绿卟啉用于生产治疗继发性白内障的药物的用途的制作方法

专利名称：绿卟啉用于生产治疗继发性白内障的药物的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及光动力疗法(PDT)防止继发性白内障的用途，更具体地说，涉及绿卟啉在这种PDT治疗中的用途。
现有技术在美国，摘除白内障是最平常的手术之一。继发性白内障，尤其是后囊浑浊化是白内障摘除术最常见的并发症，不论是否植入后眼房眼内晶状体。根据患者年龄，该症发病率为15-50％，一般是继残留晶状体上皮细胞增殖和迁移后发生。虽然眼外科医生知道继发性白内障的发病率，而且注意尽可能清除残留的晶状体上皮细胞(例如在植入人造眼内晶状体之前)，但是确认所有这类细胞很难，而且，常常很难接触到晶状体囊内表面上的这类细胞。
继发性白内障作为术后影响又称“后发白内障”。有人认为，“继发性白内障”含意模糊，因为它还常被用来指那些继各种眼病后发生的白内障。参见Kappelhoff，J.P.等，“后发白内障的病理学小综述”，Acta Opthamol.Suppl.，20513(1992)。就本发明目的而言，继发性白内障指，基于组织学观察结果，在切除白内障后，后囊上的晶状体上皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞甚至包括虹膜衍生碎片细胞的增殖，而不包括残留后囊本身内部不相关变化引起的结果。
虽然植入的眼内晶状体本身被认为是为了抑制晶状体囊的浑浊化，但对此机制知之甚少。已有人提出，眼内晶状体通过限制类晶状体(lentoid)形成所需的空间和维持晶状体上皮细胞转化所需线性构架来作用于继发性白内障。Nasisse，M.P.等“无晶状体和假晶状体眼内的晶状体囊浑浊化”，Graefes Arch.Clin.Exp.Opthalmol.233(2)63(1995)。另有人提出，眼内晶状体促进继发性白内障的发展。Nishi，O.等，“去除晶状体上皮细胞的眼内白内障手术”，J.Cataract Refract.Surg.17471-477(1991)。但是，继发性白内障经常发生且有治疗的必要。
各种缓解继发性白内障浑浊化的方法包括，例如，不致外伤的手术和皮质清除术。有关这方面的论述和其它技术参见Apple，D.J.等，“后晶状体囊浑浊化”，Survey of Ophthalmology，37(2)73(1992)。这类治疗继发性白内障的“常规”疗法本身具有严重的副作用，其中包括视网膜脱落和对植入的眼内晶状体造成损伤。参见例如Lundgren，B.等，“继发性白内障用家兔研究继发性白内障的体内模型”，Acta Opthalmol.Suppl.20525(1992)。所以，就原白内障手术的成功而言，选择防止继发性白内障的技术特别重要。
所以，已经提出或评价了多种防止继发性白内障的实验性技术。其中包括用肝素来抑制后囊表面上成纤维细胞的迁移和增殖。Xia，X.P.等，“用肝素抑制继发性白内障的细胞学研究”，Chung Hua Yen Ko Tsa Chih，30(5)363(1994)和Xia，X.P.等，“用肝素抑制继发性白内障的临床研究”，Chung Hua Yen Ko Tsa Chih，30(6)405(1994)。
其它防止继发性白内障的方法包括化学修饰晶状体囊的后囊表面，即某些化合物与之共价结合然后发生聚合反应。Lindquist，b.等，“防止继发性白内障的方法”，美国专利5,375,611(1994)。另一种方法涉及在从眼内去除天然晶状体之前，先在前囊和天然晶状体之间注射杀细胞物质。这类杀细胞物质最好是以较强的酸或碱调节的水溶液，其中可以包含粘弹性物质或染料。Dubroff,S.，“囊外白内障眼科手术后防止后囊浑浊化的组合物和白内障手术方法”，美国专利5,273,751(1993)。
与本发明比较相关的是防止或逆转白内障形成的化学方法，其中包括使用能够降低晶状体相分离温度并防止或抑制形成浑浊、高分子凝聚体和白内障其它物理特征的的化学组合物。参见Clark，J.I.等，“利用相分离抑制剂的白内障化学防止和逆转”，美国专利5,401,880(1995)。
使用单克隆抗体来防止继发性白内障也已经有所报道。例如，先在前眼房引入晶状体上皮细胞特异性补体固定性单克隆抗体，然后进行囊外切除。在这类单克隆抗体与所有存在的晶状体上皮细胞结合后，在前眼房内引入补体，由此引起残留晶状体上皮细胞的溶解。Emey，J.M.等，“抗晶状体上皮细胞的单克隆抗体和防止囊外切除术后残留晶状体上皮细胞增殖的方法”，美国专利5,202,252(1993)。
也已经使用通过插入在虹膜和晶状体囊之间的探针利用电能或热能来破坏晶状体囊内的残留晶状体上皮细胞。Bretton，R.H.，“防止后囊浑浊化的方法和仪器”，美国专利5,455,637(1995)。
也已经有对控制晶状体上皮细胞增殖的光动力学疗法的说明。在光动力学疗法中，所用的光敏剂能够进驻靶细胞，或者是通过天然的倾向性或是因为它们被有意制导向某一特定类型的组织，或者两者兼有。在接受照射时，它们会发出荧光，这就可以用于与查找靶组织有关的诊断方法。但是，更重要的是，当所用照射光的波长为化合物的吸收波长时，光敏剂能够引起对所驻细胞的细胞毒作用。虽然还没有完全确定，但是这种细胞毒作用被认为是在照射时产生了单态氧所致。
就PDT治疗继发性白内障而言，Parel，J.M.等报道了使用Photofrin II(PII)的实验性研究，“以使用Photofrin II进行的囊内清洗作为晶状体上皮细胞增殖的光动力学疗法”，Lasers and Medical Science 525(1990)。这些作者们提出了他们技术中的数个技术难题，其中包括PII从囊袋中的不断渗出，和清洗后低于15分钟的最少吸收时间。而且，30小时后，PII的荧光仍可测得，但是不再有足够的特异性来确保光动力学疗法治疗的安全。
Lingua，R等的相关研究，“对抑制晶状体上皮细胞增殖的光动力疗法的临床前评价”，Lasers and Light in Ophthalmology 2(2)103(1988)，报道了使用Photofrin的光动力学疗法的早期试验。这些作者报道，他们的技术的确造成了局部上皮细胞和纤维细胞的死亡，而且，这类物质从晶状体囊内流出造成了局部的眼毒性例如眼色素层炎和角膜水肿。他们提出，抑制晶状体细胞增殖的作用需要晶状体囊将光活性药物包含在内，而且需要设法在照射期间维持光传递的均匀性。化合物的用途之一是将其与Healon混合以提高制剂的粘度。
在其它研究报道中，曾将酞菁铝体外用于猪晶状体上皮细胞的铺满前培养物。1小时的吸收后，用红光照射培养物5分钟，结果发现有毒性作用。Wunderlick，K.等，“酞菁在猪晶状体上皮细胞培养物中的光动力活性”，Ophthalmology 92(3)346(1995)。
作为一个重要的制约，外科医生指出即使是10分钟的光敏剂吸收延迟对白内障手术来说也太长。所以，光敏组合物的吸收速度和准确定位给予具有特殊的重要性。现有技术中的组合物都不具备此类良好的吸收参数。
本发明开发了另一种PDT技术，它使用了一组较好的光敏剂，在较短的培养时间内，他们能够被残留的晶状体上皮细胞迅速吸收，保留在晶状体囊内，并传递到靶细胞。光敏剂被保留在晶状体囊内避免了对眼内其它非靶部分的光致敏作用。由于这些光敏剂呈绿色而非红色，所以他们被称为“绿卟啉”。有一定的波长范围的光为血液或其它正常组织所强吸收，使用本发明化合物就能够利用波长在该范围之外的光进行光动力治疗，具体地说是约670-780nm。除了被包含在靶组织内而提供有效的体内治疗因而减少非靶组织的过敏作用之外，还很容易做到令照射光渗透到合适的深度。
已知，绿卟啉可用于光动力治疗来查找和治疗动脉粥样硬化栓塞。参见1995年3月21日授权Levy等的美国专利5,399,583(第2页，第14至15行)；1990年4月24日授权Levy等的美国专利4,920,143(第10页，第58至59行)；1992年3月10日授权Levy等的美国专利5,095,030(第2页，第8至9行和第15页，第29至30行)；1992年12月15日授权Levy等的美国专利5,171,749(第2页，第12至13行和第18页，第1至4行和第35至47行)。
一类具有一定临床意义的特殊的绿卟啉是一类被称为苯并卟啉衍生物(BPD)的化合物。已经对这些光敏剂与其它眼病的关系进行了一定的测试。例如，Schmidt U.等记述了用BPD治疗植入家兔眼内的Greene黑素瘤(一种非着色型肿瘤)的实验并获得了肿瘤坏死作用(IOVS 331253摘要2802(1992))。Lin，C.P.等记述了用氩离子激光仪发射的458nm光激发BPD来进行荧光造影，以测定其在视网膜和脉络膜脉管内的动力学和分布(IOVS 341168摘要2293(1993))。此外，Lin，C.P.等记述了利用BPD的脉络膜脉管封闭(IOVS 341303摘要2953(1993))。
与本申请转让人合作的研究者已经在1993年3月15日公开的数份摘要和专利申请(08/390591)中记述了用BPD治疗脉络膜脉管增生，本文将其纳为参考。这些摘要包括Schmidt-Erfurth，U等“使用BPD导致的对眼内脉管增生的光致血栓形成”；Haimovici，R等“苯并卟啉衍生物一元酸在家兔眼内的定位”和Walsh，A.W.等“使用BPD-MA对实验性脉络膜脉管增生进行的光动力治疗”。以上这些都公开在IOVS341303中，分别为摘要256，255和254(1993)，还有Moulton，R.S.等“视网膜和脉络膜脉管对苯并卟啉衍生物一元酸光动力治疗的反应”IOVS341169摘要58(1993)。
本发明所涉及的绿卟啉的制剂和PDT疗法的优点在于对造成继发性白内障的细胞的选择性和引发对这些细胞的光动力介导破坏作用的能力。而且，绿卟啉被靶细胞吸收较快，因而缩短了目前PDT技术相关手术中的延迟时间。因为是用于防止继发性白内障，这类绿卟啉因此具有选择性和吸收快的特殊优点。
发明概述本发明涉及主要使用绿卟啉作为光活性化合物的光动力疗法(PDT)防止继发性白内障的用途。当用于破坏残留晶状体上皮细胞时，这些物质具有被晶状体上皮细胞吸收快，具有选择性和有效性的优点。
所以，本发明一方面涉及一种防止继发性白内障的方法，该方法包括给需要受治者使用一定量的绿卟啉，这些绿卟啉将定位于造成继发性白内障的晶状体上皮细胞内；和用被绿卟啉吸收的光照射这些细胞。
在具体的一个方面，本发明还涉及防止眼内继发性白内障的方法，它包括以下步骤给患者的晶状体囊使用足量的绿卟啉以使得有效量的绿卟啉定位于晶状体上皮细胞内；给予足够的时间让有效量的所述绿卟啉进入晶状体上皮细胞；和用绿卟啉吸收的光照射这些细胞，其能量水平足以基本上破坏全部晶状体上皮细胞。特别是，该方法涉及破坏在白内障手术过程中去除晶状体后的残留晶状体上皮细胞。
本发明还包括在使用绿卟啉之前用一粘性溶液来保护角膜的步骤。而且，可将绿卟啉与增稠剂混合。这类增稠剂可任意地选自透明质酸及其衍生物、淀粉和纤维素及其衍生物。
在一具体试剂中，本发明方法包括使用有效量，即约0.2至约2mg/ml和约150至250μl的绿卟啉。更具体地说，给药剂量范围是约0.03至0.5mg，进一步说是约0.3mg。这类制剂也可以以脂质体制剂的形式给药，此时，可先将绿卟啉配制在脂质体内，然后将脂质体与粘稠载体例如Ophthalin，Hymacel或AMVISC混合。
本发明方法特别考虑了绿卟啉的使用，它们选自BPD-DA、BPD-DB、BPD-MA和BPD-MB，以及这些化合物的衍生物。较好的BPD包括BPD-MA和BPD-DA。
就组合物而言，本发明设计了防止或抑制继发性白内障发展的药物组合物，这类组合物包含有效量的绿卟啉，它们可在用于接受白内障手术的患者时预防或抑制继发性白内障的发展；和药学上认可的载体或赋形剂。
附图简述参照附图可对本发明有更清除的了解。


图1是典型的本发明方法和组合物所用绿卟啉的结构式。
图2是本发明优选实施例中特定的4种绿卟啉BPD-DA、BPD-DB、BPD-MA和BPD-MB的结构式。
图3显示在无光条件下与BPD孵育后人晶状体上皮细胞的存活率。
图4显示BPD和光对人晶状体上皮细胞的细胞毒性。
图5显示PDT的细胞毒性是长效的。
图6显示BPD缩短孵育时间的作用。
图7显示ZnPc对人晶状体上皮细胞的光致敏作用。
图8显示粘性溶液中BPD的传递作用。
图9显示BPD从Amvisc或Hymecel中向平衡盐溶液中的扩散。
图10显示接受BPD和红光处理的家兔上皮细胞。图10A是无光对照。图10B是接受光照的细胞。
图11显示接受BPD和红光处理的Vero细胞。图11A是未处理细胞，图11B-D显示不同浓度的BPD。
本发明详细说明本发明涉及以特定细胞为目标的光动力疗法(PDT)，所述细胞即晶状体上皮细胞，它们在白内障手术后的某一时刻(可能数月或数年)造成继发性白内障。为了防止继发性白内障，该治疗被作为常规白内障手术过程中的一个附加过程。所以，在去除晶状体之后和植入(例如)新眼内晶状体之前，常规的白内障手术过程被中断。用约1分钟在晶状体囊内引入合适的卟啉化合物，以绿卟啉为佳，然后去除。期间，卟啉化合物将进驻晶状体上皮细胞。利用合适的光源施以适当频率和强度的光，用以激活卟啉杀死上皮细胞。在此PDT过程之后，继续并完成常规手术过程。
本发明的制剂和方法一般涉及给患者使用绿卟啉，即一类被称为苯并卟啉衍生物(BPD)的化合物。如图1所示，BPD是一种合成的二氢卟酚样卟啉，具有多种结构类似物。较好的是，绿卟啉是苯并卟啉衍生物二元酸或一元酸环A(BPD-DA或BPD-MA)，它们吸收约692nm的光，并具有更好的组织渗透性。例如BPD-MA，它是一种亲脂性强光敏剂，并表现出对新生脉管组织、肿瘤和残留晶状体上皮细胞的光毒性作用。在用于吸收适当制剂(例如BPD-MA被晶状体上皮细胞吸收)的不到一分钟之后，对晶状体囊内表面和赤道表面上的所有晶状体上皮细胞基本均匀地施以适当波长的光。由于其药物动力学特征，BPD似乎是用于此症的最佳候选药物，但是也可以代之以BPD-DA这类的其它绿卟啉或其它衍生物(参见图1的结构式1至6)。可以使用其它光敏剂，例如酞菁，可以用足够高的浓度来抵消其慢吸收。但是，使用这类化合物，技术人员可能将需要配制所选择的各种致敏剂，以控制意外污染眼睛其它部分的可能性。
本发明特别好的制剂应满足以下一般标准。首先，必须使用能够迅速进入靶细胞即晶状体上皮细胞的光敏剂。第二，产品的粘度必须保证在孵育期间它基本上被包含在晶状体囊内。第三，可以包括促进这些光敏剂被靶细胞吸收的成份。具体的例子是，将0.1ml BPD-MA储备液加入1.9ml例如Opthalin之类的粘弹体内，然后如后文实施例所述进行混合。
在白内障手术过程中，晶状体的前壁或被切除以便切除囊外晶状体，或被部分切除(晶状体囊切开术)以便引入晶状体乳化剂来进行囊间晶状体摘除。所以，将光敏剂成功地包含在晶状体囊内一定的孵育时间将取决于将光敏剂引入晶状体囊的制剂的粘度。孵育的时间对包含作用而言也很重要，以不超过约1分钟为佳，理想的是少于45秒，最好少于约30秒。
切除晶状体囊内表面和使用PDT化合物可能引起用于防止继发性白内障的光敏剂溢出，从而缩短其在所需囊内位点的滞留。所以，本发明的一项重要内容是为了保护眼睛的角膜这一敏感区不被光敏剂污染，在使用光敏剂之前先用无药物粘弹性物质覆盖角膜内皮。
在用PDT防止继发性白内障时还需要考虑其它情况。例如，囊的形状，即，一个长球体，赤道位置的细胞具有强有丝分裂能力，而且在考虑使用光动力疗法时，因其尺寸较小使得均匀的光传递很困难。另一制约是，眼外科医生繁忙的手术日程不允许就白内障手术本身再加入一个冗长的过程。所以，用于防止继发性白内障的PDT的最佳光敏剂必须被晶状体上皮细胞迅速吸收，必须充分地、物理性地被包含在晶状体囊内。
在给予光致敏绿卟啉之后，最好让化合物在约1分钟之内被晶状体上皮细胞所吸收。然后，用绿卟啉最大吸收波长照射这些晶状体上皮细胞，一般如前所述在约550nm和695nm之间。特别好的是红光，因为它能量较低，所以在破坏晶状体上皮细胞的同时对眼组织无毒。
本发明的组合物和方法提供了防止继发性白内障的有效PDT治疗。后文叙述了本发明的组合物及其配方，以及它们的临床应用。同时提供了实验数据。
绿卟啉本发明方法所用绿卟啉的详细说明可参见1992年12月15授权Levy等的美国专利5,171,749，本文将其纳为参考。“绿卟啉”指卟啉核与炔经为获得一氢苯并卟啉的Diels-Alder型反应而获得的卟啉衍生物。典型的是，绿卟啉选自乙炔与原卟啉在一定条件下发生Diels-Alder反应而获得的一类卟啉衍生物，所述条件促进反应只发生于存在于原卟啉-IX环系统中的两个可用的共轭、非芳香二烯结构(环A和环B)之一。
图1显示了几种典型的绿卟啉的结构。Diels-Alder反应先形成环己二烯-在此称为“氢化苯基”-与吡咯环A或B稠合，如结构式1和2所示。环己二烯环内的π系统重排形成结构式3和4化合物，经还原产生结构式5和6化合物。这些化合物以结构式1至6表示，其中氢原子结合着内环氮原子。但是，应该理解的是，也可以使用其甲基化形式，其中阳离子置换了两个氢原子之一或全部。有关本发明所用绿卟啉化合物的制备参见美国专利5,095,030，本文将其纳为参考。
为方便起见，氢化单苯并卟啉衍生物-“BPD”-一般指图1中结构式3和4化合物。特别好的是结构式3和4化合物以及它们的混合物。
如图1所示，R1、R2、R3和R4是非干扰性的取代基，它们对本发明方法和组合物中的化合物活性没有明显影响。“非干扰性取代基”指不干扰BPD药理学功能的取代基。就图1和2中的化合物而言，一般说来，R1和R2各自是中强度吸电子取代基，或者是其它不具备足够的吸电子能力的活性取代基，使得Diels-Alder反应不能在A环和B环同时进行，而是只发生于一个环。合适的R1和R2取代基的例子包括烷酯基(2至6C)、烷基(1至6C)磺酰基或芳基(6至10C)磺酰基、芳基(6至10C)、氰基和-CONR5CO-，其中的R5是芳基(6至10C)或烷基(1至6碳)。R1和R2之一也可以是氢原子，只要另一个是足以促进Diels-Alder反应的吸电子取代基。最常见的是，R1和R2都是烷酯基，以甲酯基或乙酯基为佳。较好的化合物其R1和R2相同，都是烷酯基，特别是乙酯基。
在此，“羧基”根据常规定义是-COOH，“烷酯基”表示-COOR，R是烷基。“羧基烷基”指取代基-R’-COOH，其中R’是亚烷基。“烷酯基烷基”指-R’-COOR，其中的R’和R各为亚烷基和烷基。“烷基”泛指具有1至6个碳原子的饱和直链或支链烃基，例如甲基、正己基、2-甲基戊基、叔丁基、正丙基等。“亚烷基”指二价而非单价的同一烷基。“芳基”表示可被1至3个取代基取代的苯基，取代基可各自选自卤素例如氟、氯、溴和碘；低级烷基(1至4C)；和低级烷氧基(1至4C)。“芳基磺酰基”或“烷基磺酰基”的结构式为-SO2R，其中的R是以上所述的烷基或芳基。
R3各自为ω-羧基烷基(2至6C)或其盐、酰胺、酯或酰腙，或者是烷基(1至6C)。较好的是，R3是2-羧基乙基或其烷酯，R4是乙烯基。但是，较好的是这些实例，因为天然卟啉的可得性，无需考虑生物学效应。如图1所示，R1-C≡C-R2与原卟啉-IX环系统(其中R3是2-羧基乙基的保护形式，例如2-甲酯基乙基或2-乙酯基乙基，R4是-CH＝CH2)反应生成的加合产物是结构式1和2化合物。结构式1化合物来自与A环的加合，结构式2化合物来自与B环的加合。
适合本发明绿卟啉化合物的方便的起始物质包括天然存在的卟啉，其中R3是-CH2CH2COOH或-CH2CHRCOOR，其中R是烷基(1至6碳)。但是，R3的确切特性一般与Diels-Alder反应的进程或所得产物的效果无关，除非它含有与环π键共轭的π键。所以，R3可以是多种基团中的任意一种，例如低级烷基(1至4C)；和ω-羧基烷基(2至6C)或其酯和酰胺。R3取代基还可以被卤素例如氟、氯、溴或碘；或其它非反应性取代基所取代。
已经发现，当R3是-CH2CHRCOOR时，水解或部分水解酯化的羧基是有利的。典型的是，发生在R3位置的水解作用通常比发生在R1或R2酯基团位置的快得多。而且，所得化合物的溶解度和生物分布特性也较非水解形式的更好。水解产生二元酸或一元酸产物(或它们的盐)。
在结构式1和2化合物中，R4通常(至少最初)是-CH＝CH2，但是该乙烯取代基很容易通过与结构式1或2中环B或环A的乙烯基的加成或氧化而变成其它R4。所以，R4可能是多种取代基中的任意一种，与易发生的加成反应所形成的相一致。例如，加成试剂可以是HX形式，其中的H与靠近环的碳原子加合，得到具有以下结构的R4位

所以，在实施例之一中，所加取代基之一是氢，而另一个则选自氢原子；卤素(氟、氯、溴或碘)；羟基；低级烷氧基；氨基；酰胺；巯基；或有机硫化物。例如，与水的Markovnikov加成反应在相关环处形成结构类似血卟啉的取代基。作为R4位取代基的乙烯基还可以被氧化成-CH2OH、-CHO或COOH或其盐或酯。这些加成和氧化产物本身也可以被取代，如果所加的取代基是功能性离去基团。例如如果Br是取代基，它可以被-OH、-OR(R是如前所述的烷基(1至6C))、卤素、-NH2、-NHR、-NR2等取代。
这样，总的说来，R4代表这样的取代基，即易因裂解或加成而转化形成-CH＝CH2，并因离去基团与其它基团反应形成的进一步取代基。但较好的是，R4是乙烯基(-CH＝CH2)；-CHOR4’，其中R4’是氢或烷基(1至6C)，后者又可选性地被例如CH2OH之类亲水性取代基所取代；-CHO；-COOR4’，例如COOH或COOCH3；-CH(OR4’)CH3，例如-CH(OH)CH3或CH(OCH3)CH3；-CH(OR4’)CH2OR4’；-CH(OH)CH2OH；-CH(SR4’)CH3，例如-CH(SCH3)CH3及其二硫化物；-CH(NR4’)CH3；-CH(CN)CH3；-CH(溴吡啶鎓)CH3；-CH(COOR4’)CH3；-CH(COOCR4’)CH3；-CH2(卤素)CH3，例如-CH2BrCH3；或-CH(卤素)CH2(卤素)。或者，R4可以是由乙烯基直接或间接衍生化得到的少于12个碳原子的有机基团。或者，R4可以是其它卟啉或卟啉相关性环系统，例如后文定义的具有结构式-L-P的含有1至3个含有四吡咯型核的基团。优选的是R4是-CH＝CH2，-CH(OH)CH3，-CH(卤素)CH3，或如后文定义的具有结构式-L-P的含有1至3个含有四吡咯型核的基团的化合物。
“四吡咯型核”在此指具有如下骨架的4环系统

或其盐、酯、酰胺或酰腙，它是高度共轭的。它包括吡咯系统，它实际上是完全共轭的系统；二氢卟酚系统，它实际上是卟啉的二氢化形式；还原的二氢卟酚系统，它是共轭的卟啉系统的四氢化形式。当说及“卟啉”时，所指的是完全共轭系统。绿卟啉实际上是卟啉系统的二氢形式。
在实施例之一中，取代基R4包括至少一个附加的四吡咯型核。本发明所得的化合物是二聚体或寡聚体，其中至少四吡咯型环系统之一是绿卟啉。绿卟啉部分在R4位与附加的四吡咯型环系统之间的连接可以是醚、胺或乙烯基连接。卟啉环系统有两个与R4相应的可用的取代基位置(在A环和B环中)可被进一步衍生化，如以下所解说的。
当R4是“-L-P”时，-L-选自


P是卟啉结构或图1结构式1至6所示的第二绿卟啉结构，所不同的是，任何第二R4，基团都被以上L所取代。
(而且，可以理解的是，当-L-是上述结构式(e)或(f)时，双键所连接的环系统应包含如下共振系统，

如上所不。)由前述Diels-Alder反应直接得到氢化一苯并卟啉还可以异构化成图1结构式3和4所示的化合物。图1结构式3和4所示没有显示环外甲基(结构式3的A环和结构式4的B环)与R2取代基的相对位置。两种异构体都可以获得。本发明方法和组合物中特别优选的是结构式3和结构式4所示的化合物。
此外，Diels-Alder产物可以在钯碳之类催化剂存在下经氢气处理选择性还原成图1中结构式5和6饱和的环类似物，它们分别对应A环和B环的Diels-Alder产物。以上有关结构式1和2化合物的说明，即涉及保留的乙烯取代基(R4)的转化衍生化和R3的多样性，同样适用于结构式3、4、5和6所示的化合物。
本发明较好的绿卟啉实例是Diels-Alder产物发生了重排并被部分水解。更好的是，结构式3和4化合物(BPD类)，其中R3位置的烷酯基也被水解或部分水解。本发明含有-COOH的化合物可以被制备成游离酸，或其与有机碱或无机碱的盐形式。
图2显示了结构式3和4所代表的特别为本发明所优选的4种化合物，总称为苯并卟啉衍生物，即，BPD-DA、BPD-DB、BPD-MA和BPD-MB。这些是结构式3和4重排产物的水解或部分水解形式，其中两个被保护的R3的羧基之一或都被水解。R1和R2位上酯基的水解较慢，所以，向图2所示形式的转化很容易。在这些绿卟啉中最好的是BPD-MA。
在图2中，R3是-CH2CH2COOR3’，其中的R3’随各化合物而异。具体地说，在BPD-DA中，R1和R2是烷酯基，R3’是氢，衍生化发生在环A。BPD-DB是B环衍生化的相应化合物。BPD-MA代表BPD-DA的部分水解形式，BPD-MB代表BPD-DB的部分水解形式。所以，在后两种化合物中，R1和R2是烷酯基，R3’之一是氢原子，另一个是烷基(1至6碳)。
结构式BPD-MA和BPD-MB化合物可以是均一性的，即只有C环烷酯基乙基或D环烷酯基乙基被水解，或者是C环和D环取代基水解物的混合物。此外，本发明方法和组合物可以使用BPD-MA，-MB，-DA和-DB中两种或更多中的混合物。
需要指出的是，图1中的许多化合物含有至少一个手性中心，所以可能以光学异构体形式存在。本发明方法可以使用具有手性碳两种构型的化合物，不论化合物是以一种立构分离体形式使用，还是以对映体和/或非对映体的混合物形式使用。可以用任意一种常规方法来分离非对映体的混合物。可以用任意一种常规技术来拆分对映体混合物，例如，令它们与光学活性制剂反应，然后拆分所得的非对映体。
还必须指出的是，反应产物可以是A环和B环加成的未分离的混合物，即，结构式1和2，或3和4，或5和6的混合物。本发明方法和组合物可以使用各种分离形式，即纯结构式3或纯结构式4，或它们任意比例的混合物。
而且，可以使用绿卟啉二聚体和卟啉/绿卟啉组合的二聚体或多聚体形式。本发明二聚体和寡聚体可以用与卟啉自身二聚或寡聚类似的反应来制备。可以将多个绿卟啉或绿卟啉/卟啉直接连接，或者，可以偶合卟啉，然后经末端卟啉之一或两者的Diels-Alder反应将其转化为相应的绿卟啉。
本发明的绿卟啉可以以单独一种的形式使用，较好的是BPD-DA或BPD-MA，或者用各种绿卟啉的混合物。合适的是那些适合将治疗化合物用于眼睛的制剂。此外，这类制剂中可以包含其它成份。其它成份包括可见染料或各种酶，以促进光敏化合物透过残留晶状体物质到达靶细胞。
绿卟啉制剂本发明的组合物还可包含其它成份，例如常规的传递载体和赋形剂，其中包括等渗调节剂、pH调节剂、溶剂、助溶剂、染料、胶凝剂和增稠剂，以及缓冲液，和以上物质的混合物。
通常，光敏剂是在合适的温度下(例如环境温度)，合适的pH，所需的纯度，与药学上认可的载体(即在使用剂量和浓度无毒的载体)混合而成的。一般说来，制剂的pH主要取决于具体用途和光敏剂的浓度，但较好的是在约3至8之间。光敏剂宜维持在生理范围的pH(例如约6.5至7.5)。盐的存在不是必需的，所以，制剂最好不是电解质溶液。可以加入适量合适的非抗原性成份，例如人血清白蛋白，但不致干扰光敏剂被晶状体上皮细胞所吸收。
由于光敏剂将在白内障切除术过程中用于晶状体囊，期间不希望发生渗漏，所以最好使用凝胶之类粘性溶液而不是非粘性溶液。较好的是，制剂被制备成其粘度足以将光敏剂基本上全部包含在已有大切口的晶状体囊内。优选制剂之一使用约5％(v/v)配制在脂质体中的绿卟啉和约95％(v/v)透明质酸钠例如Ophthalin。
以上是光敏剂与粘性载体的优选比例，但是也可以根据给药制剂所用的具体粘稠剂和各种可选性成份而异。而且，用不同的成份可以获得相同的最终粘度，例如使用多糖，最好是水溶性多糖，例如透明质酸、淀粉和纤维素衍生物(例如甲基纤维素、羟基纤维素和羧甲基纤维素)。如果在凝胶制剂中含有多糖，其含量一般在凝胶的约1-90重量％之间，更好的是约1-20％。就此目的而言，和考虑到多糖的溶解度，其它合适的多糖例子参见1988年5月11日公开的EP267015。还可以在本发明制剂中加入标准量的其它增稠剂，通常为有机纤维素醚，例如羟丙基甲基纤维素，或透明质酸盐，例如透明质酸钠。还可以加入标准量的常规缓冲剂。
给定绿卟啉的具体浓度须根据其光敏活性来调节。例如，可以使用BPD-DA，但是其浓度需比使用BPD-MA时高5倍。而且，可以用不同于配制在脂质体中的方式来溶解BPD。例如，可将BPD-MA或其它绿卟啉的储备液稀释在DMSO(二甲基亚砜)、聚乙二醇或其它适合用于眼睛的溶剂中。而且，需要保持药物量和粘性物质量之间比例的相对恒定，以保证粘度从而将药物包含在晶状体囊内。
一般说来，使用脂质体BPD-MA时不需要调节pH，因为两种物质(即BPD和粘性物质)都是中性的。但是，如果使用其它溶剂而非脂质体，需要在将药物与粘稠物质混合前调节pH。可在制剂中加入可用于眼睛的抑菌剂，但是，抗氧化剂会影响疗效，所以一般避免使用。
本发明还考虑制备干制剂，在临使用前再生成溶液。可从本发明溶液利用已知方式来方便地制备本发明组合物的干的或冻干的制剂。本发明的干燥制剂也是可保存的。利用常规技术，可在温和条件下将溶液蒸发至干燥，特别是为了共沸除水而加入溶剂(一般是甲苯和乙醇的混合物)之后。然后，可方便地干燥残留物，例如在烘箱中干燥数小时。
合适的等渗调节剂最好是非离子等渗调节剂，例如脲、甘油、山梨醇、甘露醇、氨基乙醇或丙二醇。相反，氯化钠之类的离子等渗调节剂是不适合用于本发明的。本发明的溶液中可能存在的等渗调节剂其含量足以形成大致等渗的溶液。“大致等渗的溶液”在此指渗透压约为300毫渗克分子(mOsm)的溶液，一般为300+10％mOsm。必需记住的是，溶液中的所有成份对渗透性都有作用。如果存在，非离子等渗调节剂的加量为常规量，即以约1至3.5重量％为佳，更以1.5至3重量％为佳。
可在本发明溶液中加入标准量的助溶剂，例如Cremophor型，较好的是Cremophor RH40，吐温型，或其它常规助溶剂。
本发明更好的实施例涉及的溶液包含绿卟啉化合物和部分醚化的环糊精，其中醚取代基是羟乙基、羟丙基或二羟丙基，非离子等渗调节剂，缓冲液和可选溶剂。但是，合适的环糊精其大小和构象必需适合与本发明的光敏剂联用。
绿卟啉化合物的给药如前所述，本发明的治疗是在去除晶状体和引入眼内晶状体之间实施的。它代表典型白内障手术过程中的短时间歇。所以，眼手术按照标准过程进行，直至切除晶状体。晶状体的空位宜用生理盐水来清洗，然后使用本发明所述的绿卟啉，为了提高其在晶状体囊内的保留性并减少渗漏，最好采用前述粘性制剂的形式。本发明制剂最好通过连接容器(例如注射器)的导管来使用。溶液被允许作用约1/2至10分钟，以约1至3分钟为佳，少于1分钟更好，最好是15至30秒。如此孵育后，最好用生理盐水再次洗涤晶状体的空位，用于去除过量的绿卟啉。在洗涤后立即使用合适的光照。
使用合适的光源，最好是波长约550nm至695nm的激光仪或二极管激光仪，对晶状体上皮细胞进行光照，光照时间足以破坏残留的晶状体上皮细胞。此类激光仪合适和较好的波长是最大波长的半值为690±12.5nm。一般说来，上皮细胞的破坏发生在60秒之内，而且可能在约15至约30秒之内充分完全。最后，可以再次用合适的缓冲盐溶液洗涤，然后按照标准过程完成白内障手术，即植入例如人造晶状体。或者，可以将绿卟啉直接注入尚为完好的晶状体来杀死晶状体囊上皮内的细胞(晶状体切除术)。过量化合物随碎片一起被洗去，然后用合适的光源照射靶细胞。整个手术过程可以进行适当修改。
在另一较好的实施例中，绿卟啉被制备成脂质体制剂，或与配体偶合，所述配体例如单克隆抗体，其与特定的晶状体上皮细胞表面成份结合，从而进一步改善其作为光敏剂的效果。较好的是，配体包含抗体或其免疫活性片段。如前所述，通过使用其高粘度组合物而非水性制剂，可以进一步提高眼外科手术过程中绿卟啉的选择性定位能力，由此减少手术过程中从晶状体囊中渗漏或溢出。该方法可将更高浓度的绿卟啉传递给靶组织。
熟练技术人员可以根据其所处的物理传递系统来优化绿卟啉的剂量，所述系统例如脂质体；或者与靶特异性配体偶合，所述配体例如抗体或其免疫活性片段。
需要指出的是，有效的、选择性的本发明光动力疗法中所用的各种参数是相互关联的。所以，必须根据其它参数来调节剂量，例如，根据光动力疗法中所用光的光通量、辐照度和持续时间，以及给药和治疗性照射之间的间隔时间。必须综合调节所有这些参数以显著破坏残留晶状体上皮细胞，但对周围组织不造成显著损伤。通常，所用绿卟啉的剂量在用于晶状体囊内制剂体积中低于约200μl。根据晶状体囊上切口的大小、晶状体状态和是否存在血液或洗涤液等物质，可以使用更多或更少的制剂。一般说来，熟练技术人员应尽量局部使用足量的绿卟啉，任何过量的化合物都必须被清洗掉，决不能有毒性危险。绿卟啉的用量一般在约0.2至2.0mg/ml范围内，以约0.5至约1.5mg/ml为佳，约1.0mg/ml更好。熟练技术人员可改变上述浓度，使得吸收参数和细胞破坏作用参数与前述就治疗目的所言的相一致。
照射的结果，三重态的绿卟啉与氧和其它化合物相互作用形成活性中间体例如单态氧，后者可导致细胞结构的破坏。可能的细胞性目标包括细胞膜，线粒体、溶酶体膜。
在PDT过程中使用的光剂量可以有所不同，但是以在约10至150J/cm2范围内为宜。较好的是50至100J/cm2范围内。增加辐照度可减少照射时间。
光照时间具有重要意义，它能够使治疗具有尽可能高的选择性从而减少对非靶细胞的损害，并有助于手术的成功。通常，应该在使用光敏剂后立刻进行光处理。
实施例1评价BPD在HLE细胞培养物中的毒性为了评价总体毒性，使用了一种技术来培养人晶状体上皮细胞，它们或是来自捐献者，或是来自白内障手术。
人晶状体细胞(HLE)中的大多数是经取自供体死后12-48小时的晶状体培养起来的，由Eye Bank of British Columbia提供的这些眼睛是后极(posterior poles)(已预先现切除了角膜)。偶尔，提供的会是完整的眼睛。而且，提供的还有在低温PBS中保存了1至5小时的切下的晶状体。晶状体囊取自20至72岁的男女捐献者。晶状体前囊都需在平面位置(和/或至多在赤道面前0.5mm)开一环性切口。此外植体细胞向下放置在塑料培养皿(35mm)中，其中含有补充了15％FCS的DME。然后用转动弯曲解剖刀将晶状体囊切成许多1mm宽的平行条，这些条的末端别粘接在培养皿的表面。每隔2至3天给外植体补以新鲜培养基。任细胞生长，直至长到单层完全铺满或基本铺满，然后用0.25％胰蛋白酶的EDTA溶液传代。使用的是第二或第三代的HLE细胞。在与HLE细胞相同的条件下培养VEROGreen Monkey肾细胞(由QLT提供)，使用的是自冷冻储备物起传代到20代之前的细胞。
在该系统中，经测定，仅与BPD浓度范围为0-800μg/ml(在5％胎牛血清中，FCS)孵育10分钟，不影响细胞的存活。(图3)实施例2在与BPD孵育后光照HLE细胞实施例1的细胞与BPD孵育10分钟后，去除过量药物，然后马上用发光二极管(LED)以10J/cm2的红光(690±12.5nm)照射细胞。正如预计的，存活细胞大大减少。在5％FCS，400-800ng BPD/ml存在下，红光照射杀死了80-100％的细胞。在相关体外实验中，HLE细胞对BPD和光的敏感性根据捐献者和培养的传代数而有所不同(图4)。细胞存活率是通过比色法，MTT，进行测定的，它同时测定细胞的代谢和增殖，因此同时反映细胞毒性和细胞抑制性作用。参见Mossman，“细胞生长和存活的快速比色法用于增殖和细胞毒性测试”，Journal ofImmunological Methods 6555-63(1983)。所以，测定PDT效果是否是长效的是有意义的。HLE细胞在与BPD(含于5％FCS或25％Amvisc中)孵育1或20天(同一培养物分成2份)后再接受10J/cm2的红光照射，实验结果显示了可比较的细胞杀死率(图5)。这表明，PDT的效果是长效的。
研究之初认为10分钟的孵育时间是合理的，但是白内障外科医生认为即使如此仍然太长而不能接受。所以，又在与BPD孵育一分钟后测试了的PDT效果。结果显示，虽然必须将BPD的浓度从每毫升纳克提高到每毫升微克，但是获得了令人满意的细胞杀灭效果(图6)。与3至5μg/ml的BPD接触一分钟，然后用10J/cm2红光照射，基本上能够杀死细胞。据观察，在细胞敏感性方面具有一些个体差异(图6)。但是，从药学上说，这些浓度是很低的，可以方便地优化到较高浓度来完全杀死细胞。BPD的主要特征就是被细胞快速吸收。
另一种光敏剂，ZnPc，也接受了该系统的测试(1分钟孵育，10J/cm2光照)。受到ZnPc储备液的限制(200μg/ml水溶液)，被测的最高浓度(200μg/ml)杀死细胞的最大值为62-78％(图7)。
实施例3用粘性溶液中的BPD处理HLE细胞如前所述，在临床上，PBD最好在粘性溶液中来传递。就此而言，目前羟丙基甲基纤维素(HPMC；Hymecel)或透明质酸钠(SH；Ammisc，Opthalin，Biolon)较为适合，而且是本领域公知的。所以，在粘性溶液中传递的BPD光致敏HLE细胞是在其它载体中进行的。由于其高粘度，在HLE培养系统中只用了含25％透明质酸钠Amvisc的平衡盐溶液(BSS，用于手术的那种)进行了测试，并与实施例2含5％FCS的培养基作了比较。数据显示，HLE与两种溶液中的BPD孵育10分钟，然后用10J/cm2的红光照射，引起的细胞死亡率相似(图8)。这提示，在粘性溶液中，BPD也能够有效地传递到细胞。
将BPD包含在晶状体囊内，防止其与其它眼细胞/组织接触在某种程度上取决于它从粘性溶液中扩散到其它无药物的粘性溶液或平衡盐溶液(BBS)中的情况，后两种溶液都是在手术中用于维持眼压的。初级体外实验显示，BPD不会很快从Hymecel或Amvisc扩散到BSS中，并且从Amvisc扩散比从Hymecel还要慢得多(图9)。所以，Amvisc或其它透明质酸钠溶液(例如Ophthalin)可以有效选作BPD的载体。还用30μg/ml BPD在100％Hymecel中的溶液对上皮细胞仍然完好的家兔晶状体囊进行了试验。在孵育1分钟后，用10J/cm2的红光照射，造成的细胞死亡率很高(图9)。
实施例4用粘性溶液中的BPD处理Vero细胞由于难以获得足量的HLE细胞用于试验，部分试验是用Vero细胞作为模型进行的。将细胞培养在盖玻片上，用含于100％粘性溶液(Hymecel，Amvisc和Ophthalin)中的BPD处理。用的都是1分钟的孵育时间，但是光剂量和BPD浓度不同。BPD的测试浓度是5至30μg/ml，光照剂量是1、5和10J/cm2。使用Cytoprobe Assay Kit(PerSeptive Bio Science；乙锭均二聚体和钙黄绿素-AM)通过荧光度测定细胞存活率。用照片显示了杀死HLE细胞的的结果(图10)。
实施例5眼用制剂A的配备方法在无菌和柔光条件下，用无菌水将一瓶脂质体BPD-MA(2mg/ml的储备液)再生用于注射。取0.1ml BPD-MA溶液加入3ml玻璃注射器内的1.9ml Ophthalin中。此时，可以任选加入其它组份，例如助穿透细胞的药物或为了使制剂在用于眼内时看得见的染料。去除多余的空气，用一不锈钢Luer接头将此注射器与另一3ml注射器相联。将两注射器之一中的粘性物质交替推进另一注射器与BPD混合，为了获得均匀的制剂，可能需要最少推动约30次。最终制剂呈绿色，BPD-MA的最终浓度约0.1mg/ml。将20号针头与注射器连接，去除晶状体后将制剂注入晶状体囊，注意覆盖囊的赤道区。
实施例6眼用制剂B的配备方法在无菌和弱光条件下，将BPD-DA溶解在PEG400(浓度为10mg/ml)而成的溶液调节pH至近中性，然后过滤灭菌。然后，取0.1ml无菌BPD-DA溶液加入3ml玻璃注射器内的1.9ml Ophthalin中。此时，可以任选加入其它组份，例如助穿透细胞的药物或为了使制剂在用于眼内时看得见的染料。去除多余的空气，用一不锈钢Luer接头将此注射器与另一3ml注射器相联。将两注射器之一中的粘性物质交替推进另一注射器与BPD混合，为了获得均匀的制剂，可能需要最少推动约30次。最终制剂呈绿色，BPD-MA的最终浓度约0.5mg/ml。将20号针头与注射器连接，去除晶状体后将制剂注入晶状体囊，注意覆盖囊的赤道区。
实施例7制剂A的体内应用在家兔的晶状体上皮上，对实施例5BPD-MA制剂经690nm光照射后的细胞毒性进行了体内研究。首先，手术前先施以麻醉，然后令待处理家兔的眼睛膨大。手术包括用手术刀(前眼房管心针手术刀，0.9mm，VISITEC)在膜缘(8PM)切开。通过前眼房维持器(maintainer)引入平衡盐溶液(BSS)，以确保前眼房的压力恒定(根据置于家兔头部上方的BSS容器高度)。压力保持眼房略为膨胀，虹膜收缩有助于接触到晶状体囊，并为操作和保持平衡提供了更多空间。
接着，用管心针(直径0.9mm)再在膜缘(12AM)造一入口，用带把手的弯曲的25号针头在晶状体囊的前部进行圆形前囊切除术。
用3mm的角膜刀将12AM位置的开口开大。(该开口是让仪器进入前眼房和进行全部操作的)。
接着，引入晶状体乳化剂，将晶状体完全摘除(该过程需约1至1.5小时)。在晶状体乳化作用之后，用无药物粘性溶液覆盖角膜，以防因BPD溢出受损。
用Raycroft导管和注射器用粘性溶液中的BPD完全覆盖赤道位置的晶状体囊壁。必须特别注意要覆盖整个区域，尤其是赤道区。
孵育(1分钟；也可以使用更长的时间)后，将前眼房维持器内的BSS吸入瞳孔和眼袋以洗去BPD。
理论上说，光仪器应通过12AM处的开口引入，而且其形状必须能够引入晶状体囊，主要照射赤道区，对虹膜、角膜和视网膜的照射很少(赤道区距离联有前眼房维持器(ACM)的晶状体囊前部的深度据估计为1mm)。
用二极管激光仪以10J/cm2的光照射30秒，以杀死残留的晶状体上皮细胞。然后，根据常规技术继续完成手术过程。
根据以上的说明和举例，本领域熟练技术人员能够开发和使用多种制剂来防止继发性白内障。这制剂可以不使用绿卟啉，只要所用的能够被残留晶状体上皮细胞迅速吸收而且制剂能够基本上被包含在晶状体内部并在经合适的光短时间照射后能够杀死晶状体上皮细胞。所以，本发明的范围是由后文权利要求限定的，而不是以上实施例。本文引用的所有公开文献，均被纳为参考。
权利要求
1.一种防止患者眼内继发性白内障的方法，它包括对患者的晶状体囊给予足量的绿卟啉，该量足以令有效量的绿卟啉进驻到晶状体上皮细胞内；给予足够的时间令有效量的所述绿卟啉进入晶状体上皮细胞；和用被绿卟啉吸收波长的、足够能量的光照射所述的晶状体上皮细胞，所述光能量足以基本上杀死所有的所述晶状体上皮细胞。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的晶状体上皮细胞是在白内障手术过程中摘除晶状体后残留的晶状体上皮细胞。
3.根据权利要求2所述的方法，其中在给予绿卟啉之前使用粘性溶液来保护角膜。
4.根据权利要求2所述的方法，其中所述的绿卟啉与增粘剂混合。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述的增粘基选自透明质酸及其衍生物、淀粉和纤维素及其衍生物。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述的有效量是指给予所含绿卟啉在约0.2至10mg/ml和150至250μl的制剂。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述的有效量是在约0.03至2.5mg范围内的给药剂量。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述的有效量是约0.1mg。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述的绿卟啉以脂质体制剂的形式给予。
10.根据权利要求1所述的方法，其中的绿卟啉具有图1中的结构式1至6，其中的R1、R2、R3和R4都是非干扰性取代基。
11.根据权利要求10所述的方法，其中R1和R2各自是甲酯基和乙酯基。
12.根据权利要求10所述的方法，其中的各个R3是-CH2CH2COOH或其盐、酰胺、酯或酰腙。
13.根据权利要求10所述的方法，其中的绿卟啉具有图1中的结构式3或4，其中R4是非干扰性取代基。
14.根据权利要求2所述的方法，其中所述的绿卟啉选自BPD-DA、BPD-DB、BPD-MA、BPD-MB以及它们的衍生物。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述的绿卟啉是BPD-DA。
16.一种防止或抑制继发性白内障发展的药物组合物物，所述的组合物包含有效量的绿卟啉，足以在给予接受白内障手术的患者时防止或抑制继发性白内障的发展；和药学上认可的载体或赋形剂。
17.根据权利要求16所述的组合物，其中的绿卟啉是BPD。
18.根据权利要求16所述的组合物，其中含包含可见的染料或有助于制剂被晶状体上皮细胞吸收的酶。
19.根据权利要求18所述的组合物，其中所述的绿卟啉与增粘剂混合。
20.根据权利要求19所述的组合物，其中所述的增粘剂选自透明质酸及其衍生物、淀粉和纤维素及其衍生物。
21.根据权利要求19所述的组合物，其中所述的有效量指使用给予所含绿卟啉在约0.2至10mg/ml和150至250μl的制剂。
22.根据权利要求19所述的组合物，其中所述的有效量是在约0.03至2.5mg范围内的给药剂量。
23.根据权利要求22所述的组合物，其中所述的有效量是约0.1mg。
24.根据权利要求19所述的组合物，其中所述绿卟啉以脂质体的形式给予。
25.根据权利要求19所述的组合物，其中所述的绿卟啉具有图1中结构式1至6，其中的R1、R2、R3和R4都是非干扰性取代基。
26.根据权利要求25所述的组合物，其中R1和R2各自是甲酯基和乙酯基。
27.根据权利要求25所述的组合物，其中的各个R3是-CH2CH2COOH或其盐、酰胺、酯或酰腙。
28.根据权利要求25所述的组合物，其中的绿卟啉具有图1中的结构式3或4，其中R4是非干扰性取代基。
29.根据权利要求25所述的组合物，其中所述的绿卟啉选自BPD-DA、BPD-DB、BPD-MA、BPD-MB以及它们的衍生物。
30.根据权利要求29所述的组合物，其中所述的绿卟啉是BPD-DA。
全文摘要
使用例如绿卟啉之类的光活性药物作为光敏剂破坏残留的晶状体上皮细胞,以进行防止继发性白内障的光动力治疗。
文档编号A61K41/00GK1246054SQ97180428
公开日2000年3月1日 申请日期1997年12月8日 优先权日1996年12月10日
发明者H·E·梅多斯, D·温克斯特恩, D·R·马莱克, N·巴斯阿尼奇, A·M·里克特, J·G·利维, C·A·哈里托, G·休伯, J·鲁特曼 申请人:Qlt光治疗股份有限公司, 不列颠哥伦比亚省大学, 汽巴视觉股份公司