去甲异波尔定在制备抗抑郁症药物中的用途的制作方法

本发明涉及制药技术，特别涉及去甲异波尔定在制备抗抑郁症药物中的用途。

背景技术：

抑郁症又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征。临床可见心境低落与其处境不相称，情绪的消沉可以从闷闷不乐到悲痛欲绝，自卑抑郁，甚至悲观厌世，可有自杀企图或行为。部分病例有明显的焦虑和运动性激越，严重者可出现幻觉、妄想等精神病症状。每次发作持续至少两周以上，长达数年。多数病例有反复发作的倾向，每次发作大多数可以缓解，部分可有残留症状或转为慢性。

药物治疗是中度以上抑郁症发作的主要治疗措施。传统的三环类、四环类抗抑郁药和单胺氧化酶抑制剂由于不良反应较大，应用明显减少。目前临床上一线的抗抑郁药主要包括选择性5-羟色胺再摄取抑制剂、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂等，但使用这类药物起效慢，作用谱窄，停药后易复发。目前，整个业界都在研发见效快、副作用小、更为有效的治疗药物。

去甲异波尔定，化学名为1,9-二羟基-2,10-二甲氧基海罂粟碱，英文名Norisoboldine，分子式为C18H19NO4，分子量为313.3511，来源于樟科山胡椒属植物乌药。乌药含有多种异喹啉类生物碱，且具有良好的生物活性，试验表明，乌药总碱具有抗风湿关节炎的活性，口服给药能显著抑制大鼠佐剂关节炎、小鼠胶原关节炎，并能显著抑制Con A(刀豆蛋白A)引起的小鼠脾淋巴细胞增殖，LPS(脂多糖)所致小鼠腹腔巨噬细胞释放NO(一氧化氮)和IL-1(白细胞介素-1)，而去甲异波尔定是其中主要成分。

目前，应用去甲异波尔定作为药效成分预防/治疗抑郁症还未见报道。

技术实现要素：

基于发明人的偶然发现，本发明提供一种以去甲异波尔定或去甲异波尔定的盐作为药效成分的抗抑郁药，这种药物具有抗抑郁效果显著、用药量少、起效快等优点。

本发明请求保护的技术方案如下：

一种抗抑郁症的药物，其特征在于，其抗抑郁药效成分为去甲异波尔定或去甲异波尔定的盐。

一种抗抑郁症的药物组合物，其特征在于，其抗抑郁药效组分包括去甲异波尔定或去甲异波尔定的盐。

一种快速抗抑郁症的药物，其特征在于，其药效成分为去甲异波尔定或去甲异波尔定的盐。

所述快速抗抑郁症的药物，其药效剂量为每千克体重0.01～100mg去甲异波尔定或每千克体重0.01～100mg去甲异波尔定相当量的去甲异波尔定的盐；给药后60分钟内可产生抗抑郁效果。

任一上述药物，其特征在于，还包括与去甲异波尔定同时施用后对治疗抑郁症有积极作用的药物成分和/或使去甲异波尔定稳定性提高的药学上可接受的成分。

任一上述药物，其特征在于，还包括制药学上可接受的辅助成分。

任一上述药物，其特征在于，其剂型为粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、溶液、悬浮液或注射液。

去甲异波尔定在制备抗抑郁症药物中的用途，其特征在于，以去甲异波尔定或去甲异波尔定的盐为药效成分制备抗抑郁症药物。

所述用途中，所述抗抑郁症药物的药效剂量为每千克体重0.01～100mg去甲异波尔定或每千克体重0.01～100mg去甲异波尔定相当量的去甲异波尔定的盐；给药后60分钟内可产生抗抑郁效果。

一种治疗/预防抑郁症的方法，其特征在于，使受试者摄入权利要求1～7任一所述的药物；

给药剂量为：每天每千克体重提供0.01～100mg去甲异波尔定，或0.01～100mg去甲异波尔定相当量的去甲异波尔定的盐。

本发明的研究发现，在哺乳动物小鼠实验中，去甲异波尔定具有快速抗抑郁症的功效，且比常规抗抑郁药物丙咪嗪更加有效。

在小鼠动物模型悬尾实验中发现，去甲异波尔定的高剂量组(5mg/kg)与1％DMSO对照组相比，在注射60分钟就能显著缩短小鼠悬尾不动时间。低剂量组(2mg/kg)不动时间也显示出降低趋势。在注射60分钟后丙咪嗪和生理盐水相比不动时间缩短，但差异并不显著。结果表明高剂量的去甲异波尔定在很短的时间内即可起效，且效果显著，可以对抗小鼠因强迫悬尾造成的抑郁症状。且去甲异波尔定在剂量低于丙咪嗪的情况下，比丙咪嗪更早地显示出抗抑郁效果。实施例1中列出了在注射60分钟之后各组小鼠在所观察的6分钟内，后4分钟内的累计不动时间，结果如图2所示。

并且，在强迫游泳实验中，去甲异波尔定剂量5mg/kg时的不动时间与丙咪嗪阳性对照组(15mg/kg)的不动时间相当(如图3所示)。和丙咪嗪相比，去甲异波尔定有效剂量更低，仅为丙咪嗪的三分之一。由此表明，去甲异波尔定对模型小鼠具有较强的抗抑郁作用，具有作为快速抗抑郁症药物的潜力。

本发明抗抑郁药物的有效成分去甲异波尔定，其化学结构式如图1所示，还具有治疗类风湿关节炎、多发性硬化症、系统红斑狼疮、银屑病、慢性活动性肝炎等自身免疫性疾病的生物活性，安全性好。目前，整个业界都在寻找见效快的抗抑郁药物。因此，去甲异波尔定有望成为快速、高效抗抑郁新药。

基于本发明的实验数据，本发明请求保护以去甲异波尔定为药效成分的抗抑郁症药物或药物组合物，即任何标识着以去甲异波尔定为药效成分且标识着其适应症包含抑郁症的药物或快速抗抑郁症的药物，或以去甲异波尔定为药效组分的药物组合物都是本发明请求保护的专利抗抑郁症药物。本发明还请求保护去甲异波尔定在制备抗抑郁症药物中的用途，任何以去甲异波尔定为药效成分制备抗抑郁症药物、快速抗抑郁症药物、抗抑郁症药物组合物的以盈利为目的生产行为都属于本发明请求保护的范围。

本发明采用的药物筛选实验为：强迫游泳实验和小鼠悬尾实验，是常用的两种动物行为绝望抑郁症模型实验，能较好地保证筛选结果的可靠性。

小鼠强迫游泳实验已用于很多抗抑郁药物的筛选。而且大多数有临床治疗作用的抗抑郁药也被证实在强迫游泳实验中能有效减少不动时间。所谓不动是指“动物在水中停止挣扎，或呈漂浮状态，仅露出鼻孔保持呼吸，仅有细小的肢体运动，以保持头部浮在水面”。在试验前给予拟筛选的药物。由于动物在强迫状态下游泳使动物不能逃出恶劣环境，导致动物行为绝望。此种模型方法简便，可靠，已广泛用于抗抑郁药剂的筛选和评价。

小鼠悬尾实验是小鼠在悬尾状态下不再挣扎，呈现特有的安静不动状态，抗抑郁药可明显缩短不动状态的持续时间。试验时，将小鼠尾部固定、倒悬。勿使小鼠尾部扭曲折叠。计录不动时间。不动指标为：“动物除呼吸外所有肢体均不动”。悬尾实验对各种抗抑郁药均很敏感，而且避免了游泳实验中温度和动物运动功能障碍的干扰，因而在用一些鼠种筛选抗抑郁药物时,可以有效地验证和补充强迫游泳实验的结果。

本发明提供的去甲异波尔定在制备抗抑郁症药物中的用途，所制备而得的抗抑郁症药物，可以基于制药领域的技术人员的常识而加入不影响药物药效的辅助成分，如载体、赋形剂、矫味剂等。由于该药物通过口服、注射、皮下包埋等方式均可见效，因此，剂型可以是多样的，包括但不限于粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、溶液、悬浮液或注射液。

本发明提供的抗抑郁症药物还可以混合有其它与去甲异波尔定或其衍生物配合使用对治疗抑郁症有积极作用的药物成分。

本领域技术人员可以加入使去甲异波尔定稳定性提高的稳定剂，只要不影响药效的发挥，所得的抗抑郁症药物均在本发明要求保护的范围内。

本发明所提供的抗抑郁症药物，所述抗抑郁症包括预防和治疗两个阶段。

所述抗抑郁症药物的用量为：每天每千克体重提供0.01～100mg去甲异波尔定，或0.01～100mg去甲异波尔定相当量的去甲异波尔定的盐。

所述抗抑郁症药物的给药方式为口服、滴注或注射；给药对象为哺乳动物，所述哺乳动物包括人。

本发明请求保护的药物组合物，是指人工复配的以两种及以上药效组分混合在一起制得的药物。例如本发明采用的去甲异波尔定与申请人之前申请并公布的虫草素、香菇多糖、灵芝酸A等物质组合而成的抗抑郁症药物组合物。区别于包含某种药效成分但是成分复杂的天然植物。

附图说明

图1.去甲异波尔定的化学结构式。

图2.去甲异波尔定对小鼠悬尾实验的影响，其中

纵坐标：悬尾实验小鼠不动时间(s)；

横坐标：从左到右依次为：1％DMSO对照组，去甲异波尔定低剂量组(2mg/kg)，去甲异波尔定高剂量组(5mg/kg)，生理盐水对照组，丙咪嗪阳性对照组(15mg/kg)；

结果：CD1雄性小鼠经不同剂量的去甲异波尔定腹腔注射60分钟后，高剂量组(5mg/kg)在小鼠悬尾实验中显示出显著的抗抑郁效果(每组动物＝24，*p＜0.05，**p＜0.01)。

图3.去甲异波尔定对小鼠强迫游泳实验的影响，其中

纵坐标：强迫游泳实验小鼠不动时间(s)；

横坐标：从左到右依次为：1％DMSO对照组，去甲异波尔定低剂量组(2mg/kg)，去甲异波尔定高剂量组(5mg/kg)，生理盐水对照组，丙咪嗪阳性对照组(15mg/kg)；

结果：CD1雄性小鼠经不同剂量的去甲异波尔定腹腔注射三天后，在小鼠强迫游泳实验中显示出极显著的抗抑郁效果，与传统抗抑郁药物丙咪嗪的抗抑郁效果相比有更强的趋势，有效剂量更低(每组动物N＝8-10，*p＜0.05，**p＜0.01)。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明进行详细说明，需要理解的是，下述实施例仅作为解释和说明，不以任何形式限制本发明的范围。

下述实施方式中，未特别说明的生物化学试剂均为本领域常规试剂，可以按照本领域常规方法配制而得或商购获得，规格为实验室纯级即可。

实施例1.去甲异波尔定对动物抑郁模型悬尾实验的影响

实验动物：

CD1种小鼠，雄性，年龄6-7周，重量30-40克，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(京)2012-0001。动物分笼饲养，食水自由，饲料由中国科学院遗传与发育生物学研究所动物实验中心提供。

实验药品：

去甲异波尔定购自中国食品药品检定研究院，货号111825-201402。

盐酸丙咪嗪(Imipramine hydrochloride)为Sigma公司产品，货号I7379，批号O56K1380。

实验器材：

横杆；胶布；Sumsung Intelli-200m数码摄像机(韩国三星公司)；JUNSO多功能计时器。

实验步骤：

1.动物药物注射：

雄性CD1小鼠经适应性饲养一周，分成5组，每组24只。分别为1％DMSO对照组(DMSO溶于生理盐水)、去甲异波尔定低剂量组(2mg/kg，溶于1％DMSO)、去甲异波尔定高剂量组(5mg/kg，溶于1％DMSO)、传统抗抑郁药物丙咪嗪阳性对照组(15mg/kg丙咪嗪，生理盐水溶解)、生理盐水对照组。

上午10时按0.3ml/30g体重腹腔注射给药。

注射60分钟后，每组随机选取12只小鼠进行悬尾实验；

注射90分钟后，对每组剩下的12只小鼠进行悬尾实验。

2.小鼠悬尾实验：

用胶布将小鼠尾在距尾尖2厘米处粘在一根水平横杆上，使动物成倒挂状态，其头部离桌面约15厘米。观察6分钟，记录后4分钟内的累计不动时间。不动指标为：“动物除呼吸外所有肢体均不动”。

3.统计分析：

实验结果用均值±SE表示，不同处理组间的显著性用单因素方差分析。

去甲异波尔定高剂量组小鼠在注射后60分钟抑郁症状开始缓解，即活动量相对空白对照组越来越频繁，悬尾不动时间明显缩短，与空白对照组差异显著。而丙咪嗪阳性对照组在注射后60分钟内，活动量与生理盐水对照组相比无显著差异，直至注射90分钟后开始明显缩短悬尾不动时间。

注射60分钟之后观察结果，如图2所示，去甲异波尔定的低剂量组与1％DMSO对照组相比，在注射60分钟后小鼠悬尾不动时间就开始有所下降，而高剂量组的效果显著，去甲异波尔定剂量为5mg/kg时的不动时间与1％DMSO对照组相比由102.29±12.37s降低为49.80±11.60s(p＜0.05)，缩短了51.3％。注射60分钟后丙咪嗪和生理盐水相比不动时间缩短，但差异并不显著。

由此表明，去甲异波尔定可以对抗小鼠因强迫悬尾造成的抑郁症状，并且其有效剂量与传统抗抑郁药物丙咪嗪相比明显减小，在很短的时间内即可起效，且效果显著。

实施例2.去甲异波尔定对动物抑郁模型强迫游泳实验的影响

实验动物：

CD1种小鼠，雄性，年龄6-7周，重量30-40克，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(京)2012-0001。实验前一周将动物分笼饲养，明暗周期12h/12h，室温20～22℃，食水自由，饲料由中国科学院遗传与发育生物学研究所动物实验中心提供。

实验药物：

去甲异波尔定购自中国食品药品检定研究院，货号111825-201402。

盐酸丙咪嗪(Imipramine hydrochloride)为Sigma公司产品，货号I7379，批号O56K1380。

实验仪器：

玻璃圆筒(高40cm，直径14cm)；温度计；JUNSO多功能计时器。

实验步骤：

1.动物药物注射：

CD1小鼠适应环境一周后开始实验。动物随机分为5组，每组8-10只动物。分别为1％DMSO对照组(DMSO溶于生理盐水)、去甲异波尔定低剂量组(2mg/kg，溶于1％DMSO)、去甲异波尔定高剂量组(5mg/kg，溶于1％DMSO)、传统抗抑郁药物丙咪嗪阳性对照组(15mg/kg丙咪嗪，生理盐水溶解)、生理盐水对照组。每天上午10点开始腹腔注射，注射量为0.3毫升/30克体重，每天腹腔注射一次，注射三天后开始强迫游泳实验。

2.强迫游泳实验：

将各组CD1鼠单个垂直地放入有机玻璃圆筒中(40cm高×14cm直径)，水深25cm，水温21-23℃。各给药组和对照组录像6分钟，记录各组小鼠在后4分钟内的累计不动时间。不动时间判定标准：小鼠漂浮在水面，不努力爬出圆筒，仅做一些必须保持其头部在水面的动作。

3.统计分析：

实验结果用均值±SE表示，不同处理组间的显著性用单因素方差分析。

结果表明去甲异波尔定具有较强的抗抑郁作用。如图3所示，与1％DMSO对照组比较，去甲异波尔定高剂量组小鼠强迫游泳后4分钟内的不动时间显著缩短。去甲异波尔定剂量5mg/kg时的不动时间与1％DMSO对照组相比，由98.50±13.86s降低为45.85±6.69s(p＜0.01)，缩短了53.5％。和传统抗抑郁药丙咪嗪相比，高剂量的去甲异波尔定的抗抑郁作用更强，有效剂量更低。

实施例3.药物组合物药效实验

重复实施例1-2的实验，只是实验药物为去甲异波尔定与虫草素、香菇多糖、灵芝酸A等在先公开的抗抑郁有效成分的1:1组合。

实验结果显示小鼠悬尾实验、强迫游泳实验与实施例1-2显示相同的趋势和显著性。