一种中药复方在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法

本发明属于医药技术领域，涉及一种中药复方在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

肿瘤发病机制复杂，已成为严重威胁人类健康的主要问题，其发病率和死亡率成逐年上升的趋势。我国癌症发病率接近世界水平，但死亡率高于世界水平。不论城市还是农村，肿瘤都是中国居民的主要死亡原因。随着年龄的增长，中国男女发病率及死亡率均逐渐上升。中国肺癌男性发病率中居首位，女性发病率中居第二位，但男性及女性死亡率均居首位。中国乳腺女性发病率中居首位。因此预防与控制面临着更大的挑战。中药是祖国医学用来防治疾病的有力武器，中药治疗恶性肿瘤，无论是在减轻临床症状，提高生存质量，防止复发转移，延长生存期，还是在与放化疗配合，增效减毒等方面都有很好的效果。

中药复方是中医药防治疾病的主要手段。近年来，复方及其对复方的再开发，已经成为抗肿瘤疗法的重要手段，通过选择不同作用机制抗肿瘤中药有效组分，协同作用使疗效得以最大化，降低肿瘤细胞的抵抗阈值，为中药的现代化开发研究奠定基础。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种中药复方在制备抗肿瘤药物中的应用，该中药复方对肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌和宫颈癌均具有较好的治疗效果。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种中药复方在制备抗肿瘤药物中的应用，按照重量计，所述中药复方包括金银花5-20份、白花蛇舌草3-10份、人参1-3份和夏枯草1-15份；所述肿瘤为肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌和宫颈癌中的一种或多种。

优选地，所述中药复方包括金银花8～12份、白花蛇舌草8～12份、人参1-3份和夏枯草1-7份。

优选地，所述抗肿瘤药物为丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸剂和口服液体制剂中的一种。

优选地，所述抗肿瘤药物中还包括抗肿瘤化疗药物。

优选地，所述抗肿瘤化疗药物为蛋白激酶抑制剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明提供了一种中药复方在制备抗肿瘤药物中的应用，所述中药复方包括金银花5-20份、白花蛇舌草3-10份、人参1-3份和夏枯草1-15份，该中药复方对肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌和宫颈癌具有良好的治疗效果。在细胞增殖抑制实验中，本发明提供的中药复方的提取物对97h、zr-75-30、mcf-7、lovo、hepg2、hep3b、hela、a549、smmc-7721和bel-7402十种细胞均表现出了良好的增殖抑制作用，且多数表现出了浓度依赖性。在体内抗肿瘤实验中，本发明提供的中药复方的提取物对hepg2、lovo和zr-75-30构建的裸鼠移植瘤模型均表现出良好的生长抑制作用。本发明提供的中药复方在制备抗肿瘤药物方面具有良好的应用前景，能够为临床肿瘤治疗提供更多的选择。

附图说明

图1为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞97h的增殖抑制作用图。

图2为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞zr-75-30的增殖抑制作用图。

图3为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞mcf-7的增殖抑制作用图。

图4为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞lovo的增殖抑制作用图。

图5为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞hepg2的增殖抑制作用图。

图6为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞hep3b的增殖抑制作用图。

图7为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞hela的增殖抑制作用图。

图8为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞a549的增殖抑制作用图。

图9为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞smmc-7721的增殖抑制作用图。

图10为实施例1制备的口服制剂对肿瘤细胞bel-7402的增殖抑制作用图。

图11为在hepg2建立的裸鼠移植瘤模型中，实施例1制备的口服制剂对肿瘤的生长抑制结果图。

图12为在lovo建立的裸鼠移植瘤模型中，实施例1制备的口服制剂对肿瘤的生长抑制结果图。

图13为在zr-75-30建立的裸鼠移植瘤模型中，实施例1制备的口服制剂对肿瘤的生长抑制结果图。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

实施例1

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花10份，白花蛇舌草10份，人参1份和夏枯草1份。

将上述药材分别粉碎后混合，用220份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液，滤渣再次用110份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例2

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花5份，白花蛇舌草8份，人参1份和夏枯草1份。

将上述药材分别粉碎后混合，用180份水回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用90份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例3

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花13份，白花蛇舌草5份，人参1.5份和夏枯草1份。

将上述药材分别粉碎后混合，用180份水回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用90份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例4

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花5份，白花蛇舌草10份，人参2份和夏枯草10份。

将上述药材分别粉碎后混合，用230份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用140份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例5

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花10份，白花蛇舌草10份，人参1份和夏枯草6.7份。

将上述药材分别粉碎后混合，用230份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用100份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例6

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花20份，白花蛇舌草5份，人参3份和夏枯草10份。

将上述药材分别粉碎后混合，用350份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用150份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例7

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花10份，白花蛇舌草3份，人参2份和夏枯草15份。

将上述药材分别粉碎后混合，用280份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用140份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例8

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花15份，白花蛇舌草5份，人参2份和夏枯草13份。

将上述药材分别粉碎后混合，用300份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用150份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例9

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花15份，白花蛇舌草10份，人参3份和夏枯草1.5份。

将上述药材分别粉碎后混合，用280份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用140份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例10

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花10份，白花蛇舌草3份，人参1份和夏枯草9份。

将上述药材分别粉碎后混合，用220份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用110份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例11

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花8份，白花蛇舌草12份，人参2份和夏枯草7份。

将上述药材分别粉碎后混合，用280份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用140份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例12

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花12份，白花蛇舌草12份，人参3份和夏枯草1份。

将上述药材分别粉碎后混合，用280份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用140份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例13

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花12份，白花蛇舌草8份，人参1份和夏枯草6.7份。

将上述药材分别粉碎后混合，用280份70-75％乙醇水溶液回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用140份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

实施例14

一种抗肿瘤的中药复方，按照重量计，包括金银花8份，白花蛇舌草8份，人参3份和夏枯草3份。

将上述药材分别粉碎后混合，用220份水回流2小时，过滤得滤液；滤渣再次用110份水回流2小时，过滤，合并滤液，浓缩成浸膏，真空干燥，制备成口服制剂。

其中，根据常识，本领域技术人员在获得合并滤液后，可以将滤液浓缩后结合适当的辅料，制备成丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸剂、口服液体制剂等常规制剂。

其中，现有的肿瘤临床治疗策略中通常采用多种药物的联合治疗，本领域技术人员可以根据需要将本发明的复方与抗肿瘤化疗药物制备成复方药物，以达成更好地质量效果和方便的联合用药。在常见的抗肿瘤化疗药物中，优选选择具有更好的选择性和靶向性的蛋白激酶抑制剂。

实施例15：实施例1所得口服制剂(zyff)抑制肿瘤细胞的增殖作用

1.仪器与材料

sw-cj-1f型超净工作台(苏州市安泰空气技术有限公司)；ti-u型倒置显微镜(nikon)；mac15ac型二氧化碳恒温培养箱(sanyo)；80-2型台式电动离心机(上海市分析器械厂)；gh隔水式恒温培养箱(北京市科伟永兴仪器有限公司)；移液器(eppendorf)；upt-iv-5t超纯水制备机(成都市超纯科技有限公司)；bp211d电子天平(上海光正医疗仪器有限公司)；细胞计数板(上海求精生化试剂有限公司)；培养板(costar)。

2.实验方法

通过mtt实验的方法，检测测试复方中药制剂对10种肿瘤细胞97h、zr-75-30、mcf-7、lovo、hepg2、hep3b、hela、a549、smmc-7721和bel-7402的抑制作用。将处于指数级增长期的细胞，用胰酶消化，吹散成单细胞悬液，计数，接种到96孔培养板中。在培养箱中培养24h，待细胞贴壁后，加入不同浓度的测试药物，分别作用48h后终止培养，每孔加入20μlmtt(5mg/ml)，37℃避光孵育4h。然后将各个孔内液体弃去，加入150μldmso，震荡15min，使结晶物充分溶解，在酶标仪490nm波长下测定细胞光密度值。

3.实验结果

zyff在10种肿瘤细胞上均具有较好的抑制作用(图1-10)，在0.04mg/ml，0.2mg/ml，1mg/ml和5mg/ml等4个浓度范围内具有较好的量效关系。

实施例16：实施例1所得口服制剂(zyff)抑制肿瘤细胞裸鼠移植瘤实验

1.仪器与材料

注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司)。

ti-u型倒置显微镜(nikon)；80-2型台式电动离心机(上海市分析器械厂)；移液器(eppendorf)；upt-iv-5t超纯水制备机(成都市超纯科技有限公司)；bp211d电子天平(上海光正医疗仪器有限公司)；细胞计数板(上海求精生化试剂有限公司)；一次性注射器(江西市金山医疗器械有限公司)；游标卡尺(无锡市锡工量具有限公司)；手术剪(上海市医疗器械有限公司)；超低温冰箱(青岛市海尔集团)；细胞工厂培养系统(nunc)。

裸鼠4-6周龄，西安交通大学实验动物中心提供，自由摄取食物和水，培养于22-24℃，50％-70％，12h-12h光照-黑暗循环的洁净动物房。

2.实验方法

将处于对数增长期的肿瘤细胞lovo、hepg2和zr-75-30用无菌生理盐水稀释至细胞浓度为2×10⁷个/ml。将细胞悬液接种于小鼠右腋窝皮下位置，每只0.2ml。接种一周左右肿瘤形成后，每隔两天用游标卡尺测量肿瘤的长径(l)与短径(w)，根据公式v(mm³)＝(l×w2)/2，计算肿瘤的体积。当肿瘤体积达到0.1cm³时，将小鼠随机分组，灌胃给药并记录体重，肿瘤体积每隔天测量一次。灌胃14d后，颈椎脱臼处死小鼠，剥离肿瘤组织并称重。根据公式计算：抑瘤率(％)＝(对照组瘤重－给药组瘤重)/对照组瘤重×100％。

3.实验结果

如图11-13所示，zyff给药浓度为75mg/kg、150mg/kg、300mg/kg的时候，在3种裸鼠移植瘤模型上呈现出抑制肿瘤的作用。给药组与阴性对照组比较，给药组降低裸鼠移植瘤体积和瘤重的同时，裸鼠体重均上升，未出现降低，说明zyff对小鼠的生理状态没有明显的影响，未表现出对实验动物的毒副作用。