专利名称：一种用于治疗冠心病、心绞痛的药物的检测方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种用于治疗冠心病、心绞痛的药物的检测方法，特别是涉及一种用于治疗冠心病、心绞痛的软胶囊剂，例如葛兰心宁软胶囊的检测方法。
背景技术：
葛兰心宁软胶囊由葛根总黄酮、山楂提取物、绞股蓝总皂苷三味中药材提取物组成，具有协同作用，符合中药组方原则，能够达到标本兼治的目的。该制剂吸收了经典古方之精华，具有活血化瘀，通络止痛之功效，用于治疗淤血闭阻所致的冠心病、心绞痛。在全国各地医院临床应用过程中，证明其具有显著的临床疗效，深得广大医务工作者和患者的信任。在现有的葛兰心宁软胶囊的检测方法中，对葛根总黄酮和绞股蓝总皂苷进行了薄层色谱(TLC)鉴别，而未制定山楂提取物的薄层色谱(TLC)鉴别方法。为进一步控制该产品的质量，需要对该产品的质量控制方法进行完善，从而更进一步保证该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种用于治疗冠心病、心绞痛的药物的检测方法，该检测方法能够有效控制药物的质量，使药物质量稳定可控，从而更好地满足
医疗需要。本发明的目的是采用如下技术方案来实现的。一种用于治疗冠心病、心绞痛的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法检测所述药物中的山楂提取物，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为15 25 2 6 O.1 1. 0，优选为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸作为展开剂；采用加热显色,显色剂为10% v/v 50% v/v,优选为30% v/v的硫酸乙醇溶液，加热温度为60_105°C，优选为80°C。上述检测方法中，采用薄层色谱法检测所述药物中的山楂提取物包括如下步骤(I)取所述药物，加硅藻土研细，加无水乙醇，超声，过滤，浓缩，取上清液作为供试品溶液；(2)另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成对照品溶液；(3)取供试品溶液和对照药材溶液点于同一薄层色谱板上，以体积比为15 25 2 6 O.1 1.0，优选为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，采用加热显色，显色剂为10% v/v 50% v/v,优选为30% v/v的硫酸乙醇溶液，加热温度为60-105°C，优选为80°C，至斑点显色清晰，检视。优选地，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物包括如下步骤(I)取所述药物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液；(2)另取熊果酸对照品,加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液,作为对照品溶液；(3)吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开齐[J,展开,取出，晾干,喷以30% v/v的硫酸乙醇溶液，在80°C下加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm的紫外光灯下检视。更优选地，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物包括如下步骤(I)取所述药物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液；(2)另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；(3)再取不含山楂提取物的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液；(4)吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开齐[J,展开,取出，晾干,喷以30% v/v的硫酸乙醇溶液，在80°C下加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm的紫外光灯下检视。上述检测方法中，所述药物组成及配比如下葛根总黄酮100-300重量份、山楂提取物30-90重量份、绞股蓝总皂苷10_40重量份、色拉油125-400重量份、蜂蜡3-15重量份、氢化棕榈油10-30重量份、大豆磷脂5_20重量份、甲基硅油O. 2-1. O重量份；优选地，所述药物组成及配比如下葛根总黄酮200重量份、山楂提取物60重量份、绞股蓝总皂苷20重量份、色拉油254重量份、蜂腊6重量份、氢化棕榈油20重量份、大豆磷脂10重量份、甲基娃油O. 5重量份。上述检测方法中，所述药物可以是葛兰心宁软胶囊，该软胶囊一个处方量(即制1000粒)配比如下葛根总黄酮200g、山楂提取物60g、绞股蓝总皂苷20g、色拉油254g、蜂腊6g、氢化棕榈油20g、大豆磷脂10g、甲基娃油O. 5g。上述葛兰心宁软胶囊的制备方法如下取色拉油，加入蜂蜡、氢化棕榈油，加热使溶解，放冷，加入大豆磷脂，搅匀，加入葛根总黄酮、山楂提取物、绞股蓝总皂苷，搅匀，胶体磨研匀，加入甲基硅油，减压除泡，药液压制成软胶囊，即得。在一个具体实施方案中，本发明提供一种检测治疗冠心病、心绞痛药物，例如上述葛兰心宁软胶囊的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物，其中，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物包括如下步骤取葛兰心宁软胶囊(该软胶囊可以购自西安千禾药业有限责任公司)内容物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。再取按葛兰心宁软胶囊处方比例和工艺制备的不含山楂提取物的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以30% v/v硫酸乙醇溶液，在80°C下加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。上述检测方法中，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同的橙黄色荧光斑点。上述鉴定方法阴性无干扰，样品重性形良好，可以作为鉴别葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的依据。本发明通过对治疗冠心病、心绞痛药物葛兰心宁软胶囊中的山楂提取物进行检测，能够更有效控制葛兰心宁软胶囊的质量，使葛兰心宁软胶囊质量达到稳定、可控、高效及安全，克服现有技术的不足，提高产品的质量、疗效、生物利用度，更好的地满足医疗的需要。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1是葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的薄层色谱鉴定图(日光检视)，其中，1-3表示三批供试品；4表示山楂提取物阴性样品；5表示熊果酸对照品；图2是葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的薄层色谱鉴定图(紫外光检视)，其中，1-3表示三批供试品；4表示山楂提取物阴性样品；5表示熊果酸对照品。图3是葛兰心宁软胶囊中采用甲苯-乙酸乙酯-甲酸(33 7 O. 05)为展开剂的山楂提取物的薄层色谱鉴定图(日光检视)，其中，I表示熊果酸对照品；2-4表示三批供试品；5表示山楂提取物阴性样品；图4是葛兰心宁软胶囊中采用甲苯-乙酸乙酯-甲酸(33 7 O. 05)为展开剂的山楂提取物的薄层色谱鉴定图(紫外光检视)，其中，I表示熊果酸对照品；2-4表示三批供试品；5表示山楂提取物阴性样品。
具体实施例方式下面通过实施例详细说明本发明，应当理解，下述实施例仅用于说明本发明，而不以任何方式限制本发明的范围。实施例1葛兰心宁软胶囊的处方及制备方法1、处方葛根总黄酮200g、山楂提取物60g、绞股蓝总皂苷20g、色拉油254g、蜂蜡6g、氢化棕榈油20g、大豆磷脂10g、甲基娃油O. 5g,制成1000粒。2、制备方法取色拉油，加入蜂蜡、氢化棕榈油，加热使溶解，放冷，加入大豆磷脂，搅匀，加入葛根总黄酮、山楂提取物、绞股蓝总皂苷，搅匀，胶体磨研匀，加入甲基硅油，减压除泡，药液压制成软胶囊，即得。实施例2葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取20110409、20110410、20110411三种不同批次葛兰心宁软胶囊(购
自西安千禾药业有限责任公司，其组成、配比和制备方法如实施例1所示)内容物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液。
另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。再取按葛兰心宁软胶囊处方比例和工艺制备的不含山楂提取物的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20 : 4 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30%硫酸乙醇溶液，在80°C加热至斑点显色清晰分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，结果如图1和图2所示。结果显示，三批供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而阴性样品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，未显相同颜色的斑点，阴性无干扰。说明方中其它药味不影响山楂提取物的检出，因此，可以作为鉴别葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的依据。实施例3葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。
2、试验步骤取葛兰心宁软胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 2 O.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% v/v硫酸乙醇溶液，在60°C加热至斑点显色清晰；分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。但效果较实施例2差，斑点不太明显。实施例4葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取葛兰心宁软胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各
5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25 6 1. O)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以50% v/v硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。但效果较实施例2差，斑点不太明显。
实施例5葛兰心宁软胶囊中山楂提取物的薄层色谱鉴定(对照试验)1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取葛兰心宁软胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(33 7 0.05)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以50% v/v硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，结果如图3和4所示。供试品色谱中，在日光下检视时在与对照品色谱相应的位置上，未显明显的相同颜色的斑点，且斑点拖尾严重。在荧光下检视时在与对照品色谱相应的位置上，隐约可见相同颜色的斑点但背景干扰较大，因此不能作为鉴别的展开剂使用。
权利要求
1.一种用于治疗冠心病、心绞痛的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为15 25 2 6 O.1 1. 0，优选为20 : 4 : O. 5的A、B、C三种混合溶液为展开剂，其中，所述A溶液选自苯、甲苯、二氯甲苯、氯仿和乙醚；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇；所述C溶液选自乙酸、甲酸和冰醋酸。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂为体积比为15 25 : 2 6 : O.1 1. 0，优选为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述薄层色谱的条件还包括采用加热显色，显色剂为10% v/v 50% v/v，优选为30% v/v的硫酸乙醇溶液,加热温度为60-105°C，优选为80°C。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的山楂提取物包括如下步骤(1)取所述药物，加硅藻土研细，加无水乙醇，超声，过滤，浓缩，取上清液作为供试品溶液；(2)另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成对照品溶液；(3)取供试品溶液和对照药材溶液点于同一薄层色谱板上，以体积比为15 25: 2 6 O.1 1.0，优选为20 4 O. 5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，采用加热显色，显色剂为10% v/v 50% v/v，优选为30% v/v的硫酸乙醇溶液,加热温度为60-105°C，优选为80°C，至斑点显色清晰，检视。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物包括如下步骤(1)取所述药物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液；(2)另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液,作为对照品溶液；(3)吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 4 0.5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30% v/v的硫酸乙醇溶液，在80°C下加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm的紫外光灯下检视。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物包括如下步骤(1)取所述药物2g，加硅藻土适量，研细，加无水乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，取上清液作为供试品溶液；(2)另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含Img的溶液,作为对照品溶液；(3)再取不含山楂提取物的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液；(4)吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 4 0.5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30% v/v的硫酸乙醇溶液，在80°C下加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm的紫外光灯下检视。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物组成及配比如下葛根总黄酮100-400重量份、山楂提取物30-120重量份、绞股蓝总皂苷10-40重量份、色拉油125-500重量份、蜂腊3-15重量份、氢化棕榈油10-40重量份、大豆磷脂5_20重量份、甲基硅油O. 2-1. O重量份；优选地，所述药物组成及配比如下 葛根总黄酮200重量份、山楂提取物60重量份、绞股蓝总皂苷20重量份、色拉油254重量份、蜂蜡6重量份、氢化棕榈油20重量份、大豆磷脂10重量份、甲基硅油O. 5重量份。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下取色拉油，加入蜂蜡、氢化棕榈油，加热使溶解，放冷，加入大豆磷脂，搅匀，加入葛根总黄酮、山楂提取物、绞股蓝总皂苷，搅匀，胶体磨研匀，加入甲基硅油，减压除泡，药液压制成软胶囊，即得。
全文摘要
本发明提供一种治疗冠心病、心绞痛药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的山楂提取物，其中，所述薄层色谱的条件包括采用体积比为15～25∶2～6∶0.1～1.0，优选为20∶4∶0.5的A、B、C三种混合溶液为展开剂，其中，所述A溶液选自苯、甲苯、二氯甲苯、氯仿和乙醚；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇；所述C溶液选自乙酸、甲酸和冰醋酸。本发明的检测方法灵敏度高，重复性好，且阴性对照无干扰，整个试验过程可操作性强，可以作为控制本品内在质量的指标之一。
文档编号G01N30/90GK103033586SQ201110303569
公开日2013年4月10日 申请日期2011年9月30日 优先权日2011年9月30日
发明者胡小虎, 吕慧锋, 赵宗平 申请人:西安千禾药业有限责任公司