本发属于中药技术领域，具体涉及一种南五味子木脂素提取物及其制备方法。
背景技术：
南五味子是木兰科植物华中五味子(Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.)的干燥成熟果实,是重要的常用中药。具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效,用于久嗽虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴、短气脉虚、内热消渴、心悸失眠。
木脂素是南五味子的主要活性成分，文献报道其具有抗癌、抗病毒、抗氧化、保肝、调血脂、神经保护等药理活性，南五味子木脂素提取物可广泛用于药品、保健食品等领域，有很好的市场前景。
现有南五味子木脂素的提取物制备方法(CN200510023873.5)为：用6-15倍南五味子药材重量的水蒸馏药材1-6小时；过滤，剩余药渣；煎煮药渣10-60分钟，过滤；体积为药材量5-15倍的75％重量以上的乙醇水溶液提取药渣，每次0.5-3小时，过滤获得滤液；将所得滤液过1-3倍药材量树脂吸附柱，获得流出液，所述树脂选自极性大孔吸附树脂；用体积为树脂量1-5倍的75％重量以上的乙醇洗脱，获得洗脱液；合并流出液和洗脱液，获得液态南五味子木脂素提取物。在此方法实施过程中发现不适合大生产操作，由于南五味子为果实类药材，水蒸馏和水煎煮药材后，药材易糊化，放液困难，阻碍生产进行，而且由于药渣含有大量水分，加入乙醇提取时实际乙醇浓度下降，导致有效成分木脂素提取率低；大孔吸附树脂为极性树脂，上样液和洗脱液均收集，没有除杂洗脱步骤，纯化效果有限，最终提取率和有效部位含量均较低，需要有更好地方法以满足大生产的顺利进行，并且提高提取物有效成分含量和得率。
技术实现要素：
针对现有技术存在的问题，本发明提供一种制备南五味子木脂素提取物的制备方法，目的是提高木脂素的提取率，满足大工业生产的要求。
本发明的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
(1)采用8-12倍南五味子药材重量的重量分数70-90％的乙醇水溶液回流提取南五味子药材1-3次，每次0.5-2小时，每次放液时间均为30分钟，提取后过滤得到乙醇提取液；
(2)将乙醇提取液减压浓缩至1-2倍药材重量体积，再加水稀释至3-10倍药材重量体积，得到上样溶液；
(3)将所得上样溶液过0.5-3倍药材重量的弱极性大孔树脂吸附柱，先以1-4倍树脂重量的重量分数10-30％的乙醇进行洗脱除杂，然后用2-5倍树脂重量的重量分数70-90％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液；
(4)将乙醇洗脱液过0.5-2倍药材重量的氧化铝吸附柱，收集流出液减压或常压回收尽溶剂，于60-100℃减压或常压干燥，获得南五味子木脂素提取物。
其中，所述的步骤(1)中乙醇水溶液的用量优选为南五味子药材重量的10倍，乙醇水溶液优选浓度为重量百分比为80％。
所述的步骤(1)回流提取南五味子药材次数优选2次，优选每次1小时。
所述的步骤(3)中的弱极性大孔吸附树脂优化为AB-8型。
所述的步骤(3)将所得上样溶液过0.5-3倍药材重量的弱极性大孔树脂吸附柱，先以2倍树脂重量的重量分数20％的乙醇进行洗脱除杂，然后用3倍树脂重量的重量分数80％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液。
所述的步骤(4)中的氧化铝选择中性氧化铝。
所述的的南五味子木脂素提取物，按照重量百分比，含有木脂素60％－90％，其中五味子酯甲8％－30％，五味子甲素8％－30％。
与现有技术相比，本发明的特点和有益效果是：
(1)本发明直接采用乙醇提取药材，相比于原方法水蒸馏和水煎煮步骤，提取效率提高，放液顺畅，大生产顺应性大幅提高，且生产时间大幅缩短，节约生产成本。
(2)本发明与原工艺比较虽然都采用大孔吸附树脂进行纯化，但两者操作步骤完全不同，使用的大孔吸附树脂极性不同，除杂原理也不同，纯化的效果也不一样。南五味子木脂素有效部位为脂溶性成分，原工艺采用极性大孔吸附树脂，醇提液直接上样，利用脂溶性成分不吸附，水溶性杂质吸附于树脂上达到除杂目的，收集流出液和洗脱液，得到南五味子木脂素有效部位；而本发明方法改采用弱极性大孔吸附树脂，提取液回收有机溶剂加水稀释，水溶液上样，需要得到的脂溶性有效成分吸附于树脂柱上，水溶性杂质不吸附，流出液弃去，采用低溶度乙醇洗脱，能够去除中等极性物质如有机酸等，再用高浓度乙醇解吸弱碱性的脂溶性木脂素类有效成分，得到南五味子木脂素有效部位，纯化效果更好。
(3)本发明增加氧化铝脱色除杂步骤，除去叶绿素等色素成分，进一步提高了南五味子木脂素提取物有效成分的含量。
具体实施方式
本发明的南五味子提取方法采用高浓度乙醇作为提取试剂，然后用大孔树脂和氧化铝进行吸附纯化，以提取木脂素、五味子酯甲和五味子甲素作为质控标准，使用本发明的制备方法，可得到含有高含量木脂素的南五味子木脂素提取物。
本实施例中对南五味子木脂素提取物中总木脂素和五味子酯甲含量的检测采用岛津UV-2550分光光度计和安捷伦HPLC-1260，具体方法是：
总木脂素：精密吸取五味子酯甲对照品溶液、供试品溶液和甲醇各0.4ml，分别置于10mL量瓶中，80℃水浴挥干，分别加入0.5mL10％变色酸溶液，3mL浓硫酸，1.5mL蒸馏水，置沸水浴中加热30分钟，迅速冷却，以甲醇管为空白，分光光度570nm处测定吸光度，计算木脂素含量。
五味子酯甲和五味子甲素：HPLC法，流动相四氢呋喃-水(38：62)，检测波长258nm，流速1ml/min，柱温25℃。
实施例1～5和对比例的检测结果如表1所示。
实施例1：
本实施例的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
(1)取20kg南五味子干燥果实，采用10倍南五味子药材重量的重量分数80％的乙醇水溶液回流提取南五味子药材2次，每次1小时，每次放液时间均在30分钟，合并两次乙醇提取液，过滤得到360L乙醇提取液；
(2)将乙醇提取液减压浓缩至40L，再加水稀释至100L，得到上样溶液；
(3)将所得上样溶液过1倍药材重量的AB-8树脂吸附柱，先以2倍树脂重量的重量分数20％的乙醇进行洗脱除杂，然后用3倍树脂重量的重量分数80％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液；
(4)将乙醇洗脱液过1倍药材重量的氧化铝吸附柱，收集流出液减压回收乙醇，于80℃真空干燥，获得南五味子木脂素提取物，提取物得率为3.65％。
本实施例的南五味子木脂素提取物，按照重量百分比，含有木脂素80％，其中五味子酯甲13.2％，五味子甲素13.5％。
实施例2：
本实施例的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
(1)取20kg南五味子干燥果实，采用8倍南五味子药材重量的重量分数90％的乙醇水溶液回流提取南五味子药材2次，每次0.5小时，每次放液时间均在30分钟，合并两次乙醇提取液，过滤得到280L乙醇提取液；
(2)将乙醇提取液减压浓缩至20L，再加水稀释至60L，得到上样溶液；
(3)将所得上样溶液过0.5倍药材重量的AB-8树脂吸附柱，先以4倍树脂重量的重量分数20％的乙醇进行洗脱除杂，然后用5倍树脂重量的重量分数80％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液；
(4)将乙醇洗脱液过0.5倍药材重量的氧化铝吸附柱，收集流出液减压回收乙醇，于60℃减压干燥，获得南五味子木脂素提取物，提取物得率为3.26％。
本实施例的南五味子木脂素提取物，按照重量百分比，含有木脂素69％，其中五味子酯甲9.5％，五味子甲素10.2％。
实施例3：
本实施例的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
(1)取20kg南五味子干燥果实，采用12倍南五味子药材重量的重量分数70％的乙醇水溶液回流提取南五味子药材2次，每次1.5小时，每次放液时间均在30分钟，合并两次乙醇提取液，过滤得到440L乙醇提取液；
(2)将乙醇提取液减压浓缩至40L，再加水稀释至200L，得到上样溶液；
(3)将所得上样溶液过1倍药材重量的AB-8树脂吸附柱，先以2倍树脂重量的重量分数20％的乙醇进行洗脱除杂，然后用3倍树脂重量的重量分数70％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液；
(4)将乙醇洗脱液过1倍药材重量的氧化铝吸附柱，收集流出液减压回收乙醇，于100℃常压干燥，获得南五味子木脂素提取物，提取物得率为3.45％。
本实施例的南五味子木脂素提取物，按照重量百分比，含有木脂素75％，其中五味子酯甲11.3％，五味子甲素12.5％。
实施例4：
本实施例的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
(1)取20kg南五味子干燥果实，采用10倍南五味子药材重量的重量分数70％的乙醇水溶液回流提取南五味子药材3次，每次1小时，每次放液时间均在30分钟，合并三次乙醇提取液，过滤得到720L乙醇提取液；
(2)将乙醇提取液减压浓缩至40L，再加水稀释至200L，得到上样溶液；
(3)将所得上样溶液过1倍药材重量的AB-8树脂吸附柱，先以2倍树脂重量的重量分数20％的乙醇进行洗脱除杂，然后用3倍树脂重量的重量分数80％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液；
(4)将乙醇洗脱液过1倍药材重量的氧化铝吸附柱，收集流出液减压回收乙醇，于80℃真空干燥，获得南五味子木脂素提取物，提取物得率为3.36％。
本实施例的南五味子木脂素提取物，按照重量百分比，含有木脂素78％，其中五味子酯甲12.1％，五味子甲素13.1％。
实施例5：
本实施例的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
(1)取20kg南五味子干燥果实，采用10倍南五味子药材重量的重量分数80％的乙醇水溶液回流提取南五味子药材2次，每次1小时，每次放液时间均在30分钟，合并两次乙醇提取液，过滤得到440L乙醇提取液；
(2)将乙醇提取液减压浓缩至40L，再加水稀释至100L，得到上样溶液；
(3)将所得上样溶液过2倍药材重量的AB-8树脂吸附柱，先以3倍树脂重量的重量分数30％的乙醇进行洗脱除杂，然后用4倍树脂重量的重量分数90％的乙醇洗脱，并收集乙醇洗脱液；
(4)将乙醇洗脱液过1倍药材重量的氧化铝吸附柱，收集流出液减压回收乙醇，于80℃真空干燥，获得南五味子木脂素提取物，提取物得率为3.56％。
树脂用量为药材量的2倍，药液过完柱床后先用3倍树脂体积量30％浓度的乙醇进行洗脱除杂，后以4倍树脂体积量90％浓度乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱液，过2倍药材量氧化铝吸附柱，流出液减压回收乙醇，80℃真空干燥，得南五味子木脂素提取物。
本实施例的南五味子木脂素提取物，按照重量百分比，含有木脂素73％，其中五味子酯甲11.5％，五味子甲素12.6％。
对比例：
对比例的制备南五味子木脂素提取物的方法按照以下步骤进行：
取20kg南五味子干燥果实，用10倍药材量的水进行水蒸气蒸馏4小时，过滤，放液时间7小时，得到药渣；
药渣用6倍药材量的水煎煮提取30分钟，放液时间10小时，过滤，弃去滤液；
用10倍药材量的80％乙醇回流提取，共提取两次，每次1小时，每次放液时间均在3小时左右，合并两次乙醇提取液，过滤，得到380L药液，所得药液过树脂吸附柱LSA-7，树脂用量为药材量的1倍，药液过完柱床后用85％乙醇洗脱，收集乙醇液(包括流过液和洗脱液)，过滤，回收乙醇，水浴蒸干，60℃烘干，得南五味子木脂素提取物。
经检测，对比例制备的南五味子木脂素提取物含木质素56％，其中五味子酯甲7.2％，五味子甲素7.5％。
表1实施例1～5与对比例的木质素提取结果表
从表1可以看出，五批20kg的南五味子药材经本发明的新方法提取纯化后，南五味子木脂素提取物得率相对药材投入量均在3％以上，经检测提取物中木脂素含量(总木脂素在提取物中所占的重量百分比)在60％以上，五味子酯甲和五味子甲素含量均在9％以上。而对比例南五味子木脂素提取物得率在2.5％左右，经检测提取物中木脂素的含量在56％，五味子酯甲和五味子甲素含量均在9％以下。
生产过程放液情况，新方法5批提取每次放液时间均在30分钟左右，而原方法放液时间分别为7小时、10小时、3小时、3小时，时间过长严重制约生产进程。
如上所述，本发明的方法能够高效的提取南五味子木脂素提取物，工艺适合大生产操作，有效成分含量高，提取物得率也高，有更好的生产效益。