本发明涉及医药技术领域，具体地说，是烟酰胺单核苷酸在制备预防或治疗目前临床常用溶栓药物rtpa的血管并发症的药物中的应用。
背景技术：
rtpa中文名为重组组织型纤溶酶原激活剂，英文全称recombinanttissueplasminogenactivator，是目前应用于急性心肌梗塞、肺栓塞、脑缺血(缺血性脑卒中)、下肢静脉血栓、上肢血栓的重要溶栓药物。rtpa是1种糖蛋白，可激活纤溶酶原成为纤溶酶。当静脉使用时，本药在循环系统中只有与其纤维蛋白结合后才表现出活性，其纤维蛋白亲和性很高。当和纤维蛋白结合后，本品被激活，引诱纤溶酶原成为纤溶酶，从而溶解血凝块中的纤维蛋白，实现溶解血栓的目的。
无论是在急性心肌梗塞、肺栓塞，还是在脑缺血、下肢静脉血栓等疾病中，rtpa的溶栓效果都确实、有效，成为临床多种疾病的重要治疗药物。但是，这一药物同样存在着对小血管的“溶解”作用，其分子机理是rtpa可以破坏形成血管紧密连接的蛋白质，从而逐渐增大血管对于血液的通透性，在剂量过大或者使用时间过长的情况下，会导致血液外渗，最终形成出血。clinpharmacolther.2015；97:274-85这一综述文章详细介绍了rtpa的临床应用、潜在的不良反应及机制。
rtpa是目前临床最常用的溶栓药物，而且其是目前经美国fda批准的唯一可用于缺血性脑卒中的治疗药物。但是，在急性心肌梗塞、肺栓塞、脑缺血(缺血性脑卒中)、下肢静脉血栓、上肢血栓这些疾病中，rtpa都存在着诱导血管并发症即出血的潜在风险。尤其是在脑缺血和心肌缺血的治疗中，rtpa导致的出血倾向甚至有可能危及生命。因此，如果能够发现降低rtpa导致的出血倾向的药物，无疑会给rtpa的使用带来诸多益处。
烟酰胺单核苷酸(nmn)是一种核苷酸类化合物，cas号为1094-61-7。已有国外报道发现烟酰胺单核苷酸在肥胖等疾病中有保护作用。发明人在前期研究发现并报道了烟酰胺单核苷酸对神经元的直接保护作用，并获得其在制备防治缺血性脑卒中的药物或保健食品中应用的发明专利。最近，我们在小鼠模型上，发现烟酰胺单核苷酸可以显著抑制rtpa注射后导致的血管通透性增加，抑制其导致的血液外渗，从而延缓其导致的出血倾向。我们的这一新发现，对rtpa在急性心肌梗塞、肺栓塞、脑缺血(缺血性脑卒中)、下肢静脉血栓、上肢血栓等疾病中的应用都有着非常积极的意义。
技术实现要素：
本发明的第一个目的是针对现有技术中的不足，提供烟酰胺单核苷酸在制备预防和/或治疗rtpa血管并发症的药物中的应用。
本发明的第二个目的是针对现有技术中的不足，提供一种溶栓药物。
为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：
烟酰胺单核苷酸在制备预防和/或治疗rtpa血管并发症的药物中的应用。
所述烟酰胺单核苷酸降低rtpa导致的血液外渗。
所述烟酰胺单核苷酸减少rtpa导致的组织水肿。
所述烟酰胺单核苷酸抑制rtpa导致的血管紧密连接蛋白下降。
所述烟酰胺单核苷酸对rtpa这一溶栓药物的血管并发症的保护作用。
所述的rtpa血管并发症是由rtpa静脉内注射诱导的。
所述的烟酰胺单核苷酸可以根据需要加入药物可接受的载体制备成任何药用剂型。
优选地，所述烟酰胺单核苷酸是注射剂形式，所述注射剂形式选自冻干粉针和注射液。所述注射剂还包括药用辅料，所述辅料包括赋形剂、增溶剂、助溶剂或ph值调节剂。
所述烟酰胺单核苷酸以前药的形式或药学上可接受的盐形式存在。
所述的前药形式包括酯化、乙酰化等药学上可接受的形式。
所述的烟酰胺单核苷酸可以单独使用或者以药物组合物的形式使用，所述药物组合物包含烟酰胺单核苷酸、其药学上可接受的盐或它的前药，以及药学上的载体，赋形剂，稀释剂，辅剂和媒介物的至少一种。
所述辅料可以任选如下常规药用辅料，但不限于此：
赋形剂：乳糖、葡萄糖、蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、水解明胶、甘氨酸、谷氨酸、右旋糖酐、氯化钠等其中一种或几种的混合物，0.01％～50％(w/v)。
助溶增溶剂：聚乙烯吡咯烷酮、泊洛沙姆、β-环糊精、hp-β-环糊精，甘油，0.001％～30％(w/v)。
ph调节剂：磷酸及磷酸盐(磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸三钠、磷酸氢二钾、磷酸钾)、碳酸及碳酸盐(碳酸氢钠、碳酸钠)、柠檬酸及柠檬酸盐(柠檬酸二钠、柠檬酸钠)、盐酸、氢氧化钠、氢氧化钾、甘氨酸、甘氨酸钠、去氧胆酸、去氧胆酸钠、氢氧化铵、醋酸及醋酸钠，0.001％～30％(w/v)。
抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫脲、维生素c，0.001％～20％(w/v)。
络合剂：edta-cana，edta-2na，0.001％～20％(w/v)。
溶剂：水、乙醇、丙二醇、多元醇等一种或几种混合溶剂。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
一种溶栓药物，所述溶栓药物由烟酰胺单核苷酸和rtpa组成。rtpa是目前临床最常用的溶栓药物，但在急性心肌梗塞、肺栓塞、脑缺血(缺血性脑卒中)、下肢静脉血栓、上肢血栓这些疾病中，rtpa都存在着诱导血管并发症即出血的潜在风险，本发明通过实验证明：烟酰胺单核苷酸给药可明显改善rtpa导致的血液外渗、组织水肿和血管紧密连接蛋白下降。因此将rtpa和烟酰胺单核苷酸组合使用，可显著抑制rtpa注射后导致的血管通透性增加，抑制其导致的血液外渗，减轻溶栓药物导致的出血并发症。
本发明采用在小鼠上注射rtpa导致的血管并发症模型，研究了烟酰胺单核苷酸对rtpa破坏血管作用的保护作用。实验结果显示烟酰胺单核苷酸给药可明显改善rtpa注射在小鼠上导致的血液外渗，减少组织的水肿，上调血管紧密连接蛋白的表达，说明烟酰胺单核苷酸可以对抗rtpa导致的血管破坏及血管并发症。
附图说明
附图1为nmn对rtpa导致的血液外渗的影响。
附图2为nmn对rtpa导致的组织水肿的影响。
附图3为nmn对rtpa导致的血管紧密连接蛋白下降的影响。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例
烟酰胺单核苷酸(nmn)在小鼠上对rtpa注射导致的血管并发症模型上表现拮抗rtpa导致的血液外渗。
本发明中，采用的烟酰胺单核苷酸市售可得，购于深圳邦泰生物工程有限公司。其化学结构式如下所示：
1实验方法
rtpa市售可得，购买于德国勃林格殷格翰药业公司，商品名为actilyse。我们使用小鼠(icr小鼠，体重25～30g，上海斯莱克实验动物有限公司)制备rtpa血管并发症模型。过程如下：将小鼠麻醉，从尾静脉注射rtpa(剂量为9mg/kg)，这一剂量的rtpa静脉内注射可导致血管紧密连接蛋白下降，随后出现明显的血管结构损害，使组织中的血红素(代表血液)增高，即出现血液外渗。血液外渗后会出现组织水肿的表现。
小鼠分为三组：对照组、rtpa组、rtpa+nmn组。rtpa组只注射rtpa，而rtpa+nmn组在注射rtpa的同时，给予小鼠腹腔注射烟酰胺单核苷酸(300mg/kg，深圳邦泰公司产品)。对照组小鼠则仅给予同体积的0.9％的生理盐水予以尾静脉+腹腔注射。
附图1实验：血液外渗。在注射rtpa或nmn并等待24小时后，麻醉并处死小鼠，取小鼠的脑组织，称重后匀浆，再用美国caymanchemical公司的血红素测定试剂盒(货号700540，英文名hemoglobincolorimetricassaykit)对血红素含量进行测定。将血红素含量除以每个样品的质量后，可以得出每g组织所含的血红素。血红素是血液的主要成分，若组织的血红素升高，说明有血管结构的破坏及血液的外渗。
附图2实验：组织水肿。脑的水肿程度检测，参见文献neurobioldis.2012apr；46(1):204-14。具体操作流程：在另外一批小鼠注射rtpa或nmn并等待24小时后，麻醉并处死小鼠，取出小鼠的全脑，去除小脑，然后使用精密天平称的湿重。随后在37度烘箱中彻底烘干脑组织(24小时)，称量其干重。然后使用湿重减去干重再除以干重，即可得到脑组织的含水量。
附图3实验：对于rtpa导致的血管紧密连接蛋白表达下降，则主要使用免疫印迹技术检测脑组织的3种血管紧密连接蛋白claudin-1、occludin、zo-1(全名zonulaoccludens-1)的蛋白质表达水平来测定。免疫印迹的具体操作方法请参见文献autophagy.2014；10:1535-48.实验中所使用到的商业化抗体生产公司及稀释比例为：claudin-1，美国santacruzbiotechnology公司，货号#sc-17658，稀释比例1:600；occludin,美国santacruzbiotechnology公司,货号#sc-5562，稀释比例1:600；zo-1，美国santacruzbiotechnology公司,货号#sc-8146，稀释比例1:600。
2结果
结果发现，烟酰胺单核苷酸给药可明显改善rtpa导致的血液外渗(图1)、组织水肿(图2)和血管紧密连接蛋白下降(图3)。说明烟酰胺单核苷酸对rtpa导致的血管并发症具有保护作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。