中的蛋白质或酶在储存时和当暴露在较高温度下时基本上 保持其物理和化学稳定性和完整性的制剂。用于测量肽稳定性的各种分析技术是本领域中 已知的并且综述在以下文献中：Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301，Vincent Lee 编，Marcel Dekker，Inc.，New York, N.Y.，Pubs. (1991)和 Jones, A. (1993) Adv. Drug Delivery Rev. 10:29-90。稳定性可以在选定温度下测量持续选定时段。
[0044] "哺乳动物"对于治疗目的是指任何被归类为哺乳动物中的动物，包括人、家畜和 农畜，以及动物园动物、运动玩赏用动物，诸如狗、马、猫、牛等。优选地，哺乳动物是人。
[0045] "病症"是指任何从用本发明要求保护的方法和组合物的治疗中受益的任何病况。
[0046] I.包含环丙沙星的脂质体的产生
[0047] 根据本发明的各方面，提供了通过将环丙沙星和其它抗感染药物包封在脂质体内 而配制环丙沙星和其它抗感染药物的方法。由生物相容的和生物可降解的天然存在的材料 组成的脂质体用于包封生物学活性材料用于许多目的。已经开发了制备具有许多层、大小、 表面电荷和组成的脂质体和在该脂质体内包封药物的许多方法，其中有一些已经按比例放 大到工业水平。脂质体可被设计用于作为持续释放药物储库并且在某些应用中帮助药物穿 过细胞膜。
[0048] 脂质体的持续释放性质可通过脂质膜的性质以及通过在脂质体组合物内包含其 它的赋形剂进行调节。多年以来对脂质体技术的广泛研宄已经获得了基于脂质体制剂的组 成对药物释放速率进行合理的预测。药物释放速率主要依赖于磷脂的性质例如氢化（一H) 或未氢化（一G)或磷脂/胆固醇的比率（这一比率越高，则释放速率越快）、活性成分的亲 水性/亲脂性及脂质体的制造方法的不同而异。
[0049] 制造生物粘附性脂质体的方法可见于U. S. 5, 401，511 (其作为参考被全文并入本 文）以及其中所引述的专利和公报，其描述了脂质体和脂质体的制造方法。最近几年中，已 经成功地对脂质体结合了不同的物质。例如，已经研宄了将糜蛋白酶结合到脂质体作为用 于将物质结合到脂质体表面的模型。考虑到包括抗体、糖蛋白和凝集素在内的物质已被结 合到脂质体表面以试图比较脂质体的靶向特异性。
[0050] 脂质体表面上用于共价结合的离散位点的数目和表面密度受脂质体制剂和脂质 体类型支配。脂质体表面还具有非共价结合的位点。共价结合是优选的，因为非共价结合 可能导致在给药部位处所考虑的物质与脂质体发生分离，因为脂质体和目标位点的生物粘 附性配对物（即生物粘附性物质）争夺被考虑的物质。这种分离将被给予的经过修饰的脂 质体逆转形成规则的未经修饰的脂质体，从而使得给药经修饰的脂质体的给药目的失败。
[0051] 为了形成被考虑的物质与脂质体的共价缀合物，已经研宄了交联试剂用于有效性 和生物相容性。一个这种试剂是戊二醛（GAD)。通过GAD交联的复合化学，建立了被考虑的 物质的胺残基与脂质体之间的链接。
[0052] 交联试剂可包括戊二醛（GAD)和水溶性的碳二亚胺，优选1-乙基-3-(3-二甲基 氨基丙基）碳二亚胺（EDC)。被考虑的物质包括明胶、胶原和透明质酸（HA)。在这些方法 之后，被考虑的物质可被用作附着剂或胶质以附着于脂质体，到达目标区域诸如肺上。
[0053] 因此，尽管对于本发明是可有可无的，但是这种生物粘附性脂质体的使用，特别是 那些具有透明质酸作为生物粘附性配体的脂质体的使用，将可能增加在肺部的渚留时间， 减少粘膜纤毛清除和巨噬细胞摄取。
[0054] 通常，在本发明制剂中优选使用环丙沙星，尽管可使用本领域技术人员已知的其 它抗生素或抗感染药物。
[0055] 根据本领域公知技术制备多层小泡（MLV)。简而言之，在一实施方案中，将脂质称 重并溶解在适当的有机溶剂（诸如氯仿或氯仿-甲醇混合物）中。在旋转蒸发器中在低 压下在约37-40°C的温度下将有机溶剂蒸发到全干。在蒸发后，将环丙沙星溶液加入到干 脂质膜。有力地混合该系统，然后在例如振荡浴室中在适于脂质组合物的温度范围下温育 约2小时。然后优选通过例如加入十分之一体积的10倍浓缩的pH 7. 4的磷酸盐缓冲盐水 (PBS)对该制备物进行缓冲。
[0056] 在一实施方案中，如上所述产生的MLV用作酸性单层小泡（ULV)的源材料。例如， MLV如上所述进行制备并在诸如例如由Lipex Biomembranes Inc. (Vancouver, British Columbia)制造的装置中经历挤出过程。挤出通过一系列具有逐渐变小的孔径的膜进行，诸 如，例如，从范围在0. 8到1. 0微米的孔径开始（每个孔径大小进行1到2次循环）并终止 于根据所需脂质体大小所选择的孔径大小范围（例如，在最终的孔径大小下进行约7次挤 出循环）。
[0057] 示例性的脂质体组合物及其制造方法公开在美国专利6, 890, 555 ;6, 855, 296 ; 6, 770, 291 ;6, 759, 057 ;6, 623, 671 ;6, 534, 018 ; ;6, 316, 024 ;6, 221，385 和 6, 197, 333 中， 所有这些专利并入本文作为参考。本发明的脂质体可以是多层、单层的，或诸如在上述专利 中所述的任何已知的结构。本发明的脂质体优选由生物相容性脂质制造。通常，产生的脂 质体的大小根据递送方式而异而具有宽范围，例如，对于肺递送，直径为1纳米到10微米或 20纳米到1微米或约100纳米±20%。
[0058] II.包含环丙沙星的脂质体的药物制剂
[0059] 在优选方案中，用脂质体包封的环丙沙星在气雾吸入装置中被给药到患者，但是 可通过IV途径给予。在一些实施方案中，环丙沙星与也被包封的其它药物组合被包封在脂 质体内。在一些实施方案中，环丙沙星与未包封的其它药物组合被包封在脂质体内。在一 些实施方案中，脂质体与未包封的环丙沙星、与未包封的药物或其不同组合进行组合给药。
[0060] 本发明的制剂可包括包含环丙沙星并结合一定量的有效增强脂质体穿过患者的 肺表面并进入循环系统内的肺泡表面活性物质蛋白的脂质体。1991年4月9日授权的美国 专利No. 5, 006, 343 (其作为参考并入本文）公开了脂质体和用于肺内递送的脂质体制剂。 美国专利No. 5, 006, 343中公开的制剂和方法可进行改编以应用环丙沙星并且可被包含在 本发明的递送装置内从而提供了对囊性纤维化患者的有效治疗。
[0061] 不管药物制剂的形式如何，优选制造用于吸入的小滴或粒子处在约0.5 ym到 12 ym，优选1 ym到6 ym，更优选约2-4 ym的范围内。通过制造具有相对较窄粒度范围的 吸入粒子，有可能进一步增加药物递送系统的效率和改善剂量给药的再现性。因此，优选粒 子不仅具有在〇. 5 ym到12 ym或2 ym到6 ym或约3-4 ym范围内的粒度，而且平均粒度处 在窄范围内以便被递送给患者的80%以上的粒子具有的粒子直径位于平均粒度的±20% 内，优选位于平均粒度的±10%和更优选平均粒度的±5%内。
[0062] 本发明的制剂可使用一次性包装和便携式的、手持式的、电池供电的装置诸如 AERx装置被给药到患者（美国专利No. 5, 823, 178, Aradigm，Hayward，CA)。作为替代，本发 明的制剂可使用机械（非电子）装置进行。其它吸入装置可用于递送制剂，包括常规的喷 射喷雾器，超声喷雾器，软雾吸入器，干粉吸入器0PI)，计量式剂量吸入器（MDIs)，凝结气 溶胶发生器和其它系统。
[0063] 气雾剂可通过使药物强行通过具有孔大小在约0. 25到6微米范围内的孔的膜来 产生（美国专利5, 823, 178)。当孔具有这一大小时，脱离通过该孔而产生气雾剂的粒子的 直径将为〇. 5到12微米。
[0064] 药物粒子可随着试图保持处在这一粒度范围内的粒子的气流被释放。小粒子的产 生可通过利用振动装置得以促进，所述振动装置提供了约800到约4000千赫的振动频率。 本领域技术人员能够认识到，基于制剂的密度和粘度，可对诸如由其释放药物的孔的大小、 振动频率、压力和其它参数的参数进行一些调整，切记一些实施方案的目的是提供具有直 径在约0. 5到12微米范围内的气雾化粒子。
[0065] 脂质体制剂可以是低粘度液体制剂。药物自身或结合载体的粘度应当足够低以便 该制剂可以被迫使脱离出孔以形成气雾剂，例如，使用20到200psi以形成优选具有的粒度 为约0. 5到12微米的气雾剂。
[0066] 在一实施方案中，低沸点易挥发推进剂与本发明的脂质体和可药用赋形剂组合使 用。脂质体可作为在推进剂中的悬浮液或干粉末形式被提供，或者，在另一个实施方案中， 脂质体被溶解在位于推进剂内的溶液中。这两种制剂可被容易地容纳在具有阀作为其唯一 开口的容器中。因为推进剂是易挥发的，即，具有低沸点，因此容器的内容物处在压力下。
[0067] 根据另一个制剂，包含环丙沙星的脂质体作为单独的干粉剂形式被提供，并且根 据又一个制剂，包含环丙沙星的脂质体作为溶液制剂形式被提供。干粉末可通过允许仅仅 在用于每次递送的相同计量的吸气流速和吸气体积条件下被吸入被直接吸入。粉末可被 溶解在水性溶剂中以产生溶液，该溶液穿过多孔膜以得到用于吸入的气雾剂。使得有可能 制造可借助于肺内途径被吸入并递送给患者的包含环丙沙星的脂质体的气雾化形式的任 何制剂可与本发明关联使用。关于可与气雾化递送装置关联使用的制剂的具体信息描述于 Remington's Pharmaceutical Sciences, A. R. Gennaro 编者（最新版本）Mack Publishing Company中。关于胰岛素制剂，其也可用于关注Sciarra等人，（1976)的发现。当使用低 沸点发射剂时，发射剂被保持在装置的加压罐内并保持为液体状态。当阀被启动时，推进剂 被释放并强迫活性成分与推进剂一起从罐中被释放。推进剂当暴露于周围气氛下时将"消 失"，即，推进剂立即蒸发。消失发生如此快使得实际上基本上纯的活性成分被递送到患者 的肺。
[0068] III?剂量给药方案
[0069] 基于以上所述，本领域技术人员可理解的是，可使用许多的不同的疗法和给药手 段来治疗单个患者。因此，已经接受这种药物例如作为静脉内给药的环丙沙星或抗生素等