抗癌组合物的制作方法

本发明涉及已知化合物的新用途，尤其是涉及其在制备抗肿瘤的药物中的用途。

背景技术：

1,3-二羟基丙酮，英文名1,3-dihydroxyaeetone或dihydroxyacetone，简写为DHA，是最简单的三碳酮糖，外观是白色或类白色粉末状结晶，具有甜、凉的味道，易吸湿并分解。一般状态下是二聚体(1,4-Dioxane)的结晶，能缓慢地溶于1份水中或15份乙醇中，微溶于乙醚，但经溶解或加热则变为单体，其单体易溶于水、乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂，熔点为75～80℃，水溶性>250g·L^-1(20℃)，在pH为6.0时稳定，是一种重要的化工、生化原料，医药、农药合成中间体和多功能食品添加剂，用途十分广泛。

二羟基丙酮有保湿、防晒和防紫外线辐射的作用，能阻止皮肤水分的过度蒸发，可以用作化妆品的配方原料，尤其作为防晒霜有特殊效果。二羟基丙酮是糖代谢的中间产物，在糖代谢过程中起着重要作用，具有降低猪体脂肪的作用，提高瘦肉率。补充二羟基丙酮能够提高机体代谢率和脂肪酸氧化，可潜在地有效燃烧脂肪而降低体脂，因而具有减肥作用，并减少相关疾病的发病率，也可以改善胰岛素敏感性和降低高胆固醇膳食所致的血浆胆固醇水平，长期补充可使血糖利用率增加而节省肌糖元，对运动员则可以提高有氧耐力成绩。

二羟基丙酮(DHA)用途虽然广泛，但目前没有关于其单独或联合用药在抗肿瘤方面效果的报道。

顺铂，化学名为顺式二氨基二氯络铂，属细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细胞的DNA复制过程，并损伤其细胞膜上结构， 有较强的广谱抗癌作用。但其副作用大，临床表现为骨髓移植、白细胞减少，强烈的胃肠道反应、恶心呕吐腹泻等，不可逆的肾脏毒性和肾衰竭，神经毒性，过敏反应，电解质紊乱等。虽然顺铂有如此强烈的毒性，但是由于其确切的广谱抑瘤作用，目前仍是临床治疗实体瘤的一线用药。

然而临床不可能通过一味加大顺铂用量来增强疗效，故建立顺铂的联合用药方案、可以在不增加其毒性的情况下显著增强抑瘤效果，一直是肿瘤医学研究的重要课题。

技术实现要素：

为了解决上述至少一个技术问题，本发明提供了二羟基丙酮和顺铂联合用药在抗肿瘤方面的应用。

根据本发明的一个方面，提供了一种抗肿瘤的药物组合物，其有效成分包括二羟基丙酮和顺铂。

根据本发明的另一方面，提供了一种抗肿瘤的药物联合，是由二羟基丙酮和顺铂组成。

根据本发明的实施方式之一，药物联合中二羟基丙酮可以呈口服制剂形式，顺铂可以呈注射剂形式。

根据本发明的再一方面，提供了二羟基丙酮在制备药物中的用途，所述药物用于抗肿瘤，为受试者同时给药二羟基丙酮和顺铂。给药方式可以按照其各自常规的给药途径、用量和频次。

根据本发明，还提供了二羟基丙酮和顺铂的组合在制备药物中的用途，所述药物用于抗肿瘤。

本发明还提供了一种用于抗肿瘤的药盒，其中包括二羟基丙酮和顺铂。

根据本发明的实施方式之一，药盒中二羟基丙酮和顺铂被设置在不同的容器中。

根据本发明的另一实施方式，二羟基丙酮呈口服制剂形式，顺铂呈注射剂形式。

根据本发明的一种实施方式，药盒中二羟基丙酮和顺铂的重量比为3375～4125:1。优选地，二羟基丙酮和顺铂的重量比为3750:1。

本发明还提供了二羟基丙酮和顺铂的组合在制备药盒中的用途，所述 药盒用于抗肿瘤。

本发明的技术效果是通过实验所证明的：

1试验材料

1.1供试品

名称：二羟基丙酮(DHA)固体粉末

提供单位：由苏州亚宝药物研发有限公司提供

阳性对照：注射用顺铂(Cisplatin)，批号：2WA2A1408055A，生产厂家:齐鲁制药有限公司，规格：20mg/瓶

1.2试验动物

种属、品系和等级：Balb/c-nude裸小鼠，SPF级

来源：上海灵畅生物科技有限公司

许可证号：SCXK(沪)2013-00185

动物合格证号:2013001812253

体重：16-18g(到达时)

性别：雄性

2试验方案

裸鼠皮下接种H460细胞(人大细胞肺癌细胞株)，待肿瘤长至体积100mm³左右时，从70只裸鼠中选出36只肿瘤体积相近、形状较好的裸鼠，分成6组，每组6只动物；

DHA组：p.o.，给药体积为0.1mL/10g，bid，共三周；

DHA+Cisplatin组：二羟基丙酮(DHA)：p.o.，给药体积为0.1mL/10g，bid；Cisplatin:4mg/kg，注射体积0.1mL/10g，i.p，每5天给药一次，共三周；

Cisplatin组：4mg/kg，注射体积0.1mL/10g，i.p，每5天给药一次，共三周；

空白组：0.9％氯化钠注射液，给药方式同DHA组。

3实验方法

3.1接种

3.1.1复苏并扩增H460细胞；

3.1.2待扩增到足够的细胞，收集细胞，用不含血清的1640培养基配成浓度为2×10⁷cell/mL的细胞悬液；

3.1.3裸鼠背部右侧皮下接种，0.1mL/只，即每只裸鼠接种细胞数为2×10⁶；

3.1.4共接种70只裸鼠，接种后观察出瘤情况和肿瘤大小。

3.2分组给药

3.2.1待肿瘤长至体积100mm³左右时，从70只裸鼠中选出36只肿瘤体积相近、形状较好的裸鼠，分成6组，每组各6只。

3.2.2分组

同“2试验方案”

3.3药物配制

DHA：称取固体粉末15.0g置于100mL容量瓶中，用5％葡萄糖注射液定容至刻度线，边超声边摇晃至完全溶解。未使用时4℃冷藏。

DHA+Cisplatin:称取固体粉末二羟基丙酮15.0g置于100mL容量瓶中,用5％葡萄糖注射液定容至刻度线，边超声边摇晃至完全溶解。量取0.6mg/mL顺铂溶液4.0mL加2.0mL生理盐水，配制成0.4mg/mL(4mg/kg)顺铂溶液，未使用时4℃冷藏。

所有样品每三天配置一次。

3.4测量

从给药第1天起，每周测量3次肿瘤体积和体重。第22天处死裸鼠，取出肿瘤称重、拍照，最后计算抑瘤率。

3.5评价指标

肿瘤体积变化；动物体重变化；最后肿瘤重量。

4检测指标及计算方法

4.1肿瘤体积(tumor volume,TV)

计算公式为：TV＝1/2×a×b²，其中a、b分别表示长、宽。

4.2相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)

计算公式为：RTV＝TV_t/TV₁，其中TV₁为分笼给药时(即d₁)肿瘤体积，TV_t为每一次测量时的肿瘤体积。

4.3相对肿瘤增殖率T/C(％)

计算公式为：

T_RTV：治疗组RTV；C_RTV：空白对照组RTV。

4.4瘤重抑瘤率IR(％)

计算公式为：

T_TW：治疗组瘤重；C_TW：空白对照组瘤重；TW(tumor weight)：肿瘤重量。

5试验结果

具体结果见表1，表2和图1，图2及图3。

表1：动物数，体重，肿瘤体积(TV)，相对肿瘤体积(RTV)，相对肿瘤增殖率(T/C)

***P<0.01v.s.Blank(RTV)*：0.01<P<0.05v.s.Blank(RTV)

表2：瘤重和瘤重抑瘤率

*:0.01<P<0.05v.s.Blank

6结果讨论

6.1肿瘤生长情况：结果显示，各组肿瘤体积具有较好的离散度，标准偏差小于均数的1/4,空白组肿瘤生长良好，在试验终点时RTV＝(1797.4±657.6)。

6.2体重：整个试验过程中，Cisplatin组、DHA+Cisplatin，体重下降明显，其余各组增长正常。

6.3 Cisplatin组：毒性反应非常明显，表现体重明显下降，体温下降，在试验终点时体重下降约16.7％，动物状态较差；定给药计划为每5天给药一次，最终给药次数4次。Cisplatin抑瘤效果明显(P＝0.04)，最后其T/C＝60.3％，瘤重抑制率为44.6％。这也同时表明该试验体系可靠，可用于药效评价。

6.4 DHA组：无毒性反应，本次试验模型中未表现出明显抑瘤作用。

6.5 DHA+Cisplatin组：有毒性反应，表现体重下降，体温下降，在试验终点时体重下降约15.7％，数值上较单独使用Cisplatin有所减少。DHA每天给药2次，Cisplatin定给药计划为每5天给药一次，最终给药次数4次。该组抑瘤效果非常明显(P＝0.0059)，最后其T/C＝44.9％，瘤重抑制率为53.3％。

6.6小结

在此次试验中，DHA+Cisplatin组在人大细胞肺癌H460细胞移植瘤模型上抑瘤效果明显强于Cisplatin组，且不会增加化药顺铂的毒性，认为 DHA与化药顺铂联用可起到较好的抑瘤作用。

本发明附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从下面结合附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1各组相对肿瘤体积统计结果；

图2各组实验动物体重统计结果；

图3各组肿瘤重量统计结果；

图4为本发明提供的药盒示意图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能解释为对本发明的限制。

实施例1

市售二羟基丙酮(DHA)，带有甜味的白色粉末状结晶。DHA 300g，加入羟丙甲纤维素200g，常规方法制成片剂40片、密封包装。顺铂0.0792g与氯化钠0.7g，加入蒸馏水80ml，无菌包装为注射剂4支。将DHA片剂和顺铂注射剂置入同一包装盒内，常规方法包装为药盒。

实施例2

市售二羟基丙酮(DHA)312g，平均分为40份，干燥室温环境下密封包装成小袋。顺铂0.076g，平均分为4份，密封包装为小瓶。使用时分别用注射用葡萄糖溶解。DHA口服，0.13g/kg(按人体重60kg计算，下同)，一日两次，连续使用20天。顺铂静脉滴注或肌肉注射，0.317mg/kg，每5天用药一次。

实施例3

抗肿瘤的药盒如图4所示。

药盒(101)内置4个小瓶(102)，分别密封包装顺铂注射液5ml(浓 度3.98mg/ml)。另置40个密封包装袋(103)，内分别有二羟基丙酮颗粒6.75g。药盒内还配有灭菌注射器(104)和服药杯(105)。使用时，将二羟基丙酮颗粒置于服药杯(105)内，溶于适量水中，餐后口服，112.5mg/kg，一日两次。顺铂用注射器(104)肌肉注射，0.339mg/kg,每5天注射1次。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。