本发明涉及药物组合物，具体涉及一种用于治疗肺结核的药物组合物。
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：结核病至今仍是危害我们人类健康的主要慢性传染性疾病之一。据世界卫生组织(who)2012年统计，结核分枝杆菌(mycobacterium，简称结核杆菌)每年可以引起全球约140万人死亡，全球疫情呈上升趋势；而且由于耐药性和多重耐药性菌株的不断出现，对人类构成严重的健康威胁。化学治疗虽是结核病的基本治疗手段，但仍存在结核杆菌清除率低、治疗持续时间长、结核病复发率与耐药结核发生率居高不下、化疗愈后肺功能状况下降等问题，而且化学药物毒副作用大，对胃、肝、肾等器官有不同程度的损伤。因此，开发出一种新的无毒的天然药物组合物，用于治疗结核杆菌，很有现实意义。目前，基于对壳聚糖的研究，已报道了其具有抑菌、抗肿瘤、调血脂、调节免疫和促进伤口修复等多种功能，但因其水溶性差，大大限制了在生物医药领域的应用。本发明人通过酶降解法，将壳聚糖降解成聚合度小、水溶性大的低聚壳聚糖。并且经研究发现，低聚壳聚糖具有游离氨基，可迅速与带负电荷的细胞膜结合，使细菌细胞膜通透性增强，细胞内容物外流；并进入细胞内部，与细菌dna及其内酶 系统发生絮凝反应，从而抑制细菌的生长繁殖。然而，本发明人进一步研究发现，如单独将低聚壳聚糖用于治疗肺结核时，效果并不显著，而添加其他成分制成药物组合物时，其对结核杆菌有强抑制作用，可用于治疗肺结核。因而，宜积极研究低聚壳聚糖组合物及其新适应症。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计含低聚壳聚糖的药物组合物及其临床应用。本发明提供了一种用于治疗肺结核的药物组合物。本发明的药物组合物由下列重量份配比的成份组成：低聚壳聚糖2份-8份，川贝提取物0.5份-2份，夏枯草提取物0.5份-1份，白芨提取物0.5份-1份，杜衡提取物0.25份-0.75份，风寒草提取物0.25份-0.75份，千日红提取物0.25份-0.75份。优选的，本发明的药物组合物由下列重量配比的成份组成：低聚壳聚糖5份，川贝提取物1份，夏枯草提取物0.8份，白芨提取物0.8份，杜衡提取物0.5份，风寒草提取物0.5份，千日红提取物0.5份。本发明的另一目的是提供了所述药物组合物的制备方法，该方法为：低聚壳聚糖、川贝提取物、夏枯草提取物、白芨提取物、杜衡提取物，风寒草提取物、千日红提取物与水一起混合，所述水的用量为 原料总重量的8-15倍量，优选11倍量；充分搅拌使其均匀，煮沸5min，冷却至室温(25℃±2℃)，过滤除去不溶物，即得。本发明所述药物组合物中，所述低聚壳聚糖的平均分子量为600-4000，通过以下方法制备：将壳聚糖10g用乙酸333ml溶解，壳聚糖浓度为0.03g/ml，加入木瓜蛋白酶5ml(含酶量45u)水解，水解20mim后调节ph值至6.1，50℃继续降解6h，100℃灭酶15min，离心取上清液，冷冻干燥，得低聚壳聚糖9.57g。经hplc测试，确认其为低聚壳聚糖，平均分子量为1200。所述川贝提取物、夏枯草提取物、白芨提取物、杜衡提取物、风寒草提取物、千日红提取物等原料均通过市售得到。本发明的又一目的是提供了所述药物组合物在制备治疗肺结核药物中的应用。本发明人对所述药物组合物进行了急性毒性实验，结果显示本发明的药物组合物可视为无毒。对所述药物组合物进行的抑菌实验，证实其对金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，结核杆菌均有极强的抑菌能力。体外抑菌实验显示本发明的药物组合物对结核杆菌有强抑菌能力。动物实验结果表明不同浓度的实验药物对结核杆菌均有抑制作用，75％浓度组即能全部存活。因而，本发明的药物组合物可用于制备治疗肺结核药物。本发明的药物组合物解决了临床药物毒性大且对结核杆菌抑制率差的问题，本发明药物组合物无毒性，效果显著，用于治疗肺结核 有较大的临床应用价值和社会效益。本发明制备方法简单，宜于工业化生产。附图说明图1本发明药物组合物体外抑菌实验(实施例5)具体实施方式实施例1低聚壳聚糖的制备(酶法)将壳聚糖10g(脱乙酰化度95％，水分4.85％，灰分0.5％，粘均分子量10万，购自济南海得贝海洋工程有限公司)用乙酸333ml溶解，壳聚糖浓度为0.03g/ml，加入木瓜蛋白酶5ml(含酶量45u)水解，水解20mim后调节ph值至6.1，50℃继续降解6h，100℃灭酶15min，离心取上清液，冷冻干燥，得低聚壳聚糖9.57g。经hplc测试，确认其为低聚壳聚糖，平均分子量为1200。实施例2药物组合物的制备低聚壳聚糖纯度≥98％，分子量600-4000，实施例1制得以下各成份原料均可购买得到：取200ml烧杯，加入100ml除热源蒸馏水，然后加入5g低聚壳聚糖、1g川贝提取物、0.8g夏枯草提取物、0.8g白芨提取物、0.5g杜衡提取物、0.5g风寒草提取物、0.5g千日红提取物，充分搅拌使其混合均匀，煮沸5min，冷却至室温25℃，过滤除去不溶物，即得药物组合物溶液109.1g。实施例2制得的药物组合物用于下列实验。实施例3急性毒性实验实验动物：昆明小鼠70只，体重17～22g，雌雄各半，购自上海斯莱克实验动物有限公司。动物分组：采用雌雄分别随机均衡分组法，共分为7组，每组10只，其中一组为空白对照组。实验样品：实施例2中制得。剂量确定：剂量设计为3ml/kg，10ml/kg，50ml/kg，100ml/kg。给药：一次性灌胃给药：给药前禁食3～5h，给药后禁食1～2h，禁食不禁水。采用分批给药，对照组、3ml/kg组、10ml/kg组第一批给药，给药后确定所设剂量合适，再给予50ml/kg组和100ml/kg组。给药后连续观察7天以上，随后每天上下午各观察一次，连续观察14天。详细记录各项观察指标。组别剂量(ml/kg)数量(只)存活率(％)101010023101003101010045010100510010100结论：受试物在本实验中灌胃给药剂量达到100ml/kg时(相当于5.8mg/kg的固体药物)，未出现死亡。按照急性毒性分级标准判定，本受试药物可视为无毒。实施例4体外抑菌实验(一)菌株：金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，结核杆菌。缓冲液：ph7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液。培养基：普通琼脂培养基。实验样品：实施例2制得。实验温度：20℃±1℃。实验方法：在20℃±1℃下，将实验样品作用于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、结核杆菌，作用时间为2min、5min、10min、20min，观察实验结果。实验重复3次。实验结果：结论：在20℃±1℃下，受试物对金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，结核杆菌均有极强的抑菌能力。实施例5体外抑菌实验(二)1.材料菌株：结核杆菌标准株h37rv。液体培养基：middlebrook7h9培养基干粉、营养添加剂(oadc)。受试物：实施例2所得。2.实验方法1)受试菌株的制备将受试菌株转入液体培养基，经活化后，于37℃培养2周，吸取培养菌液少许，置于4ml液体培养基中，加入直径2～3mm无菌玻璃珠10～20粒，振荡2o～30秒，静止沉淀l0～20min，吸取菌悬液上清，用液体培养基调整比浊至1个麦氏单位，相当于1×107cfu(菌落形成单位)/ml备用。2)受试药物的准备受试药物用0.22μm滤器过滤后，用液体培养基稀释，获得40％ 浓度的初始药物溶液，再用液体培养基对倍稀释，获得20％、10％、5％、2.5％、1.25％、0.625％、0.3125％、0.156％、0.078％、0.039％、0.0195％十个浓度梯度。3)操作步骤检测时，各取上述药物溶液100μl，加到96孔微孔板中，再加入104cfu/ml(由107cfu/ml稀释获得)浓度的菌液100μl。同时设置不含药的100％、10％接菌量为对照。37℃培养。同一药物稀释度设两组平行对照。观察药物对分枝杆菌的最低抑菌浓度(mic)。3.实验结果受试物检测结果，见下表。菌株mic(稀释浓度)结核杆菌≤0.0195％4.实验结论受试物在稀释浓度为0.0195％时，对结核杆菌仍然具有强抑菌能力。实验数据如图1所示。实施例6动物实验1.材料实验菌株：结核杆菌标准株h37rv(中国生物制品检定所)。受试药物：分为3组，①为实施例2所得溶液；②为①用水稀释到75％浓度所得；③为①用水稀释到50％浓度所得。培养基：罗琴氏培养基。实验动物：选用体质量(18±2g)的nih(美国国立卫生院)小鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)，每组10只，雌雄各半。细菌培养方法：将结核杆菌接种于罗琴氏培养基上，37℃培养4周。2.实验部分实验分为实验组、感染对照组和空白对照组。参照临床用药常规方案，实验组每只小鼠尾静脉注射结核杆菌菌液0.2ml，感染后即刻分别将①②③灌胃，每只0.5ml，以后每周灌胃同剂量药物2次，共1周。感染对照组和空白对照组小鼠分别尾静脉注射结核杆菌菌液和灭菌生理盐水各0.2ml，注射后即刻用0.5ml生理盐水灌胃，以后每周灌胃同剂量的生理盐水2次，共1周。各组小鼠常规饲养，观察各组小鼠的存活情况，4周后统计数据。3.实验结果实验结果见表格。4.结论实验证明，不同浓度的实验药物对结核杆菌均有抑制作用，75％浓度组即能全部存活。当前第1页12