本发明属于兽药
技术领域：
，涉及臭氧化油单独或联合用药用于奶畜养殖中预防和治疗疾病。具体涉及臭氧化油通过乳房和子宫灌注等的给药途径预防和治疗奶畜子宫内膜炎、乳房炎、胎衣不下。
背景技术：
：VelioBocci在《臭氧治疗学》一书中概述了使用低剂量的臭氧气体能够发挥许多有益功能，且无副作用，即臭氧疗法（见VelioBocci撰写的《Oxygen-OzoneTherapy》，北京大学医学出版社，2004）。臭氧疗法可以通过多种给药途径来实现，并针对不同疾病产生不同的功效。臭氧化油外用作为抗菌剂、除臭剂用于褥疮和溃疡等皮肤病的治疗药物。因此，现已知臭氧具有氧化和抗菌作用。将臭氧化油直接灌胃用于幽门螺旋杆菌引起的胃炎的治疗。肌肉或皮下注射臭氧气体来治疗慢性病毒肝炎和血管性疾病。阴道直接通入臭氧气体能够治愈炎症和细菌感染。将臭氧气体直接与一定体积的血液在体外混合，再回输给患者被称为自体血疗法，能够调理人体内环境，降低机体的敏感性和增强机体免疫力。直肠直接吹臭氧气体能够改善帕金森病的症状（见LambertoRe，MohamedN.Mawsouf，SilviaMenendez，OlgaS.Leon，GregorioM.Sanchez，andFrankHernandez撰写的《OzoneTherapy:ClinicalandBasicEvidenceofItsTherapeuticPotential》，ArchivesofMedicalResearch，2008，39:17-26）。腹腔给臭氧气体能够保护心脏免受急性心肌梗塞的损伤（ClaraDiFilippo，MargheritaLuongo，RaffaeleMarfella，FrancaFerraraccio，BiagioLettieri，AnnalisaCapuano，FrancescoRossi，MicheleD'Amico撰写的《Oxygen/ozoneprotectstheheartfromacutemyocardialinfarctionthroughlocalincreaseofeNOSactivityandendothelialprogenitorcellsrecruitment》，Naunyn-SchmiedArchPharmacol，2010，382:287–291）。从结构上看，尽管臭氧化油和臭氧气体（:O-O-O）并不是同一物质，但臭氧化油是通过对油的加成臭氧得到，故在其分子中具有臭氧化物结构，与臭氧气体的功能相似。以上各种给药途径均表明臭氧能够以气体的方式直接被机体吸收并发挥功能。臭氧气体的功能可能通过以下三个途径来实现：（1）、臭氧在体内通过生物化学反应，生成类似活性氧的物质（羟基自由基OH-、超氧阴离子O2-等），广泛影响着机体氧化还原系统；（2）、臭氧能够引起内皮祖细胞聚集和促进一氧化氮（NO）的生成，起到舒张血管的作用；（3）、臭氧能够诱导骨髓干细胞到血管损伤部位，促进损伤血管修复重建，但具体机制尚不明确。上述给药途径存在诸多缺陷：沿途与太多物质接触，难以保证气体进入机体的有效浓度。若给予过量极易诱发机体产生不适反应，且操作过程繁琐，再加上疗程较长，患者难以接受。尤其是自体血疗法，每周2～3次，连续10周为一疗程。本发明以油与臭氧加成的方式，得到臭氧化油。在常态下亦可长期稳定保存；还能定量控制臭氧化油进入机体，从而避免通过其它给药方式给药，人为造成药量不当。在臭氧化油产品中，臭氧化橄榄油、葵花油、大豆油作为抗菌剂、除臭剂用于褥疮和溃疡等皮肤病的治疗的外用药品已经上市。但将臭氧化油通过子宫和乳房灌注的形式给药而产生功效，目前尚无报道。在本发明中，臭氧化油通过腹腔注射、静脉注射、皮下注射、肌肉注射和栓剂的方式，也能够产生药物作用。臭氧广泛存在于常见的大气中，具有多种生物活性，如：心血管保护作用、抗氧化作用、抗紫外及抗辐射作用、抗诱变及抗癌作用、抗菌作用、抗病毒作用、免疫调节作用等。在医药化工和食品等领域都具有广泛的应用。技术实现要素：本发明的目的是利用臭氧化油来预防和治疗奶畜子宫内膜炎、乳房炎、胎衣不下，制备简便、成本低廉。经临床应用验证，本发明具有疗效显著，剂量低，无毒副作用，有效率高等优点。在本发明中，之所以选择权利要求1、2所述的各种油中的一种、两种和两种以上，是因为这些油不饱和脂肪酸含量较高，其中核桃油的不饱和脂肪酸高达92%以上，在不饱和脂肪酸结构中至少有一个烯烃类双键。若将权利要求1、2中的一种、两种和两种以上含不饱和脂肪酸高的油与权利要求3～7中的一种、两种和两种以上的表面活性剂混合，亦能与臭氧发生加成反应。可见只要加成物的结构中存在烯烃不饱和键即可与臭氧发生加成反应，不饱和键数目越多，反应越容易发生，且与臭氧加成的量越多，加成物能够携带臭氧分子的数目也越多。为达到上述目的，本发明采用的技术方案将结合下面的制作流程和实施方式进行简单的说明。1、制备臭氧气体。2、制备臭氧化油。3、制备臭氧化橄榄油。4、制备含表面活性剂的臭氧化油。5、臭氧化橄榄油治疗奶牛子宫内膜炎的临床效果。6、臭氧化橄榄油治疗奶牛乳房炎的临床效果。7、臭氧化橄榄油治疗奶山羊临床型乳房炎的临床效果。8、臭氧化橄榄油治疗奶牛胎衣不下的临床效果。具体实施方式下列非限制性实施例用于说明本发明。实施例1臭氧化橄榄油的制备1、制备臭氧气体。本发明采用医用氧气通过臭氧发生器来制备臭氧气体。选自西安德润生物技术有限责任公司设计生产的DRO3-A型臭氧机（功率≦55W）。2、制备臭氧化油的整个过程须要在20～25℃进行，确保臭氧化油不会发生热解反应。3、橄榄油3kg置入反应釜中；臭氧以150m3/h流速加入，总反应时间为20小时。反应结束后，余气灭活。4、得到臭氧化橄榄油浓度为40mg/L，25℃可稳定保存十个月。实施例2臭氧化橄榄油、大豆油和花生油混合油的制备1、制备臭氧气体。本发明采用医用氧气通过臭氧发生器来制备臭氧气体。选自西安德润生物技术有限责任公司设计生产的DRO3-A型臭氧机（功率≦55W）。2、制备臭氧化油整个过程须要在20～25℃进行，确保臭氧化油不会发生热解反应。3、橄榄油1kg，大豆油1kg和花生油1kg置入反应釜中；臭氧以150m3/h流速加入，总反应时间为20小时。反应结束后，余气灭活。4、得到臭氧化混合油浓度为40mg/L，25℃可稳定保存十个月。实施例3含表面活性剂的臭氧化橄榄油的制备1、制备臭氧气体。本发明采用医用氧气通过臭氧发生器来制备臭氧气体。选自西安德润生物技术有限责任公司设计生产的DRO3-A型臭氧机（功率≦55W）。2、制备臭氧化油整个过程须要在20～25℃进行，确保臭氧化油不会发生热解反应。3、橄榄油3kg置入反应釜中，缓慢加入失水山梨醇单油酸酯聚氧乙烯醚（吐温80）20mL，混匀，臭氧以150m3/h流速加入，总反应时间为20小时。反应结束后，余气灭活。4、得到臭氧化橄榄油浓度为40mg/L，25℃可稳定保存十个月。实施例4含表面活性剂和助表面活性剂的臭氧化橄榄油制备1、制备臭氧气体。本发明采用医用氧气通过臭氧发生器来制备臭氧气体。选自西安德润生物技术有限责任公司设计生产的DRO3-A型臭氧机（功率≦55W）。2、制备臭氧化油整个过程须要在20～25℃进行，确保臭氧化油不会发生热解反应。3、橄榄油3kg置入反应釜中，缓慢加入失水山梨醇单油酸酯聚氧乙烯醚（吐温80）20mL和纯乙醇20mL，混匀，臭氧以150m3/h流速加入，总反应时间为20小时。反应结束后，余气灭活。4、得到臭氧化橄榄油浓度为40mg/L，25℃可稳定保存十个月。实施例5臭氧化橄榄油治疗奶牛子宫内膜炎的临床效果:试验动物杨陵某奶牛养殖场3～5龄，3～5胎经产奶牛，体重约700～850kg，经过临床诊断为患奶牛子宫内膜炎奶牛50头。实验用药本发明实施例1中得到的臭氧化橄榄油；土霉素购自天津轩耀生物科技有限公司。用药量40mL-50mL，候温子宫灌注，每天1次，3d为一疗程。诊断标准阴道有中等程度炎症、充血，有少量絮状物或脓性分泌物，宫颈阴道部肿胀、充血。直肠检查，可触及子宫角增粗、子宫壁厚薄不均，宫腔内积液且有波动感。治疗效果判定标准:治愈:连续给药3次后，子宫内积液基本排除，子宫恢复正常，颈液由混浊变为透明且无臭味;阴道检查时，可见阴道、及宫颈口处无炎性分泌物;非发情时，宫颈口关闭且呈粉红色。直肠检查子宫收缩、大小及质地恢复正常；停止治疗后30天内恢复正常发情可人工授精。有效:连续给药3次后，阴门无粘性或粘脓性分泌物排出，检查阴道无及宫颈口无炎性分泌物;直肠检查子宫收缩、大小及质地基本恢复正常;停止治疗后30天内，未恢复正常发情，或恢复发情但颈液仍不够清亮或韧性差，不能进行人工授精。无效:连续给药3次后，临床症状没有改善，触诊疼痛及肿胀明显，子宫内积液未排出，且颈液依旧混浊。结果:表1臭氧化橄榄油治疗奶牛子宫内膜炎的临床效果组别患病牛（头）治愈头数（%）有效头数（%）无效头数（%）总有效率头（%）臭氧化橄榄油2520（80%）4（16%）1（4%）96%土霉素2515（60%）6（24%）4（16%）84%结果表明:与土霉素组相比，臭氧化橄榄油灌注剂可有效治疗奶牛子宫内膜炎，治疗有效率达到96%，治愈率可达80%，效果优于土霉素组。以上实验结果表明，本治疗奶牛子宫内膜炎的臭氧化橄榄油灌注液具有抗菌消炎、调整子宫机能、改善局部血液循环、调整子宫内环境、增加药物在子宫内扩散、渗透和吸收作用、无刺激性、提高免疫力等特点。实施例6臭氧化橄榄油治疗奶牛乳房炎的临床效果临床药效试验:1试验方法1.1试验奶牛:试验治疗杨陵周边奶牛场发生急性、亚急性和隐性乳房炎的120个病例(以患病乳区为例)，急性、亚急性乳房炎患病乳区出现不同程度的红肿热痛，乳汁清稀、发黄、出现凝块或脓汁，产奶量明显下降。采用“美国加州乳房炎试验(CMT)”法进行检测，将检测结果为“++”或以上的患牛列入隐性乳房炎试验。1.2治疗方法:120个病例，分为试验组和对照组，用消毒液清洗乳房，将病乳挤净，用75%的酒精棉消毒乳头，通过乳头管注入药物，按摩乳区片刻，3天一个疗程，观察治疗效果。试验组90例，使用实施例1的臭氧化橄榄油灌注乳房，每天1次，每次lOml;对照组30例，使用泌乳灵注入剂(氨节西林钠、氯唑西林钠乳房注入剂，英国NORBROOK公司生产)，每天2次，每次5.Og。1.3疗效判断:治疗前后进行细菌学检查，治疗过程中详细记录患病奶牛病理表现，并按下述标准判断药物疗效:痊愈:乳房红、肿、热、痛消失，乳汁肉眼观察正常，乳产量回升，病原菌转阴。临床治愈:乳房红、肿、热、痛消失，乳汁肉眼观察正常，乳产量回升，但病原菌未完全转阴。有效:乳房红、肿、热、痛减轻，肉眼观察乳汁性状改观或趋于正常，乳产量有所回升。无效:乳房红、肿、热、痛没有明显改观或更加严重，乳汁异常，乳产量下降。隐性乳房炎判断治愈标准:强阳性(+++)或阳性(++)转为阴性(-)或可疑(±)。有效:强阳性(+++)或阳性(++)转为弱阳性(+)。无效:用药后无变化。2治疗结果表1试验组与对照组临床药效试验试验结果实施例1的乳房灌注剂泌乳灵治疗病例9030痊愈(例)8010临床治愈(例)89有效(例)25无效(例)06痊愈率(%)89%33%总临床治愈率(%)98%63%表1的临床疗效试验结果显示，本发明实施例1制备的臭氧化橄榄油灌注乳房与对照药物泌乳灵比较，临床总治愈率和有效率明显较高。3结论药效试验结果说明，本发明实施例1制备的臭氧化橄榄油灌注乳房治疗革兰氏阴性和阳性菌引起的急性、亚急性和隐性乳房炎效果显著，治愈率高，使用方便又安全，具有较好的临床应用价值。实施例7臭氧化橄榄油治疗奶山羊乳房炎的临床效果用于治疗奶山羊临床型乳房炎的试验试验方法:陕西富平某羊场，选取50只临床型乳房炎的奶山羊进行试验，实验组25头，对照组25头。实验组采用本发明实施例1制备的臭氧化橄榄油灌注乳房1次/天，每次5mL，连续用药1-10天。对照组采用恩诺沙星按羊体重给予剂量，2次/天。判断治愈标准:乳房红、肿、热、痛症状消失，乳汁肉眼观察正常，奶产量恢复，精神、食欲正常；有效:乳房红、肿、热、痛症状减轻，乳汁絮状物基本消失或明显减少，产奶量回升;无效:乳房红、肿、热、痛症状无明显减轻，乳汁清稀或发黄，絮片较明显，产奶量没有回升，全身状态未见改善。试验效果:用药后实验组25头病羊治愈22头，有效2头，治愈率为88%，有效率为96%;对照组25头病羊治愈14个，有效为5头，治愈率为56%，有效率为80%;可见，本发明对奶山羊临床型乳房炎具有很好的治疗作用。实施例8臭氧化橄榄油治疗奶牛胎衣不下的临床效果临床药效试验1、试验动物以杨陵某养牛场2年来发生奶牛胎衣不下的21例病牛为研究对象，试验前对病牛进行临床检查，确定被确诊为奶牛胎衣不下病。2、试验分组分别将21例病牛分为3组，每组7头。按本发明实施例1得到的臭氧化橄榄油，候温子宫灌注，每天1次，3d为1疗程。本发明低剂量组用药量20mL；本发明中剂量组用药量40mL;本发明高剂量组用药量60mL。观察各组病情治疗情况，并进行记录。3、试验结果通过对各试验小组进行观察后，结果如下:低剂量组:通过对流产后胎衣不下的奶牛进行低剂量药物治疗，48小时后7头奶牛都将胎衣排出。中剂量组:通过对流产后胎衣不下的奶牛进行中剂量药物治疗后，48小时后7头奶牛都将胎衣排出。高剂量组:通过对流产后胎衣不下的奶牛进行高剂量药物治疗后，48小时后7头奶牛胎衣全部排出。4、结论与分析本发明实施例1制备的臭氧化橄榄油，可以达到临床治疗奶牛胎衣不下病的效果。本发明安全可靠。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 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