专利名称：一种绞股蓝总皂苷的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种绞股蓝总皂苷的提取方法。
背景技术：
绞股蓝是我国中药的宝贵财富，素有"南方人参"之称，在日本被称作"福音草"。 祖国医学认为绞股蓝具有清热解毒、祛痰止咳、镇静安神、益气强身的功效。绞股蓝含有80 多种绞股蓝皂苷，有4种皂苷分别与人参皂苷Rbl、 Rb3、 Rd、 F2的结构完全相同，其人参皂 苷的含量是人参的8倍，11种皂甙是高丽参的3倍，总皂苷含量是人参的3倍，同时还富含 绞股蓝多糖、18种氨基酸、多种微量元素、丰富的维生素、果酸等。绞股蓝皂苷与人参皂苷作 用相似，且无过量服用的副作用，是一种新的药食两用植物资源。现代药学研究证实绞股蓝 皂苷具有降血脂、降血糖、抗溃疡、抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老、保肝及增强免疫功能等作用。
目前，对绞股蓝的研究虽然是遍地开花，但主要采用水提法和醇提法制备纯度不 高的绞股蓝总皂苷提取物，也有极少一部分生产厂家采用大孔树脂进行绞股蓝总皂苷分离 纯化。其中，水提法和醇提法存在绞股蓝皂苷活性损失大、耗时长、溶剂耗费量大、易污染环 境、分离成本高及在提取过程中有效成分损失严重等缺点，收率一般在0. 3%左右。而采用 大孔吸附树脂处理时，由于绞股蓝所含皂苷的极性大，且与色素不易分离，使得所用树脂柱 的分离效果不佳，所得的总皂苷提取率低，且色泽不好，含量不高，给工业化利用大孔树脂 柱为分离和纯化绞股蓝总皂苷带来许多问题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种绞股蓝总皂苷的提取方法，利用碱液煮沸提 取及树脂层析法从绞股蓝中提取高纯度的调节脂肪代谢的绞股蓝皂苷，用以预防高脂血 症、动脉粥样硬化等病变。
本发明提供的绞股蓝总皂苷的提取方法，包括下述步骤
(1)将绞股蓝粉碎，得到绞股蓝粉末； (2)取步骤(1)得到的绞股蓝粉末，加入NaOH水溶液煮沸，过滤，取滤液；
(3)步骤(2)所述滤液通过大孔吸附树脂进行吸附，然后以NaOH水溶液对所述大 孔吸附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯化水洗至中性，最后以乙醇解吸，收 集乙醇解吸液； (4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2);
(5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷。
作为优选，步骤(1)所述绞股蓝粉末粒径大小为2 4mm。
作为优选，上述的NaOH水溶液PH = 9 11 。 上述大孔吸附树脂优选ADS-7型大孔树脂与AB-8型大孔吸附树脂任意比的混合
物，更优选ADS-7型大孔吸附树脂与AB-8型大孔吸附树脂质量比2 : 1的混合物。 步骤(3)所述乙醇优选质量浓度大于等于50%的乙醇溶液，更优选质量浓度为50 70%的乙醇水溶液。
本发明提供的绞股蓝总皂苷的提取方法，有益效果如下 1、以NaOH溶液煮沸提取绞股蓝皂苷，提取率高，成本低，不仅使绞股蓝皂苷更好 地溶解于溶液中，同时还使得色素形成沉淀，过滤后可除去绝大多数的色素杂质，为后续处 理减轻了色素除去的压力； 2、用NaOH溶液洗脱树脂柱至无色，除去了所有难于除去的色素，所得产品纯度高 (> 97% )，颜色为白色。由于采用碱溶液洗脱色素，碱溶液本身就有树脂再生功能，因此省 去了树脂再生过程，且每批次大孔树脂可循环使用300次以上，节省了时间和大量多次购 买树脂的成本，创造了效益； 3、层析过程所采用的NaOH溶液用活性炭柱脱去色素，循环至提取和层析使用，因 此整个过程只需要第1次处理所需的水即可，该过程并没有增加生产成本，节省出来的水 成本反而大大的降低了整个过程的生产成本； 4、用高于50%的乙醇解吸效率很高，其解析率达96. 2%以上；
5、整个过程无污水排放，无毒，无有害物质产生。
图1是绞股蓝总皂苷提取方法的工艺流程具体实施例方式
下面结合附图1和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可
以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。 实施例1 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸搅拌 提取3次，每次2h，过滤，合并滤液。 用碱水提取省去了醇提取浓縮过程，既节省了时间又节省了浓縮过程中的电能损 耗和试剂回收过程中的试剂损耗，同时提取率高达93.2%，成本低，易于实现低成本大规模 生产。而且，经长期的生产跟踪检测显示，绞股蓝总皂苷在整个提取过程中活性稳定，没有 因为碱性环境和水环境而影响其绞股蓝总皂苷活性。 (3)步骤(2)所述滤液通过ADS-7大孔吸附树脂，比吸附量为40. 3mg/g，然后以pH
=9 11的NaOH水溶液对所述大孔吸附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯
化水洗至中性，最后以70%的乙醇水溶液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率达96. 2%。 (4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)。 碱水用活性炭柱脱去色素循环使用，提取过程碱水零排放，省水节能； (5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉，颜色
为白色。
(6)总皂苷含量测定
①对照品的制备
称取干燥的绞股蓝，以甲醇为溶剂，回流提取3次，每次2h。合并过提取液，浓縮至 浸膏，用水溶解，分别用石油醚、氯仿、正丁醇萃取，回收石油醚、氯仿、正丁醇后得到不同的 萃取物。将正丁醇萃取物用少量水溶解后，过ADS-7大孔吸附树脂柱层析，先用pH二 10碱 液洗至无色，再纯化水洗至中性最后用纯度高于50%的乙醇洗脱，收集乙醇液，减压回收乙 醇，干燥后作为对照品。
②标准曲线的制作 精密称取对照品10mg，置于干燥的lOmL容量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，精 密吸取O. 06， 0. 12， 0. 18， 0. 24， 0. 30mL分别注入具塞试管中，水浴加热挥去溶剂，冷却，各 加入0. 40mL 5%香草醛一冰醋酸(新配)和1. 6mL高氯酸，摇匀，塞紧试管，放入7(TC恒温 水浴15min后取出，冷却至室温，加入冰醋酸10mL，摇匀，用紫外分光光度计在波长529nm处 测量吸收度。随行试剂作空白。得回归曲线方程为Y = 6. 58X-0. 0006， r = 0.9998。
③样品溶液的制备及测量 精密称取步骤(5)所得的总皂苷干粉10mg，分别置于10mL的容量瓶中，用乙醇溶 解并稀释至刻度。精密吸取O. 12mL分别注入具塞试管中，水浴加热挥去溶剂，冷却，各加入 0. 40mL 5%香草醛一冰醋酸(新配)和1. 6mL高氯酸，摇匀，塞紧试管，在7(TC恒温水浴中 加热15min后取出，冷却至室温，加入冰醋酸10mL，摇匀。同标准曲线的操作，在同一条件下 测量吸收度，由回归曲线方程计算得总皂苷含量为98. 5%。
实施例2 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸搅拌 提取3次，每次2h，过滤，合并滤液。 用碱水提取省去了醇提取浓縮过程，既节省了时间又节省了浓縮过程中的电能损 耗和试剂回收过程中的试剂损耗，同时提取率高达93.2%，成本低，易于实现低成本大规模 生产。而且，绞股蓝总皂苷在整个提取过程中活性稳定，没有因为碱性环境和水环境而影响 其绞股蓝总皂苷活性。 (3)步骤(2)所述滤液通过AB-8大孔吸附树脂，比吸附量为40. 5mg/g，然后以pH
=9 11的NaOH水溶液对所述大孔吸附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯
化水洗至中性，最后以90%的乙醇水溶液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率达97. 4%。 (4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)。 碱水用活性炭柱脱去色素循环使用，提取过程碱水零排放，省水节能； (5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉，颜色
为白色。 (6)总皂苷含量测定步骤① ③同实施例l，计算得总皂苷含量为98. 0%。
实施例3 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸搅拌 提取3次，每次2h，过滤，合并滤液。
用碱水提取省去了醇提取浓縮过程，既节省了时间又节省了浓縮过程中的电能损 耗和试剂回收过程中的试剂损耗，同时提取率高达93.2%，成本低，易于实现低成本大规模 生产。而且，绞股蓝总皂苷在整个提取过程中活性稳定，没有因为碱性环境和水环境而影响 其绞股蓝总皂苷活性。 (3)步骤(2)所述滤液通过ADS-7型大孔吸附树脂与AB-8型大孔吸附树脂质量比 2 : 1的混合物，比吸附量为45. 5mg/g，然后以pH = 9 11的NaOH水溶液对所述大孔吸 附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯化水洗至中性，最后以50%的乙醇水溶 液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率达99. 1 % 。 (4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)。 碱水用活性炭柱脱去色素循环使用，提取过程碱水零排放，省水节能； (5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉，颜色
为白色。 (6)总皂苷含量测定步骤① ③同实施例l，计算得总皂苷含量为99. 3%。
实施例4 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸搅拌 提取3次，每次2h，过滤，合并滤液。 用碱水提取省去了醇提取浓縮过程，既节省了时间又节省了浓縮过程中的电能损 耗和试剂回收过程中的试剂损耗，同时提取率高达93.2%，成本低，易于实现低成本大规模 生产。而且，绞股蓝总皂苷在整个提取过程中活性稳定，没有因为碱性环境和水环境而影响 其绞股蓝总皂苷活性。 (3)步骤(2)所述滤液通过ADS-7型大孔吸附树脂与AB-8型大孔吸附树脂质量比 1 : 1的混合物，比吸附量为41. 5mg/g，然后以pH = 9 11的NaOH水溶液对所述大孔吸 附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯化水洗至中性，最后以70 %的乙醇水溶 液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率达97. 1 % 。 (4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)。 碱水用活性炭柱脱去色素循环使用，提取过程碱水零排放，省水节能； (5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉，颜色
为白色。 (6)总皂苷含量测定步骤① ③同实施例l，计算得总皂苷含量为97. 8%。
实施例5 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸搅拌 提取3次，每次2h，过滤，合并滤液。 用碱水提取省去了醇提取浓縮过程，既节省了时间又节省了浓縮过程中的电能损 耗和试剂回收过程中的试剂损耗，同时提取率高达93.2%，成本低，易于实现低成本大规模 生产。而且，绞股蓝总皂苷在整个提取过程中活性稳定，没有因为碱性环境和水环境而影响其绞股蓝总皂苷活性。 (3)步骤(2)所述滤液通过ADS-7型大孔吸附树脂与AB-8型大孔吸附树脂质量比 1 : 4的混合物，比吸附量为45. 2mg/g，然后以pH = 9 11的NaOH水溶液对所述大孔吸 附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯化水洗至中性，最后以50%的乙醇水溶 液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率达96. 1 % 。 (4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)。 碱水用活性炭柱脱去色素循环使用，提取过程碱水零排放，省水节能； (5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉，颜色
为白色。 (6)总皂苷含量测定步骤① ③同实施例l，计算得总皂苷含量为98. 3%。
对比实施例1 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入50 %乙醇水溶液煮沸搅拌提取3次， 每次2h，过滤，合并滤液。 (3)步骤(2)所述滤液通过ADS-7型大孔吸附树脂与AB-8型大孔吸附树脂质量 比2 : 1的混合物，比吸附量为39. 5mg/g，以纯化水洗至无色，最后以80%的乙醇水溶液解 吸，收集乙醇解吸液，解吸率达93. 1 % 。 (4)步骤(3)所述的乙醇解吸液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉， 颜色为浅绿色。 (6)总皂苷含量测定步骤① ③同实施例l，计算得总皂苷含量为87. 3%。
对比实施例2 (1)取干燥的绞股蓝，粉碎至粒径为2 4mm的粉末。此粒径下的粉末有利于总皂 苷的提取及过滤分离。 (2)称取绞股蓝粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸搅拌 提取3次，每次2h，过滤，合并滤液。 (3)步骤(2)所述滤液通过D-101型大孔吸附树脂，比吸附量为37. lmg/g，然后以 pH = 9 n的Na0H水溶液对所述大孔吸附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以 纯化水洗至中性，最后以80%的乙醇水溶液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率达91. 8%。
(4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)。
(5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷干粉，颜色 为淡绿色。 (6)总皂苷含量测定步骤① ③同实施例l，计算得总皂苷含量为89. 0%。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范 围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明 的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
权利要求
一种绞股蓝总皂苷的提取方法，其特征在于，包括下述步骤(1)将绞股蓝粉碎，得到绞股蓝粉末；(2)取步骤(1)得到的绞股蓝粉末，加入NaOH水溶液煮沸，过滤，取滤液；(3)步骤(2)所述滤液通过大孔吸附树脂进行吸附，然后以NaOH水溶液对所述大孔吸附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯化水洗至中性，最后以乙醇解吸，收集乙醇解吸液；(4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)；(5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷。
2. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述绞股蓝粉末粒径大小为2 4mm 。
3. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的NaOH水溶液PH = 9 11。
4 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂为ADS-7型大孔树脂与AB-8型大孔吸附树脂任意比的混合物。
5. 根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)所述大孔吸附树脂为ADS-7型大孔吸附树脂与AB-8型大孔吸附树脂质量比2 : l的混合物。
6. 根据权利要求l所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)所述乙醇为质量浓度大于等于50%的乙醇溶液。
7. 根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)所述乙醇为质量浓度50 70%的乙醇水溶液。
全文摘要
本发明公开了一种绞股蓝总皂苷的提取方法，包括下述步骤(1)将绞股蓝粉碎，得到绞股蓝粉末；(2)取步骤(1)得到的绞股蓝粉末，加入NaOH水溶液煮沸，过滤，取滤液；(3)步骤(2)所述滤液通过大孔吸附树脂进行吸附，然后以NaOH水溶液对所述大孔吸附树脂进行洗脱至无色，收集NaOH洗脱液，再以纯化水洗至中性，最后以乙醇解吸，收集乙醇解吸液；(4)步骤(3)所述NaOH洗脱液以活性炭吸附，脱去色素后，循环用于步骤(2)；(5)步骤(4)所述的乙醇液，减压蒸馏，回收乙醇，固体烘干，得总皂苷。此方法成本低，效率高，无污染，产品纯度高。
文档编号A61P9/00GK101732398SQ20101010501
公开日2010年6月16日 申请日期2010年2月3日 优先权日2010年2月3日
发明者张向军, 李培帮 申请人:陕西太极华青信息系统有限公司