专利名称：穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物及其提取方法及其医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药新的药用部位中的提取物及其提取方法及其药物用途。
背景技术：
穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)为薯蓣科植物，其根部入药，俗称穿地龙。产于内蒙古、黑龙江、四川、安徽、江苏等省。其主要有效部位为薯蓣总皂苷，既是生产治疗心血管疾病药物的主要药源，又是用于合成多种甾体激素类和避孕类药物的薯蓣皂苷元(diosgenin)的重要药源之一。临床研究证明穿龙薯蓣总皂苷对降血脂、平喘、抗炎和抗肿瘤有一定疗效。此类皂苷的种类繁多，但都具有相同的基本骨架和某些官能团，可以借助骨架的通性或官能团的特性，对其进行提取分离。赵全成，等对穿龙薯蓣根部薯蓣皂苷进行了研究，发表了薯蓣皂苷的制备方法、药物制剂及其医药新用途，并申请了发明专利(发明名称薯蓣皂苷的制备方法、药物制剂及其医药新用途，申请号02146284.4)，同时有许多关于薯蓣皂苷元的研究报道。
目前未见到有关穿龙薯蓣的研究与利用报道，因穿龙薯蓣每4年才能收获利用，而其地上部分茎叶茂密、茎高可达2-3米，每年都可以利用，资源非常丰富，而目前却未见利用。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物。
本发明的目的之二是提供一种利用穿龙薯蓣地上部分提取制备穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物的方法。
本发明的目的之三是提供了穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物的新的药物用途。
为实现上述发明目的，本发明采取薯蓣茎叶总皂苷提取物提取精制方法是a.将穿龙薯蓣地上部分粉碎，用20-25倍量水煮提取3次，每次分别为3h、2h、1h，过滤，合并提取液；b.将步骤a得到的提取液上大孔吸附树脂柱，经水洗至无色后，继用80％-95％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至浸膏，干燥。
因穿龙薯蓣每4年才能收获利用，而其地上部分茎叶茂密、茎高可达2-3米，每年都可以利用，资源非常丰富，经过研究表明其富含薯蓣茎叶总皂苷答2％-3％之多，是十分珍贵的新的药用部位，穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物属于新的有效部位，未见到报道，其药物用途属首次发现。穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物其特征为浅黄色至褐色，粉末状，味苦，可溶于水、乙醇等。该穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物的含量占穿龙薯蓣茎叶干重的2％-3％。
当本发明用于制备治疗冠心病，心肌缺血，心律不齐，抗高血脂症的药物时，其口服或胃肠外给药，均是安全的，在口服情况下，其可以任何常规形式给药，如散剂、粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、溶液剂、悬浮液、糖浆、口腔含片、舌下含片等当该药物肠胃外给药时，可采取任何常规形式，例如注射剂如静脉内注射、软膏剂、栓剂、经皮给药、吸入剂等。
本发明制备治疗冠心病、心肌缺血、心律不齐和抗高血脂症的药物是由有效成分单体或有效成分与固体或液体的赋形剂一起构成的，这里使用的固体或液体的赋形剂在本领域是众所周知的，下面举几个具体例子，散剂是内服的粉末剂，它的赋形剂有乳糖、淀粉、浆糊精、碳酸钙、合成或天然硫酸铝、氧化镁、硬脂酸镁，碳酸氢钠、干燥酵母等；溶液剂的赋形剂有水、甘油、丙二醇、单糖浆、乙醇、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇等；软膏剂的赋形剂可以使用脂油，含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂腊、木腊、液体石腊、树脂、高级腊等组合成的疏水剂或亲水剂。
本发明的有益效果是，穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物属于穿龙薯蓣新的有效部位，其药物用途属首次发现，扩大穿龙薯蓣药源。
有效物质的剂量可以根据服用方式，病人的年龄和体重及病情严重程度和其它类似的因素而改变，口服量为70～120mg/次，每日1～2次服用注射30～70mg/次，每日一次。
本发明可通过下面的实验例进一步说明。穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物以下简称DNSSP。
实验例一、DNSSP预防和治疗高血脂症的初步试验1、材料与方法1.1动物 SD大鼠，40只，雌雄各半，体质量130g-150g，购自本校实验动物中心。
1.2药物 穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物DNSSP自制；月见草油，白求恩医科大学制药厂生产。胆固醇粉(AR)，由中国医药(集团)上海化学试剂公司提供(批号F20030410)。
1.3高脂兔饲料及各种含药物高脂饲料的配制 高脂饲料配制基础饲料100g中加入胆固醇0.4g，猪油2mL；在高脂饲料的基础上加入不同含量的药物配制成含药物的高脂饲料供实验喂养。
2、对正常大鼠血脂水平的影响 取大鼠40只，雌雄各半，禁食给水12h，称体质量，随机分为4组(各10只)正常对照组(生理盐水，1ml/100g)、阳性对照组(月见草油1.2g/100g)、薯蓣茎叶总皂苷提取物大剂量组(2.8g/kg)和小剂量组(1.4g/kg)。上述药物均灌胃(ig)给药，每日1次，共15d，实验过程中每周称体质量1次，第16天摘除大鼠眼球，眼眶取血2-3ml，送血生化检查，测血清中TG和TC含量。
3、薯蓣茎叶总皂苷提取物降血脂试验结果见表1。
表1薯蓣茎叶总皂苷提取物降血脂试验结果
4、结论 实验结果表明薯蓣茎叶总皂苷提取物具有明显的降血脂作用。
实验例二、DNSSP对心肌缺血犬心外膜电图ST段的影响一、材料与方法1、动物 健康成年杂种犬，雌、雄兼用，体重16.12±1.67kg。
2、药品及试剂DNSSP样品，性状浅粽色粉末，纯度样品中总皂苷含量不少于55％，批号041107，由吉林大学再生医学科学研究所提供；阳性对照药银杏叶片，规格12mg/片，含总黄酮苷9.6mg，萜类内酯2.4mg，批号20031212，贵州信邦制药股份有限公司产品；戊巴比妥钠，规格分析纯(25g/瓶)，批号950427，北京通县育才精细化工厂产品；肝素钠注射液，规格12500U:2ml，批号0104108，徐州万邦生化制药有限公司产品。
3、仪器 CBI-8000激光多普勒血流量仪(美国BIOPAC公司产品)，根据实验动物冠状动脉及主动脉直径选择适合口径血流量探头；Powerlab/8s型八导数据分析记录仪及相关附件(澳大利亚埃德公司产品)；SC-3型人工呼吸机(上海医疗设备厂产品)；HL-2型恒流泵(上海市沪西仪器厂产品)；TU-1800S型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司产品)；BI-2000医学图象分析仪(成都泰盟科技有限公司产品)。
二、实验方法1.分组及给药剂量 将实验犬随机分为对照组；阳性对照药银杏叶片组(24mg/kg)；DNSSP 24mg/kg、12mg/kg和6mg/kg三个给药剂量组。每组6只。对照药物及受试药物用蒸馏水配制成所需浓度混悬液。
2.手术操作方法 实验动物用3％戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉。
通过结扎犬冠状动脉左前降支中下1/3段，造成左冠脉前降支闭塞，引起左心室前壁、前间隔、心尖部、下侧壁和二尖瓣前乳头肌梗塞，其明显特征是心外膜电图ST段抬高。因此，心外膜电图ST段抬高的总毫伏数(∑ST)是直接反应心肌损伤程度的重要指标。
三、实验结果从表中可以看出冠状动脉结扎前，各组动物心外膜电位的ST段分布一致，各组间无显著差异(P＞0.05)。但在冠状动脉结扎后2min，各组动物心外膜电位的ST段均明显抬高。直至冠状动脉结扎后360min时仍非常明显的高于结扎前。表明冠状动脉左前降支中下1/3段结扎造成的急性心肌缺血模型的稳定、可靠。此外，从表表中的实验结果也可以看出，薯蓣茎叶总皂苷提取物24mg/kg剂量组在冠脉结扎后2min、5min、10nin、20min、30min、60nin、90nin、120nin、180min、240min和300min时，其心外膜电位的∑ST均非常明显的低于对照组(分别为P＜0.05；P＜0.01或P＜0.001)。并且在冠脉结扎后60min时，其心外膜电位的∑ST还非常明显的低于阳性对照药银杏叶片(P＜0.05)。与对照组比较，其具有明显改善作用的持续时间为5h，也长于阳性对照药银杏叶片的4h。表明在相同剂量下，薯蓣茎叶总皂苷提取物对缺血性心外膜电图的改善作用优于阳性对照药银杏叶片。薯蓣茎叶总皂苷提取物12mg/kg剂量组在冠脉结扎后10nin、20min、30min、60nin、90nin、120nin、180nin和240min时；6mg/kg剂量组在冠脉结扎后30min、60nin、90min、120nin和180nin时，其心外膜电位的∑ST均非常明显的低于对照组(分别为P＜0.05或P＜0.01)。表明薯蓣茎叶总皂苷提取物对急性心肌缺血时心电图ST段的异常改变有非常明显的改善作用。详细结果见表2。
表2穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物对心肌缺血犬心外膜心电图ST段抬高总毫伏数(∑ST)的影响(mV x±s n＝6)
注与对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。与阳性对照药银杏叶片组比较▲P＜0.05。
具体实施例方式
提取方法的实施例一a.将穿龙薯蓣地上部分粉碎，用20倍量水煮提取3次，每次分别为3h、2h、1h，过滤，合并提取液；b.将步骤a得到的提取液上大孔吸附树脂D4020柱，经水洗至无色后，继用80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至浸膏，干燥。
提取方法的实施例二a.将穿龙薯蓣地上部分粉碎，用22倍量水煮提取3次，每次分别为3h、2h、1h，过滤，合并提取液；b.将步骤a得到的提取液上大孔吸附树脂D101柱，经水洗至无色后，继用85％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至浸膏，干燥。
提取方法的实施例三a.将穿龙薯蓣地上部分粉碎，用25倍量水煮提取3次，每次分别为3h、2h、1h，过滤，合并提取液；b.将步骤a得到的提取液上大孔吸附树脂柱，经水洗至无色后，继用95％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至浸膏，干燥。
制备药剂的实施例一取穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物50g，加入药用淀粉250g，二者充分混合，制成1000粒胶囊，每粒重0.3g，含穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物50mg。
制备药剂的实施例二取穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物65g，加入药用淀粉235g，二者充分混合，制成1000粒胶囊，每粒重0.3g，含穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物65mg。
权利要求
1.一种穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物，其特征在于由下述方法制备得到的a.将穿龙薯蓣地上部分粉碎，用20-25倍量水煮提取3次，每次分别为3h、2h、1h，过滤，合并提取液；b.将步骤a得到的提取液上大孔吸附树脂柱，经水洗至无色后，继用80％-95％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至浸膏，干燥。
2.一种制备穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物的方法，其特征在于a.将穿龙薯蓣地上部分粉碎，用20-25倍量水煮提取3次，每次分别为3h、2h、1h，过滤，合并提取液；b.将步骤a得到的提取液上大孔吸附树脂柱，经水洗至无色后，继用80％-95％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至浸膏，干燥。
3.穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物在制备用于抗高血脂症、抗心肌缺血、治疗冠心病、心绞痛的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物以及提取精制方法及医药用途。涉及一种中药新的药用部位中的提取物及其提取方法及其药物用途。将中药穿龙薯蓣地上部分粉碎后用水煮提取，水煮液上大孔吸附树脂，经水洗脱无色后，继用80％－95％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇可得到用于中药新药研究的原料药。本发明提取纯化的穿龙薯蓣茎叶总皂苷提取物，具有治疗冠心病、心绞痛、抗心肌缺血、治疗高血脂症等疾病的作用。
文档编号C07J71/00GK1706864SQ20051001677
公开日2005年12月14日 申请日期2005年5月9日 优先权日2005年5月9日
发明者李平亚, 卢丹 申请人:李平亚