二取代的氨基酸及其制备和使用方法
【专利说明】二取代的氨基酸及其制备和使用方法 发明背景
[0001] 在其一条侧链上具有末端烯烃的a，a -二取代的氨基酸及其盐("烯烃a，a -二 取代的氨基酸"）可用于制备交联的大环肽。例如，国际申请号PCT/US2004/038403( "403 申请"）公开了向肽中引入两个各自包含具有末端烯烃的侧链的a，a-二取代的氨基酸， 并交联该末端烯烃基团，以形成交联的（"钉合的（stapled)"）大环肽。该交联可以，例如， 稳定在钉合的大环肽中存在的二级结构（例如，a-螺旋）。
[0002] 国际申请公开号W02008/121767( "767申请"）公开了使用烯烃a，a -二取代的 氨基酸来形成拼接的（stitched)多肽（例如，多个及串联的交联的多肽），该多肽具有通过 拼接而稳定化的二级结构。"403申请"、"767申请"以及其他申请、公开物和专利公开了钉 合的和拼接的大环肽可用于治疗和预防各种疾病，包括癌症。
[0003] 因此，烯烃a，a_二取代的氨基酸是用于形成拼接的和钉合的多肽及其前体的 重要且有用的结构单元。然而，烯烃a，a-二取代的氨基酸的应用已经受限于无法以结 晶形式提供这些重要的分子。例如，烯烃a，a-二取代的氨基酸的市售制剂通常作为预 制备的溶液来出售。预制备的溶液限制了每单位体积可运送的a，a-二取代的氨基酸的 量，限制了可用于与烯烃a，a-二取代的氨基酸一同运行的化学反应，使烯烃a，a-二 取代的氨基酸具有增强的降解速率，并且是环境不友好的。因此，仍然迫切需要结晶的烯烃 a，a _二取代的氨基酸及其结晶盐，以及制备和使用这些结晶氨基酸的方法。
[0004]此外，用氘或卤素原子取代烯烃a，a-二取代的氨基酸的一个或多个氢原子可 以改变氨基酸的一种或多种性质。例如，烯烃a, a-二取代的氨基酸的偶极矩、疏水性、亲 水性、空间体积（steric bulk)或反应性可以通过用一个或多个氘或卤素原子取代其上的 一个或多个氢原子来改变。因此，仍需要其上一个或多个氢原子被氘或卤素取代的任选结 晶的烯烃a，a-二取代的氨基酸及其任选结晶的盐，以及制备和使用它们的方法。
【发明内容】
[0005] 本文解决了上述及其他需求。在
【发明内容】
中提供的发明实施方案仅意在说明并提 供关于本文公开的选定的发明实施方案的概述。为说明性和选择性的
【发明内容】
并不限制任 何权利要求的范围，不提供本文公开的或考虑的发明实施方案的整个范围，并且不应该解 释成限制或约束本公开内容或任何请求保护的发明实施方案的范围。
[0006]本文提供了结晶的式（I)化合物及其结晶盐：
【主权项】
1. 结晶的式（I)化合物或其结晶盐： 其中：
札是crc3烷基、ci-c3氘代烷基或ci-c3卤代烷基； *是立构中心；n是1至20的整数； 馬是-H或氮保护基团；且 馬是-H或保护或活化基团。
2. 如权利要求1所述的结晶的式（I)化合物或其结晶盐，其中^是^-仏烷基。
3. 如任一前述权利要求所述的结晶的式（I)化合物或其结晶盐，其中1^是甲基。
4. 如任一前述权利要求所述的结晶的式（I)化合物或其结晶盐，其中R2选自： _H， 9-荷基甲氧羰基（Fmoc)， 三苯甲基（Trt)， 4-甲氧基三苯甲基（Mmt)， 2-(3, 5-二甲氧基苯基）丙烷-2-基氧基羰基（Ddz)， 2-(对联苯基）-2-丙氧幾基（Bpoc)， 2-(4-硝基苯基磺酰基）乙氧羰基（NSC)， (1，1-二氧代苯并[b]噻吩-2-基）甲氧羰基（Bsmoc)， (1，1-二氧代萘并[1，2-b]噻吩-2-基）甲氧羰基（a-Nsmoc)， 1- (4, 4-二甲基-2, 6-二氧代环己-1-亚基）-3_甲基丁基（ivDde)， 2,-二叔丁基-Fmoc(Fmoc*)， 2_ 氣 _Fmoc(Fmoc(2F))， 2_单异辛基-荷基甲氧羰基（mio-Fmoc)， 2, 7_ 二异辛基-Fmoc(dio-Fmoc)， 2- [苯基（甲基）锍]乙氧羰基四氟硼酸盐（Pms)， 乙烷磺酰基乙氧羰基（Esc)， 2-(4-磺基苯基磺酰基）乙氧羰基（Sps)， 叔丁氧羰基（Boc)， 苄氧羰基（Z)， 條丙基氧基幾基（Alloc)， 之^^-三氯乙氧羰基^!^。）， 对硝基苄氧羰基（PNZ)， 块丙基氧基幾基（Poc)， 邻硝基苯磺酰基（〇NBS)， 2, 4-二硝基苯磺酰基（dNBS)， 苯并噻唑-2-磺酰基（Bts)， 邻硝基节氧羰基（〇Nz)， 4-硝基藜芦基氧基羰基（NVC0)， 2-(2-硝基苯基）丙氧羰基（即?0〇， 2,（3, 4-甲基乙烯二氧基-6-硝基苯基）丙氧羰基（MNPP0C)， 9_ (4-溴苯基）-9-芴基（BrPhF)， 叠氮基甲氧羰基（Azoc)， 六氟丙酮（HFA)， 2-氯节氧幾基（C1-Z)， 4-甲基三苯甲基（Mtt)， 三氟乙酰基（tfa)， (甲基磺酰基）乙氧羰基（Msc)， 苯基^硫烷基乙氧幾基（Phdec)， 2-吡啶基二硫烷基乙氧羰基（Pydec)，和 邻硝基苯磺酰基（0-NBS)。
5.如任一前述权利要求所述的结晶的式（I)化合物或其结晶盐，其中R2选自： 9-荷基甲氧羰基（Fmoc)， 三苯甲基（Trt)， 4-甲氧基三苯甲基（Mmt)， 2-(3, 5-二甲氧基苯基）丙烷-2-基氧基羰基（Ddz)， 2-(对联苯基）-2-丙氧幾基（Bpoc)， 2-(4-硝基苯基磺酰基）乙氧羰基（NSC)， 1，1-二氧代苯并[b]噻吩-2-基）甲氧羰基（Bsmoc)， 1- (4, 4-二甲基-2, 6-二氧代环己-1-亚基）-3_甲基丁基（ivDde)， 叔丁氧羰基（Boc)， 苄氧羰基（Z)， 條丙基氧基幾基（Alloc)， 之^^-三氯乙氧羰基^!^。）， 对硝基苄氧羰基（PNZ)， 邻硝基苯磺酰基（〇NBS)， 2, 4-二硝基苯磺酰基（dNBS)， 邻硝基节氧羰基（〇Nz)， 4-硝基藜芦基氧基羰基（NVC0)， 2- (2-硝基苯基）丙氧羰基（即?0〇， 六氟丙酮（HFA)， 2-氯节氧幾基（C1-Z)， 4-甲基三苯甲基（Mtt)， 三氟乙酰基（tfa)， (甲基磺酰基）乙氧羰基（Msc)，和 邻硝基苯磺酰基（0-NBS)。
6. 如任一前述权利要求所述的结晶的式（I)化合物或其结晶盐，其中R2选自： 9-荷基甲氧羰基（Fmoc)， 三苯甲基（Trt)， 4-甲氧基三苯甲基（Mmt)， 2-(3, 5-二甲氧基苯基）丙烷-2-基氧基羰基（Ddz)， 2-(对联苯基）-2-丙氧幾基（Bpoc)， 叔丁氧羰基（Boc)， 苄氧羰基（Z)， 條丙基氧基幾基（A