专利名称：伪人参皂苷－Pdq及其半合成方法和其药物用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及伪人参皂苷-Pdq及其半合成方法，和其在制备治疗心肌缺血、缺血性休克、心律不齐和再灌损伤药物中的应用。
背景技术：
自从人参皂苷被确证为人参和西洋参中主要有效成分后，化学家们致力于某些单体皂苷的合成和有效单体的转化。目前，主要有以下儿种方法在研究及应用中，例如酸水解法、碱水解法、酶解法、缩合法等。前三种方法主要是在总甙及单体皂苷间，通过水解掉分子中某一部分或几部分来实现某一单体皂苷或儿种单体皂苷转化后的；后一种则是通过糖与苷元通过成甙反应得到某一单体化合物的。
1982年，Hart BH首次报道了用温和酸条件下，使人参皂苷降解并测定了降解产物的结构。例如，将人参皂甙-Rg1，用0.1M HCl，在37℃条件下以不用间隔时间处理，得到降解产物人参皂苷Rh1，李平亚，等研究了从人参皂苷二醇组经酸水解制备单体人参皂苷Rg3(专利号ZL98103433.0)，陈英杰，等首次发现，在适宜的反应条件下，碱催化水解法，对人参皂苷降解具有反应温和，容易控制等优点，用此法成功地从人参皂苷Rg2合成人参皂甙Rh1。1992年宋长春等用同样方法从西洋参茎叶皂苷制备了单体人参皂甙Rh1和Rh2。还有一些用酸碱法降解、用酶法降解的例子，不再赘述。李平亚，等报道了有关利用氧化、环化方法使人参皂苷Rg3转化成伪人参皂苷-Pgq(专利号ZL 0012837.9)。
目前未见到有关伪人参皂苷-Pdq的合成方法及化合物的报道，该化合物属于新化合物，属于首次合成；该化合物的新的药物用途属首次发现。
发明内容
本发明的目的在于提供一种化合物伪人参皂苷-Pdq 其化学名称为达玛-20S，24S-环氧-3β，12β，25-三醇(dammara-20S，24S-epoxy-3β，12β，25-triol)。mp180℃～182℃，白色粉末，易溶于甲醇，乙醇、丙二醇等。因该化合物为新化合物，是以原人参二醇皂苷经过半合成方法得到，其结构特征C17位具有与伪人参皂苷PF11相似残基，也是西洋参中特有成分之一，故命名为伪人参皂苷-Pdg，简称PDQ(P伪；D二醇；Q西洋参，即由原人参二醇皂苷转化成具有西洋参结构特征的化合物)。
本发明的目的还在于利用原人参二醇皂苷为前体，经过氧化、环化等有机化学合成方法，制备一种具有较强生物活性的新物质。
为实现上述发明目的，要发明采取的半合成方法是a、半合成方法，取1.0g 20(S)-原人参皂苷，溶于50ml 1，4-二氧六环中，加浓H2SO4调节pH值3-5，在搅拌下逐滴加入氧化剂间-氯过苯甲酸5ml，于75℃～85℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq0.7g～0.9g；b、伪人参皂苷-Pdq的纯化取粗伪人参皂苷-Pdq进行柱层析，也可以采用溶剂萃取办法进行纯化，得纯伪人参皂苷-Pdq0.5g～0.7g。
化学反应如下 在上述半合成方法中，20(S)-原人参二醇皂苷可用20(R)-原人参二醇皂苷代替。
在上述半合成方法中，氧化剂包括无机氧化剂及有机氧化剂；无机氧化剂为H2O2或KMnO4；有机氧化剂为过氧乙酸、间-氯过苯甲酸或对-氯过苯甲酸。
当本发明用于制备治疗冠心病，心肌缺血，缺血性休克，心律不齐和再灌损伤的药物时，其口服或胃肠外给药，均是安全的，在口服情况下，其可以任何常规形式给药，如散剂、粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、溶液剂、悬浮液、糖浆、口腔含片、舌下含片等当该药物肠胃外给药时，可采取任何常规形式，例如注射剂如静脉内注射、软膏剂、栓剂、经皮给药、吸入剂等。
本发明制备治疗冠心病、心肌缺血、缺血性休克、心律不齐和再灌损伤的药物是由有效成分单体或有效成分与固体或液体的赋形剂一起构成的，这里使用的固体或液体的赋形剂在本领域是众所周知的，下面举几个具体例子，散剂是内服的粉末剂，它的赋形剂有乳糖、淀粉、浆糊精、碳酸钙、合成或天然硫酸铝、氧化镁、硬脂酸镁，碳酸氢钠、干燥酵母等；溶液剂的赋形剂有水、甘油、1，2-丙二醇、单糖浆、乙醇、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇等；软膏剂的赋形剂可以使用脂油，含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂腊、木腊、液体石腊、树脂、高级腊等组合成的疏水剂或亲水剂。
本发明的有益效果在于，新化合物伪人参皂苷-Pdq可用于制备治疗冠心病，心肌缺血，缺血性休克，心律不齐和再灌损伤的药物，具有疗效显著的特点。
有效物质的剂量可以根据服用方式，病人的年龄和体重及病情严重程度和其它类似的因素而改变，口服量为9.0～16.0mg/kg，每日二次服用注射7.0～9.0mg/kg，每日一次。
本发明可通过下面的实验例进一步说明。
实验例一、伪人参皂苷-Pdq对失血性休克的影响一、实验材料与方法材料家犬6只；PDQ10mg/ml水溶液方法将狗用戊巴比妥钠静脉麻醉(1ml他)，仰卧固定于手术台上，分离气管，插气管插管。分离颈总动脉，连接RM-6000四导生理记录仪，测BP(SBP/DBP)；分离右侧骨动脉，测LVSP，LVEDP，±dp/dt；分离右侧股静脉，备给药用。
分离右倾侧股动脉，备动脉放血用，连接心电导联，测ECG计算HR，剑突皮肤处用丝线连接力传感器，测呼吸频率，手术完毕后，稳定10分钟，记录各项正常指标，然后经股动脉放血至盛有0.1％肝素生理盐水贮血瓶中，使动脉平均压降至40mmHg为休克(如放血后，BP急剧下降，可将血液输回动物体内，使动脉平均压维持在40mmHg)。稳定20分钟，动脉平均压不升，按10mg/kg·b给药，观察120分钟各项指标变化，记录给药后1，3，5，10，20，30，45，60，90，120分钟。静脉采血，离心，取血清，测定LPO(八木氏改良法)和SOD。
二、实验结果1、对平均动脉血压(MBP)的影响PDQ小剂量组在给药后20’、30’MBP显著升高，与盐水对照组相比，有明显差异(p＜0.05)。5’～45’MBP的上升百分率明显高于盐水对照组，两组相比，差异显著(p＜0.05，p＜0.01，p＜0.001)。
PDQ大剂量组在给药后5’～120’MBP及上升百分率均明显高于盐水对照组(p＜0.05，p＜0.01，p＜0.001)，有非常显著性意义。
多巴胺组在给药后5’～20’MBP明显升高，5’～30’MBP的上升百分率明显高于盐水对照组，与盐水组相比有差异显著(p＜0.05，p＜0.01)。结果见表1-1。
表.1-1 PDQ对MBP(Kpa)的影响(x±s，n＝6)
续表1-1
续表.1-1
*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001与0.9％NaCl对照组比较。
2、对+dp/dt的影响PDQ小剂量组在给药后10’～45’和90’、120’的+dp/dt明显增加，与盐水对照组相比较差异显著(p＜0.05，p＜0.01)。30’～120’+dp/dt的上升百分率显著高于盐水对照组，两组相比较有显著差异(p＜0.05，p＜0.01)。
PDQ大剂量组在给药后30’～120’+dp/dt及上升百分率均显著增加，与盐水对照组相比有非常显著性意义(p＜0.05，p＜0.01)。
多巴胺组在给药后5’～45’+dp/dt及上升百分率均显著增加，与盐水对照组相比差异显著(p＜0.05，p＜0.01，p＜0.001)。结果见表1-2。
表1-2 PDQ对+dp/dt(Kpa/8)的影响(x±s，n＝6)
续表1-2
续表1-2
续表1-2
续表1-2
p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001与0.9％NaCl对照组比较。
3、对-dp/dt的影响PDQ小剂量组在给药后45’-dp/dt的上升百分率明显高于盐水对照组，与盐水对照组相比较差异显著(p＜0.05)。
PDQ大剂量组在给药后60’-dp/dt明显升高，10’～60’-dp/dt的上升百分率明显高于盐水对照组，两组相比(p＜0.05，p＜0.01)。
多巴胺组在给药后5’、10’-dp/dt明显高于盐水对照组，与盐水对照组相比差异显著(p＜0.01)。5’～20’-dp/dt的上升百分率明显高于盐水对照组，与盐水对照组相比差异显著(p＜0.05，p＜0.01)。结果见表1-3。
表1-3PDQ对-dp/dt(Kpa/s)的影响(x±s，n＝6)
续表1-3
续表1-3
续表1-3
续表1-3
*p＜0.05，**p＜0.0l与0.9％NaCl对照组比较。
心率和呼吸频率在给药后各时间点与休克时相比无明显差异。
结果表明伪人参皂苷-Pdq(PDQ)具有抗失血性休克作用。
实验二、伪人参皂苷-Pdq对正常麻醉犬血流动力学的影响(n＝6)一、实验材料与方法材料家犬6只，体重13kg～15kg体重，雌雄各3只，伪人参皂苷-Pdq10mg/ml溶液；方法方法同实验一，故略。
二、结果1、对过氧化脂质(LPO)的影响PDQ小、大剂量组在给药后120’LPO的含量明显低于盐水对照组，两组比较差异显著(p＜0.05)。
多巴胺组在给药后120’LPO的含量明显低于盐水对照组，两组比较差异显著(p＜0.05)。结果见表2-1。
表2-1PDQ对LPO(A/ml)的影响(x±s，n＝6)
p＜0.05与0.9％NaCl对照组比较。
2、对超氧化物歧化酶(SOD)的影响PDQ小剂量组在给药后120’SOD的含量及百分率与盐水对照组比较无显著差异。
PDQ大剂量组在给药后120’SOD的含量及上升百分率明显高于盐水对照组，两组比较差异显著(p＜0.05，p＜0.01)。
多巴胺组在给药后120’SOD的含量及上升百分率明显高于盐水对照组，两组比较差异显著(p＜0.01)结果见表2-2。
表2-2PDQ对SOD(U/l)的影响(x±s，n＝6)
*p＜0.05，**p＜0.01与NaCl对照组比较。
结果表明伪人参皂苷-Pdq能显著降低LPO及提高SOD含量，有抗自由基作用。
具体实施例方式
实施例一a、半合成方法，取1.0g 20(S)-原人参二醇皂苷，溶于50ml 1，4-二氧六环中，加浓H2SO4调节pH值3，在搅拌下逐滴加入间-氯过苯甲酸5ml，于75℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq 0.9g；b、伪人参皂苷-Pdq的纯化，取上步得到的粗伪人参皂苷-Pdq进行硅胶柱层析，得纯伪人参皂苷-Pdq0.7g。
实施例二a.半合成方法，取1.0g 20(S)-原人参二醇皂苷，溶于50ml CHCl3中，加浓H2SO4调节pH值4，在搅拌下逐滴加入对-氯过苯甲酸5ml，于80℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq 0.8g。
b.伪人参皂苷-Pdq的纯化取上步得到的粗伪人参皂苷Pdq溶于水中，采用正丁醇萃取，进行纯化，得纯伪人参皂苷-Pdq0.6g。
实施例三a、半合成方法，取1.0g 20(S)-原人参二醇皂苷，溶于50ml 1，4-二氧六环中，加浓H2SO4调节pH值5，在搅拌下逐滴加入H2O25ml，于85℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq 0.7g；b、伪人参皂苷-Pdq的纯化，取上步得到的粗伪人参皂苷-Pdq进行硅胶柱层析，得纯伪人参皂苷-Pdq0.5g。
实施例四a、半合成方法，取1.0g 20(R)-原人参二醇皂苷，溶于50ml 1，4-二氧六环中，加浓H2SO4调节pH值3，在搅拌下逐滴加入KMnO45ml，于75℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq 0.9g；b、伪人参皂苷-Pdq的纯化，取上步得到的粗伪人参皂苷-Pdq进行硅胶柱层析，得纯伪人参皂苷-Pdq0.7g。
实施例五a.半合成方法，取1.0g 20(R)-原人参二醇皂苷，溶于50ml CHCl3中，加浓H2SO4调节pH值4，在搅拌下逐滴加入过氧乙酸5ml，于80℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq 0.8g。
b.伪人参皂苷-Pdq的纯化取上步得到的粗伪人参皂苷Pdq溶于水中，采用正丁醇萃取，进行纯化，得纯伪人参皂苷-Pdq0.6g。
实施例三a、半合成方法，取1.0g 20(R)-原人参二醇皂苷，溶于50ml 1，4-二氧六环中，加浓H2SO4调节pH值5，在搅拌下逐滴加入H2O25ml，于85℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq 0.7g；b、伪人参皂苷-Pdq的纯化，取上步得到的粗伪人参皂苷-Pdq进行硅胶柱层析，得纯伪人参皂苷-Pdq0.5g。
制备药剂的实施例一伪人参皂苷-Pdq 35g，1，2-丙二醇10000ml，混合后装入1000支安瓶中，每支10ml，含伪人参皂苷-Pdq35mg。
制备药剂的实施例二伪人参皂苷-Pdq20.0g，药用淀粉480g，二者充分混合，装胶囊，制成1000粒胶囊，每粒重0.5g，含伪人参皂苷-Pgq20mg。
权利要求
1.一种如下式的伪人参皂苷-Pdq， 其化学名称为达玛-20S，24S-环氧-3β，12β，25-三醇(dammara-20S，24S-epoxy-3β，12β，25-triol)。
2.一种伪人参皂苷-Pdq的半合成方法其特征在于a、半合成方法，取1,0g 20(S)-原人参二醇，溶于50ml1，4-二氧六环中，加浓硫酸调节pH值3-5，在搅拌下逐滴加入氧化剂5ml，于75℃～85℃加热回流90分钟，冷却后，用0.1M NaOH水溶液调节pH为7.0，过滤，滤液浓缩至干，得粗伪人参皂苷-Pdq0.7g～0.9g；b、伪人参皂苷-Pdq的纯化取粗伪人参皂苷-Pdq进行柱层析，也可以采用溶剂萃取办法进行纯化，得纯伪人参皂苷-Pdq 0.5g-0.7g。
3.根据权利要求2所述的伪人参皂苷-Pdq的半合成方法，其特征在于20(S)-原人参二醇可用20(R)-原人参二醇代替。
4.根据权利要求2所述的伪人参皂苷-Pdq的半合成方法，其特征在于氧化剂包括无机氧化剂及有机氧化剂。
5.根据权利要求4所述的伪人参皂苷-Pdq的半合成方法，其特征在于无机氧化剂为H2O2或KMnO4。
6.根据权利要求4所述的伪人参皂苷-Pdq的半合成方法，其特征在于有机氧化剂为过氧乙酸、间-氯过苯甲酸或对-氯过苯甲酸。
7.如权利要求1所述的伪人参皂苷-Pdq在制备治疗冠心病、心肌缺血、缺血性休克、心律不齐和再灌损伤药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及伪人参皂苷－Pdq及其半合成方法和其药物用途。属于新化合物及其合成方法及其药物用途。以20(S)－原人参二醇皂苷或20(R)－原人参二醇皂苷为原料，在酸性条件下，经过氧化、环化等步骤合成一种新化合物，其化学名称为达玛－20S，24S－环氧－3β，12β，25－三醇。简称伪人参皂苷－Pdq，产率达80％以上。伪人参皂苷－Pdq在制备治疗，冠心病、心肌缺血，缺血性休克、心律不齐和再灌损伤药物中有着广泛的药物用途。
文档编号C07J17/00GK1706862SQ20051001677
公开日2005年12月14日 申请日期2005年5月9日 优先权日2005年5月9日
发明者李平亚, 刘金平 申请人:李平亚