化妆品级葛根异黄酮的纳滤膜分离制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种利用耐溶剂纳滤膜技术从葛根 (A/eraria 原料中分离制备化妆品级葛根异黄酮的方法。
【背景技术】
[0002] 美容化妆是人类社会一个永恒的主题，化学合成成分在化妆品产业中占据了相当 长的主导地位，然而其毒性、刺激性、过敏性和环境污染等问题引起了人们对合成化妆品安 全性的极大担忧 [1]。回归自然、研制纯天然、无毒副作用的化妆品必将成为化妆品产业可 持续性和谐发展的主题之一，目前日本化妆品市场上，含天然中草药的化妆品已占整个市 场的50 %以上，开发植物来源的绿色化妆品已逐步成为时代的主流[2'3]。葛根（A/araria hhto)是藤本植物葛的块根，是中国南方一些省区的一种常食的药食同源蔬菜，其在抗衰 老、抗血栓、降脂降压、增强免疫力及雌激素样作用等方面有广泛的生理活性 [4'6]。葛根中的 主要有效成分葛根异黄酮(约6~12%)，包括葛根素、大豆(黄豆）苷、大豆苷元等30余种，现 代研宄表明葛根异黄酮为双酚类化学结构，与人体分泌的雌激素在结构上相似，有弱雌 激素活性，故称其为"植物雌激素"，并具有美白防晒、保湿、抗氧化和延缓皮肤衰老、预防 和治疗痤疮等一系列功效，是天然化妆品的优势资源 [M1]。然而，传统葛根异黄酮提取物的 加工采用高温浸提、浓缩、干燥等工艺，导致产品活性成分部分损失，并存在粉末色泽深、 常温时溶解性差等应用弊端，严重影响其在终端产品领域的深度开发。目前解决产品色变、 助溶、转溶问题主要有化学(转溶)、生物(酶解）等技术途径，但在操作过程中会涉及到重 金属催化、有机溶剂残留等系列问题，产业化效果不佳，致使葛根异黄酮在化妆品行业的 应用上受到极大的限制 [12，13]。因此，寻求安全高效的生产工艺从而解决上述问题，促进葛 根异黄酮在化妆品领域的深度利用，具有极大的应用前景和经济效益。纳滤膜介于超滤与 反渗透之间，其集透析与浓缩分离为一体，能截留分子量为200 ~ 1000的小分子物质，与常 规分离技术相比，浓缩纯化过程在常温下进行，无相变，无化学反应，不造成产品的分解变 性，同时可脱除产品的盐分，减少产品灰分，提高产品纯度，并增加产品溶解性，最大程度保 持产品原有的化学和功效活性，特别适合于多酚类等热敏性物质的分离纯化，应用于天然 化妆品领域，符合"绿色原料、绿色生产"的绿色化妆品理念，具有广阔的市场前景和社会价 值 [14_17]。
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【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种利用耐溶剂纳滤膜技术从葛根原料中分 离制备化妆品级葛根异黄酮的方法，成功解决了传统工艺生产导致葛根异黄酮产品色泽加 深、溶解性差以及有机溶剂残留等制约其应用于化妆品领域的一系列问题，开发天然绿色 化妆品原料来源、促进葛根资源的深度开发利用。
[0005] 本发明提供的技术方案是：一种利用耐溶剂纳滤膜从葛根原料中分离制备化妆品 级葛根异黄酮的方法，其包括如下制备步骤： (1) 提取葛根（/七eraria 原料中总异黄酮：称取葛根（A/eraria 原 料，分别加入7 BV/6BV/4BV 80%乙醇72?78°C回流提取2-5次，合并所有醇提取溶液，经 Type-A纳滤膜透析分离、回收乙醇并浓缩至35?38 ° B6,浓缩汁冷冻干燥后产品即为葛 根异黄酮粗品； (2) 大孔吸附树脂柱与纳滤膜联用富集总异黄酮：以55?60°C纯水溶解所述的葛根异 黄酮粗品配置成浓度为5?6% ( r/V)的上柱料液，冷却至室温后过Type-A大孔吸附树脂 柱分离纯化，解吸馏分，通过Type-B纳滤膜透析分离，收集透过馏分备用； (3)将步骤（2)中的透过馏分用Type-C纳滤膜进一步透析分离、回收乙醇并浓缩至 35?38 ° B6,浓缩汁冷冻干燥得到高含量、常温（25°C)时高溶解性的葛根异黄酮精制 品； 所述纳滤膜Type-A为耐溶剂型纳滤膜，截留分子量为：200 ~ 600 Da之间，在此范围 内能够有效截留葛根异黄酮类组分；Type-B为耐溶剂型纳滤膜，截留分子量为800~1000 Da之间，在此范围内葛根异黄酮类组分可穿透膜管；Type-C为耐溶剂型纳滤膜，截留分子 量为200~400 Da之间，在此范围内能够有效截留葛根异黄酮类组分；所述大孔吸附树脂 Type-A为HP20、聚酰胺或D101之一。
[0006] 所述的方法，上述步骤（1)中，醇提取溶液经Type-A纳滤膜透析分离、回收乙醇以 及浓缩的过程中温度38°C，压力10 bar，膜通量为16. 35 L m_2 h'
[0007] 所述的方法，上述步骤（2)中，树脂用量：50倍葛根异黄酮粗品的重量；上柱流速： 1.0 BV/h;静置30 min后以2 BV纯水洗涤；用2 BV 80%乙醇解吸富含葛根异黄酮馏分，解 吸流速为1. 〇BV/h，收集80%乙醇解吸馏分，使用Type-B纳滤膜透析分离，该过程中温度 20°C，压力 12 bar,膜通量为 18. 35 L nT2 h'
[0008] 所述的方法，上述步骤（3)中，将步骤（2)中的透过馏分用Type-C纳滤膜进一步透 析分离、回收乙醇并浓缩的过程中，操作温度控制25°C，进膜压力控制在14. 0 bar，膜通量 为 21. 24 L nT2 h'
[0009] 本发明具有以下有益效果：本发明结合膜分离原理和葛根异黄酮提取物工业化生 产现状，联用柱色谱吸附分