本发明属于药剂学技术领域，具体涉及一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法。
背景技术：
水凝胶（Hydrogel）是以水为分散介质的凝胶，具有网状交联结构的水溶性高分子中引入一部分疏水基团和亲水残基，亲水残基与水分子结合，将水分子连接在网状内部，而疏水残基遇水膨胀的交联聚合物。是一种高分子网络体系，性质柔软，能保持一定的形状，能吸收大量的水。一类采用天然生物材料（如胶原、海藻酸盐和壳聚糖等）制备得到的水凝胶，因为拥有与机体高度相似的理化特性和优越的生物学性能，已被广泛地应用于生物医药和组织工程领域。
丝胶蛋白（SS）是一种生物相容性优良的天然高分子材料。丝胶蛋白富含丝氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸等极性氨基酸，约占丝胶蛋白氨基酸总量的70%，与人体皮肤角质层中天然保湿因子的氨基酸组成及比例相似。由于丝胶蛋白具有良好的生物可降解性，促进细胞粘附分化和伤口愈合等功能特性，是一种优异的生物医用材料。
长期以来由于人们对丝胶蛋白认识的不足和研究的局限性，导致丝胶在缫丝工业中被当作废物处理，浪费了大量宝贵的天然资源。近年来人们发现丝胶蛋白具有保湿、抗菌、抗氧化、抗凝血以及促进细胞粘附和增殖等生物特性。
技术实现要素：
解决的技术问题：本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，所制成的丝胶蛋白水凝胶不仅具有多孔性、可降解性，还具有良好的生物相容性。
技术方案： 一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，取蚕茧破碎，清洗后晾干，得碎片；
步骤2，将碎片加至含有1-4wt.%复合酶的水溶液中，高压均质，得到酶解液；
步骤3，采用微滤膜对酶解液进行过滤除杂，得到清液；
步骤4，将清液导入层析柱中进行除杂，得到丝胶蛋白溶液；
步骤5，将所得丝胶蛋白溶液减压浓缩至体积缩小为15-20%，加入0.5-1.2wt.%戊二醛、0.2-0.7wt.%柠檬酸，搅拌，静置，即得。
进一步地，步骤1中碎片大小在0.5-1cm。
进一步地，步骤2中复合酶是中性蛋白酶和液体纤维素酶按重量比2：3组成的混合物。
进一步地，步骤2中高压均质条件为0.8-1.2MPa、循环5次。
进一步地，步骤4中层析柱是聚酰胺柱。
进一步地，步骤5中还需要加入0.1-0.5wt.%海藻酸钠。
有益效果：本发明采用复合酶结合高压均质的工艺提取丝胶蛋白，该工艺丝胶蛋白的提取效率可达90%，所制成的丝胶蛋白水凝胶不仅具有多孔性、可降解性，还具有良好的生物相容性。
具体实施方式
实施例1
一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，取蚕茧破碎，清洗后晾干，得碎片；
步骤2，将碎片加至含有1wt.%复合酶的水溶液中，高压均质，得到酶解液；
步骤3，采用微滤膜对酶解液进行过滤除杂，得到清液；
步骤4，将清液导入层析柱中进行除杂，得到丝胶蛋白溶液；
步骤5，将所得丝胶蛋白溶液减压浓缩至体积缩小为15%，加入0.5wt.%戊二醛、0.2wt.%柠檬酸，搅拌，静置，即得。
其中，步骤1中碎片大小在0.5-1cm；步骤2中复合酶是中性蛋白酶和液体纤维素酶按重量比2：3组成的混合物，高压均质条件为0.8MPa、循环5次；步骤4中层析柱是聚酰胺柱。
实施例2
一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，取蚕茧破碎，清洗后晾干，得碎片；
步骤2，将碎片加至含有2wt.%复合酶的水溶液中，高压均质，得到酶解液；
步骤3，采用微滤膜对酶解液进行过滤除杂，得到清液；
步骤4，将清液导入层析柱中进行除杂，得到丝胶蛋白溶液；
步骤5，将所得丝胶蛋白溶液减压浓缩至体积缩小为17%，加入0.6wt.%戊二醛、0.5wt.%柠檬酸，搅拌，静置，即得。
其中，步骤1中碎片大小在0.5-1cm；步骤2中复合酶是中性蛋白酶和液体纤维素酶按重量比2：3组成的混合物，高压均质条件为0.9MPa、循环5次；步骤4中层析柱是聚酰胺柱。
实施例3
一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，取蚕茧破碎，清洗后晾干，得碎片；
步骤2，将碎片加至含有1wt.%复合酶的水溶液中，高压均质，得到酶解液；
步骤3，采用微滤膜对酶解液进行过滤除杂，得到清液；
步骤4，将清液导入层析柱中进行除杂，得到丝胶蛋白溶液；
步骤5，将所得丝胶蛋白溶液减压浓缩至体积缩小为18%，加入0.6wt.%戊二醛、0.4wt.%柠檬酸，搅拌，静置，即得。
其中，步骤1中碎片大小在0.5-1cm；步骤2中复合酶是中性蛋白酶和液体纤维素酶按重量比2：3组成的混合物，高压均质条件为1MPa、循环5次；步骤4中层析柱是聚酰胺柱。
实施例4
一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，取蚕茧破碎，清洗后晾干，得碎片；
步骤2，将碎片加至含有4wt.%复合酶的水溶液中，高压均质，得到酶解液；
步骤3，采用微滤膜对酶解液进行过滤除杂，得到清液；
步骤4，将清液导入层析柱中进行除杂，得到丝胶蛋白溶液；
步骤5，将所得丝胶蛋白溶液减压浓缩至体积缩小为20%，加入1.2wt.%戊二醛、0.7wt.%柠檬酸，搅拌，静置，即得。
其中，步骤1中碎片大小在0.5-1cm；步骤2中复合酶是中性蛋白酶和液体纤维素酶按重量比2：3组成的混合物，高压均质条件为1.2MPa、循环5次；步骤4中层析柱是聚酰胺柱。
实施例5
本实施例与实施例3的区别在于：步骤5中还需要加入0.1-0.5wt.%海藻酸钠。
一种丝胶蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，取蚕茧破碎，清洗后晾干，得碎片；
步骤2，将碎片加至含有1wt.%复合酶的水溶液中，高压均质，得到酶解液；
步骤3，采用微滤膜对酶解液进行过滤除杂，得到清液；
步骤4，将清液导入层析柱中进行除杂，得到丝胶蛋白溶液；
步骤5，将所得丝胶蛋白溶液减压浓缩至体积缩小为18%，加入0.6wt.%戊二醛、0.4wt.%柠檬酸，搅拌，静置，即得。
其中，步骤1中碎片大小在0.5-1cm；步骤2中复合酶是中性蛋白酶和液体纤维素酶按重量比2：3组成的混合物，高压均质条件为1MPa、循环5次；步骤4中层析柱是聚酰胺柱。
本发明采用复合酶结合高压均质的工艺提取丝胶蛋白，该工艺丝胶蛋白的提取效率可达90%，所制成的丝胶蛋白水凝胶不仅具有多孔性、可降解性，还具有良好的生物相容性。