防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂及其制备方法和使用方法与流程

文档序号:13397939阅读:591来源:国知局
本发明涉及中兽药
技术领域
,更具体地说本发明涉及防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂及其制备方法和使用方法。
背景技术
:如果种鸡患有沙门氏菌疾病,会通过垂直传播传染给种蛋,感染沙门氏菌的种蛋孵化出的鸡苗,一般会表现为腹部膨大;有白色粪便堵塞雏鸡的泄殖腔导致排便困难;腹腔内卵黄吸收不良导致母源抗体低下,进而导致雏鸡抗病力低下,雏鸡前期死亡率较高等症状。如果健康的鸡和感染沙门氏菌的鸡一起混合饲养,通过饮水、饲料、粪便以及注射免疫等水平传播途径,原本健康的鸡也会感染沙门氏菌。如果是商品代的蛋鸡或肉鸡,则降低了商品代鸡的产品性能;如果是种用鸡,感染了沙门氏菌后,在种用阶段将会出现受精率、孵化率、健雏率明显降低,严重降低其种用性能。从给药途径看,目前防治沙门氏菌疾病的主要给药途径是饮水、拌料或者注射给药,这些给药途径都需要经过肝脏的解毒。这三种给药途径,会造成肝脏脂肪含量增高和脂肪变性;引起胆汁淤积性黄疸、肝细胞坏死、谷丙转氨升高,甚至出现致死性脂肪肝;肝脏转氨酶升高、肝肿大等副作用,进而降低鸡的机体抵抗力。鸡的泄殖腔的周围有丰富的动脉、静脉、淋巴丛,泄殖腔粘膜具有很强的吸收功能。泄殖腔给药是指通过泄殖腔将药物送入大肠管,通过泄殖腔粘膜的迅速吸收进入大循环,发挥药效以治疗全身或局部疾病的给药方法。技术实现要素:本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。本发明还有一个目的是提供一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,其具有绿色环保、毒副作用小、避免对鸡肝脏、肠胃造成损伤,提高鸡生产成绩的特点。本发明另一目的是提供上述中药制剂的制备方法。本发明的进一步目的是提供上述中药制剂的使用方法。为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针30~35份、丝瓜叶15~25份、泡桐花15~25份、贯众7~15份、伸筋草7~15份、老鹳草3~6份、钩吻3~6份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、按重量份称取上述原料,粉碎,混合得到药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-20~-30℃下冷冻24~30h,冷冻后于20~25℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。优选的是,所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s1中各原料粉碎至100~150目;s3中用浓度为90~95%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于20~25℃下提取3~5h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为3~5:1。优选的是,所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的5~6倍。优选的是,所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中还包括解冻后的糊状物经过乙醇溶液提取三次后,并合并三次提取的滤渣,并向滤渣中加入发酵培养基、复合菌液于温度为25~30℃下厌氧发酵1~2d,然后再加入em菌、长双岐杆菌于温度为28~35℃下进行继续发酵12~18h,过滤,得到滤液,将滤液加入除去乙醇的提取液中,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂;其中,所述复合菌液的制备方法为:将果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌分别加入营养肉汤中培养,培养至对数生长期0.5~1.0×106cfu/ml;将培养后的果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌液按照1:1~1.5:0.5~1:1~1.2比例混合得到复合菌液。优选的是,所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,发酵培养基包括以下重量份原料:松果鳞片30~40份、麦麸20~30份、豆粕5~10份、硫酸铵1~2份、硫酸镁1~2份、碳酸钙1~2份、水50~80份、蜂蜜5~10份、葡萄糖2~6份。优选的是,所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,继续发酵过程中通入流量为1~2l/min氧气,通入时间为30~60min。优选的是,所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,滤渣、发酵培养基、复合菌液、em菌、长双岐杆菌的质量比为100:50~60:2~4:0.5~1.2:0.5~1。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的使用方法,使用时将中药制剂喷在鸡的泄殖腔上。本发明至少包括以下有益效果:1、本发明的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂是在大量调查和实践的基础上,按照设计功用要求对多种中药材进行反复筛选,根据复方中药的君臣佐使、七情配伍、十八反十九畏等中药配伍原则,对比筛选后的中药有效成分,对沙门氏菌的抑制和杀灭作用,最终确定配方,其为纯中药制剂,药性平和,对鸡无刺激性,可有效降低鸡在各个阶段的沙门氏菌感染率,提高生产成绩;配方中各中药材的药理情况为:松针,为松科松属植物中的西伯利亚红松、黑松、油松、红松、华山松、云南松、思茅松、马尾松等的针叶,味酸,苦涩,性温,无毒。入心、脾、肝经。能祛风燥湿,杀虫止痒。主治风湿痿痹,湿疮疥癣等。松针具有治百病,安五脏,生毛发,耐寒暑,耐风吹雨打,轻身益气,守中而辟谷延年。松叶以除邪气为主,邪去则正安,疾病不生,从而获得不饥延年的实效。丝瓜叶,为葫芦科植物丝瓜的叶片,具有清热解毒,杀菌消炎,止血,祛暑之功效。泡桐花,为玄参科植物泡桐和毛泡桐的花。味苦、性寒。具有清肺利咽,解毒消肿,杀菌消炎的功效。贯众,为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,具有杀虫,清热,解毒,凉血止血等功效。伸筋草,为石松科植物石松的干燥全草,具有祛风散寒,除湿消肿,舒筋活络等功效。老鹳草,为牻牛儿苗目牻牛儿苗科植物,具有祛风,活血,清热解毒,抗病毒,抗菌等功效。钩吻,为马钱科植物,属常绿木质藤本植物,别名野葛、胡蔓藤、断肠草、朝阳草等,具有破积拔毒,祛瘀止痛,杀虫止痒,镇痛,镇静,抗炎,抗肿瘤等功效。2、本发明的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,各原料粉碎后经冻融和多次有机萃取技术提炼,有效成分的提取率显著提升,而且药效稳定,作用持久。其中,将各原料搅拌成糊状物时使用沸水,根据大多数物质热胀冷缩的原理,粉状药粉接触沸水后,细胞壁会膨胀,有部分细胞达到再次破壁的效果。根据姆佩巴效应原理,热水比冷水更快结冰,而水结冰后的体积较同样质量的液态水的体积增大11.1%,因此较高温度的糊状物在置于-20~-30℃的环境中,糊状物中的水分会更加快速的结成冰晶从而体积快速膨胀,水分在短时间结成冰晶发生体积膨胀的同时,也能快速充分地撑破植物类药材的细胞壁,达到更有效的破壁效果,从而充分释放各原料的有效成分,大大提高了药效。3、本发明的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,还将各原料的滤渣通过复合菌发酵之后进一步将原料中的蛋白、鞣质、淀粉等释放出来,而这些成分更容易被鸡吸收利用,加快了鸡的治疗速度和抗病能力,大大提高了药效。4、本发明的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的使用方法,通过泄殖腔给药,药物混合于泄殖腔分泌液中,通过大肠粘膜被吸收,因不经过肝脏从而避免了肝脏的首过解毒效应,既提高血药浓度,又不损伤肝脏;也不经过胃和小肠,避免了酸、碱消化酶对药物的影响和破坏作用,减轻药物对胃肠道的刺激,通过泄殖腔给药可大大地提高鸡对药物的生物利用度,改变了中药在家禽生产领域的传统使用方法。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。需要说明的是,下述实施方案中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。<实施例1>一种通过泄殖腔给药防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针33份、丝瓜叶22份、泡桐花22份、贯众12份、伸筋草12份、老鹳草5份、钩吻4份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、选取上述重量份原料经过清洗干燥后粉碎成100目的药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-25℃下冷冻24h,冷冻后于25℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。其中在水浴恒温为60℃的真空旋转仪上搅拌浓缩,浓缩至与原药材相同重量。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中将解冻后的糊状物用浓度为95%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于20℃下提取3h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为3:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的5倍。<实施例2>一种通过泄殖腔给药防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针35份、丝瓜叶20份、泡桐花20份、贯众12份、伸筋草12份、老鹳草3份、钩吻3份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、选取上述重量份原料经过清洗干燥后粉碎成100目的药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-25℃下冷冻24h,冷冻后于25℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。其中在水浴恒温为60℃的真空旋转仪上搅拌浓缩,浓缩至与原药材相同重量。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中将解冻后的糊状物用浓度为95%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于20℃下提取3h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为3:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的5倍。<实施例3>一种通过泄殖腔给药防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针30份、丝瓜叶25份、泡桐花22份、贯众15份、伸筋草14份、老鹳草5份、钩吻5份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、选取上述重量份原料经过清洗干燥后粉碎成100目的药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-25℃下冷冻24h,冷冻后于25℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。其中在水浴恒温为60℃的真空旋转仪上搅拌浓缩,浓缩至与原药材相同重量。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中将解冻后的糊状物用浓度为95%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于20℃下提取3h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为3:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的5倍。<实施例4>一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针30份、丝瓜叶15份、泡桐花15份、贯众7份、伸筋草7份、老鹳草3份、钩吻3份。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、按重量份称取上述原料,粉碎,混合得到药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-20℃下冷冻24h,冷冻后于20℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,其特征在于,s1中各原料粉碎至100目;s3中用浓度为90%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于20℃下提取3h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为3:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的5倍。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,其特征在于,s3中还包括解冻后的糊状物经过乙醇溶液提取三次后,并合并三次提取的滤渣,并向滤渣中加入发酵培养基、复合菌液于温度为25℃下厌氧发酵1d,然后再加入em菌、长双岐杆菌于温度为28℃下进行继续发酵12h,过滤,得到滤液,将滤液加入除去乙醇的提取液中,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂;其中,所述复合菌液的制备方法为:将果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌分别加入营养肉汤中培养,培养至对数生长期0.5×106cfu/ml;将培养后的果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌液按照1:1:0.5:1比例混合得到复合菌液。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,发酵培养基包括以下重量份原料:松果鳞片30份、麦麸20份、豆粕5份、硫酸铵1份、硫酸镁1份、碳酸钙1份、水50份、蜂蜜5份、葡萄糖2份。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,继续发酵过程中通入流量为1l/min氧气,通入时间为30min。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,滤渣、发酵培养基、复合菌液、em菌、长双岐杆菌的质量比为100:50:2:0.5:0.5。<实施例5>一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针32份、丝瓜叶20份、泡桐花20份、贯众12份、伸筋草12份、老鹳草5份、钩吻5份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、按重量份称取上述原料,粉碎,混合得到药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-25℃下冷冻27h,冷冻后于23℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s1中各原料粉碎至120目;s3中用浓度为93%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于23℃下提取4h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为4:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的6倍。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中还包括解冻后的糊状物经过乙醇溶液提取三次后,并合并三次提取的滤渣,并向滤渣中加入发酵培养基、复合菌液于温度为28℃下厌氧发酵2d,然后再加入em菌、长双岐杆菌于温度为31℃下进行继续发酵16h,过滤,得到滤液,将滤液加入除去乙醇的提取液中,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂;其中,所述复合菌液的制备方法为:将果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌分别加入营养肉汤中培养,培养至对数生长期0.8×106cfu/ml;将培养后的果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌液按照1:1.2:0.8:1.1比例混合得到复合菌液。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,发酵培养基包括以下重量份原料:松果鳞片35份、麦麸25份、豆粕8份、硫酸铵2份、硫酸镁2份、碳酸钙2份、水60份、蜂蜜8份、葡萄糖4份。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,继续发酵过程中通入流量为2l/min氧气,通入时间为40min。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,滤渣、发酵培养基、复合菌液、em菌、长双岐杆菌的质量比为100:55:3:0.8:0.8。<实施例6>一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针35份、丝瓜叶25份、泡桐花25份、贯众15份、伸筋草15份、老鹳草6份、钩吻6份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、按重量份称取上述原料,粉碎,混合得到药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入沸水,搅拌成糊状物,然后于-30℃下冷冻30h,冷冻后于25℃下解冻;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s1中各原料粉碎至150目;s3中用浓度为95%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于25℃下提取5h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为5:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的6倍。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中还包括解冻后的糊状物经过乙醇溶液提取三次后,并合并三次提取的滤渣,并向滤渣中加入发酵培养基、复合菌液于温度为30℃下厌氧发酵2d,然后再加入em菌、长双岐杆菌于温度为35℃下进行继续发酵18h,过滤,得到滤液,将滤液加入除去乙醇的提取液中,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂;其中,所述复合菌液的制备方法为:将果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌分别加入营养肉汤中培养,培养至对数生长期1.0×106cfu/ml;将培养后的果香地霉、醋酸杆菌、芽孢杆菌、乳酸菌液按照1:1.5:1:1.2比例混合得到复合菌液。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,发酵培养基包括以下重量份原料:松果鳞片40份、麦麸30份、豆粕10份、硫酸铵2份、硫酸镁2份、碳酸钙2份、水80份、蜂蜜10份、葡萄糖6份。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,继续发酵过程中通入流量为2l/min氧气,通入时间为60min。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,滤渣、发酵培养基、复合菌液、em菌、长双岐杆菌的质量比为100:60:4:1.2:1。<对比例1>一种通过泄殖腔给药防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂,包括以下重量份原料:松针33份、丝瓜叶22份、泡桐花22份、贯众12份、伸筋草12份、老鹳草5份、钩吻4份。一种防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:s1、选取上述重量份原料经过清洗干燥后粉碎成100目的药粉;s2、向s1中得到的药粉中加入水,搅拌成糊状物;s3、将解冻后的糊状物用乙醇提取,过滤,合并提取液并除去其中乙醇,加水,浓缩即得防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中将解冻后的糊状物用浓度为95%乙醇溶液提取三次并合并每次提取液,每次均于20℃下提取3h,每次使用乙醇溶液的质量与解冻后的糊状物的质量比为3:1。所述的防治鸡沙门氏菌疾病的中药制剂的制备方法,s3中加入水的体积为合并后提取液体积的5倍。在兴化明灿商品代蛋鸡场,将该场出雏的1日龄10000羽鸡苗随机平均分为5组,每组2000羽。其中,第一组每周在鸡的泄殖腔用棉拭子涂抹一次实施例1中的中药制剂,第二组每周在鸡的泄殖腔用棉拭子涂抹一次实施例4中的中药制剂,第三组每周在鸡的泄殖腔用棉拭子涂抹一次对比例1中的中药制剂,第四组每周通过注射方式注射实施例1中的中药制剂,第五组为空白对照组。至育雏结束,每组全群采血检测沙门氏菌阳性率,实验结果如表1所示。表1每组鸡苗沙门氏菌阳性率第一组第二组第三组第四组对照组阳性率(%)0.60.530.680.922.4强阳性率(%)0000.120.4从表1中可以看出,第一组、第二组、第三组、第四组的鸡苗沙门氏菌的阳性率、强阳性率远远低于对照组,说明本发明的中药制剂具有良好的防治鸡沙门氏菌疾病的功效。其中第一组和第二组相比,第二组鸡苗沙门氏菌的阳性率低于第一组,说明将各种原料的滤渣经过发酵之后,进一步将原料中的蛋白、鞣质、淀粉等释放出来,而这些成分更容易被鸡吸收利用,加快了鸡的治疗速度和抗病能力,大大提高了药效。第三组和第一组对比,第三组鸡苗沙门氏菌的阳性率高于第一组,这是由于第一组中将各原料使用沸水搅拌,然后进行冷冻,粉状药粉接触沸水后,细胞壁会膨胀,有部分细胞达到再次破壁的效果,而冷冻时热水比冷水更快结冰,从而体积快速膨胀,也能快速充分地撑破植物类药材的细胞壁,达到更有效的破壁效果,从而充分释放各原料的有效成分,大大提高了药效。第四组与第一组对比,第四组鸡苗沙门氏菌的阳性率高于第一组,这是由于第四组采用注射方式给药,药经过胃和小肠,胃中酸、碱消化酶对药物的影响和破坏作用,降低了药效。尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。当前第1页12
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