寡聚物和寡聚物缀合物的制作方法

技术特征：

1.适用于治疗病毒性疾病的寡聚物缀合物，其中所述寡聚物缀合物包含：

a)能够调节乙型肝炎病毒(HBV)的靶序列以治疗所述病毒性疾病的至少一个第一寡聚物区域；和

b)载体组分；

其中所述第一寡聚物区域是10-20个核苷酸长度；

其中所述载体组分是脱唾液酸糖蛋白受体(ASGP-R)靶向部分或胆固醇缀合物部分；并且

其中所述靶序列包含编码HBx(SEQ ID NO:1)或HBsAg(SEQ ID NO:2)的基因或mRNA或其天然存在的变体的至少一部分。

2.权利要求1的寡聚物缀合物，其中所述第一寡聚物区域包含在每侧上旁侧有翼的2'-脱氧核糖核苷酸缺口区，其中每个翼独立地包含一个或多个LNA单元。

3.权利要求1或2中任一项的寡聚物缀合物，其中所述ASGP-R靶向部分选自半乳糖、半乳糖胺、N-甲酰半乳糖胺、N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)、N-丙酰半乳糖胺、N-正丁酰半乳糖胺、N-异丁酰半乳糖胺或其任一种或多种的簇。

4.权利要求1-3中任一项的寡聚物缀合物，其中所述载体组分是包含2至4个末端GalNAc部分、连接每个GalNAc部分至分支点基团的PEG间隔团的GalNAc簇。

5.权利要求4的寡聚物缀合物，其中GalNAc簇是三价GalNAc，如作为Conj 1、2、1a或2a显示的那些。

6.权利要求1至5中任一项的寡聚物缀合物，其中所述载体组分是GalNAc2。

7.权利要求1至6中任一项的寡聚物缀合物，其中载体组分通过生理不稳定接头连接至第一寡聚物。

8.权利要求7的寡聚物缀合物，其中生理不稳定接头包含两个、三个、四个或五个磷酸二酯连接的DNA或RNA核苷。

9.权利要求1至8中任一项的寡聚物缀合物，其中所述靶序列选自任何一个或多个以下位置：SEQ ID NO:3的1530至1598；1264-1278和670至706。

10.权利要求1至9中任一项的寡聚物缀合物，其中所述第一寡聚物区域基于选自以下任一者或多者的核心基序：

GCGTAAAGAGAGG(SEQ ID NO:13)；

GCGTAAAGAGAGGT(SEQ ID NO:11)；

AGCGAAGTGCACACG(SEQ ID NO:20)；

AGGTGAAGCGAAGTG(SEQ ID NO:26)；

AGCGAAGTGCACACGG(SEQ ID NO:18)；

CGAACCACTGAACA(SEQ ID NO:7)；

GAACCACTGAACAAA(SEQ ID NO:4)；

CGAACCACTGAACAAA(SEQ ID NO:5)；

CGAACCACTGAACAA(SEQ ID NO:6)；

CGAACCACTGAAC(SEQ ID NO:8)

CCGCAGTATGGATCG(SEQ ID NO:9)

CGCAGTATGGATC(SEQ ID NO:10)；

CGCGTAAAGAGAGGT(SEQ ID NO:12)；

AGAAGGCACAGACGG(SEQ ID NO:14)；

GAGAAGGCACAGACGG(SEQ ID NO:15)

GAAGTGCACACGG(SEQ ID NO:16)；

GCGAAGTGCACACGG(SEQ ID NO:17)；

CGAAGTGCACACG(SEQ ID NO:19)；

AGGTGAAGCGAAGT(SEQ ID NO:27)；和

TAGTAAACTGAGCCA(SEQ ID NO:834)。

11.权利要求1至10中任一项的寡聚物缀合物，其中所述第一寡聚物区域基于选自以下任一者或多者的序列：

GCGtaaagagaGG(SEQ ID NO:303)；

GCGtaaagagaGGT(SEQ ID NO:301)；

GCGtaaagagAGG(SEQ ID NO:618)；

AGCgaagtgcacACG(SEQ ID NO:310)

AGgtgaagcgaAGTG(SEQ ID NO:668)；

AGCgaagtgcacaCGG(SEQ ID NO:308)；

CGAaccactgaACA(SEQ ID NO:297)；

CGCagtatggaTC(SEQ ID NO:300)；

AGGtgaagcgaagTGC(SEQ ID NO:315)；

AGGtgaagcgaaGTG(SEQ ID NO:316)；

GAAccactgaacAAA(SEQ ID NO:294)；

CGAaccactgaacAAA(SEQ ID NO:295)；

CGAaccactgaaCAA(SEQ ID NO:296)；

CGAaccactgaAC(SEQ ID NO:298)；

CCGcagtatggaTCG(SEQ ID NO:299)；

CGCgtaaagagaGGT(SEQ ID NO:302)；

AGAaggcacagaCGG(SEQ ID NO:304)；

GAGaaggcacagaCGG(SEQ ID NO:305)；

GAAgtgcacacGG(SEQ ID NO:306)；

GCGaagtgcacaCGG(SEQ ID NO:307)；

CGAagtgcacaCG(SEQ ID NO:309)；

GAAccactgaaCAAA(SEQ ID NO:585)；

CGAAccactgaacAAA(SEQ ID NO:588)；

GAAgtgcacaCGG(SEQ ID NO:628)；

TAGtaaactgagCCA(SEQ ID NO:678)；

CGAaccactgAAC(SEQ ID NO:600)；

AGGtgaagcgaAGT(SEQ ID NO:317)；和

CGAaccactgAACA(SEQ ID NO:597)，

其中大写字母指LNA单元并且小写字母指DNA单元。

12.权利要求11的寡聚物缀合物，其中所述第一寡聚物区域基于选自以下任一者或多者的序列：

GCGtaaagagaGG(SEQ ID NO:303)

GCGtaaagagaGGT(SEQ ID NO:301)；

GCGtaaagagAGG(SEQ ID NO:618)和

CGCgtaaagagaGGT(SEQ ID NO:302)，

其中大写字母指LNA单元并且小写字母指DNA单元。

13.权利要求11的寡聚物缀合物，其中所述第一寡聚物区域基于选自以下任一者或多者的序列：

AGCgaagtgcacACG(SEQ ID NO:310)；

AGGtgaagcgaagTGC(SEQ ID NO:315)；

AGGtgaagcgaaGTG(SEQ ID NO:316)；

GAAgtgcacaCGG(SEQ ID NO:628)；

AGgtgaagcgaAGTG(SEQ ID NO:668)；

AGCgaagtgcacaCGG(SEQ ID NO:308)；

GAAgtgcacacGG(SEQ ID NO:306)；

GCGaagtgcacaCGG(SEQ ID NO:307)；

CGAagtgcacaCG(SEQ ID NO:309)；和

AGGtgaagcgaAGT(SEQ ID NO:317)，

其中大写字母指LNA单元并且小写字母指DNA单元。

14.权利要求1至11中任一项的寡聚物缀合物，其中所述第一寡聚物区域基于选自以下任一者或多者的序列：

其中大写字母指β-D-氧代-LNA单元；小写字母指DNA单元；下标“s”指硫代磷酸酯键；上标m指含有5-甲基胞嘧啶碱基的DNA或β-D-氧代-LNA单元；GN2-C6指带有C6接头的GalNAc2载体组分。

15.寡聚物，其基于选自以下任一者或多者的核心基序：

GCGTAAAGAGAGG(SEQ ID NO:13)；

GCGTAAAGAGAGGT(SEQ ID NO:11)；

AGCGAAGTGCACACG(SEQ ID NO:20)；

AGGTGAAGCGAAGTG(SEQ ID NO:26)；

CGAACCACTGAACA(SEQ ID NO:7)；

GAACCACTGAACAAA(SEQ ID NO:4)；

CGAACCACTGAACAAA(SEQ ID NO:5)；

CGAACCACTGAACAA(SEQ ID NO:6)；

CGAACCACTGAAC(SEQ ID NO:8)

CCGCAGTATGGATCG(SEQ ID NO:9)

CGCAGTATGGATC(SEQ ID NO:10)；

CGCGTAAAGAGAGGT(SEQ ID NO:12)；

AGAAGGCACAGACGG(SEQ ID NO:14)；

GAGAAGGCACAGACGG(SEQ ID NO:15)

GAAGTGCACACGG(SEQ ID NO:16)；

GCGAAGTGCACACGG(SEQ ID NO:17)；

CGAAGTGCACACG(SEQ ID NO:19)；

AGGTGAAGCGAAGT(SEQ ID NO:27)；和

TAGTAAACTGAGCCA(SEQ ID NO:834)。

16.权利要求15的寡聚物，其基于选自以下任一者或多者的序列：

GCGtaaagagaGG(SEQ ID NO:303)；

GCGtaaagagaGGT(SEQ ID NO:301)；

GCGtaaagagAGG(SEQ ID NO:618)；

AGCgaagtgcacACG(SEQ ID NO:310)

AGgtgaagcgaAGTG(SEQ ID NO:668)；

AGCgaagtgcacaCGG(SEQ ID NO:308)；

CGAaccactgaACA(SEQ ID NO:297)；

CGCagtatggaTC(SEQ ID NO:300)；

AGGtgaagcgaagTGC(SEQ ID NO:315)；

AGGtgaagcgaaGTG(SEQ ID NO:316)；

GAAccactgaacAAA(SEQ ID NO:294)；

CGAaccactgaacAAA(SEQ ID NO:295)；

CGAaccactgaaCAA(SEQ ID NO:296)；

CGAaccactgaAC(SEQ ID NO:298)；

CCGcagtatggaTCG(SEQ ID NO:299)；

CGCgtaaagagaGGT(SEQ ID NO:302)；

AGAaggcacagaCGG(SEQ ID NO:304)；

GAGaaggcacagaCGG(SEQ ID NO:305)；

GAAgtgcacacGG(SEQ ID NO:306)；

GCGaagtgcacaCGG(SEQ ID NO:307)；

CGAagtgcacaCG(SEQ ID NO:309)；

GAAccactgaaCAAA(SEQ ID NO:585)；

CGAAccactgaacAAA(SEQ ID NO:588)；

GAAgtgcacaCGG(SEQ ID NO:628)；

TAGtaaactgagCCA(SEQ ID NO:678)；

CGAaccactgAAC(SEQ ID NO:600)；

AGGtgaagcgaAGT(SEQ ID NO:317)；和

CGAaccactgAACA(SEQ ID NO:597)，

其中大写字母指LNA单元并且小写字母指DNA单元。

17.权利要求15或16的寡聚物，其中所述寡聚物基于选自以下任一者或多者的序列：

其中大写字母指β-D-氧代-LNA单元；小写字母指DNA单元；下标“s”指硫代磷酸酯键；上标m指含有5-甲基胞嘧啶碱基的DNA或β-D-氧代-LNA单元；AM-C6是氨基-C6接头；其中5’末端基团“AM-C6 ca”是任选的。

18.药物组合物，包含根据权利要求1至14中任一项的寡聚物缀合物；或根据权利要求15至17中任一项的寡聚物和一种或多种可药用的稀释剂、载体、盐或佐剂。

19.用于治疗病毒性疾病的寡聚物缀合物，其中所述寡聚物缀合物包含：

a)能够调节乙型肝炎病毒(HBV)的靶序列、优选地HBV的HBx或HBsAg以治疗所述病毒性疾病的至少一个第一寡聚物区域；和

b)用于递送所述第一寡聚物至肝脏的载体组分。

20.用于根据权利要求19的用途的寡聚物缀合物，其中所述寡聚物缀合物是如权利要求1至12中任一项所限定的寡聚物缀合物。

21.根据权利要求19或20用途的寡聚物缀合物，其中所述寡聚物缀合物皮下施用。