的动脉粥样硬化指数AI，与模型组相比，茶饮料组和立普妥组小鼠 AI均显著 降低（P〈0. 01)(图3)。两给药组之间数据无显著差异（P > 0. 05)。
[0133] 3.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠校正后主动脉斑块面积的影响
[0134] 药物干预6周后，经HE染色和IPP图像软件分析结果显示：与模型组相比，立普妥 组和茶饮料组小鼠的校正后主动脉As斑块面积显著降低（P〈0. 05)，两给药组之间无显著 差异（Ρ>0· 05)(图 4)。
[0135] 4.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠主动脉斑块内细胞外脂质成分的影响
[0136] 药物干预6周后，经油红0染色和IPP图像软件分析结果显示：与模型组相比，立 普妥组和茶饮料组的校正后主动脉As斑块内细胞外脂质成分显著降低（P〈0. 01)，两给药 组之间无显著差异（Ρ>〇· 05)(图5)。
[0137] 5.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠主动脉斑块内胶原成分的影响
[0138] 药物干预6周后，经VG染色和IPP图像软件分析结果显示：与模型组相比，立普妥 组和茶饮料组的校正后主动脉As斑块胶原成分显著降低（P〈0. 01)，两给药组之间无显著 差异（Ρ>0· 05)(图 6)。
[0139] 6.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠血清DNA甲基化水平和DNMT水平的影响
[0140] 药物干预6周后，处死米血后经HPLC法检测小鼠血清DNA甲基化水平和米用 ELISA法检测血清DNMT水平。结果显示：与模型组相比，立普妥组和茶饮料组小鼠血清DNA 甲基化水平及DNMT水平显著降低（P〈0. 01)，两给药组之间无显著差异（P>0. 05)(图7和 8) 〇
[0141] 7.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠体重的影响
[0142] 药物干预6周后，处死前称量小鼠体重，结果显示：与模型组相比，茶饮料组小鼠 体重明显降低，并且优于阳性对照药立普妥组（表1)。
[0143] 表1.茶饮料对高脂喂养12周ApoE-/-小鼠体重的影响（克，均数土标准差）
[0144]
【权利要求】
1. 一种抗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，由以下成分组成： 按重量计，普洱茶20-30份，山楂20-30份，白菊花10-20份，陈皮10-20份，乌梅10-20 份。
2. 根据权利要求1所述的抗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-20份，陈皮10-20份，乌梅10-20份。
3. 根据权利要求1所述的抗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-15份，陈皮10-20份，乌梅10-20份。
4. 根据权利要求1所述的抗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-15份，陈皮15-20份，乌梅10-20份。
5. 根据权利要求1所述的抗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-15份，陈皮15-20份，乌梅15-20份。
6. 根据权利要求1所述的抗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，普洱茶25份，山楂25 份，白菊花15份，陈皮15份，乌梅15份。
7. 权利要求1所述的抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤： 步骤A :按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅； 步骤B :提取普洱茶、山楂、白菊花、陈皮和乌梅中的有效成分后，制成中药制剂。
8. 根据权利要求7所述的抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，其特征在于，所述中药 制剂为粉剂、丸剂、汤剂中的一种。
9. 根据权利要求7所述的抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，其特征在于，所述步骤B 的方法为： 将山楂、白菊花、陈皮和乌梅混合，再加入9. 5-10. 5倍量的水，进行煎煮，得到第一煎 液和药渣； 向所述药渣中加入6-7倍量的水，进行煎煮，得到第二煎液； 合并所述第一煎液和所述第二煎液后，加入普洱茶，在90-KKTC下浸泡8-12min，再过 滤，得到药液； 将所述药液浓缩，得到汤剂。
10. 根据权利要求9所述的抗动脉粥样硬化的药物的制备方法，其特征在于，将所述药 液浓缩至原体积的1/4?1/5。
【文档编号】A61K36/82GK104491186SQ201510004984
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2015年1月6日 优先权日:2015年1月6日
【发明者】周明学, 康群甫, 刘卫红, 刘红旭, 李萍, 王宁 申请人:北京市中医研究所