本发明属中药领域，涉及中药有效部位及其提取、纯化及精制方法，具体指一种从绞股蓝全草原料中提取精制绞股蓝皂苷及其制备方法。
背景技术：
现有技术公开了绞股蓝为葫芦科绞股蓝属多年生攀援草本植物，又称七叶胆、五叶参、公罗锅底、落地生根和七叶参等，拉丁文名为gynostemmapentaphyllum(thunb.)makino。该植物共分13种，分布于我国、日本和朝鲜及东南亚各国，其中，据调查显示，在我国有11种存在，即：单叶绞股蓝、光叶绞股蓝、缅甸绞股蓝、毛绞股蓝、长梗绞股蓝、啄果绞股蓝、心籽绞股蓝、小籽绞股蓝、聚果绞股蓝、疏花绞股蓝；其味苦、性甘寒、无毒，具有清热解毒、补气生津、祛痰止咳、安神固精的作用，主治慢性支气管炎、咳嗽、气喘、传染性肝炎，肾盂肾炎，以及健忘失眠、倦怠少食、梦遗滑精等症。
研究显示，绞股蓝植物中含有皂苷类物质、黄酮类物质、多糖类物质、维生素类物质、菇类类物质、有机酸类物质、生物碱类物质、蛋白质类物质等有效成分。皂苷类物质是其主要成分之一，绞股蓝皂苷含有人参皂苷相同的四环三萜达玛烷型结构。绞股蓝中皂苷含量比较丰富，目前有关研究已先后从绞股蓝中分离鉴定了80余种皂苷。研究显示，绞股蓝皂苷具有降血脂、降胆固醇、降血压、增强冠状动脉和脑血流量、抗dna的变异作用、提高机体免疫功能等作用。
目前，从绞股蓝药材中提取皂苷类物质的常规提取方法有加水煎煮法、有机溶剂回流提取法、渗漉法等，以及有微波提取、超声提取法、酶辅助提取等各种新技术；但其中的精制的方法不多，主要利用皂苷类物质在正丁醇中溶解度大的特性，用正丁醇萃取，但正丁醇沸点高，回收不容易，且在终产物中残留量较大，工业化生产不易。
基于现有技术的现状，
本技术：
的发明人拟提供一种中药有效部位及其提取、纯化及精制的方法，尤其是从绞股蓝全草原料中提取精制绞股蓝皂苷及其制备方法。该方法将对工业化大生产提取精制绞股蓝皂苷具有现实意义。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种中药有效部位及其提取、纯化及精制的方法，具体涉及绞股蓝总皂苷及其制备方法，尤其是一种可工业化生产，成本低，工艺流程短的从绞股蓝中提取纯化绞股蓝总皂苷的方法。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为，基于大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂，具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积，以及，大孔吸附树脂越来越多的应用于中药与天然药物有效成分、有效部位的纯化和分离，且，所述的大孔吸附树脂可再生重复使用，生产成本低的特点，提供了一种从绞股蓝中提取精制绞股蓝皂苷的方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）取绞股蓝全草，粉碎成粗粉或切成小段，加较高浓度醇，回流提取1-3次，每次0.5-3小时，滤过，滤液回收醇，加水溶解，滤过，得滤液；
（2）将滤液上于大孔吸附树脂柱上，使绞股蓝中的有效成分缓慢吸附于柱床内的树脂上，以水洗脱，再用较低浓度碱液洗脱除杂，再用水洗至中性，洗脱液弃去；
（3）再用较低浓度醇洗脱以适合的流速除杂，低浓度乙醇洗液弃去；
（4）再用较高浓度醇以适合的流速洗脱绞股蓝总皂苷，收集较高浓度醇洗脱液，合并，回收，再减压干燥，即为绞股蓝总皂苷。
本发明中采用紫外分光光度法测定制得的绞股蓝总皂中的总皂苷含量，以绞股蓝皂苷a计，含量为92%~94%。
进一步地，所述步骤(1)的较高浓度醇为40%-95%的甲醇或乙醇，所用量为药材量的6-30倍；
进一步地，所述步骤(2)所述的较低浓度碱液为0.5%-10%的氢氧化钠或氢氧化钾或氨试液，洗脱剂用量为树脂体积的1-7倍；
进一步地，所述步骤(1)中，所述的绞股蓝全草为切成短段的绞股蓝或者粉碎成粗粉的绞股蓝；
进一步地，所述步骤(2)中，所述的绞股蓝中的有效成分为绞股蓝皂苷；
进一步地，所述步骤(2)中，所用的大孔树脂为弱极性和非极性大孔吸附树脂，包括但不限于ab-8，d101，hpd100，nka-2等；
进一步地，所述步骤(3)的较低浓度醇为20%-40%的甲醇或乙醇，流速为0.5-2倍柱体积每小时，洗脱剂用量为树脂体积的2-6倍；
进一步地，所述步骤(4)的较高浓度醇为50%-95%的甲醇或乙醇，流速为0.5-2倍柱体积每小时，洗脱剂用量为树脂体积的2-8倍。
与现有技术相比，本发明的优点在于，
本方法中仅应用一次树脂纯化，不采用正丁醇萃取，即达到纯化效果，其损失的皂苷量少，成本低，周期短。本发明的从绞股蓝中提取纯化绞股蓝总皂苷的方法，可用于工业化生产，成本低，工艺流程短。
附图说明
图1是紫外分光光度法测定总皂苷含量图。
具体实施方式
实施例1
取绞股蓝全草1500克，切成短断，加70%乙醇20倍量，回流提取3小时，滤过，滤液加收乙醇至尽，加水7500ml，煮沸30分钟，滤过，将滤液上于ab-8柱（已处理，vol=1500ml），5小时上样完毕，流出液弃去；以水洗2bv，水洗液弃去；再用0.2%氢氧化钠洗2bv（3000ml），碱洗液弃去（除掉黄酮类物质），1bv/h；再用水洗至中性（约6bv），水洗液弃去，2bv/h；然后用40%乙醇4bv（6000ml）洗脱，1bv/h，40%乙醇洗液弃去；再用80%乙醇4bv（6000ml）洗脱，1bv/h，收集80%乙醇洗液，回收乙醇，浓缩成稠膏，再减压干燥，即得绞股蓝总皂苷；采用紫外分光光度法测定总皂苷含量，以绞股蓝皂苷a计，含量为92%。
实施例2
取绞股蓝全草3000克，粉碎成粗粉，加85%甲醇15倍量，回流提取2小时，滤过，滤液加收甲醇至尽，加水20l，煮沸30分钟，滤过，将滤液上于d101柱（已处理，vol=3000ml），6小时上样完毕，流出液弃去；以水洗3bv，水洗液弃去；再用0.5%氢氧化钾洗2bv（6000ml），碱洗液弃去，1.5bv/h；再用水洗至中性（约6bv），水洗液弃去，2bv/h；然后用30%甲醇4bv（6000ml）洗脱，1bv/h，30%甲醇洗液弃去；再用70%甲醇5bv洗脱，1bv/h，收集70%甲醇洗液，回收甲醇，浓缩成稠膏，再减压干燥，即为绞股蓝总皂苷；采用紫外分光光度法测定总皂苷含量，以绞股蓝皂苷a计，含量为94%。