专利名称:制备一种含抗肿瘤氨茴环霉素糖苷的可注射给药并可随时取用的溶液的方法
本发明涉及一种制备抗肿瘤氨茴环霉素糖苷(anthracyline glycoside)(例如阿霉素)的稳定、可静脉内注射、随时取用的溶液的方法，提供封存于容器内的该溶液，并涉及用所说的随时取用的溶液治疗肿瘤的方法。
氨茴环霉素糖苷，是抗恶性增生剂中一类有名的化合物，其中典型的、并且应用最广的代表性化合物是阿霉素(doxorubicin)(参见Anticancer Aitibiotics，Federico Arcamone，1981，Academic Press，New，York，N.Y.;Adriamycin Review，EROTC Inter national Symposium，Brussels，1974年5月，M.Staguet，Eur.Press Medikon，Chent，Belg.;Results of Adriamycin Therapy，Adnamycin Symposium at Frankfurt/Main 1974 edi ted by M.Ghione，J.Fetzer and H.Maier，Publ.Springer，New York，N.Y.)。
目前，氨茴环霉素糖苷类抗肿瘤药物，特别是阿霉素只能以冻干制品的形式提供应用，给药前需要重新配制。
在制造和重新配制这些制剂的过程中，使有关人员(工人、药剂师、医疗人员、护士)，受到被污染的危险，这种污染由于抗肿瘤物质的毒性是特别严重的。
Martindale Extra药典第28版，175页左栏中，谈到抗肿瘤药物的不良作用时建议“使用时须特别小心，避免接触皮肤和眼睛;不得吸入。因为可能引起疼痛和组织损伤，故必须小心以避免外渗”。
相似地，Scand.J.Work Environ Health第10卷，71-74页(1984)以及Chemistry Industry上的文章(1983年7月30出版)第488页和Drug-Topies-Medical-Economics-Co，(1983年2月7日出版)第99页均报导了在接触到细胞生长抑制剂(包括阿霉素)的医务人员中观察到的严重的不良影响。
为了投用冻干制剂，需要将药物处理两次即首先必须将冻干“饼”重新配制，之后再给药，另外在某些情况下，由于制剂溶液化程度低，还必须长时间摇晃，以使粉末完全溶解。
如果制成可随时直接取用的药物溶液，就可大大减少有关人员在制造或重新配制过程中接触冻干制品的危险，为此我们研制了一种稳定的、治疗上可直接拿来作静脉注射的氨茴环霉素糖苷如阿霉素的溶液，其制备和给药过程中不必进行冻干和重新配制。
根据本发明，我们提供了一种无菌、无热原的氨茴环霉素糖苷溶液，其主要含有溶解于生理上可接受的溶剂中的氨茴环霉素糖苷的生理上可接受的盐，其不是由冻干品重新配成的，它具有2.5-6.5的pH值范围。
本发明所提供的溶液更适于包装在一封闭的容器内。
氨茴环霉素糖苷选自下列一组抗生素则较为理想，包括阿霉素，4′-表-阿霉素(epirubicin)，4′-脱氧-阿霉素.(esorubicin)，4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素，正定霉素和4-脱甲氧基正定霉素(idarubicin)首选的氨茴环霉素糖苷是阿霉素。
任何生理上接受的氨茴环霉素糖苷盐均可用来制备本发明的溶液。例如，适用的盐的例子可以是无机酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐等;以及某些有机酸盐，如醋酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、柠檬酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐等。特别可取的是盐酸盐，尤其是当氨茴环霉素糖苷是阿霉素时。
任何生理上可接受的、并且能够溶解氨茴环霉素糖苷盐的溶剂均可使用。本发明的溶液还可含有一种或多种附加成份，如共增溶剂(可以是一种溶剂)，张力调节剂和防腐剂。下文将介绍用于制备本发明氨茴环霉素糖苷溶液的溶剂、共增溶剂、张力调节剂和防腐剂的例子。
例如，适用的溶剂和共增溶剂可以是水;生理盐水;脂族酰胺，如N，N-二甲基乙酰胺、N-羟基-2-乙基-乳酰胺等;醇类，如乙醇、苯甲醇等;二元醇和多元醇，如丙二醇、丙三醇等;多元醇的酯，如甘油二乙酸酯、甘油三乙酸酯等;聚乙二醇类和聚醛类，如聚乙二醇400、丙二醇甲基醚等;二氧戊环类，如异亚丙基丙三醇等;二甲基异山梨糖醇酐;吡咯烷酮衍生物，如2-吡咯烷酮、N-甲基-2-吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮(只作共增溶剂)等;聚氧乙烯化脂肪醇，如Brij
等;聚氧乙烯化脂肪酸的酯。如Cremophor
、Myrj
等;聚山梨酸酯，如Tweens
;聚丙二醇的聚氧乙烯衍生物，如Pluronics
。
其中特别可取的共增溶剂是聚乙烯吡咯烷酮。
适用的张力调节剂，如生理上可接受的无机氯化物(如氯化钠)、D-葡萄糖、乳糖、甘露糖醇等。
适用于生理给药的防腐剂可以是对羟基苯甲酸的酯类(如甲、乙、丙和丁酯，或其混合物)，以及氯甲酚等。
上述溶剂、共增溶剂、张力调节剂和防腐剂可单独使用，亦可两种或多种结合使用。
优选的溶剂是水、乙醇、聚乙二醇和二甲基乙酰胺，或者是这些溶剂的不同比例的混合物。尤其优选的是水。
为了将pH调至2.5至大约5.0的范围内，可按需要加入一种生理上可接受的酸。可以是任何一种生理上可接受的酸，如无机酸类的盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸及硝酸等;或者是一种有机酸如醋酸、琥珀酸、酒石酸、抗坏血酸、柠檬酸、谷氨酸、苯甲酸、甲磺酸及乙磺酸等，或者也可以是一种生理上可接受的酸性缓冲溶液，如氯化物缓冲液、醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液等。
为了得有大约5至5.5的pH值，通常不必加酸，而只根据实际需要加上面指出的任一种生理上可接受的缓冲液即可。
为了得有大约5.5至6.5的pH，须加入一种生理上可接受的碱化剂，如氢氧化钠，一、二或三乙醇胺等，或者更好是加一种缓冲溶液，如磷酸盐缓冲液或Tris缓冲液等。
本发明的可直接取用溶液的优选pH值范围是2.5-5，特别是大约3-5.2，尤其可取的范围是大约3-5。
本发明的溶液中，氨茴环霉素糖苷的浓度可在很大的范围内变动，较好是0.1-100毫克/毫升，特别是0.1-50毫克/毫升，最好是1-20毫克/毫升。
对于不同的氨茴环霉素糖苷，优选的浓度范围可稍有不同。例如，阿霉素的较好浓度是大约2-50毫克/毫升，尤其是2-20毫克/毫升，最好是2-5毫克/毫升。对于4-表-阿霉素、4-脱氧-阿霉素和4-脱氧-4′-碘代-阿霉素也优选相似的浓度。正定霉素和4-脱甲氧基-正定霉素的优选浓度范围是0.1-50毫克/毫升，更好是1-20毫克/毫升，最好是1-5毫克/毫升。
适于包装氨茴环霉素糖苷溶液的可以是所有用于注射剂的被认可的容器，如塑料和玻璃容器，随时取用的注射器等。较好的容器是封闭的玻璃容器，如小瓶或安瓶。
根据本发明的特别优选的特征，本发明提供了一种无菌的、无热原的阿霉素溶液，该溶液主要含有一种溶于生理上可接受溶剂的阿霉素的生理上可接受的盐，其不需要由冻干品重新配制，并且具有2.5-6.5的pH范围。
上面指出的本发明之优选特征中，阿霉素的生理上可接受的盐可以是无机酸的盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐等，或者是有机酸的盐，如醋酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、柠檬酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐等。最好是盐酸盐。
作为本发明的特征，上文所指出之溶液的适用的溶剂、共增溶剂、张力调节剂和防腐剂，可以是本说明书中前面已列出的那些的类似物，水是特别优选的溶剂。
另外，根据需要，可加生理上可接受的酸以将pH调至2.5到约5的范围内，亦可根据需要，加入前面限定的碱化剂，将pH调到约5.5至6.5的范围内。如需要将上述优选的溶液的pH调到2.5至大约5时，最好是加盐酸。本发明的上述优选溶液的较好pH值是2.5-5，特别是大约3-5.2，最好是3-5。
虽然上述优选条件中阿霉素的浓度可在0.1-100毫克/毫升这样很宽的范围内变动，但优选的浓度为2-50毫克/毫升，更好是2-20毫克/毫升。阿霉素的最优选的浓度是2-5毫克/毫升。
本发明也提供一种制备pH为2.5-6.5的、无菌无热原的氨茴环霉素糖苷的方法，该方法包括将一种并非以冻干品形式存在的、氨茴环霉素糖苷的生理上可接受的盐溶解在一种其生理上可接受的溶剂中;根据需要加或不加一种生理上可接受的酸或缓冲液，以将pH调到所说的预期范围内;并使所得溶液通过一个除菌滤器防菌。
在溶液通过除菌滤器除菌之前，可向溶液内加入一种或多种附加成分，如上文所述某种共增溶剂、张力调节剂和防腐剂。
用本发明的溶液，可以制得含有高浓度氨茴环霉素糖苷活性物质(浓度甚至高达50毫克/毫升或更高)的组合物。这一构成比例要比目前应用的冻干制品要优越得多，对于这种冻干制品，因为在重新配制(主要是用盐水)时遇到增溶问题，很难使其中的氨茴环霉素糖苷达到很高的浓度。在冻干饼中存在有赋形剂，如乳糖，一般其比例相对于活性物质，甚至高达每份活性物质有5份赋形剂，其对于增溶作用有相反的影响，以致很难提高的溶解度，甚至很难使氨茴环霉素的浓度高于2毫克/毫升。
本发明的溶液的特征是具有良好的稳定性。已发现在适于药物制剂储存的温度条件下，在各种溶剂中制成的、有不同pH值和浓度的溶液，均可长期保持稳定性。对此，将在下述的实验中进一步阐明。
基于氨茴环霉素糖苷活性物质的为人熟知的抗肿瘤活性，本发明的医药组合物适用于治疗人和动物宿主的肿瘤。可治疗的肿瘤包括肉瘤，如生骨和软组织肉瘤;癌，如乳腺、肺、输尿管、甲状腺、前列腺和卵巢癌;淋巴瘤，如何杰金氏和非何杰金氏淋巴瘤，神经母细胞瘤，黑素瘤，骨髓瘤，Wilms氏瘤和白血病-包括急性淋巴母细胞性白血病和急性成髓细胞性白血病。
能治疗的特异肿瘤的例子有Moloney病毒肉瘤、S180腹水癌、S180肉瘤、Gross可移植白血病、L1210白血病和淋巴细胞P388白血病。
因此，本发明也提供了一种抑制肿瘤-特别是上述的任一种肿瘤生长的方法，其包括给予患有所述肿瘤的宿主注射含有足以抑制所述肿瘤生长量之活性物质的本发明的溶液。
本发明的可注射溶液是根据不同的可用剂量表经迅速静脉内注射或滴注给药的。阿霉素的适宜给药程序可以是，按每平方米体表面积给予60-75毫克活性药物，作一次迅速输注，之后21天重复一次;另一种程序是按每平方米体表面积每天静脉注射30毫克，连续3天，之后每28天重复一次。4-表-阿霉素和4′-脱氧-阿霉素的适宜剂量可以是一次静脉输注75-90毫克/平方米体表面积，21天重复一次;对于4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素亦可使用相似的剂量。
Idarubicin，即4-脱甲氧基-正定霉素如用于治疗实体瘤，可按每21天一次剂量为13-15毫克/平方米体表面积的剂量静脉给药;而用于治疗白血病时，则最好是按10-12毫克/平方米静脉内注射，连续3天，之后每15-21天重复一次;使用正定霉素时亦可采用相似的剂量。
下列实施例旨在进一步阐明而不是以任何方式限定本发明。
对于实施例，本随时取用之溶液的稳定性对照是使用高效液相层析法(HPLC)完成的，所用实验条件如下液相层析仪 Varian 5010型分光光度检测仪 Knauer 8700型积分纪氯仪 Varian CD S 401型注射活阀 Rheodyne 7125型，配有10微升样品回管层析柱 Waters M-Bondapak C18(长300毫米;内经3.9毫米，平均颗粒大小10微米)柱温度 常温(约22℃±2℃)流动相 水∶乙腈(69∶31，体积/体积)，用磷酸调至pH2，经过滤(用烧结玻璃滤器，孔隙度为1微米或更细)除气流动相流速 1.5毫升/分分析波长 254±1毫微米积分记录仪敏感度 512走纸速度 1厘米/分在这些条件下，阿霉素糖苷的峰显示保留时间为6分钟。
在各实施例所附的表中，给出了所获之结果。
分析数据外推，经Arrhenius作图以确保可期望获得90%初始分析的可测量的时间。
这一分析数据处理的程序是为人熟知的并广泛采用的(参见Chemical Stability of Pharmaceuticals，Kennet A.Connors，Gordon L.Amidon，Lloyd Kennon，Publ.John Wiley and Sons，New York，N.Y.，1979)。
术语“teflon”(特氟隆，聚四氟乙烯的商品名)是指“Teflon TM”。
实施例1组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.8克 (10毫克)注射用水加至 0.4升 (5毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的、经氮起泡除气的注射用水中。不调整溶液的pH。再加给除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下通过-0.22微米微孔膜过滤溶液。将溶液以每瓶5毫升分装入Ⅰ型无色玻璃小瓶(容积为5-7毫升)内。之后将小瓶加盖表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并封以铝帽。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃储存，分别储存3周(55℃)、4周(45℃和35℃)及12周(4℃)。
下列表Ⅰ中给出了用高效液相层析(HPLC)检测效力所获得的稳定性数据表1初始值浓度1.994毫克/毫升 PH＝5.2相对%测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃
浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.992 99.9 1.917 96.1 1.768 88.7 1.493 75.02 1.843 92.4 1.618 81.1 1.166 58.53 1.774 89.0 1.506 75.5 0.830 41.64 1.974 99.0 1.720 86.3 1.393 69.9812 1.980 99.3根据 Arrhenius方程外推的tgo(天数)4℃的t90＝815天8℃的t90＝480天对于含浓度为5毫克/毫升盐酸阿霉素、或者浓度为2毫克/毫升及5毫克/毫升的4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素或4-脱甲氧-正定霉素的类似溶液(盐酸盐)，均测得相似的稳定性数据。
实施例2组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.8克 (10毫克)0.1当量盐酸加至 PH＝3 (PH＝3)注射用水加至 0.4升 (5毫升)将盐酸阿霉素(0.8克)溶解于占90%量的、经氮起泡除气的注射用水内。之后逐滴加入盐酸将溶液的PH调到3。再加经除气的注射用水使溶液达到其终体积(0.4升)。
于氮气压力下通过0.22微米微孔膜过滤溶液。以每瓶5毫升将溶液分装入容积为5-7毫升的Ⅰ型无色玻璃小瓶内。之后用涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞加盖并封以铝帽。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速的稳定性对照)以及4℃的温度条件下，分别储存3周(55℃)4周(45℃和35℃)及12周(4℃)。
下列表2中给出了用高效液相层析法(HPLC)进行效力检测所获得的稳定性数据表2初始值浓度1.994毫克/毫升 PH＝5.2相对%测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.995 100.2 1.952 98.0 1.919 96.3 1.493 75.02 1.889 94.8 1.851 92.9 1.036 51.93 1.876 94.2 1.565 78.6 0.730 36.74 1.979 99.4 1.808 90.8 1.393 69.9
812 1.972 99.0根据Arrhenius方程外推的t90(天数)t90(4℃)＝3970天t90(80℃)＝2000天对于含有浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素、浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素或4-脱甲氧-正定霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，亦得到相似的稳定性数据。
实施例3组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 8.0克 (100毫克)加0.1当量盐酸至 PH＝3 (PH＝3)注射用水加至 0.4升 (5毫升)将盐酸阿霉素(8.0克)溶解于90%量的、经氮起泡除气的注射用水中。之后逐滴加盐酸将溶液的PH调到3。再加入经过除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.4升)。
于氮气压力下使溶液通过-0.22微米微孔的膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入有5-7毫升容积的Ⅰ型无色玻璃小瓶内。之后盖以涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并封以铝帽。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速的稳定性对照)以及4℃条件下，储存时间分别为3周(55℃)、4周(45℃和35℃)及12周(4℃)。
下列表3中给出了用高效液相析法(HPLC)检测效力所获得的稳定数据表3初始值浓度20.06毫克/毫升 PH＝2.95相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 20.06 100.0 19.56 97.5 17.84 88.9 12.31 61.42 18.87 94.1 15.61 77.8 7.09 35.33 18.24 90.9 13.41 66.8 3.13 15.64 19.91 99.2 17.51 87.3 11.07 55.2812 19.80 98.7根据Arrhenius方程外推出的t90值(天数)4℃时的t90＝3700天8℃时的t90＝1780天对于含浓度同样为20毫克/毫升之4′-表-阿霉素或4′-脱氧-阿霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，可测得相似的稳定性数据。
实施例4组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.80克 (10.0毫克)聚乙烯吡咯烷酮 20.00克 (250.0毫克)注射用水加至 0.40升 (5毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的、经氮起泡除气的注射用水中。不调整PH。于搅拌和通氮起泡下加入聚乙烯吡咯烷酮并溶解之。之后再加注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压力下通过-0.22微米孔膜过滤溶液。以每瓶5毫升将溶液分装有5-7毫升容积的Ⅰ型无色玻璃小瓶内。之后用表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶瓶塞塞住并封上铝帽。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)及4℃条件下，分别储存3周(55℃)、4周(45℃和35℃)及8周(4℃)。
表4中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测储存品所获得的稳定性数据
表4初始值浓度1.986毫克/毫升 pH＝4.6相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.984 99.9 1.928 97.1 1.797 90.5 1.605 80.02 1.847 93.0 1.616 81.4 1.293 65.13 1.828 92.0 1.527 76.9 1.018 51.34 1.928 97.1 1.797 90.5 1.403 70.78 1.989 100.1根据Arrhenius方程外推出的tgo值(天数)4℃时t90＝1460天8℃时t90＝835天含有浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素、或浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表阿霉素、4′-脱氧阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代阿霉素，正定霉素或4-脱甲氧-正定霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，亦可测得相似的稳定性数据。
实施例5组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.800克 (10.00毫克)N，N-二甲基乙酰胺 0.060升 (0.75毫升)丙二醇 0.048升 (0.60毫升)乙醇 0.012升 (0.15毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.400升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.800克)溶解于90%量的经氮发泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下相继加入N，N-二甲基乙酰胺、丙二醇和乙醇。之后逐滴加盐酸将溶液的pH调至3。再加经除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.400升)。
于氮气压下使溶液通过0.22微米微孔膜过滤。以每升5毫升的体积将溶液分装入有5-7毫升容量的Ⅰ型无色玻璃小瓶内。之后盖上表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)及4℃条件下，储存时间分别为3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和8周(4℃)。
下列表5中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测储存品所得到的稳定性数据
表5初始值浓度2.000毫克/毫升 pH＝3.03相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.892 94.6 1.735 86.7 1.495 74.72 1.993 99.7 1.927 96.4 1.624 81.2 1.212 60.63 1.908 95.4 1.432 71.6 1.032 51.64 2.00 100.0 1.863 93.2 1.266 63.38 1.960 98.0根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝4360天8℃时的t90＝2200天含有浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素、或含浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素，正定霉素或4-脱甲氧-正定霉(作为盐酸盐)的类似溶液亦可测得相似的稳定性数据。
实施例6组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.800克 (10.00毫克)聚乙烯吡咯烷酮 20.00克 (250.0毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.400升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.8克)溶解于90%量的经氮起泡除气的注射用水中。之后于搅拌及通氮起泡条件下加入聚乙烯吡咯烷酮并溶解之。逐滴加入盐酸将溶液的pH调到3。之后再加经过除气的注射用水使溶液达到其终体积(0.4升)。
于氮气压下通过-0.22微米的微孔膜过滤溶液。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入有5-7毫升容量的Ⅰ型无色玻璃瓶内。将小瓶盖以表面涂布特氟隆的氯丁基橡胶塞并封以铝帽。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)及4℃条件下，并分别储存3周(55℃)、4周(45℃和35℃)及8周(4℃)。
下列表6中给出了使用高效液相层析(HPLC)检测所得到的稳定性数据。
表6初始值浓度1.973毫克/毫升 pH＝2.71相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 2.028 102.8 1.944 98.5 1.791 90.8 1.477 74.92 1.885 95.5 1.582 80.2 0.972 49.33 1.840 93.2 1.402 71.0 0.632 32.04 1.913 97.0 1.853 93.9 1.273 64.58 1.972 99.9根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝5560天8℃时的t90＝2670天对于含有浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素、或浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素或4′-脱甲氧-正定霉素(作为盐酸盐)的类似溶液亦可测得相似的稳定性数据。
实施例7组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 8.00克 (100.0毫克)N，N-二甲基乙酰胺 0.12升 (1.5毫升)1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(8.00克)溶解于90%量的、经氮起泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下加入N，N-二甲基乙酰胺。之后盐酸将溶液的pH调到3。再加经过除气的注射用水使溶液的终体积达到0.40升。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤溶液。以每瓶5毫升的体积将溶液分装于容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后将小瓶加盖表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度下，分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和8周(4℃)。
下列表7中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表7初始值浓度19.32毫克/毫升 pH＝2.96相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 20.1 103.5 19.14 99.1 17.34 89.8 15.57 80.62 19.20 99.4 15.77 81.6 12.94 67.03 18.06 93.5 14.85 76.9 11.61 60.14 20.03 103.7 17.81 92.2 13.78 71.38 19.99 103.5根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝1310天8℃时的t90＝770天对含有浓度均为20毫克/毫升之4′-表-阿霉素或4′-脱氧-阿霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，亦可得到相似的稳定性数据。
实施例8
组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.80克 (10.0毫克)乙醇 0.12升 (1.5毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的、经氮起泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下加入乙醇。之后逐滴加入0.1当量盐酸将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液发装于容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后将小瓶加盖以表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度下，分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和12周(4℃)。
下列表8中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表8初始值浓度1.979毫克/毫升 pH＝3.11相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 2.010 101.6 1.965 99.3 1.947 98.4 1.750 88.42 1.957 98.9 1.910 96.5 1.645 83.13 1.895 95.8 1.737 87.8 1.356 68.54 1.927 97.3 1.818 91.9 1.678 84.812 1.939 97.9根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝1270天8℃时的t90＝780天含有浓度均为5毫克/毫升盐酸阿霉素的溶液，或者浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升的4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4-碘代-阿霉素、正定霉素或4-脱甲氧正定霉素(作为其盐酸盐)的类似溶液也可测得相似的稳定性数据。
实施例9组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 8.000克 (100.00毫克)N，N-二甲基乙酰胺 0.060升 (0.75毫升)丙二醇 0.048升 (0.60毫升)乙醇 0.012升 (0.15毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(8.000克)溶解于90%量的、经过氮起泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下相继加入N，N-二甲基乙酰胺、丙二醇和乙醇。之后逐滴加入盐酸将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水使溶液达到其终体积(0.400升)。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液分装于容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后盖以表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度下，分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和8周(4℃)。
下列表9中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表9初始值浓度20.07毫克/毫升 pH＝2.99相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 19.14 95.4 17.81 88.7 14.84 73.92 19.97 99.5 19.07 95.0 16.27 81.1 12.36 61.63 18.08 90.1 14.62 72.9 10.04 50.04 20.06 99.9 18.03 89.8 13.20 65.88 19.69 98.1根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝846天8℃时的t90＝505天用含有浓度均为20毫克/毫升的4′-表-阿霉素或4′-脱氧-阿霉素(作为盐酸盐)的类似溶液也可测得相似的稳定性数据。
实施例10
组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 8.00克 (100.00毫克)聚乙烯吡咯烷酮 20.00克 (250.0毫克)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(8.00克)溶解于经过氮起泡除气的90%量的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下加入聚乙烯吡咯烷酮。之后逐滴加入盐酸以将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。小瓶盖以表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度条件下，并分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和8周(4℃)。
下列表10中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表10初始值浓度19.51毫克/毫升 pH＝2.62相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 19.54 99.9 19.11 97.6 16.88 86.2 12.48 63.82 18.43 94.2 14.13 72.2 6.00 30.73 18.02 92.1 11.57 59.1 2.61 13.34 19.58 100.1 17.36 88.7 9.23 47.28 19.34 98.8根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝2540天8℃时的t90＝1290天用浓度同样为20毫克/毫升的4′-表-阿霉素或4′-脱氧-阿霉素(作为其盐酸盐)的类似溶液也可测得相似的稳定性数据。
实施例11
组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.80克 (10.00毫克)N，N-二甲基乙酰胺 0.12升 (1.5毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的经过氮起泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下加入N，N-二甲基乙酰胺。之后逐滴加入0.1当量盐酸以将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤溶液。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后将小瓶加盖表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度条件下，并分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和8周(4℃)。
下列表11中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表11初始值浓度1.826毫克/毫升 pH＝3.14相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.830 100.2 1.812 99.2 1.784 97.7 1.605 87.92 1.818 99.6 1.781 97.5 1.554 85.1 1.292 70.83 1.743 95.4 1.409 77.2 1.018 55.74 1.823 99.8 1.734 95.0 1.369 75.08 1.792 98.2根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝5815天8℃时的t90＝2920天含有浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素，或者浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-表-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素或4-脱甲氧-正定霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，亦测得相似的稳定性数据。
实施例12组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.80克 (10.00毫克)丙二醇 0.12升 (1.5毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的经过氮起泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下加入丙二醇。之后逐滴加入0.1当量盐酸，将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后将小瓶加盖表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度条件下，并分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和8周(4℃)。
下列表12中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表12初始值浓度1.982毫克/毫升 pH＝3.11相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.972 99.5 1.934 97.6 1.889 95.3 1.705 86.02 1.952 98.5 1.795 90.6 1.483 74.83 1.935 97.6 1.669 85.7 1.153 58.24 2.056 103.7 1.788 90.2 1.460 73.7根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝1794天8℃时的t90＝1025天含浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素，或者浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-表-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素或4-脱甲氧-正定霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，亦可测得相似的稳定性数据。
实施例13组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.80克 (10.00毫克)聚乙二醇400 0.12升 (1.5毫升)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的经过氮起泡除气的注射用水中。于搅拌和通氮起泡条件下加入聚乙二醇400。之后逐滴加入0.1当量盐酸，将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后将小瓶加盖表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶储存于55℃、45℃和35℃(加速稳定性对照)以及4℃温度条件下，并分别储存3周(55℃)、4周(45℃及35℃)和4周(4℃)。
下列表13中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表13初始值浓度1.907毫克/毫升 pH＝3.07相对% 测量100.0时间 温度(周) 4℃ 35℃ 45℃ 55℃浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对% 浓度 相对%毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量 毫克/ 测量毫升 毫升 毫升 毫升1 1.871 98.1 1.797 94.2 1.668 87.5 1.484 77.82 1.710 89.7 1.608 84.3 1.237 64.93 1.739 91.2 1.551 81.3 1.007 52.84 1.873 98.2 1.693 88.8 1.453 76.2根据Arrhenius方程外推出的tgo(天数)4℃时的t90＝1130天8℃时的t90＝680天含有浓度为5毫克/毫升之盐酸阿霉素，或者浓度为2毫克/毫升和5毫克/毫升之4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素或4-脱甲氧-正定霉素(作为盐酸盐)的类似溶液，亦可测得相似的稳定性数据。
实施例14组份 80小瓶 (1小瓶)盐酸阿霉素 0.80克 (10.00毫克)0.1当量盐酸加至 pH＝3 (pH＝3)注射用水加至 0.40升 (5.00毫升)将盐酸阿霉素(0.80克)溶解于90%量的经过氮起泡除气的注射用水中。之后逐滴加入盐酸将溶液的pH调到3。最后再加经过除气的注射用水，使溶液达到其终体积(0.40升)。
于氮气压下使溶液通过一0.22微米孔径的微孔膜过滤。以每瓶5毫升的体积将溶液分装入容量为5-7毫升的Ⅰ型无色小玻璃瓶内。之后将小瓶加盖表面涂有特氟隆的氯丁基橡胶塞并用铝帽封住。
检验小瓶内溶液的稳定性。将小瓶于4℃和8℃储存6个月。
表14中给出了用高效液相层析法(HPLC)检测所得到的稳定性数据
表14初始值浓度2.039毫克/毫升 pH＝3.06相对% 测量100.0时间 温度(月) 4℃ 8℃浓度 相对% 浓度 相对%毫克/毫升 测量 毫克/毫升 测量1 1.983 97.3 1.959 96.12 1.984 97.3 1.983 97.33 2.012 98.7 2.002 98.2在同样条件下，对于上述实施例中提到的其它溶液一般均可测得相似的稳定性数据。
权利要求
1.一种生产无菌、无热原的氨茴环霉素糖苷溶液的方法，该方法主要包括将生理上可接受的氨茴环霉素糖苷的盐溶解于其生理上可接受的溶剂中，该溶液没有由冻干品重新配制，并具有2.5至6.5的pH，所说的方法包括将氨茴环霉素糖苷的生理上可接受的盐、非冻干品形式的盐溶解于其生理上可接受的溶剂中；根据需要可加入一种生理上可接受的酸或缓冲液，将溶液的pH调到所说的范围之内；并将所得溶液通过一除菌滤膜过滤。
2.根据权利要求
1的方法，其中所产生的氨茴环霉素糖苷是装在一密封的容器内被提供的。
3.根据权利要求
1或2的方法，其中的氨茴环霉素糖苷是选自阿霉素、4′-表-阿霉素、4′-脱氧-阿霉素、4′-脱氧-4′-碘代-阿霉素、正定霉素和4-脱甲氧-正定霉素。
4.根据权利要求
3的方法，其中氨茴环霉素糖苷是阿霉素。
5.根据上述权利要求
中任一项的方法，其中氨茴环霉素糖苷的生理上可接受的盐是与选自盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、醋酸、琥珀酸、酒石酸、抗坏血酸、柠檬酸、谷氨酸、苯甲酸、甲磺酸和乙磺酸的生理上可接受的酸所形成的盐。
6.根据权利要求
5的方法，其中氨茴环霉素糖苷的生理上可接受的盐是与盐酸形成的盐。
7.根据上述权利要求
中任一项的方法，其中氨茴环霉素糖苷溶液的pH范围为2.5至5.5。
8.根据权利要求
7的方法，其中氨茴环霉素糖苷溶液的pH为3或5。
9.根据上述权利要求
中任一项的方法，其中氨茴环霉素糖苷的生理上可接受的溶剂是选自水、乙醇、聚乙二醇、二甲基乙酰胺和其混合物。
10.根据权利要求
9的方法，其中生理上可接受的溶剂是水。
11.根据上述权利要求
中任一项的方法，其中氨茴环霉素糖苷的浓度是0.1毫克/毫升至100毫克/毫升。
12.根据权利要求
11的方法，其中氨茴环霉素糖苷的浓度是0.1毫克/毫升至50毫克/毫升。
13.根据权利要求
12的方法，其中氨茴环霉素糖苷的浓度是1毫克/毫升至20毫克/毫升。
14.一种生产无菌、无热原之阿霉素溶液的方法，该方法主要包括将生理上可接受的阿霉素的盐溶解于其生理上可接受的溶剂中，其不经冻干品重新配制，并且具有2.5至6.5的pH范围，所说的方法包括将非冻干品形成的阿霉素的生理上可接受的盐溶解于其生理上可接受的溶剂中;可根据情况加入一种生理上可接受的酸或缓冲液，以将溶液的pH调到所说的范围之内;以及将所得的溶液通过一除菌滤膜过滤。
15.根据权利要求
14的方法，其中所产生的阿霉素溶液是装在一密封的容器内被提供的。
16.根据权利要求
14或15的方法，其中阿霉素的生理上可接受的盐是与选自盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、醋酸、琥珀酸、酒石酸、抗坏血酸、柠檬酸、谷氨酸、苯甲酸、甲磺酸和乙磺酸的一种生理上可接受的酸所形成的盐。
17.根据权利要求
16的方法，其中阿霉素的生理上可接受的盐是与盐酸形成的盐。
18.根据权利要求
14至17中任一项的方法，其中阿霉素溶液的pH范围为2.5至5.5。
19.根据权利要求
18的方法，其中阿霉素溶液的pH为3或5。
20.根据权利要求
14至19中任一项的方法，其中阿霉素的生理上可接受的溶剂选自水、乙醇、聚乙二醇、二甲基乙酰胺和其混合物。
21.根据权利要求
20的方法，其中生理上可接受的溶剂是水。
22.根据权利要求
14至21中任一项的方法，其中阿霉素的浓度是从0.1毫克/毫升至100毫克/毫升。
23.根据权利要求
22的方法，其中阿霉素的浓度是从2毫克/毫升至50毫克/毫升。
24.根据权利要求
23的方法，其中阿霉素的浓度是从2毫克/毫升至20毫克/毫升。
25.根据权利要求
24的方法，其中阿霉素的浓度是2毫克/毫升至5毫克/毫升。
26.根据上述权利要求
中任一项的方法，其中是在溶液通过除菌滤膜之前，向溶液内加入一种选自共增溶剂、张力调节剂和防腐剂的附加成分。
27.根据权利要求
26的方法，其中共增溶剂是聚乙烯吡咯烷酮。
专利摘要
本发明提供了一种制备无菌的、无热源的、随时取用的氯茴环霉素糖苷，特别是阿霉素之溶液的方法，本方法主要包括将一种氨茴环霉素的生理上可接受的盐溶解于其生理上可接受的溶剂中，该溶液无须由冻干品重新配制，并具有2.5到6.5的pH范围。本发明的溶液特别有利于通过注射氨环霉素糖苷类药物给药，以治疗人类和动物肿瘤。
文档编号A61K9/08GK86104283SQ86104283
公开日1987年1月28日 申请日期1986年6月28日
发明者加塔诺·加蒂, 戴格·奥尔达尼, 吉塞著·波托尼, 卡洛·康法龙尼里, 鲁希诺·加姆比尼 申请人:法米塔利亚·卡洛·埃巴公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan