本发明涉及食品领域，特别涉及一种复合饮料及其应用。
背景技术：
现代社会中，电视、计算机的广泛普及，工作压力和生活压力的增大，用眼的增多，导致眼睛疲劳、干眼症等眼科疾病越来越多。
干眼病是因泪液低分泌或其他原因引起泪膜异常而发生眼表上皮干变的常见眼病。随着电脑终端工作者的人数逐年增加以及人口老龄化问题的出现等，干眼发病率正逐年上升，流行病学调查表明，30-40岁人群中超过20％患有干眼病，70岁以上人群中患病率则高达36.1％，干眼病的研究和防治工作越来越受到重视。
近视是一种严重危害人类视力的眼病，严重影响人们正常的工作和学习。据有关部门统计，小学近视率为40％，中学为50％-60％，大学为70％-80％，我国大约有3600万患者，位居世界首位。因而探讨近视的发病机制，研发防治近视的药物是我们医药工作者当前面临的一项重大的课题。
目前认为调节学说是近视眼形成的原因之一，该学说认为，在近视早期，由于长时间持续视近，为使物体成像在视网膜上，脑支配睫状肌持续过度收缩，久之易造成睫状肌供血不足、代谢产物堆积和肌纤维的损伤，进而引起睫状肌的痉挛。近视眼早期的患者常表现为眼部疲劳、不适、酸痛甚至头痛等症状，可能与睫状肌损伤后痉挛有关。随着近视的不断加深，往往需要配戴眼镜，尽管眼镜可以缓解近视程度，但却减少了晶状体调节性变化，久之会引起睫状肌废用性肌无力，使调节功能进一步下降。
美国营养学家建议，每天食用蓝莓40～80克，可以达到眼睛保健的目的。美国教育部将蓝莓列为中小学生保护眼睛的营养配餐食品，并要求每人每周至少食用一杯蓝莓鲜果汁或加工品。
蓝莓(blueberry)是杜鹃花科越桔属(vacciniumspp)，含有丰富的营养和药用保健价值，被誉为浆果之王。在英国权威营养学家列出的全球15种健康食品中，蓝莓食品居首位，联合国粮农组织(fao)将其列为五大健康食品之一。
因此，提供一种有效预防和/或缓解眼科疾病的蓝莓制剂具有重要的现实意义。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供一种复合饮料及其应用。试验结果表明，本发明提供的复合饮料对实验性干眼症有明显缓解作用。本发明制得的复合饮料通过松弛睫状肌，改善视网膜血循环而发挥防治近视的作用。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种组合物，包括蓝莓、红葡萄、枸杞和维生素。
在本发明的一些具体实施方案中，蓝莓、红葡萄、枸杞和维生素的质量比为(150～250):(50～120):(1～4):(0.6～3.0)。
在本发明的一些具体实施方案中，所述蓝莓为蓝莓浓缩汁；所述红葡萄为红葡萄浓缩汁；所述枸杞为枸杞提取物；所述维生素包括维生素c和维生素e；
其中，所述蓝莓浓缩汁的质量标准为：
所述红葡萄浓缩汁的质量标准为：
所述枸杞提取物的质量标准为：
所述维生素c和所述维生素e的质量比为(0.5～2.0):(0.1～1.0)。
在本发明的一些具体实施方案中，组合物还包括果糖、木糖醇、聚葡萄糖、羧甲基纤维素钠、果胶、叶黄素、苹果酸、食用盐中的一种或两者以上的混合物。
在本发明的一些具体实施方案中，以质量份计，包括如下组分：
在本发明的一些具体实施方案中，水的用量优先630～680kg。
本发明还提供了所述的组合物制备预防和/或治疗干眼症或松弛睫状肌、改善视网膜血循环的药物和/或食品中的应用。
在本发明的一些具体实施方案中，所述组合物的有效剂量为3.17g/kg～12.68g/kg。
本发明还提供了一种预防和/或缓解干眼症或松弛睫状肌、改善视网膜血循环的食品，包括所述的组合物和食品中可接受的辅料。
本发明提供了一种复合饮料在制备预防和/或缓解干眼症或松弛睫状肌、改善视网膜血循环的药物和/或食品中的应用。建立了兔干眼症模型，观察本发明制得的复合饮料对schirmeri试验滤纸湿长、泪膜破裂时间和角结膜虎红染色点数的影响。同时建立了家兔离体睫状肌收缩模型，观察本发明制得的复合饮料对乙酰胆碱诱导的收缩睫状肌的松弛作用；采用多普勒观察蓝莓对家兔视网膜缺血模型血流动力学的影响。
实验结果表明：1)本发明提供的复合饮料能增加干眼症模型兔schirmeri试验滤纸湿长(增加泪液分泌)，延长泪膜破裂时间(增加泪膜的稳定性)，减少角结膜虎红染色点数(提高眼表保护水平)。2)本发明提供的复合饮料对乙酰胆碱诱导的睫状肌收缩具有松弛作用；能够增加视网膜中央动脉收缩期和舒张期的血流，降低血管阻力指数。可见，本发明取得了如下有益效果：
1、本发明提供的复合饮料对实验性干眼症有明显缓解作用。
2、本发明提供的复合饮料通过松弛睫状肌，改善视网膜血循环而发挥预防近视、缓解视疲劳的作用。
具体实施方式
本发明公开了一种复合饮料及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
schirmeri试验是衡量泪液中浆液性泪的主要指标。在本实验中，用本发明制得的复合饮料给干眼家兔局部治疗3周后，其schirmeri试验滤湿长明显高于同期的模型组说明本发明制得的复合饮料可能通过某种途径使泪腺和harder腺的分泌增加，从而改善干眼症。
泪膜为由睑板腺分泌的脂质、主副泪腺分泌的水样液和眼表面上皮细胞分泌的黏蛋白所构成。可保护眼表上皮层，即结膜上皮、角膜缘上皮和角膜上皮，同时该上皮层也参与稳定泪膜的形成。因为结膜的杯状细胞可分泌形成凝胶的黏蛋白，而黏蛋白正是泪膜的重要组成部分。本发明实验结果表明，本发明制得的复合饮料可提高泪膜破裂时间，增加泪膜的稳定性，起到缓解干眼的作用。
虎红为荧光素含碘的衍生物，主要着染已死亡、失去活性、变性的细胞和那些缺乏表面蛋白尤其是粘蛋白覆盖的细胞和沉淀的粘蛋白，而对正常角膜细胞不染色。虎红染色对探察泪膜粘蛋白的完整性简单易行，是眼表保护水平的敏感指标，也是早期诊断干眼症较敏感、特异的方法。在本发明的实验中，本发明制得的复合饮料可迅速、明显地减少角结膜虎红染色，促进眼表的愈合，达到治疗干眼症的作用。
本发明的实验结果表明，本发明制得的复合饮料可以抑制乙酰胆碱引起的睫状肌收缩，从而产生调节麻痹作用，该作用可能是蓝莓防治近视的作用机制之一。
本发明实验表明，本发明制得的复合饮料可以明显的提高vs和vd，降低ri，故该作用是蓝莓防治近视的另一条作用机制。总之，实验发现蓝莓防治近视的作用机制与其松弛睫状肌，改善视网膜血液循环作用有关。
1、药物及试剂
浓缩复合饮料：本发明实施例1～3制得的复合饮料(相对密度1.05)68kg浓缩为22kg浓缩饮料，由无限极(中国)有限公司提供。复合饮料人体低、中、高服用量建议：200ml/天、400ml/天、800ml/天；浓缩饮料为68g/天(55ml)、136g/天(110ml)、272g/天(220ml)。兔给予低、中，高三个剂量组，低剂量为3.17g浓缩汁/kg(68×0.07÷1.5＝3.17g/kg，即2.6ml浓缩汁/kg，将浓缩汁稀释4倍，给药体积10.4ml/kg)；中剂量为6.34g浓缩汁/kg(5.2ml/kg，将浓缩汁稀释2倍，给药体积10.4ml/kg)；高剂量为12.68g浓缩汁/kg(给药体积10.4ml/kg)；分别相当于人用等效剂量的1、2、4倍。
硝酸毛果芸香碱片：2mg/片，成人一次1片，一日3次。兔0.56mg/日·kg兔，给药剂量相当于人用量的2倍，湖南华纳大药厂有限公司生产，批号：20110312。用于对兔实验性干眼症影响实验阳性对照药。
山莨菪碱片：5mg/片，成人一次1片，一日3次，1.4mg/日·kg兔，给药剂量相当于人用量的2倍。杭州民生药业集团有限公司，批号：20120305。用于对兔实验性视网膜缺血模型影响实验阳性对照药。
阿托品片：0.3mg/片，成人一次1片，一日3次，0.084mg/日·kg兔，给药剂量相当于人用量的2倍。北京双鹤药业股份有限公司，批号：20120902。用于对兔眼睫状肌收缩影响实验阳性对照药。
乙酰胆碱：1g/瓶，北京中生瑞泰科技有限公司产品。批号：100911。
荧光素钠：25g/瓶，上海试剂三厂产品，批号09082。
虎红:10g/瓶，上海沪峰化工有限公司产品，批号10001。
乌拉坦(氨基甲酸乙酯):国药集团化学试剂有限公司产品。批号：30191228。
0.25％氯霉素滴眼液：石家庄格瑞药业有限公司产品，20mg/8ml。批号：120801。
0.5％四环素眼膏：芜湖三益信成制药有限公司产品，2g/支。批号：120604。2、主要仪器设备
powerlab16/30型16道生理记录仪：澳大利亚adi公司产品。
激光多普勒血流仪：澳大利亚adi公司产品。
yz-5csi型裂隙灯显微镜：苏州医疗仪器厂产品。
hv-4离体组织器官恒温灌流系统：成都泰盟科技有限公司产品。
ab204型电子分析天平：瑞士梅特勒－托利多公司产品。
3、实验动物
健康新西兰兔：购自长沙市天勤生物技术有限公司，动物合格证号4306702097。实验在本院动物室进行，实验动物环境设施合格证号：00023167号。
4、统计学处理
应用spss17.0统计软件处理数据，采用单因素方差分析(one-wayanova)，lsd(l)方差齐性检验，分析观察期各指标的变化及组间各指标平均值的差异。
本发明提供的一种复合饮料及其应用中所用原料及试剂均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1-3与对比例1-2
采用上述用量，混合、杀菌、灌装、旋盖、倒瓶、包装，制成1000kg，480ml/瓶。
实施例4对家兔实验性干眼症的缓解作用实验研究
1.1干眼病模型的制备与缓解试验
新西兰兔30只(60眼)，适应性喂养3天后，随机分为空白对照组，模型对照组，本发明制得的复合饮料低、中、高剂量组，毛果芸香碱阳性对照组6组，每组5只动物。除空白对照组外，动物双眼滴0.25％氯霉素滴眼液(每次每眼3滴，每天2次)并喂养3天后，取兔按照谢汉平等的方法制作干眼模型:33％乌拉坦腹腔注射麻醉，给药剂量为1g/kg。将兔固定于实验台上，手术区用碘伏及75％乙醇消毒，铺洞巾。将眼球向前推挤，在眼窝后壁处寻找泪腺，完整摘除之，约0.3cm3，在第3眼睑的内侧面见harders腺的总导管，顺着导管逐渐，完整的分离harders腺；腺体分两部分，靠背侧前方较小的一部分白色，靠腹侧后方较大的一部分呈淡红色，总长约2cm，完整摘出harders腺及第3眼睑。用前端直径约4mm的细棉签蘸50％三氯醋酸涂抹距角膜缘3mm以外球结膜1周，待球结膜颜色变白时用生理盐水缓慢冲洗，术后点0.5％四环素眼膏预防感染，每日1次，共用7天，使兔眼形成干眼症模型。
手术后第8天起，空白对照组及模型对照组动物灌胃给予等体检蒸馏水。本发明制得的复合饮料低剂量治疗组动物灌胃给予3.17gkg；中剂量治疗组动物灌胃给予6.34g/kg；高剂量治疗组动物灌胃给予12.68g/kg；阳性对照组灌胃给予毛果芸香碱0.56mg/kg。一日一次，连续4周。每周进行1次schirmeri试验，泪膜破裂时间记录及虎红染色情况观察。
1.2检测指标
schirmeri试验：用药后间隔3小时，室内中等亮度和湿度，背光检查，以5×35(mm)新华滤纸一条，在首端5mm处反折，轻巧地置于下睑中后部1/3交界处，5分钟后取出纸条(如不到5分钟滤纸条已湿透，另换滤纸条)，取出后测滤纸湿长。
泪膜破裂时间(tearbreak-uptime，but)：1％荧光素钠2μl于下睑结膜囊内，以恒定力手动眨眼数次后，以恒定力撑开兔双眼，用裂隙灯显微镜的钴蓝色弥散光，从瞬目后睁眼时开始用秒表记时到泪膜出现第1个破裂点(黑斑)的时间，即为but。
1％虎红角结膜染色：虎红对失去活力的细胞及沉淀的黏蛋白极易染色，将睑裂区眼表分为鼻侧球结膜、颞侧球结膜及角膜3个区，每区按0、1、2、3评分，共计9分。其中0分，无染色；1分，染色在10个点以下；2分，染色在10个点以上且30个点以下；3分，染色在30个点以上或呈片状。
1.3结果
1.3.1复合饮料对干眼症模型兔泪液分泌量的影响：结果见表1，手术后第7天进行兔泪液分泌量检测显示，模型对照组、复合饮料低、中、高3个剂量组、毛果芸香碱阳性对照组动物泪液分泌量较空白对照组显著减少，表明造模成功。给药14天时，复合饮料3个剂量组较模型组兔泪液分泌量有增加趋势。给药21天及28天时，复合饮料低、中、高3个剂量组使兔泪液分泌量显著增加，与模型组比较，p＜0.05或p＜0.01。毛果芸香碱阳性对照组亦能增加兔泪液分泌量。
表1：复合饮料对干眼症模型兔泪液分泌量的影响(
注：与空白对照组比较#p<0.05，##p<0.01与模型组比较：*p<0.05，**p<0.01
1.3.2复合饮料对干眼症模型兔泪膜破裂时间的影响：结果见表2，手术后第l天进行兔泪膜破裂时间检测显示，模型对照组、复合饮料3个剂量组、毛果芸香碱阳性对照组动物兔泪膜破裂时间较空白对照组显著减少，表明造模成功。给药14天时，复合饮料3个剂量组较模型组兔泪膜破裂时间有增加趋势。21天及28天时，蓝毒低、中、高3个剂量组使兔泪膜破裂时间显著增加，与模型组比较，p＜0.05或p＜0.01。毛果芸香碱阳性对照组亦能增加兔泪膜破裂时间。
表2：复合饮料对干眼症模型兔泪膜破裂时间的影响(
与空白对照组比较#p<0.05，##p<0.01与模型组比较：*p<0.05，**p<0.01
1.3.3蓝毒饮料对干眼症模型兔1％虎红角结膜染色的影响：结果见表3，手术后第7天进行兔角结膜染色检测显示，模型对照组、复合饮料3个剂量组、毛果芸香碱阳性对照组动物兔角结膜染色较空白对照组显著增加，表明造模成功。给药14天时，复合饮料低、中2个剂量组较模型组兔角结膜染色有减少趋势，高剂量组能显著减少兔角结膜染色，与模型对照组比较p＜0.05。给药21天及28天时，复合饮料低、中、高3个剂量组使兔角结膜染色显著减少，与模型组比较p＜0.05或p＜0.01。毛果芸香碱阳性对照组亦能减少兔角结膜染色。
表3：复合饮料对干眼症模型兔1％虎红角结膜染色的影响(
与空白对照组比较##p<0.01与模型组比较：*p<0.05，**p<0.01
实施例5对家兔视网膜缺血模型缓解作用实验研究
2.1实验方法：新西兰兔30只(60眼)，适应性喂养3天后，随机分为空白对照组，模型对照组，本发明制得的复合饮料低、中、高剂量组，山莨菪碱片阳性对照组6组，每组5只动物。空白对照组及模型对照组动物灌胃给予等体检蒸馏水。本发明实施例1～3制得的复合饮料以及对比例1～2制得的饮料的低剂量治疗组动物灌胃给予3.17g/kg兔·日；中剂量治疗组动物灌胃给予6.34g/kg兔·日；高剂量治疗组动物灌胃给予12.68g/kg兔·日；阳性对照组灌胃给予山莨菪碱2.8mg/kg兔·日。一日给予一次，连续4周。
4周末，除空白对照组外，动物造视网膜缺血动物模型，33％乌拉坦腹腔注射麻醉，给药剂量为1g/kg。将兔固定于实验台上，手术区用碘伏及75％乙醇消毒，铺洞巾。将连接生理盐水的5号头皮针从耳前方角巩膜缘内刺入前房，缓慢升高输液瓶高度产生16.7kpa压力，缓慢升高输液瓶高度产生16.7kpa压力(125.25mmhg即170.30cm水柱)。60min后将输液瓶高度逐渐降低，缓慢减低眼内压，直至输液瓶高度到动物眼球水平，拔除灌注针头，视网膜血供恢复。各组动物同时分别灌胃相应药物，2h后用激光多普勒血流仪及powerlab16/30型16道生理记录仪测定视网膜中央动脉收缩期血流速度(peaksystolicvelocity，vs)、舒张期血流速度(enddiastolicvelocity，vd)和血管阻抗指数(resistanceindex，ri)。
2.2实验结果：结果见表4，模型对照组兔视网膜中央动脉收缩期血流速度(vs)、舒张期血流速度(vd)较空白对照组显著减慢，血管阻抗指数(ri)显著增加，表明造模成功。实施例1制得的复合饮料低、中、高3个剂量组能显著提高兔视网膜中央动脉收缩期血流速度(vs)、舒张期血流速度(vd)，减少血管阻抗指数(ri)，与模型组比较，p<0.05或p<0.01。山莨菪碱片阳性对照组亦有相同作用。实施例1制得的复合饮料低、中、高3个剂量组的试验结果与对比例1～2相比，具有显著差异(p＜0.05)或极显著差异(p＜0.01)。
取实施例2～3制得的产物进行上述试验，试验结果与实施例1制得的复合饮料的结果无显著差异(p＞0.05)。表明本发明提供的组合物或复合饮料能显著提高兔视网膜中央动脉收缩期血流速度(vs)、舒张期血流速度(vd)，减少血管阻抗指数(ri)。
表4：复合饮料对家兔视网膜缺血模型视网膜血流量的影响(
与空白对照组比较##p<0.01与模型组比较：*p<0.05，**p<0.01
实施例6复合饮料对兔眼睫状肌收缩的影响
3.1实验方法
新西兰兔25只(50眼)，适应性喂养3天后，随机分为空白对照组，实施例1制得的复合饮料低、中、高剂量组，阿托品阳性对照组6组，每组5只动物。空白对照组动物灌胃给予等体检蒸馏水。本发明实施例1～3制得的复合饮料以及对比例1～2制得的饮料的低剂量治疗组动物灌胃给予3.17g/kg兔·日；中剂量治疗组动物灌胃给予6.34g/kg兔·日；高剂量治疗组动物灌胃给予12.68g/kg兔·日；阳性对照组灌胃给予阿托品2.8mg/日·kg兔。一日给予一次，连续4周。
末次给药后2h耳缘静脉取血2ml，肝素抗凝，4000转/min离心10min分离血清，冻干置低温冰箱保存备用。临用前用蒸馏水配置，使血清比原浓度浓缩1倍供试验用备用。注射空气处死动物，立即用弯剪取出眼球，纵行切开，游离出睫状肌修剪成1cm长的细条，置于含k-h液(nacl120mmol/l，kcl417mmol/l，nah2po41.2mmol/l，mgso41.2mmol/l，cacl22.5mmol/l，nahco320mmol/l，葡萄糖10mmol/l，ph7.4)的浴槽中，冲洗两次。将睫状肌条一端固定于l型管，另一端连结肌力换能器，放入含有20ml的k-h液水浴管中，温度恒定于37℃，通入氧气。睫状肌条先平衡30min，预置负荷200mg，待其收缩稳定后，开始实验。加入终浓度为10mg/ml乙酰胆碱，20min后分别加入50μl/ml不同组别的动物血清，观察其对乙酰胆碱引起的睫状肌条收缩幅度的影响，以mv表示。
3.2实验结果
结果见表5，实施例1制得的复合饮料低、中、高3个剂量组能显著减少睫状肌收缩幅度的作用，与空白组比较，p<0.05或p<0.01，即具有松弛睫状肌的作用。阿托品阳性对照组亦有相同作用。
取实施例2～3制得的产物进行上述试验，试验结果与实施例1制得的复合饮料的结果无显著差异(p＞0.05)。表明本发明提供的组合物或复合饮料有松弛睫状肌的作用。
表5：复合饮料对兔睫状肌收缩幅度的影响
与空白组比较：*p<0.05，**p<0.01
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。