本发明属于医药领域，具体涉及冠心宁组合物在制备治疗和/或预防慢性疲劳综合症药物中的应用。
背景技术：
冠心宁组合物由丹参、川芎两味中药组成，具有活血化瘀，通脉养心作用。川芎中的化学成分主要有生物碱如川芎嗪，酚性物质如阿魏酸、大黄酚和川芎酚等。川芎的药理作用主要通过钙的拮抗作用和清除自由基作用，对缺血性组织器官的损伤有明显的保护作用和改善作用，川芎通过抗血小板聚集、扩张血管、降低血糖粘稠度、调整txa2/pgi2等作用而具有抗血栓作用。冠心宁注射液是含有丹参和川芎的有效提取物的中药制剂。自70年代开发研制成水针剂在国内上市已有30多年的历史，是临床常用的治疗心脑血管病的中药注射剂，具有改善冠脉循环和抗血凝作用，能显著增加冠脉血流量，改善心肌供血，预防和减少血栓的形成，使栓塞范围缩小。主要用于冠心病、心绞痛的治疗。现代医学研究表明：冠心宁注射液能扩张血管，降低血压，增加冠脉血流量，缩短实验性心肌缺血持续时间；降低血粘度，改变红细胞膜的电荷，增加红细胞的变形能力；抑制凝血，抑制血小板合成前列腺素。抑制血小板粘附，聚集，延长血清凝血酶原时间，促进红细胞解聚，促进纤溶功能。临床上主要用于治疗支气管肺炎、冠心病、冠心病心绞痛、颈性眩晕、急性脑梗塞、血管性痴呆、早期脑梗死、慢性肺心病心衰、病毒性心肌炎、2型糖尿病、糖尿病并发缺血性脑卒中、糖尿病周围神经病变、2型糖尿病肾病、慢性支气管炎急性发作等。
现上市的冠心宁注射液是按照药品标准ws3-b-3267-98-2012制备的。其具体制备方法是：丹参、川芎按照1000g∶1000g配伍。以上二味，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.16～1.26(70℃)的清膏，加乙醇至含量为85％，冷藏，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调ph值至约8.0～8.5，冷藏，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至约1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(70℃)的清膏，用盐酸溶液调节ph值至2～3，冷藏，滤过，滤液以10％氢氧化钠溶液调节ph至6.8～7.2，加热煮沸30分钟，加适量活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加入注射用水适量和亚硫酸氢钠0.5g，滤过，滤液调节ph值至约6.8～7.3，滤液加注射用水至1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。
慢性疲劳综合症是一种持续及反复发作的身体疲劳症状。美国疾病预防及控制中心早于上世纪80年代末期已确立了这种病症，日本、欧美经济发达国家以及香港等城市的患者较多。慢性疲劳综合症的主要病症为长期极度疲劳，包括脑力疲劳及体力疲劳，患者经常有睡眠不足的感觉，即使长期卧床休息也未能舒缓疲惫，体力也会不断下降，运动量只及平时一半，患者还会出现难以集中精神、记忆力变差、关节及肌肉痛和淋巴结肿大等问题，症状可以持续半年或以上，但不少患者的身体检查及验血结果多属正常，长时间也未能找出引致疲劳的原因。医学界估计压力是引发慢性疲劳综合症的重要原因之一。生活节奏急速，发病率高。闷热、污染、噪音、压迫等环境因素都可能导致人体的神经、内分泌及免疫系统紊乱，由此产生慢性疲劳综合症。在日常生活中，由于工作繁忙、生活紧张、学习负担沉重等原因，一些人时常会感到十分疲劳，一般情况下，自感疲劳的病人几天或一周后体力即可恢复。如疲劳超过一个月，可认为是持续疲劳；如果疲劳症状长于3个月，就应到医院及时就诊。若疲劳持续半年以上，并伴有肌肉疼痛、头痛、低热、注意力不集中、记忆力下降、情绪低落、夜间盗汗、体重改变、喉部酸痛、多个关节疼痛，即使睡眠充足，体力仍难以恢复，运动后疲劳感持续较长时间等症状，甚至影响人们的工作、学习和日常生活，就可能患上了疲劳综合征或原发性慢性疲劳。由于医学界对慢性疲劳综合征的研究尚不深入，目前对其进一步危害尚不清楚，也缺乏有效的治疗措施。
慢性疲劳综合征的西医治疗以对症支持疗法为主，有抗抑郁治疗、抗病毒治疗、免疫治疗，营养补充和大剂量维生素、心理咨询等疗法，其疗效大部分尚未确定。而中医药治疗目前是热点之一，其优点表现在疗效明显且药物毒副作用小。本发明首次发现冠心宁组合物或制剂具有治疗和/或预防慢性疲劳综合症的作用。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供冠心宁组合物的新用途。
为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：
一种冠心宁组合物在制备治疗和/或预防慢性疲劳综合症损伤药物中的应用，所述冠心宁组合物是由以下原料制成：丹参、川芎。
在本发明的一种实施方式中，所述冠心宁组合物是由重量比为1:1的丹参与川芎制备而成的。
在本发明的一种实施方式中，按重量比为1:1称取丹参与川芎，混合后粉碎，或粉碎后混合得到。
在本发明的一种实施方式中，按重量比为1:1称取丹参与川芎，混合后提取制备而成。
在本发明一种优选的实施方式中，所述冠心宁组合物的制备方法包括如下步骤：按重量比为1:1称取丹参与川芎，制备丹参提取物的步骤，制备川芎提取物的步骤，以及将上述丹参提取物、川芎提取物混合的步骤，或将丹参与川芎混合，在进行提取的步骤。
在本发明一种优选的实施方式中，所述冠心宁组合物的制备方法包括如下步骤：丹参与川芎的水提、醇沉步骤。
在本发明一种优选的实施方式中，所述冠心宁组合物所述冠心宁组合物可以与适当的辅料制备成注射制剂或口服制剂。
在本发明一种优选的实施方式中，所述冠心宁组合物所述口服制剂包括口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂。
在本发明一种优选的实施方式中，所述冠心宁组合物可以与适当的辅料制备成口服制剂，可采用常规的制备方法制备，例如，范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可接受的常规剂型。
在一些实施方式中，所述口服制剂包括口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂。
为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：peg6000，peg4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料)。
在本发明一种优选的实施方式中，所述冠心宁组合物制备成注射制剂的制备方法包括：丹参与川芎加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度1.16～1.26的清膏，加乙醇至含量为85％，冷藏，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调ph值至约8.0～8.5，冷藏，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释，冷藏，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度1.10～1.15的清膏，用盐酸溶液调节ph值至2～3，冷藏，滤过，滤液以10％氢氧化钠溶液调节ph至6.8～7.2，加热煮沸30分钟，加适量活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加入注射用水适量和亚硫酸氢钠，滤过，滤液调节ph值至约6.8～7.3，滤液加注射用水，滤过，灌封，灭菌。
具体实施方案
下述是结合具体实施例或试验例进一步阐述本发明。但这些实施例或试验例仅限于说明本发明而不是用于限制本发明的范围。下列实施例或试验例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按照常规条件。
实施例1：冠心宁组合物
丹参1000g，川芎1000g
以上二味，加6l水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.16～1.26(70℃)的清膏，加乙醇至含量为85％，冷藏，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调ph值至约8.0～8.5，冷藏，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至约1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(70℃)的清膏，干燥，粉碎，过100目筛，即得。
实施例2：冠心宁注射液
丹参1000g，川芎1000g
以上二味，加6l水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.16～1.26(70℃)的清膏，加乙醇至含量为85％，冷藏，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调ph值至约8.0～8.5，冷藏，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至约1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(70℃)的清膏，用盐酸溶液调节ph值至2～3，冷藏，滤过，滤液以10％氢氧化钠溶液调节ph至6.8～7.2，加热煮沸30分钟，加适量活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加入注射用水适量和亚硫酸氢钠0.5g，滤过，滤液调节ph值至约6.8～7.3，滤液加注射用水至1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。
对比例1：丹参提取物
丹参1000g，加3l水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.16～1.26(70℃)的清膏，加乙醇至含量为85％，冷藏，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调ph值至约8.0～8.5，冷藏，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至约1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(70℃)的清膏，干燥，粉碎，过100目筛，即得。
对比例2：川芎提取物
川芎1000g，加3l水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.16～1.26(70℃)的清膏，加乙醇至含量为85％，冷藏，滤过，滤液用40％氢氧化钠溶液调ph值至约8.0～8.5，冷藏，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至约1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(70℃)的清膏，干燥，粉碎，过100目筛，即得。
试验例冠心宁组合物对慢性疲劳综合症的作用
1.试验动物与分组
健康sd大鼠50只，180～220g，雌雄不限，随机分为5组，每组10只，分别为：对照组，模型组、丹参提取物(对比例1)组、川芎提取物(对比例1)组、冠心宁组合物(实施例1)组。除了对照组外，其他各组大鼠采用电击法、限制法和冷水游泳法诱导出现慢性疲劳综合症状。操作细节如下：电击法：在大鼠饲养笼下方中间放置用铜丝缠绕成排状的电路板(20cm×30cm)，每天两次喂食的期间通电，大鼠要去觅食和饮水就必须踩踏通电铜丝后才能到达放置食物的另一端。限制法：将大鼠放置在一根自制的聚氯乙烯管(长20.0cm，直径5.0cm)中，头部一侧封闭并留有呼吸用的小洞，尾部一侧用胶带封闭，每隔一天进行一次，每次2h。冷水游泳法：将大鼠放置在21℃的水中游泳，每天1次，每次30min。4周的建模期间，每天上午给各剂量组大鼠灌胃相应剂量的药物水溶液，对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水。
2.血清抗氧化指标与免疫器官指数的测定
4周造模期结束后，立刻对大鼠麻醉采血，少量血液制备血清，使用试剂盒测定血清sod、gsh-px活性和mda含量。大鼠处死后，立刻取脾脏和胸腺组织，按照下式计算免疫器官指数。
免疫器官指数(mg/g)＝免疫器官质量(mg)÷体质量(g)
3.脾脏t淋巴细胞转化能力测定
将脾脏置于预冷的rpmi-1640培养基中，洗涤后剪碎，针拴研磨，经200目筛网过滤，分离脾脏淋巴细胞，hank’s液洗涤若干次，1000r/min离心10min，取上清液，台盼蓝染色计数，活细胞需多于95％，调整细胞密度为2×106个/ml，置于96孔培养板中，每孔加入细胞悬液1ml，平行2孔，一孔加入50μlcona，另一孔作为对照。置于培养箱(37℃，5％co2)中培养72h。培养终止前4h，每孔吸出上清液0.7ml，加入0.7mlrpmi-1640完全培养基，同时加5mg/mlmtt溶液50μl，振荡混匀，培养箱中继续培养4h后取出，每孔加入1ml酸性异丙醇，振荡静置，1500r/min离心5min取上清液，测定光密度值od570nm。
4.统计分析
采用统计软件spss10.0处理数据，统计方法用单因素方差分析，组间比较采用t检验。
5.结果
(1)冠心宁组合物对大鼠免疫器官指数测定结果的影响
表1冠心宁组合物对大鼠免疫器官指数的影响(x±s，n＝10)
注：*与对照组比较：p＜0.05；#与模型组比较：p＜0.05；##与模型组比较：p＜0.01
本实验结果发现，与对照组相比，模型组大鼠脾脏指数与胸腺指数显著下降，表明慢性疲劳综合症模型对大鼠造成影响，使得大鼠免疫器官指数降低，进而影响机体免疫能力。给予丹参提取物、川芎提取物，及冠心宁组合物后，脾脏指数、胸腺指示较模型组显著增加，而对冠心宁组明显好于丹参提取物及川芎提取物组，提示两提取物可以起到协同增效作用。
(2)冠心宁组合物对大鼠脾脏t淋巴细胞转化的影响
表2冠心宁组合物对大鼠脾脏t淋巴细胞转化的影响(x±s，n＝10)
注：*与对照组比较：p＜0.05；#与模型组比较：p＜0.05
本实验结果发现，与对照组相比，模型组大鼠t淋巴细胞转化实验测定的od570nm值显著下降，表明慢性疲劳综合症模型对大鼠的淋巴细胞活性造成影响。给予丹参提取物、川芎提取物，及冠心宁组合物后，只有冠心宁组合物组大鼠的od570nm值较模型组显著增加，且与对照组相比无显著差异。
(3)冠心宁组合物对大鼠血清sod、gsh-px活性及mda含量的影响
表3冠心宁组合物对血清sod、gsh-px活性及mda含量的影响情况(x±s，n＝10)
注：**与对照组比较：p＜0.01；#与模型组比较：p＜0.05
本实验结果发现，与对照组相比，模型组大鼠血清sod、gsh-px活性变化不明显，但mda含量极显著性升高(p＜0.01)；给予丹参提取物、川芎提取物，及冠心宁组合物后，只有冠心宁组合物组大鼠的mda含量比模型组显著降低(p＜0.05)。
慢性疲劳综合症是人体由于长期处于身体与精神双重压力下而导致身体出现多种症状的一种疾病。为了更好地研究筛选慢性疲劳综合症的治疗药物及作用效果，一般采用如精神刺激、强迫运动、药物以及限制活动等方式建立慢性疲劳综合症动物模型，造模时间不少于2周。本实验采用电击法、限制法和冷水游泳法3种方式建立慢性疲劳综合症模型，为期4周。有研究报道慢性疲劳综合症患者一般会伴随免疫能力低下及机体抗氧化能力下降的现象，如自然杀伤细胞活性降低、t淋巴细胞转化能力降低、脂质过氧化程度增加等[16-19]。本实验通过测定大鼠脾脏指数、胸腺指数、t淋巴细胞转化程度、血清抗氧化酶活性以及脂质过氧化产物含量等指标，结果显示慢性疲劳综合症对照组脾脏指数、胸腺指数和t淋巴细胞转化程度显著降低，血液脂质过氧化产物mda含量显著升高，说明慢性疲劳综合症模型建立较为成功，酶活性、部分免疫学指标和氧化损伤指标符合慢性疲劳综合症患者的一般特征。
本实验结果表明冠心宁组合物对慢性疲劳综合症模型大鼠的脾脏指数、胸腺指数、t淋巴细胞转化程度、血液脂质过氧化产物含量等指标都有一定程度的改善作用，这可能与其免疫调节活性及抗氧化性有关。
应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。