本发明属于医药制剂领域，具体涉及一种含有亮氨酸衍生物的外用制剂。
背景技术：
银屑病是一种常见的慢性、复发性、炎症性皮肤病，特征是以角质形成细胞过度增生、炎症细胞浸润和新生血管形成为主要组织病理改变。临床上主要表现为红斑、鳞屑，在自然人群中的发病率为0.1-3％，并且逐年增多，可出现在任何年龄段。2010年的关于我国六省市流行病学调查表明，其选取的调查点人群银屑病的总患病率为0.47％，与以往国内其他的同类调查相比有所升高。银屑病发病机制复杂，至今尚不十分清楚，目前认为，该病的发生不是单一的原因，可能涉及遗传、细菌感染、免疫异常、内分泌等多方面的因素。
目前，西药的外用制剂主要为激素、润肤剂、角质松解剂、维生素d衍生物、蒽林、煤焦油等，这些药物在临床上均有明确的治疗效果，但是大部分药物都具有不同程度的副作用，如停药后复发、皮肤萎缩、色素沉着、刺激性较强、有灼烧感、大剂量使用会造成肝肾功能的损伤、糖皮质激素类药物不适合骨质疏松和糖尿病患者等，长期使用更会造成患者的负担，影响患者的身体健康。如中国专利cn105534996b公开了一种治疗银屑病的药物组合物，该药物组合物主要由卡泊三醇、羟基脲、单硬脂酸甘油酯、脂溶性基质、乳化剂、保湿剂、透皮吸收剂和纯化水制成，其组方科学，制备工艺简单，治疗寻常型银屑病、顽固性银屑病疗效显著，但是该药物组合物含有具有致畸风险的羟基脲，还容易引起脱发、皮疹的不良反应。
中医认为，情志内伤，气机壅滞，郁久化火，毒热伏于营血而发生银屑病，治疗的基本原理是通过一系列的手段控制患者体内的易感因子，主要为“辨血为主、从血论治”，使患者由内到外都达到一个健康稳定的状态。中国专利cn103705664b公开了一种治疗银屑病的药物组合物及其制备方法，该药物组合物主要由紫草、白鲜皮、大青叶、地锦草、槐花、穿心莲、墨旱莲、贯众、半枝莲、丹皮和泽泻制成，具有清热解毒、凉血清血、祛屑止痒的功能，但是该药物组合物主要以口服作为主要的给药方法，不直接接触患处，起效缓慢，且主要由中药制成，提取、制备工艺复杂，不适用于大规模生产。
可见，虽然目前对于银屑病临床上治疗方法较多，但疗效不理想，西药存在一定的副作用，治标不治本，中药制备工艺复杂，质量参差不齐，且多为口服制剂，起效缓慢，因此，迫切需要研发一种直接作用于患处、对银屑病具有显著的治疗效果、皮肤刺激性小、制备工艺简单的外用制剂。
技术实现要素：
本发明旨在提供一种含有亮氨酸衍生物，直接作用于患处、对银屑病具有显著的治疗效果、皮肤刺激性小、制备工艺简单的外用制剂。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种含有亮氨酸衍生物的外用制剂，所述外用制剂含有0.01-5％的亮氨酸衍生物(i)。
进一步地，所述外用制剂含有1-5％的亮氨酸衍生物(i)。
更进一步地，所述外用制剂可显著降低机体细胞因子il-2和il-6的含量。
进一步地，所述外用制剂可显著降低机体细胞因子ifn-γ和tnf-α的含量。
更进一步地，所述外用制剂包括软膏剂、乳膏剂、凝胶剂和霜剂。
进一步地，所述外用制剂还含有药学上允许的基质和附加剂。
更进一步地，所述附加剂选自防腐剂、抗氧化剂、乳化剂中的一种或多种。
进一步地，所述抗氧剂优选自维生素e、没食子酸烷酯、丁羟基茴香醚、丁羟基甲苯、抗坏血酸、异抗坏血酸、枸橼酸、酒石酸、依地酸二钠和巯基二丙酸中的一种或多种。
更进一步地，所述防腐剂选自乙醇、异丙醚、氯丁醇、三氯甲基叔丁醇、苯基-对-氯苯丙二醇、苯氧乙醇、溴硝基丙二醇、苯甲酸、脱氧乙酸、山梨酸、肉桂酸、茴香醚、香茅醛、丁子香酚、香兰酸酯、醋酸苯汞、硼酸盐、硝酸盐、汞撒利、苯酚、苯甲酚、麝香草酚、卤化衍生物媒酚、氯代百里酚、水杨酸、对羟基苯甲酸烷基酯、苯扎氯铵、溴化烷基三甲基铵和葡萄糖酸洗必泰中的一种或多种。
进一步地，所述乳化剂可以由新生皂法制备而成，所述新生皂法的反应物为一价金属离子的氢氧化物、硼酸盐或有机胺和脂肪酸，所述一价金属离子选自钠离子、钾离子或铵离子中的一种；所述有机胺可以是二乙醇胺；所述脂肪酸可以是硬脂酸、月桂酸、亚油酸、豆蔻酸、棕榈酸或油酸中的一种。
更进一步地，所述乳化剂可以是多价金属离子的氧化物与脂肪酸作用制成，所述多价金属离子可以是钙离子、镁离子、锌离子或铝离子中的一种；所述脂肪酸可以是硬脂酸、月桂酸、亚油酸、豆蔻酸、棕榈酸或油酸中的一种；所述脂肪酸反应时的浓度为10-25％。
进一步地，所述乳化剂可以是脂肪醇硫酸钠，所述脂肪醇硫酸钠包括十二烷基硫酸钠和多库酯钠。
更进一步地，所述乳化剂可以是高级脂肪醇，所述高级脂肪醇包括十四醇、十六醇、十八醇、油醇和辛基十二醇。
进一步地，所述乳化剂可以是多元醇，所述多元醇包括甘油单油酸酯、甘油单硬脂酸酯和中链甘油三酯。
更进一步地，所述乳化剂可以是树胶类乳化剂，所述树胶类乳化剂包括阿拉伯树胶、琼脂、卡拉胶和果胶。
进一步地，所述乳化剂可以是藻酸盐或酯类，所述藻酸盐包括藻酸铵、藻酸钙、藻酸钾和藻酸钠，所述酯类为藻酸丙二醇酯。
更进一步地，所述乳化剂可以是胆固醇。
进一步地，所述乳化剂可以是羟丙基淀粉。
更进一步地，所述乳化剂可以是羊毛脂类乳化剂，所述羊毛脂类乳化剂包括羊毛脂、羊毛脂醇和羊毛脂醇-矿物油混合物。
进一步地，所述乳化剂可以是聚氧乙烯醚衍生物类乳化剂，所述聚氧乙烯醚衍生物类乳化剂包括平平加o、聚西托醇、聚氧乙烯(6)十六十八烷基醚、聚氧乙烯(20)十六十八烷基醚、聚氧乙烯(25)十六十八烷基醚、聚氧乙烯(2)十六烷基醚、聚氧乙烯(10)十六烷基醚、聚氧乙烯(20)十六烷基醚、聚氧乙烯(4)月桂醚、聚氧乙烯(9)月桂醚、乳化剂op、聚氧乙烯(23)月桂醚、聚氧乙烯(2)油醚、聚氧乙烯(10)油醚、聚氧乙烯(20)油醚、聚氧乙烯(2)十八烷基醚、聚氧乙烯(10)十八烷基醚、聚氧乙烯(21)十八烷基醚和聚氧乙烯(100)十八烷基醚。
更进一步地，所述乳化剂可以是聚氧乙烯硬脂酸酯类乳化剂，所述聚氧乙烯硬脂酸酯类乳化剂包括聚氧乙烯(6)硬脂酸酯、聚氧乙烯(8)硬脂酸酯、聚氧乙烯(12)硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)硬脂酸酯、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯、聚氧乙烯(50)硬脂酸酯、聚氧乙烯(100)硬脂酸酯、聚氧乙烯(12)二硬脂酸酯、聚氧乙烯(32)二硬脂酸酯和聚氧乙烯(150)二硬脂酸酯。
进一步地，所述乳化剂可以是聚氧甘油酯类乳化剂，所述聚氧甘油酯类乳化剂包括辛酰己酰聚氧甘油酯、月桂酰聚氧甘油酯、亚油酰聚氧甘油酯、油酰聚氧甘油酯和硬脂酰聚氧甘油酯。
更进一步地，所述乳化剂可以是钠的低脂肪酸酯或无机酸盐，所述钠的低脂肪酸酯包括柠檬酸钠和乳酸钠；所述钠的无机酸盐为磷酸氢二钠。
进一步地，所述乳化剂可以是脂肪酸山梨坦类乳化剂，所述脂肪酸山梨坦类乳化剂包括单异硬脂酸山梨坦、单月桂酸山梨坦、单油酸山梨坦、单棕榈酸山梨坦、单硬脂酸山梨坦、倍半异硬脂酸山梨坦、倍半油酸山梨坦、三月桂酸山梨坦、三油酸山梨坦和三硬脂酸山梨坦。
更进一步地，所述药物可以是软膏剂，所述软膏剂主要由所述药物组合物、基质和附加剂制成；所述基质为油脂性基质或者水溶性基质，所述油脂性基质包括凡士林、石蜡、液状石蜡、硅油、蜂蜡、鲸蜡、硬脂酸、羊毛脂、羊毛脂醇、维生素e聚乙二醇琥珀酸酯和椰子油，所述水溶性基质为分子量在300-6000之间的聚乙二醇。
进一步地，所述药物可以是乳膏剂，所述乳膏剂主要由所述药物组合物、基质和附加剂制成；所述基质为将油相加热熔化后与水相混合，在乳化剂的作用下得到的乳状液型基质；所述油相选自硬脂酸、石蜡、地蜡、蜂蜡、鲸蜡和高级醇中的一种或多种。
更进一步地，所述药物可以是凝胶剂，所述凝胶剂主要由所述药物组合物、基质和附加剂制成；所述基质选自卡波姆和纤维素衍生物中的一种或两种，所述纤维素衍生物包括羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、微晶纤维素和甲基纤维素。
另外的，本发明还提供了一种所述含有亮氨酸衍生物的外用制剂的制备方法，包括以下步骤：将所述亮氨酸衍生物(i)、基质和附加剂混合，搅拌均匀，即得。
另外的，本发明还提供了一种所述含有亮氨酸衍生物在制备治疗银屑病药物中的应用。
进一步地，所述药物可加入药学上允许的基质和附加剂制成外用制剂。
申请人在实践中惊喜的发现，将亮氨酸衍生物(i)按一定的配比制成的外用制剂可以显著(p<0.01)降低机体中il-2、il-6、tnf-ɑ和ifn-γ细胞因子的含量，通过抑降低胞因子的表达，来改善银屑病的症状；还可以显著(p<0.01)降低银屑病小鼠模型的皮损评分，对银屑病造成的红斑、鳞屑及浸润增厚程度具有显著的改善效果；并且实验证明本发明制备的外用制剂对皮肤作用时无红斑、水肿等现象，也未见色素沉着、出血点、皮肤粗糙或变薄等现象，对皮肤刺激性小。
本发明具有以下优点：
(1)本发明含有亮氨酸衍生物的外用制剂，将亮氨酸衍生物(i)以一定的含量加入药学上允许的基质和附加剂制成外用制剂，可通过抑制细胞因子的表达来改善银屑病的症状，效果显著。
(2)本发明含有亮氨酸衍生物的外用制剂，制备的外用制剂对皮肤刺激性小，安全性高，且其制备方法简单，适用于大规模产业化生产。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
其中，本发明所用试剂均为常用试剂，均可购于常规试剂生产销售公司。
实施例1一种含有亮氨酸衍生物的软膏
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)3份、石蜡30份、蜂蜡10份、凡士林57份、依地酸二钠0.001份和苯扎氯钠0.01份。
制备方法：取相应量的石蜡、凡士林、依地酸二钠、苯扎氯钠混合，加热至110℃搅拌均匀，冷却至70℃，加入相应量的亮氨酸衍生物(i)，混合均匀，即得。
实施例2一种含有亮氨酸衍生物的软膏
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)0.1份、硬脂酸50份、硅油15份、维生素e聚乙二醇琥珀酸酯10份、羊毛脂醇25份、抗坏血酸0.002份和苯甲酸0.15份。
制备方法：取相应量的硬脂酸、维生素e聚乙二醇琥珀酸酯、羊毛脂醇、抗坏血酸和苯甲酸混合，加热至105℃搅拌均匀，冷却至70℃，加入相应量的亮氨酸衍生物(i)与硅油，混合均匀，即得。
实施例3一种含有亮氨酸衍生物的软膏
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)5份、液状石蜡45份、鲸蜡30份、羊毛脂19份、维生素e0.002份和羟苯乙酯0.25份。
制备方法：取相应量的液状石蜡、鲸蜡、羊毛脂、羟苯乙酯和维生素e混合，加热至120℃搅拌均匀，冷却至70℃，加入相应量的亮氨酸衍生物(i)，混合均匀，即得。
实施例4一种含有亮氨酸衍生物的软膏
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)3份、聚乙二醇335040份和聚乙二醇40057份。
制备方法：取相应量的聚乙二醇3350和聚乙二醇400混合，加热至60℃搅拌均匀，加入相应量的亮氨酸衍生物(i)，混合均匀，即得。
实施例5一种含有亮氨酸衍生物的乳膏
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)2.5份、硬脂酸甘油酯3.5份、硬脂酸12份、液状石蜡6份、凡士林1份、羊毛脂5份、三乙醇胺0.8份、羟苯乙酯0.1份和蒸馏水69.1份。
制备方法：取相应量的硬脂酸甘油酯、硬脂酸、液状石油、凡士林与羊毛脂混合，加热至80℃搅拌均匀，得油相；取相应量的三乙醇胺、羟苯乙酯溶于相应量的蒸馏水中，加热至80℃搅拌溶解均匀，得水相；将油相逐渐加入水相中，边加边搅拌，冷却至70℃加入相应量的亮氨酸衍生物(i)，搅拌均匀，冷却至室温成为乳膏状，即得。
实施例6一种含有亮氨酸衍生物的乳膏
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)2.5份、油酸25份、蓖麻油12.5份、硬脂酸10份、氢氧化钠0.5份、羟苯乙酯0.25份和水49.25份。
制备方法：取相应量的油酸、蓖麻油与硬脂酸混合，加热至90℃搅拌均匀，得油相；取相应量的氢氧化钠和羟苯乙酯于相应量的蒸馏水中，加热至85℃搅拌溶解均匀，得水相；将油相逐渐加入水相中，边加边搅拌，冷却至70℃加入相应量的亮氨酸衍生物(i)，搅拌均匀，冷却至室温成为乳膏状，即得。
实施例7一种含有亮氨酸衍生物的凝胶
由以下组分及其重量份数制成：亮氨酸衍生物(i)3份、卡波姆1份、乙醇5份、甘油5份、聚山梨酯800.2份、羟苯乙酯0.1份、氢氧化钠0.4份和蒸馏水85.3份。
制备方法：取相应量的亮氨酸衍生物(i)、卡波姆、乙醇、甘油、聚山梨酯80和40份蒸馏水，混合均匀，得混合物a；取剩下的蒸馏水将相应量的氢氧化钠溶解后，加入相应量的羟苯乙酯，混合均匀，得混合物b；将混合物a和混合物b混合均匀，即得。
对比例1一种软膏
与实施例1不同之处在于，对比例1去掉亮氨酸衍生物(i)，将凡士林的重量份数增加至60份，其余参数及操作参考实施例1。
对比例2一种乳膏
与实施例5不同之处在于，对比例2去掉亮氨酸衍生物(i)，将蒸馏水的重量份数增加至71.6份，其余参数及操作参考实施例5。
对比例3一种乳膏
与实施例7不同之处在于，对比例3去掉亮氨酸衍生物(i)，将蒸馏水的重量份数增加至88.3份，其余参数及操作参考实施例7。
对比例4一种乳膏
与实施例1不同之处在于，对比例4将亮氨酸衍生物(i)的重量份数增加至8份，将凡士林的重量份数减少至52份，其余参数及操作参考实施例1。
试验例1对银屑病豚鼠模型的试验
1、试验材料：实施例1、5、7和对比例1-4制备的外用制剂；卤米松乳膏(国药准字h20153118，重庆华邦制药有限公司)；豚鼠白细胞介素2(il-2)elisa检测试剂盒，豚鼠白细胞介素6(il-6)elisa检测试剂盒，豚鼠肿瘤坏死因子ɑ(tnf-ɑ)elisa检测试剂盒，豚鼠γ干扰素(ifn-γ)elisa检测试剂盒，均购自北京雅安达生物技术有限公司。
2、试验对象：白色豚鼠，200-250g，雌雄各半。
3、实验方法：
将豚鼠随机分为空白对照组、阳性对照组(卤米松乳膏)、模型组、实施例1、5、7组和对比例1-4组，每组10只豚鼠，除空白对照组外，其余各组均用普萘洛尔乳膏均匀外涂豚鼠双耳背皮肤，0.1g/cm2，每日3次，连续涂4周。4周后，除空白对照组和模型组外，其余各组豚鼠双耳背皮肤分别涂上相应的外用制剂0.1g/cm2，每日3次，连续2周，观察豚鼠耳廓变化；用药2周后，处死豚鼠，手术切取各组豚鼠右侧耳部标本按照试剂盒说明书要求测定各组豚鼠样本的il-2、il-6、tnf-ɑ和ifn-γ含量。
4、实验结果：
空白对照组豚鼠耳部皮肤光滑，无红斑、鳞屑等异常病变；模型组和对比例1-3组豚鼠耳部可见鳞屑性暗红色至红褐色斑块，有不同程度的浸润；实施例1、5、7组和对比例4组还有阳性对照组豚鼠耳部有不同程度的改善，表现为皮肤光滑或斑块消退，其中，对比例4组的有一定的改善，但改善效果不显著。
表1对银屑病豚鼠模型耳廓组织中细胞因子的影响
注：与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01。
由表1可见，本发明实施例1、5、7制备的外用制剂可以显著(p<0.01)降低il-2、il-6、tnf-ɑ和ifn-γ细胞因子的含量，效果与阳性对照组无显著差异，说明本发明制备的外用制剂可以通过抑降低胞因子的表达，来改善银屑病的症状。
试验例2对银屑病小鼠模型的试验
1.试验材料：实施例1-7和对比例1制备的外用制剂；卤米松乳膏(国药准字h20153118，重庆华邦制药有限公司)
2.试验对象：实验小鼠，16-20g，雌雄各半。
3.实验方法：
将小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(卤米松乳膏)和实施1-7组，每组10只小鼠，将小鼠背部脱毛，脱毛面积为2cm×3cm，每天上午除空白对照组以外其余各组均在脱毛区涂膜5％咪喹莫特乳膏，200mg/kg，空白对照组给予等量的对比例1制备的外用制剂，每天1次，连续2周；在造模的同时，每天下午再其脱毛区均匀涂布各组相应的外用制剂，每天1次，连续2周。
在给药后第7、14天分别对小鼠皮损处红斑、鳞屑及浸润增厚程度进行评分，将三者的积分相加作为总积分，评价标准为：无-0分；轻度-1分；中度-2分；重度-3分；极重度-4分。
4.实验结果：
表2对银屑病小鼠模型皮损评分的影响
注：与模型组相比，**p<0.05，*p<0.01。
由表2可见，本发明实施例1-7制备的外用制剂可显著(p<0.01)降低银屑病小鼠模型的皮损评分，对银屑病造成的红斑、鳞屑及浸润增厚程度具有显著的改善效果，其效果与阳性对照组无明显的差异。
试验例3皮肤刺激试验
1.试验材料：实施例1和对比例1制备的软膏剂。
2.试验对象：新西兰家兔，雌雄各半，1.5-3kg。
3.试验方法：
取新西兰家兔4只，于给药前24h将兔背部脊柱两侧对称脱毛，不损伤皮肤，脱毛面积共约150cm2，右侧脱毛区均匀涂抹实施例1制备的软膏，左侧涂抹等量对比例1制备的软膏，分别用两层纱布覆盖，再用无刺激性胶布封闭固定，分笼饲养，2次/天，1.6mg/次，24h后洗去剩余药物，观察并记录给药部位出现红斑和水肿的情况。
另取家兔4只，同上法处理，续给药14天后停药洗去剩余药物，连续观察4天，观察并记录红斑、水肿情况，以及涂药部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或变薄等情况。
4.试验结果
观察结果显示，用药24h或14天后，均未见红斑、水肿等现象，也未见色素沉着、出血点、皮肤粗糙或变薄等现象。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。