一种含有顺铂的抗癌药物组合物的制作方法

本发明属于抗癌药物技术领域，具体涉及一种含有顺铂和噻唑烷化合物ZYF-38的抗癌药物组合物。

背景技术：

癌症是严重威胁人类生存健康的重大疾病之一，其发病率呈上升趋势，其死亡率很高。癌症的治疗，传统的方法包括手术、放射治疗和化学药物治疗，目前化学治疗是晚期癌症的主要治疗手段之一。但目前临床上广泛使用的化疗药物疗效有限，毒性作用较大，多次后还会发生耐药。癌症的化学药物疗中，只给予一种抗癌药物就能达到所需的治疗效果的情形十分少见。临床治疗上，为达到良好的治疗效果的目的，通常使用具有不同作用机理的两种以上药物的多药物治疗。这种联合治疗的目的在于通过使具有不同作用机理的抗癌药物联合使用以减轻副作用，增强抗癌作用，希望达到减少不敏感细胞群体，防止或延迟产生抗药性，分散毒性等治疗效果。然而，对于联合治疗，不同作用机理药物的随机联用并不一定提供抗肿瘤效果增强作用或协同作用。

顺铂，CAS号为 15663-27-1，分子式为 Pt(NH₃)₂Cl₂，分子量为 300.05。中文别名为顺氯氨铂，顺式铂，顺式二氨二氯铂，英文名称cis-Dichlorodiamineplatinum(II)，最早于1844年制得，直到1967年，美国密执安州大学教授Rosenberg等人才发现其顺式异构有抗癌作用，并于1969年应用于临床，1978年在美国上市。顺铂是第1个铂类药物，顺铂为重金属铂的络合物，在中心原子铂的四周有2个氯原子和2个氨分子，具有双官能团烷化剂的性质。在人体内，氯可被水解下来，形成活泼的带正电的水化分子，然后与核酸和蛋白质反应，引起DNA链间或链内交联，或形成DNA与蛋白质的交联，从而抑制DNA复制和转录，导致DNA断裂和误码，抑制细胞有丝分裂，且作用较强而持久。顺铂的抗癌谱较广，为细胞周期非特异性药物，静注后迅速广泛分布于肝、肾、前列腺、膀胱、卵巢、亦可到达胸腹腔，极少通过血脑屏障，在人体内主要通过肾脏排泄。DDP是目前肿瘤化疗的主要药物，对睾丸癌、骨肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、小细胞肺癌和非小细胞肺癌、头颈部癌、胃癌、膀胱癌、恶性淋巴瘤和软组织肉瘤有较好疗效。顺铂具有以下特点：(1)抗癌谱广，抗癌作用强，抗癌活性高；(2)毒副作用，主要是肾毒性和恶心、呕吐，毒性谱与其他抗癌药物有不同之处，因此易与其他抗癌药物配伍，包括与其他铂类抗癌药物配伍；(3)与其他抗癌药物缺乏交叉耐药性，有利于临床的联合用药。顺铂的抗肿瘤药效确定，效果较好，临床应用较为广泛。但是，在杀伤肿瘤细胞同时，对人体正常细胞也造成很大伤害，毒性反应较为严重。其主要的毒性反应包括肾毒性、消化道毒性、骨髓抑制神经毒性和耳毒性等，在很多情况下，毒性反应严重时可导致治疗中断。

噻唑烷化合物在医药、农业、化学等很多领域具有广泛的开发以及应用价值。在医药领域，噻唑烷化合物具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化和抗菌等作用，因此在临床上噻唑烷化合物可用于治疗多种疾病。近年来，大量研究表明噻唑烷化合物能通过多种途径干预肿瘤发展的不同阶段，进而发挥潜在的抗癌效应，其中涉及的主要机制包括阻止细胞增长、诱导细胞凋亡、抑制细胞侵袭转移、限制能量供应等。本发明人研究中发现一种噻唑烷化合物(E)-5-(4-hydroxy-3-methoxybenzylidene)-2-(phenylamino)thiazol-4(5H)-one具有抗癌作用，其化学式为C₁₇H₁₄N₂O₃S，分子量为326.37，结构式见图1，命名为ZYF-38。经研究ZYF-38对多种癌细胞具有抑制作用，但其和顺铂等药物组合使用的效果未见报道。

技术实现要素：

为解决现有技术上的不足，本发明提供了一种含有顺铂和噻唑烷化合物ZYF-38的抗癌药物组合物。

本发明的目的是提供一种含有顺铂和噻唑烷化合物ZYF-38的组合物作为抗癌药物，解决临床药物复合使用，减轻毒性，提高疗效。

本发明的技术方案如下：

一种含有顺铂的抗癌药物组合物，其特征在于：顺铂和噻唑烷化合物ZYF-38之间的重量比为0.1:1至20: 0.1。

优选的，顺铂和噻唑烷化合物ZYF-38之间的重量比为0.3:1至13.4:1 。

更优选的，顺铂和噻唑烷化合物ZYF-38之间的重量比为0.3:1、5:3、10:3、20:3或40:3。

药物组合物的剂型为粉剂、注射液、胶囊、片剂、缓释剂或口服液中的一种或多种医学上可接受的剂型。

药物组合物的使用方式为注射、口服、手术放置中的一种或多种医学上可接受的方式。

优选的，所述药物组合物用于制备治疗肺腺癌或大细胞肺癌的药物。

本发明的有益效果是：

1、本发明可以显著提高疗效。比单组份治疗，本药物组合物具有明显的协调作用，具有增加治疗效果作用。

2、本发明药物联合使用，可以降低抗性的产生。

3、本发明毒副作用小。

附图说明

图1是ZYF-38的化学结构式。

图2是不同浓度的ZYF-38对A549和WI-38细胞的生长抑制作用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述：

实施例1 ZYF-38对A549细胞和Wi-38细胞的增殖抑制作用

将处于对数生长期且形态良好的肺腺癌细胞系A549、人正常胚肺细胞系Wi-38细胞PBS冲洗、0.25%胰酶消化并吹打为单细胞悬液，计数后，调整细胞浓度为4×10⁴个/mL，按照100µL/孔接种于96孔板。于37℃、5% CO2饱和湿度培养箱中培养24h后，加入不同浓度的待测药物，继续培养一段时间后加入50µL XTT-PMS，孵育4h后，于酶标仪中检测450nm处的吸光值。

存活率=（实验组OD-空白组OD）/（溶剂对照组OD-空白组OD）×100%。

结果表明，用浓度为0.1µM/L、1µM/L、10µM/L、40µM/L、80µM/L的ZYF-38作用细胞48h后，实验组A549、细胞的存活率下降趋势极显著，呈剂量依赖性；而阳性对照组Wi-38细胞存活率的下降趋势不显著，说明ZYF-38对正常细胞Wi-38的毒性相对较小（图2）。

实施例2 ZYF-38与顺铂联合使用对A549细胞、H460细胞和Wi-38细胞的协同抑制作用

将处于对数生长期且形态良好的A549细胞、H460细胞或者Wi-38细胞进行PBS冲洗、0.25%胰酶消化并吹打为单细胞悬液。常规计数后，调整细胞浓度为4×10⁴个/mL，按照100µL/孔接种于96孔板。于37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱中培养24h后，加入待测药物，继续培养一段时间后加入50µL XTT-PMS，孵育4h后，于酶标仪中检测450nm处的吸光值。

抑制率=1-（实验组OD-空白组OD）/（溶剂对照组OD-空白组OD）×100%。

两药相互作用系数值Q=E（A+B）/(EA+EB-EA×EB)

E（A+B）指A、B两药联合对细胞的抑制率，EA和EB指A、B药分别对细胞的抑制率。Q>1.15时，两药有协同作用；Q=0.85~1.15时，两药有相加作用；Q<0.85时，两药表现为拮抗作用。

表1、ZYF-38与顺铂联用对A549细胞的增殖抑制作用

表2、ZYF-38与顺铂联用对H460细胞的增殖抑制作用

表3、ZYF-38与顺铂联用对Wi-38细胞的增殖抑制作用

结果表明，ZYF-38联合顺铂对A549细胞和H460细胞的增殖抑制作用显著强于ZYF-38或者顺铂单独对两种细胞的作用，ZYF-38联合顺铂对A549和H460两种细胞表现为明显的协同作用（表1、表2）。而ZYF-38联合顺铂对Wi-38细胞表现为相加作用（表3）。

实施例3 ZYF-38与顺铂联用对小鼠移植性肺癌A549的抑制作用

将雄性裸鼠随机分成对照组（加生理盐水），顺铂组以及ZYF-38组，每组10只。首先，将形态良好且处于对数生长期的A549细胞于超净工作台内，用1×PBS缓冲液冲洗，再用0.25%的胰蛋白酶+0.02%EDTA-Na₂消化细胞，加入1640培养基，将消化下来的A549细胞混匀，离心并收集A549细胞沉淀，接着用生理盐水来稀释沉淀的A549细胞，计数后调整细胞浓度为1.2×10⁷个/mL，用一次性注射器吸取0.2mL接种于裸鼠上肢的腋下。待瘤长到大小约1.0cm时，采用尾静脉注射的方式给药。向对照组的裸鼠上肢的腋下注射生理盐水0.2mL/只，顺铂组的裸鼠上肢的腋下加入抗肿瘤药物顺铂的浓度为3mg/kg，ZYF-38组的裸鼠上肢的腋下加入ZYF-38的浓度为10mg/kg。每隔三天用游标卡尺测量一次肿瘤的直径(A)和肿瘤的横径（B），按照公式V=π/6×(A/2+B/2)3计算肿瘤的体积大小，绘制出肿瘤的生长曲线。

表4、ZYF-38与顺铂联用对小鼠移植性肺癌A549的抑制作用

结果表明，ZYF-38或者顺铂单独对A549细胞作用后，肿瘤的抑制率分别为16.5%和35.8%，显著抑制了肿瘤的生长。ZYF-38和顺铂联合作用增强了抑瘤作用，肿瘤抑制率达到70.6%，Q值为1.52，两药表现为明显协同作用（表4）。

以上所述仅是本专利的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和替换，这些改进和替换也应视为本专利的保护范围。