本发明属于中药
技术领域：
，具体涉及一种中药组合物及其制备方法与应用，尤其涉及一种具有补血功能和提高免疫力的中药组合物及其制备方法与应用。
背景技术：
：贫血是指人体外周血红细胞容量减少，低于正常范围下限的一种常见的临床症状。贫血的表现为软弱无力，疲乏、困倦，是因肌肉缺氧所致，为最常见和最早出现的症状。此外，头晕、头痛、耳鸣、眼花、注意力不集中、嗜睡等均为贫血常见症状。中医认为贫血属于血虚的范畴。血虚多由于失血过多，或者血液生化之源不足，或因淤血阻滞或因新血不生等，临床表现为面色淡白或萎黄，口唇、眼睑、指甲色淡，心悸多梦，手足发麻，头晕眼花，妇女经血量少色淡、延期甚或闭经，舌淡脉细。而血虚是中医临床最为常见的病证之一。目前市售的治疗贫血的中成药虽然确有一定疗效，但大多配伍复杂、长期服用对身体有一定副作用。因此，研究开发服用配伍简单、效果显著、适合长期服用并宜于养生的中药组合物具有重要意义。技术实现要素：有鉴于此，本发明的目的在于提供一种中药组合物及其制备方法与用途。本发明所述组合物以中药为主要原料，各种成分合理组方、配合共用，对贫血、免疫力低下有着显著的改善作用。为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：一种中药组合物，由下述重量份的组分制备而成：灵芝20～50份，黄芪30～60份，银耳10～30份，当归10～30份。其中，灵芝为多孔菌科真菌赤芝ganodermalucidum(leyss.exfr.)karst.或紫芝ganodermasinensezhao，xuetzhang的干燥子实体，性味甘，平，归心、肺、肝、肾经，主要功能有补气安神，止咳平喘，用于眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘。当归，伞形科植物当归angelicasinensis(oliv.)diels.的根，性味温，甘、辛，归肝、心、脾经，主要功效有补血活血，调经止痛，润肠通便。临床上常用于血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌扑损伤，痈疽疮疡。黄芪，豆科植物蒙古黄芪astragalusmembranaceus(fisch.)bge.var.mongholicus(bge.)hsiao或膜荚黄芪astragalusmembranaceus(fisch.)bge.的干燥根，甘，温，归肺、脾经。主要功能有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。临床上常用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴。银耳，真菌类银耳科银耳属植物银耳tremellafuciformisberk.以子实体，甘，平。主要功能有补肺益气，养阴润燥。临床上常用于病后体虚，肺虚久咳，痰中带血，崩漏，大便秘结，高血压病，血管硬化。本发明所述中药组合物中以灵芝、黄芪、银耳、当归进行复配，各种成分合理组方、配合共用，各组分产生增效协同作用，对贫血、免疫力低下有着显著的改善作用，其效果显著优于单独使用各组分。本发明所述中药组合物所用原料均属于食品或保健品可用范畴，无毒，长期食用依赖性小，且价格低廉，适合普通消费者适合日常及长期食用，具有广阔的市场前景。在本发明提供的一些实施方案中，所述的中药组合物由下述重量份的组分制备而成：灵芝50份，黄芪50份，银耳10份，当归10份。在一些实施方案中，所述的中药组合物由下述重量份的组分制备而成：灵芝20份，黄芪60份，银耳20份，当归20份。在另一些实施方案中，所述的中药组合物由下述重量份的组分制备而成：灵芝30份，黄芪30份，银耳30份，当归30份。本发明中所述的灵芝、黄芪、银耳、当归是本领域技术人员公知的，可以通过商业途径购买得到，可以为原药，也可以为饮片，只要灵芝、黄芪、银耳、当归满足《中华人民共和国药典》(2015年版)质量标准即可。本发明所述中药组合物的使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括使用者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、使用时间、代谢速率、病程严重程度以及诊治医师的主观判断。本领域的技术人员根据上述因素可以容易地决定所述中药组合物的使用剂量和使用方法。本发明还提供了所述中药组合物的制备方法。一种中药组合物的制备方法，取灵芝、当归、黄芪、银耳混合加水提取，过滤后收集提取液。在一些实施方案中，所述中药组合物的制备方法中所述水提取为加10-20倍量水，煎煮2-3次，每次1.5-3小时。在一些具体实施例中为：将灵芝、黄芪、银耳、当归按比例称量，第一次加20倍量水，煎煮2h，过滤，收集滤液，滤渣加入20倍水，煎煮1h，过滤，合并2次滤液。进一步的，所述中药组合物的制备方法中还包括浓缩和干燥步骤。在一些实施方案中，合并的滤液浓缩至每100ml含有100g生药量，干燥。所述干燥可以为冷冻干燥，也可以为70℃烘干。在一个具体实施方案中，本发明通过给予大鼠本发明所述中药组合物30天，再以放血和环磷酰胺造模10天后，检测本发明所述中药组合物对血虚大鼠模型的体重、外周血相的影响，结果显示，给予本发明所述中药组合物的大鼠体内红细胞数量、血红蛋白含量和血清铁蛋白水平皆显著高于模型组或空白对照组。表明本发明所述中药组合物可增加红细胞数量、提高血红蛋白和血清铁蛋白水平，具有补血、改善贫血的作用。因此，本发明提供了所述中药组合物在制备增加红细胞数量、提高血红蛋白和/或血清铁蛋白水平的产品中的应用。同时还提供了所述中药组合物在制备补血产品中的应用。其中，所述中药组合物用于补血的剂量为1ml/100g。在一个具体实施方案中，本发明通过给予大鼠本发明所述中药组合物30天，再以放血和环磷酰胺造模10天后，检测本发明所述中药组合物对血虚大鼠模型的白细胞数量、脾指数和胸腺指数的影响，结果显示给予本发明所述中药组合物的大鼠造模后脾指数升高、胸腺指数升高，且血液中白细胞数量也得到显著提高。表明本发明所述中药组合物可提高白细胞数量、提高动物脾指数、提高胸腺指数，具有提高免疫力的作用。因此，本发明提供了所述中药组合物在制备提高白细胞数量、提高动物脾指数、提高胸腺指数的产品中的应用。同时还提供了所述中药组合物在制备提高免疫力的产品中的应用。其中，所述中药组合物用于提高免疫力的剂量为1ml/100g。本领域技术人员可以根据不同使用者的需求将本发明所述中药组合物加入制备不同剂型时所需的各种常规的添加剂，如崩解剂、润滑剂、乳化剂、粘合剂等，以常规制剂方法，制成常用药品或保健食品，如胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、粉剂、颗粒剂、散剂等。本发明所述中药组合物选用灵芝、当归、黄芪、银耳为原料按一定配比制成，灵芝、当归、黄芪、银耳合理组方、配合共用，各组分产生增效协同作用，对贫血、免疫力低下有着显著的改善作用，其效果显著优于单独使用各组分。本发明所述中药组合物的制备方法为取灵芝、当归、黄芪、银耳混合加水提取，过滤后收集提取液，最大程度的保留了各原料的有效成分，制备得到的中药组合物补血、提高免疫力效果显著，同时操作简单，适合于工业化生产。本发明所述中药组合物能显著提高血虚大鼠模型的体重以及增加红细胞数量、提高血红蛋白和/或血清铁蛋白水平，具有补血、改善贫血的作用。同时本发明所述中药组合物可提高白细胞数量、提高动物脾指数、提高胸腺指数，具有提高免疫力的作用。具体实施方式本发明公开了一种具有补血功能的中药组合物及其制备方法与应用。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。实施例1：中药组合物按照重量份分别称取灵芝50份，黄芪50份，银耳10份，当归10份，加入20倍水，煎煮2h，过滤，收集滤液，滤渣加入20倍水，煎煮1h，过滤，合并2次滤液；浓缩滤液至每100ml含有100g生药量，冷冻干燥或者70℃烘干，粉碎即得中药组合物。实施例2：中药组合物按照重量份分别称取灵芝20份，黄芪60份，银耳20份，当归20份，加入20倍水，煎煮2h，过滤，收集滤液，滤渣加入20倍水，煎煮1h，过滤，合并2次滤液；浓缩滤液至每100ml含有100g生药量，冷冻干燥或者70℃烘干，粉碎即得中药组合物。实施例3：中药组合物按照重量份分别称取灵芝30份，黄芪30份，银耳30份，当归30份，加入20倍水，煎煮2h，过滤，收集滤液，滤渣加入20倍水，煎煮1h，过滤，合并2次滤液；浓缩滤液至每100ml含有100g生药量，冷冻干燥或者70℃烘干，粉碎即得中药组合物。对比例1～4处方如表1：组别灵芝黄芪银耳当归对比例112份0份0份0份对比例20份12份0份0份对比例30份0份12份0份对比例40份0份0份12份按照重量份分别称取灵芝、黄芪、银耳、当归，加入20倍水，煎煮2h，过滤，收集滤液，滤渣加入20倍水，煎煮1h，过滤，合并2次滤液；浓缩滤液至每100ml含有100g生药量，冷冻干燥或者70℃烘干，粉碎即得对比例1-4的组合物。实施例4：中药组合物对血虚大鼠模型的干预研究1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物spf大鼠，雄性，动物适应性喂养5天后，将所有大鼠称体重，按照体重由轻到重排列。剔除重量在150～160g以及240g以上的大鼠。将体重在180-230g的大鼠分为12个区间，每个区间4.2g，随机分为每组12只。本次实验所需大鼠均从华中农业大学实验动物中心订购且自行饲养及管理。1.1.2供试品实施例1-3所述中药组合物和对比例1-4所述中药组合物，需在4℃避光保存。1.1.3主要试剂及仪器铁蛋白检测试剂盒(南京建成；货号:h129；48t)电子天平bsa124s，赛多利斯科学仪器(北京)有限公司；台式高速离心机tg16-ⅱ，长沙平凡仪器仪表有限公司；血细胞分析仪xfa6100，美国贝克曼库尔特；灌胃针，1ml注射器，1.5mlep管，移液枪，离心机，小剪刀镊子等。1.2方法1.2.1动物分组将spf级大鼠进行随机分组，分为空白对照组、模型组、阳性药对照组(当归补血口服液，国药准字z10970001，郑州市协和制药厂)、实施例1～3组，对比例1～4组；每组12只。将0.06g实施例和对比例所述中药组合物粉末溶解于1ml蒸馏水中，用灌胃针吸取药品溶液，按给药量1ml/100g对大鼠进行灌胃。1.2.2动物造模大鼠分组后，除空白对照组和模型组外，其他组别大鼠均预给药30d，剂量为1ml/100g(实施例1～3组分别给予各实施例中药组合物，对比例1～4组分别给予各对比例中药组合物，阳性药组给予当归补血口服液)。除空白对照组外，其他各组开始造模10d。造模第一日每鼠尾部(眼眶)放血5ml/kg，隔日再放血1次，共放血5次，大鼠于造模的第2日，每鼠腹腔注射环磷酰胺40mg/kg，隔日注射，共注射5次(第2次-第5次的剂量为20mg/kg)，造成血虚模型共10d。1.2.3动物外观及行为学观察主要观察造模后各组中大鼠的精神状态、体重、眼、耳、皮毛色泽等外观行为变化。精神状态：正常；自发活动减少；逃避、攻击行为明显减少。外观状况：观察大鼠毛发(光泽、稀疏脱落程度)、耳边缘、眼部变化(眼球及眼周围颜色)。体重：称量体重变化。结果显示，造模后大鼠的耳边缘明显要比空白对照组大鼠颜色苍白，鼻周围明显要比空白对照组血色暗淡，眼球颜色比空白对照组暗淡，无神。造模10天后，与空白对照组大鼠比较，模型组活动明显减弱，逃避、攻击行为明显减少，通过对模型大鼠外观及行为学的观察，表明造模后大鼠有明显的血虚状态，表明血虚模型大鼠造模成功。表2造模后大鼠体重占初始体重百分比(％)(n＝12)注：*示与空白对照组相比存在显著性差异，p<0.05；#示与模型组相比存在显著性差异，p<0.05；a表示对比例与实施例1相比存在显著性差异，p<0.05；b表示对比例与实施例2相比存在显著性差异，p<0.05；c表示对比例与实施例3相比存在显著性差异，p<0.05；如表2所示，空白对照组大鼠体重未出现明显波动；模型组大鼠体重呈下降趋势，在第3天至第7天下降幅度明显；阳性药对照组大鼠体重呈先上升再下降趋势；各个实施例组大鼠体重均呈逐渐上升趋势，且与模型组对比均有显著性差异(p<0.05)；第7天，对比例1、3、4与实施例2和3相比具有显著性差异(p<0.05)；第10天，对比例1、2、3、4与各实施例相比均具有显著性差异(p<0.05)。1.2.4外周血相的测定大鼠气血两虚模型成功后，末次放血造模中，收集大鼠眼眶取血1.5ml，其中0.5ml全血(肝素抗凝450u·ml-1)，用动物血细胞分析仪测定血常规包括红细胞计数(rbc)、白细胞计数(wbc)、血红蛋白(hb)。另取1ml于干燥ep管收集全血，充分静置使得红细胞充分自然凝固后，3000r/min离心10min，取上层血清(约200μl)。按铁蛋白试剂盒(南京建成，货号:h129；48t)操作说明测定。结果如表3：表3造模后大鼠红细胞和白细胞含量变化(n＝12)注：*示与空白对照组相比存在显著性差异，p<0.05；#示与模型组相比存在显著性差异，p<0.05；a示对比例与实施例1相比存在显著性差异，p<0.05；b表示对比例与实施例2相比存在显著性差异，p<0.05；c表示对比例与实施例3相比存在显著性差异，p<0.05；如表3，大鼠经预给药30天，放血和环磷酰胺造模10天后，测得红细胞含量和白细胞含量。其中，红细胞含量，与空白对照组比较，模型组中红细胞数量显著降低(p<0.05)。与模型组比较，阳性药对照组显著提高造模后大鼠的红细胞数量。实施例1～3组大鼠的红细胞数量均高于模型组也高于各对比例组，且实施例1～3组与模型组或对比例组相比均具有显著性差异(p<0.05)。白细胞含量，与空白对照组比较，模型组中白细胞数量显著降低(p<0.05)。与模型组比较，阳性药对照组没有显著提高造模后大鼠的白细胞数量。且实施例1～3组与模型组或对比例组相比均具有显著性差异(p<0.05)。表4造模后大鼠血红蛋白和血清铁蛋白含量变化注：*示与空白对照组相比存在显著性差异，p<0.05；#示与模型组相比存在显著性差异，p<0.05；a示对比例与实施例1相比存在显著性差异，p<0.05；b表示对比例与实施例2相比存在显著性差异，p<0.05；c表示对比例与实施例3相比存在显著性差异，p<0.05；如表4，大鼠经预给药30天，放血和环磷酰胺造模10天后，测得血红蛋白含量和血清铁蛋白含量。其中，血红蛋白含量，与空白对照组比较，模型组中血红蛋白含量显著降低(p<0.05)。与模型组比较，阳性药对照组显著提高造模后大鼠的血红蛋白的含量(p<0.05)。且实施例1～3组与模型组或对比例组相比均具有显著性差异(p<0.05)。血清铁蛋白含量，与空白对照组比较，模型组大鼠的血清中铁蛋白含量显著降低(p<0.05)。与模型组比较，阳性药对照组显著提高造模后大鼠的血清中铁蛋白含量(p<0.05)。且实施例1～3组与模型组或对比例组相比均具有显著性差异(p<0.05)。1.2.5脾指数和胸腺指数的测定将试验大鼠腹主动脉取血后，解剖取脾脏、胸腺，于生理盐水中漂洗掉表面的血液，在用滤纸吸去水分，用电子天平称重，计算胸腺和脾指数，胸腺指数＝胸腺重(mg)/鼠重(g)；脾指数＝脾重(mg)/鼠重(g)。表5造模后大鼠脾指数、胸腺指数和肝糖原指标含量(n＝12)注：*示与空白对照组相比存在显著性差异，p<0.05；#示与模型组相比存在显著性差异，p<0.05；a示对比例与实施例1相比存在显著性差异，p<0.05；b表示对比例与实施例2相比存在显著性差异，p<0.05；c表示对比例与实施例3相比存在显著性差异，p<0.05；如表5所示，大鼠经预给药30天，放血和环磷酰胺造模10天后，测得其脾指数、胸腺指数和肝糖原数值。与空白对照组比较，模型组大鼠脾指数或胸腺指数显著降低(p<0.05)。与模型组比较，阳性药对照组显著提高造模后大鼠脾指数或胸腺指数(p<0.05)。实施例1～3组大鼠脾指数、胸腺指数均高于模型组或各对比例组。当前第1页12